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基于DNA指纹图谱的水牛角真伪及掺杂鉴别方法研究

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中国中药杂志 2024年第7期49卷 1826-1833页

作者：熊辕陈天韵张恬田娜蒋超中国中医科学院、中药资源中心、道地药材品质保障与资源持续利用全国重点实验室北京100700

是否存在掺杂是中药鉴定的难点问题。水牛角主要以水牛角丝或水牛角粉2种形态流通于药材市场,缺乏明显的鉴定特征,存在掺杂风险。然而目前水牛角的掺杂鉴定方法缺失。为解决中药水牛角的真伪及掺杂问题,控制药材水牛角的质量,保证临床... 详细信息

是否存在掺杂是中药鉴定的难点问题。水牛角主要以水牛角丝或水牛角粉2种形态流通于药材市场,缺乏明显的鉴定特征,存在掺杂风险。然而目前水牛角的掺杂鉴定方法缺失。为解决中药水牛角的真伪及掺杂问题,控制药材水牛角的质量,保证临床用药的真实性。使用DNA指纹图谱对来自药材企业和药材市场的43批样品进行鉴定,筛选出可鉴定水牛角和牦牛角的荧光DNA指纹图谱扩增引物,利用荧光毛细管分型技术获得水牛角的DNA指纹图谱。并检测了荧光毛细管分型技术对不同掺杂比例的鉴别效果。筛选出了2对可区分水牛角和牦牛角的荧光STR分型引物16Sa和CRc,建立DNA指纹图谱鉴别方法,牦牛角16Sa迁移峰为223.4~223.9 bp、水牛角为225.5~226.1 bp,牦牛角CRc迁移峰为518.8~524.8 bp、水牛角为535.9~542.5 bp。通过迁移峰的峰高可对掺伪比例在50%以下的掺杂品进行初步定量,定量结果与掺入比例相似。该研究建立了一种简单快捷,可用于中药水牛角及其掺杂品的通用DNA指纹图谱鉴别方法,能够实现对药材水牛角鉴定的同时对掺杂品进行半定量。

关键词：水牛角掺杂 DNA指纹图谱 STR分型分子鉴别动物药

运用宏基因组技术研究施加中药渣有机肥对丹参及土壤微生物群落的影响

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中国中药杂志 2024年第5期49卷 1206-1216页

作者：王紫涵刘莎杨光陆祖瑜朱荣清李颖申业康利平陈美兰中国中医科学院、中药资源中心、道地药材品质保障与资源持续利用全国重点实验室北京100700

土壤微生物组是土壤健康的关键性评价指标,前期的研究表明中药渣有机肥能够提高栽培中药材的产量和质量,但是中药渣有机肥对于土壤微生物组的影响相关的报道很少。基于此该研究在评价中药渣有机肥对栽培丹参产量和质量影响的基础上,采... 详细信息

土壤微生物组是土壤健康的关键性评价指标,前期的研究表明中药渣有机肥能够提高栽培中药材的产量和质量,但是中药渣有机肥对于土壤微生物组的影响相关的报道很少。基于此该研究在评价中药渣有机肥对栽培丹参产量和质量影响的基础上,采用宏基因组测序技术研究中药渣有机肥对栽培丹参根际微生物组群落以及功能的影响。实验结果表明①施用中药渣有机肥促进了丹参生长以及有效成分的积累,其中丹参地上干重、地下干重、地上鲜重、地下鲜重的提高幅度为371.4%、288.3%、313.4%、151.9%;迷迭香酸和丹酚酸B的提高幅度为887.0%、183.0%。②施用中药渣有机肥显著改变了栽培丹参根际细菌和真菌群落结构,微生物的群落组成具有显著性的区别。③施用中药渣有机肥能够显著提高多亚硝化螺菌Nitrosospira multiformis、枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis、产酶溶杆菌Lysobacter enzymogenes以及木霉菌Trichoderma等土壤有益菌的相对丰度。④KEGG功能预测分析表明,施加有机肥后的土壤环境中更容易富集与代谢相关的微生物;施加中药渣有机肥后还可增加与硝化作用、反硝化作用相关的功能基因的丰度。该研究结果为今后中药渣有机肥在中药材栽培中的应用提供指导,丰富了中药材绿色栽培技术的内容。

关键词：丹参中药渣有机肥土壤微生物群落结构多样性宏基因组

洋地黄毒苷合成途径3β-羟基类固醇脱氢酶基因克隆及功能分析

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中国中药杂志 2024年第2期49卷 370-378页

作者：韩洋夏梦张逸风苏平黄璐琦中国中医科学院中药资源中心道地药材品质保障与资源持续利用全国重点实验室北京100700

洋地黄毒苷作为中药洋地黄中重要的次生代谢产物,是临床中最常用的强心药物之一。3β-羟基类固醇脱氢酶(3βHSD)是洋地黄毒苷生物合成途径酶,属于短链脱氢酶/还原酶(SDR)家族,起到氧化和异构前体化合物甾醇的作用,参与强心苷类化合物的... 详细信息

