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兔肩袖腱骨愈合过程中基质细胞衍生因子1的表达及作用机制

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中国组织工程研究 2024年第19期28卷 3049-3054页

作者：王旭吴亚洁张鑫福石志杨腾云熊波涵卢晓君赵道洪昆明医科大学第二附属医院骨科云南省昆明市650000 昆明医科大学云南省昆明市650500 昆明医科大学第一附属医院骨科云南省昆明市650000 昆明医科大学第一附属医院运动医学科云南省昆明市650000

背景:近年在腱骨损伤领域部分学者将基质细胞衍生因子1搭载在组织工程支架上用以促进腱骨愈合,取得了较好的成效,但在基质细胞衍生因子1促进腱骨愈合机制及自然愈合过程中其是否参与修复,目前尚未明确。目的:研究兔肩袖全层冈上肌断裂... 详细信息

背景:近年在腱骨损伤领域部分学者将基质细胞衍生因子1搭载在组织工程支架上用以促进腱骨愈合,取得了较好的成效,但在基质细胞衍生因子1促进腱骨愈合机制及自然愈合过程中其是否参与修复,目前尚未明确。目的:研究兔肩袖全层冈上肌断裂后腱骨愈合过程中基质细胞衍生因子1表达,及其在腱骨损伤时对干细胞的迁移作用和最佳体外促迁移浓度。方法:随机取成年新西兰大白兔18只建立肩袖损伤模型,另取3只为空白对照。于造模后3,5,7,14,21,28 d各处死3只并处死空白组兔,取腱骨连接处组织保存在-80℃冰箱。应用ELISA反应检测损伤后各时间点愈合处基质细胞衍生因子1表达。取幼兔股骨骨髓间充质干细胞分离培养鉴定,通过transwell实验验证基质细胞衍生因子1对干细胞的促迁移作用效果及体外促迁移最佳浓度,将培养到P3代的干细胞与Brdu共培养后注入兔耳缘静脉,通过免疫组化染色验证干细胞是否迁移至损伤处。结果与结论:①基质细胞衍生因子1在肩袖腱骨愈合过程呈双峰表达,于伤后3 d明显增高(P一定浓度范围,超出范围则可能起到抑制作用。

关键词：肩袖大撕裂腱骨愈合基质细胞衍生因子1 骨髓间充质干细胞兔

内减张技术辅助前交叉韧带重建对滇南小耳猪关节软骨的保护作用

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中国组织工程研究 2024年第14期28卷 2221-2226页

作者：熊波涵卢晓君薛文强刘津瑞高娴玲余鸿李雅娟刘昊龙李彦林昆明医科大学第一附属医院运动医学科云南省昆明市650032 昆明医科大学第一附属医院麻醉科云南省昆明市650032

背景:内减张技术可通过分担膝关节内部负荷有效减轻前交叉韧带重建移植物的松弛及微动,取得了较好的生物力学结果及临床疗效,但其是否能通过分担应力减轻前交叉韧带重建后的软骨退变尚不清楚。目的:观察内减张技术对前交叉韧带重建滇南... 详细信息

背景:内减张技术可通过分担膝关节内部负荷有效减轻前交叉韧带重建移植物的松弛及微动,取得了较好的生物力学结果及临床疗效,但其是否能通过分担应力减轻前交叉韧带重建后的软骨退变尚不清楚。目的:观察内减张技术对前交叉韧带重建滇南小耳猪关节软骨退变的作用。方法:取10头成年雌性滇南小耳猪,左后膝采用自体跟腱移植进行前交叉韧带重建(普通组),右后膝采用内减张增强系统联合自体跟腱进行前交叉韧带重建(减张组)。术后1年,取小耳猪膝关节软骨组织,分别进行苏木精-伊红染色、番红-固绿染色、国际骨关节炎研究协会评分及软骨Ⅱ型胶原、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α免疫组化染色分析。结果与结论:①苏木精-伊红染色显示,减张组可见轻微骨关节炎病理改变,空骨陷窝数量少,无明显纤维化、细胞层断裂等病理改变;普通组软骨损伤程度较重,空骨陷窝数量增多,靠近骨质部分软骨细胞缺失,甚至形成形态裂隙。番红-固绿染色显示,减张组软骨组织厚度正常,软骨面平整,细胞排列呈整齐呈极性,细胞无肿胀及凋亡;普通组软骨组织厚度明显变薄,细胞排列紊乱,极性丧失,细胞数量减少,有明显软骨裂隙及软骨空泡形成,靠近中央骨质部分细胞缺失明显。减张组软骨组织国际骨关节炎研究协会评分低于普通组(P<0.05)。②免疫组化染色显示,减张组软骨组织中Ⅱ型胶原蛋白表达高于普通组(P<0.05),白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α蛋白表达低于普通组(P<0.05)。③结果表明,内减张技术可延缓前交叉韧带重建滇南小耳猪关节软骨的退变。

