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重组弹性蛋白的表征及在紫外诱导皮肤光老化过程中的作用

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日用化学工业（中英文） 2024年第9期54卷 1106-1116页

作者：张娅周浩王蓉侯增淼黄文涛杨鹭西安德诺海思医疗科技有限公司陕西西安710000

采用基因工程技术构建重组弹性蛋白工程菌,再利用发酵纯化技术得到重组弹性蛋白,并经氨基酸N端测序、分子量测定、氨基酸组成、蛋白纯度分析、内毒素含量测定及其红外光谱和圆二色谱分析对其进行表征鉴定。通过测定重组弹性蛋白对L929... 详细信息

采用基因工程技术构建重组弹性蛋白工程菌,再利用发酵纯化技术得到重组弹性蛋白,并经氨基酸N端测序、分子量测定、氨基酸组成、蛋白纯度分析、内毒素含量测定及其红外光谱和圆二色谱分析对其进行表征鉴定。通过测定重组弹性蛋白对L929小鼠胚胎成纤维细胞粘附能力和细胞活力影响,以及在中波紫外线(UVB)诱导L929细胞光老化模型中,考察重组弹性蛋白对Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(CollagenⅢ)、弹性蛋白(Elastin)以及基质金属蛋白酶1(MMP-1)mRNA转录水平的影响,探究重组弹性蛋白在UVB诱导皮肤光老化过程中的作用。结果表明,获得的重组弹性蛋白与天然弹性蛋白二级结构相似;在0.1 mg/mL质量浓度下无细胞毒性且具有一定的细胞活力,显著促进L929细胞的粘附和增殖。此外,重组弹性蛋白可通过下调UVB辐射后L929细胞内MMP-1转录水平,提高细胞中的CollagenⅠ,CollagenⅢ和Elastin表达,对UVB诱导的L929细胞光损伤具有良好的保护作用,显著提升L929细胞的存活率。

关键词：重组弹性蛋白小鼠胚胎成纤维细胞细胞外基质蛋白光老化紫外线(UVB)

鲍鱼脏器碱提多糖的分离纯化、结构表征及抗氧化活性研究

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食品工业科技 2024年第4期45卷 53-60页

作者：林志超潘晓明吴启赐薛钰黄家福潘裕添闽南师范大学菌物产业工程技术中心福建漳州363000 萌得尔(厦门)生物科技有限公司福建厦门361000

目的:分离纯化鲍鱼脏器碱提多糖(alkali-extracted abalone vscera polysaccharides,Aavp),并研究其结构和抗氧化活性,以期为鲍鱼脏器碱提多糖的开发及应用提供参考。方法:通过热碱提醇沉获得鲍鱼脏器碱提粗多糖,经DEAE Sepharose Fast ... 详细信息

目的:分离纯化鲍鱼脏器碱提多糖(alkali-extracted abalone vscera polysaccharides,Aavp),并研究其结构和抗氧化活性,以期为鲍鱼脏器碱提多糖的开发及应用提供参考。方法:通过热碱提醇沉获得鲍鱼脏器碱提粗多糖,经DEAE Sepharose Fast Flow和Sephacryl S-400 HR纯化得到高纯度多糖,并利用气相色谱、高效液相色谱、红外光谱和热重分析仪等工具分析其结构及抗氧化活性。结果:粗多糖纯化后得到四个组分,包括Aavp Ia、Aavp Ib、Aavp IIa和Aavp IIb,其中Aavp IIa得率较高,选择其进一步进行结构分析。分析发现,Aavp IIa由木糖和半乳糖组成,分子量为166513 Da;糖苷键构型为α型,组成如下:半乳糖1→4糖苷键摩尔百分比为11.81%,半乳糖1→3糖苷键为34.14%,半乳糖1→2糖苷键为10.14%;木糖1→3糖苷键摩尔百分比为33.85%,1→2和1→4糖苷键共占10.06%。热重分析显示,Aavp IIa在226.4-332.6℃下断裂分解,热失重率为43.65%。抗氧化实验显示Aavp IIa对O2-·的清除率为85.89%,对DPPH·的清除率为62.17%,具有一定的抗氧化活性。结论:提取的鲍鱼脏器碱提多糖是一类杂多糖,并具有一定的抗氧化活性。