洋地黄毒苷作为中药洋地黄中重要的次生代谢产物,是临床中最常用的强心药物之一。3β-羟基类固醇脱氢酶(3βHSD)是洋地黄毒苷生物合成途径酶,属于短链脱氢酶/还原酶(SDR)家族,起到氧化和异构前体化合物甾醇的作用,参与强心苷类化合物的生物合成。该研究从洋地黄中首次克隆得到2个3βHSD基因,实验结果显示:Dp3βHSD1开放阅读框为780 bp,编码259个氨基酸;Dp3βHSD2开放阅读框为774 bp,编码257个氨基酸。Dp3βHSD1/2均具有TGxxxA/GxG辅因子结合位点和YxxxK催化位点基序,含有SDR酶的活性位点和NAD(P)结合位点。通过体外酶促试验证实Dp3βHSD1/2均能催化孕烯醇酮生成洋地黄毒苷前体化合物黄体酮,且Dp3βHSD1较Dp3βHSD2具有更强的催化能力。基因表达水平分析表明Dp3βHSD1基因在叶中的表达水平显著高于Dp3βHSD2,而洋地黄毒苷在叶中特异性富集,基于以上结果推测洋地黄毒苷生物合成途径中孕烯醇酮脱氢生成黄体酮过程主要由Dp3βHSD1催化完成。该研究成功解析了功能性3β-羟基类固醇脱氢酶,为进一步解析洋地黄中强心苷类化合物的生物合成途径奠定基础。

关键词：洋地黄洋地黄毒苷 3β-羟基类固醇脱氢酶功能鉴定

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基于传统品质评价的野生与栽培北柴胡比较

中国实验方剂学杂志 2024年第14期30卷 145-155页

作者：刘云翔王亚鹏康利平詹志来南铁贵中国中医科学院中药资源中心道地药材品质保障与资源持续利用全国重点实验室北京100700

目的:为了解野生与栽培北柴胡的品质差异,采用现代分析技术,从外观性状、初生代谢产物、次生代谢产物等方面对野生与栽培北柴胡的品质进行系统比较。方法:从山西、陕西、河北等北柴胡主产区收集野生与栽培北柴胡样品,采集北柴胡图像并... 详细信息

目的:为了解野生与栽培北柴胡的品质差异,采用现代分析技术,从外观性状、初生代谢产物、次生代谢产物等方面对野生与栽培北柴胡的品质进行系统比较。方法:从山西、陕西、河北等北柴胡主产区收集野生与栽培北柴胡样品,采集北柴胡图像并使用游标卡尺测量其长度、直径,对比分析两者的性状特征;参考2020年版《中华人民共和国药典》(一部)“柴胡”浸出物项下方法,测定两者的浸出物含量;采用纤维素分析仪测定两者的纤维素、半纤维素及木质素成分;采用超高效液相色谱法(UPLC)定量测定北柴胡中代表性柴胡皂苷类、黄酮类及糖类含量,顶空气相色谱-质谱法(HS-GC-MS)测定挥发性成分种类及相对含量,超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)结合多元统计分析方法筛选野生与栽培北柴胡中的差异性化合物并进行鉴别。结果:外观性状方面,两者差异较大,野生北柴胡根头部较为膨大,主根扭曲粗大,表皮粗糙,常有茎基、侧根,根色深、气味强;而栽培北柴胡主根细长顺直,表皮细腻,侧根少,根色较浅,气味淡。初生、次生代谢产物方面,野生北柴胡醇溶性浸出物、木质素含明显高于栽培北柴胡,水溶性浸出物、槲皮苷含量略高于栽培北柴胡;栽培北柴胡中纤维素、5种柴胡皂苷、芦丁、水仙苷、异鼠李素-3-O-葡萄糖苷均明显高于野生北柴胡,水溶性总多糖、蔗糖、半纤维素、淀粉高于野生北柴胡,但差异无统计学意义;HS-GC-MS鉴定结果显示,在野生与栽培北柴胡中共鉴定得到67种挥发性成分,野生北柴胡59种,栽培北柴胡51种,两者共有化合物43种,根据变量重要性投影(VIP)值>1筛选发现差异性成分主要集中在芳香族及脂肪酸类物质上;基于UPLC-Q-TOF-MS的非靶向代谢组学联合多元统计分析结果显示,两者在柴胡皂苷类物质上具有明显差异,且差异性化合物在栽培北柴胡中响应值较高。结论:野生与栽培北柴胡两者在外观性状、初生代谢产物、次生代谢产物含量上均存在明显差异。目前,栽培北柴胡质量评价体系并不完善,本研究可为增补修订栽培北柴胡质量评价标准,引导生产高品质北柴胡药材提供参考。