关键词：前交叉韧带前交叉韧带重建动物模型骨关节炎内减张技术关节软骨

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外泌体微小RNA与骨关节疾病：作用与机制

中国组织工程研究 2024年第31期28卷 5063-5069页

作者：袁平王志华王伟舟王文通何飞昆明医科大学第一附属医院创伤中心昆明医科大学第一附属医院骨科昆明医科大学附属曲靖医院骨科

背景：外泌体是一种细胞以胞吐形式分泌到胞外的囊泡状结构，其中包含了大量的微小RNA，具有重要的细胞间通讯作用。外泌体中的微小RNA依靠外泌体运输，能够进入靶细胞发挥重要的生物学调控效应。在常见的骨关节疾病中，由于骨骼代谢异... 详细信息

背景：外泌体是一种细胞以胞吐形式分泌到胞外的囊泡状结构，其中包含了大量的微小RNA，具有重要的细胞间通讯作用。外泌体中的微小RNA依靠外泌体运输，能够进入靶细胞发挥重要的生物学调控效应。在常见的骨关节疾病中，由于骨骼代谢异常或受损会释放大量的外泌体，其中一些外泌体微小RNA促进骨关节疾病的进展。因此，外泌体微小RNA与骨骼系统关系密切，对许多骨关节疾病的发生发展以及诊疗都具有重要意义。目的：综述外泌体微小RNA在骨代谢和骨关节疾病中的研究进展。方法：以“外泌体，细胞外囊泡，微小RNA,miRNA，骨，骨疾病，骨形成，骨再生，骨吸收，骨破坏”为中文检索词，“exosomes,extracellular vesicle,microRNA,miRNA,bone,bone diseases,bone formation,bone regeneration,bone resorption,bone destruction”为英文检索词，在中国知网、迈特思创和PubMed数据库进行检索，最终纳入86篇文献进行归纳总结。结果与结论：外泌体中的微小RNA可以通过影响骨形成和骨吸收调控骨代谢，并且与骨折愈合、骨质疏松症、骨关节炎、类风湿性关节炎、股骨头坏死和骨肉瘤等骨关节疾病的发生发展关系密切，外泌体微小RNA将是未来诊治某些骨关节疾病的有效手段。但目前关于外泌体微小RNA在骨关节疾病中的研究有限，想要利用外泌体微小RNA诊断治疗骨关节疾病仍然需要更多的探索和研究。

关键词：外泌体微小RNA 骨关节疾病骨形成骨吸收骨折骨质疏松关节炎股骨头坏死骨肉瘤

雌激素受体低表达乳腺癌免疫组织化学结果判读影响因素探讨

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中华病理学杂志 2024年第1期53卷 83-85页

作者：武建娥董苑刘士岳彭靖高茜边莉杨莹昆明医科大学第一附属医院病理科昆明650032 昆明医科大学第一附属医院乳腺外科昆明650032 昆明医科大学第一附属医院影像科昆明650032

目的:探讨雌激素受体(ER)低表达乳腺癌免疫组织化学结果判读的影响因素。方法:收集昆明医科大学第一附属医院2018—2021年病理档案中报告为ER低表达的乳腺癌病例,重新判读结果并分析与原结果不一致的原因及影响同一患者穿刺标本与根治... 详细信息

目的:探讨雌激素受体(ER)低表达乳腺癌免疫组织化学结果判读的影响因素。方法:收集昆明医科大学第一附属医院2018—2021年病理档案中报告为ER低表达的乳腺癌病例,重新判读结果并分析与原结果不一致的原因及影响同一患者穿刺标本与根治标本之间ER结果差异的因素,并进行不同医师间判读重复性分析。结果:ER低表达病例误判率为15.94%(11/69),原因包括正常乳腺组织的卷入、接近阈值和染色微弱情况下的判读困难。穿刺与根治标本ER检测结果18例(18/35,51.43%)显示出差异,其原因包括组织固定、肿瘤异质性、染色微弱、新辅助治疗。重复性判读乳腺病理专科医师间具有中、高度的可重复性;非专科医师与专科医师、非专科医师间可重复性差。结论:组织固定、肿瘤异质性、染色微弱的判断、观察者的经验和判读重复性均是导致ER免疫组织化学出现差异的因素。严格规范检测和判读流程、加强病理医师培训有助于提高ER低表达乳腺癌的检测和判读准确性。