关键词：鲍鱼脏器碱提多糖单糖组成热重分析抗氧化活性

鲍鱼脏器碱提多糖制备工艺及对L929细胞H_(2)O_(2)氧化损伤的修复活性

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食品工业科技 2024年第13期45卷 204-211页

作者：吴启赐林志超潘晓明薛钰黄家福潘裕添闽南师范大学菌物产业工程技术中心福建漳州363000 萌得尔(厦门)生物科技有限公司福建厦门361000

目的:优化鲍鱼脏器碱提多糖(Alkali-extracted abalone viscera polysaccharides,Aavp)提取工艺,并研究纯化Aavp对L929细胞H_(2)O_(2)氧化损伤的预防和修复作用,以期为鲍鱼脏器碱提多糖的开发及应用提供参考。方法:通过热碱提醇沉法获... 详细信息

目的:优化鲍鱼脏器碱提多糖(Alkali-extracted abalone viscera polysaccharides,Aavp)提取工艺,并研究纯化Aavp对L929细胞H_(2)O_(2)氧化损伤的预防和修复作用,以期为鲍鱼脏器碱提多糖的开发及应用提供参考。方法:通过热碱提醇沉法获得鲍鱼脏器碱提粗多糖,并利用响应面法优化提取工艺,最后分析纯化Aavp对L929细胞H_(2)O_(2)氧化损伤的预防和修复能力。结果:鲍鱼脏器碱提粗多糖最佳提取工艺条件为:料液比1:150 g/mL,提取时间2 h,提取温度70℃,在此条件下,鲍鱼脏器碱提粗多糖得率为8.57%。在L929细胞H_(2)O_(2)氧化损伤预防试验中,不同剂量的纯化Aavp(20、50和100μg/mL)对L929细胞氧化损伤均具有极显著的预防作用(P<0.001),但没有表现出剂量效应,其中中剂量组(50μg/mL)的细胞存活率最高(71.94%±3.08%),略优于阳性对照的维生素E组,但无显著性差异。在修复试验中,不同剂量的纯化Aavp(20、50和100μg/mL)对L929细胞氧化损伤均具有极显著的修复效果(P<0.001),并呈现剂量效应,而高剂量组(100μg/mL)的细胞存活率最高(90.93%±1.17%),略高于阳性对照的维生素E组(87.96%±3.05%)。结果表明鲍鱼脏器碱提多糖对L929细胞H_(2)O_(2)氧化损伤具有出较好的预防和修复作用。结论:鲍鱼脏器碱提多糖具有一定的L929细胞H_(2)O_(2)氧化损伤修复能力。

关键词：鲍鱼脏器碱提多糖响应面优化氧化损伤

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连续相变萃取南瓜籽油的工艺优化及其成分分析

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食品工业科技 2024年第17期45卷 163-173页

作者：黄梦丽彭成海蔡舒欧成成江运秋周爱梅华南农业大学食品学院广东广州510642 纽斯葆广赛生物科技股份有限公司广东广州510931

为了高效萃取南瓜籽油,充分发挥其应用价值,本研究采用连续相变萃取技术(continuous phase transition extraction,CPE)提取南瓜籽油,以提取率及活性成分含量为指标,研究萃取温度、萃取时间、萃取压力、解析温度对南瓜籽油提取效果的影... 详细信息

为了高效萃取南瓜籽油,充分发挥其应用价值,本研究采用连续相变萃取技术(continuous phase transition extraction,CPE)提取南瓜籽油,以提取率及活性成分含量为指标,研究萃取温度、萃取时间、萃取压力、解析温度对南瓜籽油提取效果的影响,通过响应面设计确定最佳提取工艺参数,并与超临界流体萃取技术(supercritical fluid extraction,SFE)和螺旋压榨法(screw pressing,SP)对比,对南瓜籽油的提取率、活性成分含量、理化性质和脂肪酸组成进行比较分析。结果表明,CPE萃取南瓜籽油的最佳工艺参数为:萃取温度46℃、萃取时间72 min、萃取压力0.51 MPa、解析温度65℃。此工艺参数下南瓜籽油的提取率高达96.75%,比SFE和SP法分别提高14.49%和35.24%;而总酚、类胡萝卜素、甾醇、锌含量分别为1333.80 mg/kg、8.41 mg/kg、2.59 mg/g和9.61 mg/100 g,分别是SFE法的1.56、2.29、1.17、1.40倍,分别是SP法的1.54、2.56、1.89、2.46倍。CPE所得南瓜籽油为澄清透明、粘稠性的液体,风味清香,其酸价、碘值和过氧化值的理化指标均符合LS/T 3250-2017标准的要求;气相色谱-质谱法(GC-MS)分析鉴定出7种脂肪酸,其中亚油酸和油酸占总脂肪酸含量的82.32%,比SFE和SP法分别提高5.66%和8.99%。该研究表明连续相变萃取技术在兼顾南瓜籽油提取率及活性成分含量的情况下,可以有效缓解油脂氧化酸败程度、提高不饱和脂肪酸含量,为高活性南瓜籽油的工业化连续性生产提供了参考。