关键词：北柴胡野生栽培传统品质评价性状化学成分代谢组学

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停留时间加权的新疆旅游流网络结构研究

干旱区资源与环境 2024年第3期38卷 161-171页

作者：普拉提·莫合塔尔程学婷麦迪妮古丽·阿不力米提新疆历史文化旅游可持续发展重点实验室乌鲁木齐830046 新疆大学旅游学院乌鲁木齐830046

以往的旅游流研究仅聚焦于以流“量”为表征的网络关系,鲜有从旅游停留时间视角考察旅游流“质”的异质性。文中以游客停留时间作为流量的权重,构建“质”、“流”兼顾的旅游流网络结构,通过网络文本分析获取数据,运用社会网络分析法探... 详细信息

以往的旅游流研究仅聚焦于以流“量”为表征的网络关系,鲜有从旅游停留时间视角考察旅游流“质”的异质性。文中以游客停留时间作为流量的权重,构建“质”、“流”兼顾的旅游流网络结构,通过网络文本分析获取数据,运用社会网络分析法探究停留时间加权的旅游流网络结构特征,对比与传统旅游流网络结构的差异,分析其影响因素。结果显示:1)相对于传统旅游流网络,停留时间加权的旅游流网络密度和规模增大,网络社群数量有所减少,但其内部联系更加紧密。2)在停留时间加权的旅游流网络中,乌鲁木齐市、伊犁州等区域的旅游核心地位有所弱化,而喀什地区、阿勒泰地区、巴音郭楞蒙古自治州等区域的地位显著提高。3)停留时间加权的旅游流网络在新疆旅游流形成机理方面更具解释力。文中研究为旅游流研究提供质和量相结合的新思路,克服传统旅游流网络中片面强调流量而忽视流质的局限性,以揭示目的地网络节点之间的实际互动关系。

关键词：游客停留时间旅游流网络旅游流质量社会网络分析 QAP分析

季节性生态旅游地的旅游化过程与机制及其启示——基于新疆赛里木湖案例

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自然资源学报 2024年第7期39卷 1626-1642页

作者：梁增贤李新静中山大学旅游学院珠海519082 新疆历史文化旅游可持续发展重点实验室乌鲁木齐830046

如何平衡保护与开发、淡季与旺季问题是促进生态旅游地高质量发展的关键,而旅游化是生态地区常用的平衡途径。然而,现有旅游化研究缺乏有效的分析工具和解释机制,难以厘清旅游地历时态的阶段性特征、因果机制及其时空影响。拓展旅游化... 详细信息

如何平衡保护与开发、淡季与旺季问题是促进生态旅游地高质量发展的关键,而旅游化是生态地区常用的平衡途径。然而,现有旅游化研究缺乏有效的分析工具和解释机制,难以厘清旅游地历时态的阶段性特征、因果机制及其时空影响。拓展旅游化理论的应用情境,构建包含时空维度的旅游化模型,并开展案例研究,采用观察法、访谈法和收集二手数据等方式获得多源数据,解释与厘清新疆赛里木湖景区由生态牧场到成熟生态旅游地20多年的旅游化过程及其内在机制。研究表明:赛里木湖的旅游化经历政府主导的内部空间旅游化、政府主导的外部空间旅游化、企业主导的深度时空旅游化、政企主导的淡季时间旅游化四个阶段,总体上呈现先内部旅游化、再外部旅游化及先旺季和白天的旅游化、再夜间和淡季旅游化等特征。赛里木湖旅游化的各阶段互有交叉,解决的关键问题和旅游化的驱动力均不同。其中,内部旅游化是构建吸引力的重点,外部旅游化是发挥吸引力的关键,二者应相互协调。本文提出的旅游化模型为理解旅游化的演进规律和各阶段的因果关系及其影响提供了分析工具,为生态旅游地平衡保护与开发、破解淡旺季供需矛盾、促进高质量发展提供路径指引和案例借鉴。

关键词：生态旅游旅游化季节性旅游目的地赛里木湖

大狼毒根茎中对胰腺癌SW1990细胞具有毒性的二萜

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有机化学 2024年第6期44卷 1929-1937页

作者：朱红波王吉胡炜彦周堂林芷淇张荣平耿长安陈兴龙云南中医药大学中药学院暨云南省南药可持续利用研究重点实验室昆明650500 昆明医科大学药学院暨云南省天然药物药理重点实验室昆明650500 中国科学院昆明植物研究所植物化学与西部植物资源可持续利用国家重点实验室昆明650201

采用硅胶柱色谱、MCI柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱和半制备高效液相色谱等分离方法对大狼毒根茎的化学成分进行研究,通过高分辨电喷雾电离质谱(HR-ESI-MS)、核磁共振(NMR)和计算电子圆二色谱(ECD)等方法鉴定了8个二萜类成分,包括2个新... 详细信息

采用硅胶柱色谱、MCI柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱和半制备高效液相色谱等分离方法对大狼毒根茎的化学成分进行研究,通过高分辨电喷雾电离质谱(HR-ESI-MS)、核磁共振(NMR)和计算电子圆二色谱(ECD)等方法鉴定了8个二萜类成分,包括2个新的对映松香烷型二萜类化合物(1~2)、4个已知对映松香烷型二萜(3~6)和2个已知续随子烷型二萜(7~8).(7R,8S)-7,8-二羟基-17-降碳对映松香烷-13(14)-烯-15-酮(1)为C-17位降碳的松香烷型二萜类成分,化合物2为松香烷型二萜内酯类成分.细胞毒活性筛选表明,化合物7对胰腺癌SW1990细胞具有明显的毒性,IC50为(44.97±9.16)μmol/L;并且能剂量依赖性地促进SW1990细胞的前期凋亡,通过降低胰腺癌细胞内抑制凋亡蛋白Bcl-2的表达发挥抑制肿瘤细胞作用.

关键词：大狼毒对映松香烷型二萜续随子烷型二萜 SW1990细胞细胞毒性 Bcl-2

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《金匮要略》“胞阻”病名考辨

中华中医药杂志 2024年第8期39卷 4291-4293页

作者：赵京博徐爽赵沛涵任沁怡钟相根北京中医药大学北京100029 道地药材品质保障与资源持续利用全国重点实验室北京100700

《金匮要略》记载了“胞阻”这一病名,历代医家多以“胞阻”之名解释“胞阻”之实,并以此阐释病机、指导治疗。然而,“胞阻”之名存在异文和争议。经考察,得出以下结论:(1)“胞阻”为“胞漏”之误名,以“胞阻”之名解释“胞阻”之实的... 详细信息

《金匮要略》记载了“胞阻”这一病名,历代医家多以“胞阻”之名解释“胞阻”之实,并以此阐释病机、指导治疗。然而,“胞阻”之名存在异文和争议。经考察,得出以下结论:(1)“胞阻”为“胞漏”之误名,以“胞阻”之名解释“胞阻”之实的论述不可信;(2)852—960年当为讹误发生的上下限,且很可能发生于《金匮玉函要略方》的成书年代,即932—960年;(3)该讹误对后世学术和临床影响颇深,在阅读后世医籍及交流临证体会时,应对讹误之记载和论述有所分辨。

关键词：胞阻胞漏胶艾汤金匮要略经方

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丹参转录因子及相关调控蛋白研究进展

中国中药杂志 2024年

作者：徐文田梅申业郭娟靳保龙崔光红中国中医科学院中药资源中心道地药材品质保障与资源持续利用全国重点实验室

丹参Salvia miltiorrhiza为唇形科鼠尾草属植物，为最早进行分子生物学研究的药用植物之一，并逐渐成为药用植物分子生物学研究的模式植物。随着丹参基因组及其主要活性成分丹参酮、丹酚酸类化合物生物合成途径的逐步解析，由转录因子... 详细信息

丹参Salvia miltiorrhiza为唇形科鼠尾草属植物，为最早进行分子生物学研究的药用植物之一，并逐渐成为药用植物分子生物学研究的模式植物。随着丹参基因组及其主要活性成分丹参酮、丹酚酸类化合物生物合成途径的逐步解析，由转录因子及相关调控蛋白介导的转录调控研究逐步成为新的热点。由于不同文献对转录因子缺乏科学一致的命名，研究指标各不相同等问题，该文使用自交3代紫花丹参DSS3和自交6代白花丹参bh2-7的基因组作为参考，对不同文献中的转录因子进行了系统的整理，确定了来源于13个基因家族，共计73个丹参转录因子及相关调控蛋白的功能。同时也对相关基因过表达或基因沉默实验后对丹参酮和丹酚酸类成分的影响进行了统计。这些工作从源头统一了已鉴定的转录因子，为后续深入开展丹参中次生代谢产物及抗虫、抗逆等调控网络的构建和利用全局转录调控工程提高药材品质研究奠定了基础。

关键词：丹参转录因子调控蛋白