关键词：南瓜籽油连续相变萃取技术提取率活性成分理化性质脂肪酸组成

半理性设计提升4-α-糖基转移酶歧化活性并应用于工业生产

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食品与发酵工业 2024年

作者：谢静雯李超慧韦猛赵伟张金祥山东福洋生物科技股份有限公司康彤(上海)生物研发有限公司

4-α-糖基转移酶（4-alpha-glucanotransferase， 4αGT）是一种多功能的糖基转移酶，在淀粉工业上具有广泛的应用，如淀粉改性及海藻糖、麦芽寡糖、大环糊精、糖原等淀粉深加工产品的制备。其中，以淀粉为原料制备海藻糖的工业生产过... 详细信息

4-α-糖基转移酶（4-alpha-glucanotransferase， 4αGT）是一种多功能的糖基转移酶，在淀粉工业上具有广泛的应用，如淀粉改性及海藻糖、麦芽寡糖、大环糊精、糖原等淀粉深加工产品的制备。其中，以淀粉为原料制备海藻糖的工业生产过程中，借助4αGT的歧化活性，能够减少葡萄糖、麦芽糖等副产物的含量，从而提升海藻糖产量。在该研究中，采用半理性设计策略对Synechocystis sp. PCC 6803来源4αGT进行了改造。研究基于HotSpot Wizard在线工具及残基所处空间位置选择突变热点，利用4-α-糖基转移酶水解淀粉产生透明圈的能力对18 000个转化子进行高通量筛选，确定了一个对4αGT活性起着关键性作用的位点，对其进行饱和突变，最终获得活性提升的突变体A470F，歧化活性较野生型提升了17%。在工业化生产的条件下，突变体A470F在海藻糖制备上，较野生型也有所提升。通过对突变位点附近底物通道及作用力进行分析，为4αGT的活性改造提供了理论支持，并且为淀粉糖工业的制造效率提升提供了新思路。

关键词：海藻糖 4-α-糖基转移酶半理性设计歧化活性

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全球农业动物基因编辑基础研究发展动态分析

农业生物技术学报 2024年第1期32卷 220-233页

作者：张萌萌蒋颖李宁北京首农未来生物科技有限公司

基因编辑技术是一项可以对生物机体DNA序列进行精准修饰的技术。为了解全球该领域特别是针对农业动物基因编辑的发展趋势，本研究运用文献计量法，统计2015～2022年基因编辑技术领域论文数据，系统分析了该领域主要研发机构、研发团队... 详细信息

基因编辑技术是一项可以对生物机体DNA序列进行精准修饰的技术。为了解全球该领域特别是针对农业动物基因编辑的发展趋势，本研究运用文献计量法，统计2015～2022年基因编辑技术领域论文数据，系统分析了该领域主要研发机构、研发团队、研究前沿热点以及农业动物基因编辑技术研究现状。结果表明，我国基因编辑技术在论文层面处于国际领先地位，2015～2022年统计基因编辑技术相关论文量居全球第2，全球排名前20机构中，中国机构含8个，占40%。但与发达国家(美国)相比，我们还存在差距，主要体现在底盘核心技术创新不足，基因编辑系统开发、优化及Cas蛋白发现等均在国外；国际顶级学术期刊发表论文虽居全球第2，但远不及美国，中国在《自然-生物技术》(Nature Biotechnology)期刊中发文量最多(31篇)，仅占美国发文量的五分之一；基因编辑技术在农业动物中的研究报道整体数量较少，但呈逐年增多趋势，其在农业动物育种领域的应用存在巨大的潜力；最后结合自身国情，展望基因编辑技术前景以及在农业动物育种领域的发展趋势，以期为利用基因编辑技术解决农业动物育种特别是抗病育种中重大难题提供参考。

关键词：基因编辑农业动物文献分析全球

全球基因编辑技术产业化发展分析及其在农业动物育种中的应用

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农业生物技术学报 2024年第3期32卷 691-700页

作者：张萌萌蒋颖李宁北京首农未来生物科技有限公司

为了解全球农业动物基因编辑技术专利及其产业化态势，本研究利用专利计量法，统计2015～2022年基因编辑技术领域专利数据，对该领域主要研发机构、主要研发团队、研究前沿热点及针对不同农业动物基因编辑技术的概况进行系统分析。结果... 详细信息

为了解全球农业动物基因编辑技术专利及其产业化态势，本研究利用专利计量法，统计2015～2022年基因编辑技术领域专利数据，对该领域主要研发机构、主要研发团队、研究前沿热点及针对不同农业动物基因编辑技术的概况进行系统分析。结果显示，全球基因编辑技术专利在近8年呈上升趋势；中国申请公开的基因编辑技术专利数量排全球第1，但就整体而言，美国在基因编辑技术领域领跑全球；我国核心技术创新、论文专利质量、顶级研发机构和团队、知识成果转化及产业化机制等方面有待进一步提高。我国基因编辑技术专利在农业动物育种领域中数量较少，有些相关企业已完成千万级首轮融资。本研究对全球农业动物基因编辑产业化发展动态进行系统分析，为我国利用基因编辑技术破解农业动物育种重大难题提供参考。

关键词：基因编辑农业动物专利分析产业化

DN-PN/A耦合处理低氨氮电镀尾水长期运行研究

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中国环境科学 2024年

作者：章裕李嘉懿杨俊峰周松伟汪晓军华南理工大学环境与能源学院佛山市化尔铵生物科技有限公司

以物化预处理后的电镀工业园区尾水为处理对象，构建了中试规模连续流形式的反硝化-部分亚硝化-厌氧氨氧化多单元反应器，前置反硝化TIN和COD的去除率为(29.96±10.37)和 (73.33±9.6)%，大量溶解性有机物被去除，减少了污染物对后续单... 详细信息

以物化预处理后的电镀工业园区尾水为处理对象，构建了中试规模连续流形式的反硝化-部分亚硝化-厌氧氨氧化多单元反应器，前置反硝化TIN和COD的去除率为(29.96±10.37)和 (73.33±9.6)%，大量溶解性有机物被去除，减少了污染物对后续单元的冲击.亚硝化单元验证了沸石填料的方法有助于实现稳定亚硝化，亚硝酸盐氮积累率(NAR)达到 (87.73±22.28)%，长期运行过程中会受水垢影响，水垢清除后性能可恢复.厌氧氨氧化单元为主要脱氮单元，在亚硝化单元失衡情况，依靠氨氧化菌(AOB)、反硝化菌(DNB)和厌氧氨氧化菌(AnAOB)协同作用，能够贡献TIN去除(41.25±14.46)%.微生物高通量测序结果表明，亚硝化反应器检出AOB功能菌Nitrosomonas，相对丰度为5.45%， Anammox功能菌Candidatus Anammoxoglobus，其相对丰度达到25.91%.本文为厌氧氨氧化工艺工程化应用提供理论与实践基础.

关键词：厌氧氨氧化电镀低氨氮尾水高效脱氮亚硝化沸石

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工业机器人在自动化生产线上的改造应用

电气时代 2024年第2期 24-26页

作者：施永刚浙江娇阳生物医疗科技有限公司

自动化生产技术在生产线已经投入许久,可以保证产品连续可靠的生产与加工。其产线上设备有气缸、电磁阀、伺服电动机、传感器等基本零部件。随着产品生产工艺与技术的不断提高,工业机器人目前正大量投入使用到电气自动化设备生产线上。... 详细信息

自动化生产技术在生产线已经投入许久,可以保证产品连续可靠的生产与加工。其产线上设备有气缸、电磁阀、伺服电动机、传感器等基本零部件。随着产品生产工艺与技术的不断提高,工业机器人目前正大量投入使用到电气自动化设备生产线上。具有安全性高、可靠性好、高准确度、与其他设备通信便捷以及能在复杂、恶劣环境下持久耐用等优点。

关键词：工业机器人自动化生产线电气自动化设备伺服电动机产品生产工艺改造应用电磁阀设备通信