关键词：专科医师新辅助治疗病理医师免疫组织化学肿瘤异质性乳腺癌误判率可重复性

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复发性单纯疱疹继发淋巴细胞浸润症1例

中国皮肤性病学杂志 2024年

作者：徐驰张娟左麻迈李佳熹何黎云南省昆明医科大学第一附属医院皮肤科

患者女，44岁，右侧臀部反复水疱、红斑、斑块伴痒5年。右侧臀部可见片状暗红斑，可触及浸润性斑块，皮肤菲薄，部分可见纵向条纹状结构，毛细血管扩张，其上可见少量鳞屑及红色痂皮。辅助检查提示单纯疱疹病毒感染，皮损组织病理示：... 详细信息

患者女，44岁，右侧臀部反复水疱、红斑、斑块伴痒5年。右侧臀部可见片状暗红斑，可触及浸润性斑块，皮肤菲薄，部分可见纵向条纹状结构，毛细血管扩张，其上可见少量鳞屑及红色痂皮。辅助检查提示单纯疱疹病毒感染，皮损组织病理示：表皮角化过度，局部可见浆液渗出、破溃，部分区域基底细胞空泡变性。真皮浅层大量淋巴细胞带状浸润，真皮内附属器、毛囊、脂肪、汗腺周围见大量淋巴细胞、组织细胞浸润，部分细胞异型性改变。诊断：复发性单纯疱疹继发淋巴细胞浸润症。

关键词：单纯疱疹淋巴细胞浸润症湿疹

前交叉韧带重建术中局部注射多模式混合药物的早期疗效及对软骨影响的研究

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中国修复重建外科杂志 2024年第5期38卷 562-569页

作者：余鸿董珍林施政良李黎董开颜刘昊龙李彦林昆明医科大学第一附属医院运动医学科昆明650032 昆明医科大学第一附属医院影像科昆明650032

目的探讨前交叉韧带重建术(anterior cruciate ligament reconstruction,ACLR)中局部注射多模式混合药物(multimodal drug cocktail,MDC)的早期疗效及对软骨的影响。方法以2022年2月—2023年8月拟采用自体腘绳肌腱行关节镜下ACLR患者作... 详细信息

目的探讨前交叉韧带重建术(anterior cruciate ligament reconstruction,ACLR)中局部注射多模式混合药物(multimodal drug cocktail,MDC)的早期疗效及对软骨的影响。方法以2022年2月—2023年8月拟采用自体腘绳肌腱行关节镜下ACLR患者作为研究对象,其中90例符合选择标准纳入研究,根据韧带重建后注射药物不同随机分为3组(n=30)。3组患者性别、年龄、身体质量指数、手术侧别、病程以及术前大腿周径及关节液中TNF-α、IL-6、IL-1、基质金属蛋白酶3(matrix metalloproteinase 3,MMP-3)、MMP-13、聚集蛋白聚糖(aggrecan,ACAN)含量等基线资料比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。术中韧带重建后,分别于关节内和取腱处注射对应MDC(A组由罗哌卡因、氨甲环酸、倍他米松组成,B组由罗哌卡因、倍他米松、生理盐水组成)或生理盐水(C组)。比较3组患者住院时间、术后曲马多注射量及并发症发生情况,膝关节肿胀程度及活动度、疼痛视觉模拟评分(VAS)、国际膝关节文献委员会(IKDC)评分、Lyshlom评分以及美国特种外科医院(HSS)评分;MRI检查不同软骨区域T2*值;ELISA法检测关节液中TNF-α、IL-6、IL-1、MMP-3、MMP-13、ACAN含量。结果3组患者均获随访,A、B、C组随访时间分别为(12.53±3.24)、(13.14±2.87)、(12.82±3.32)个月。术后切口均Ⅰ期愈合。A、B组与C组相比,住院时间缩短、曲马多注射量减少、并发症发生率降低,差异均有统计学意义(P0.05)。术后A组膝关节肿胀程度较B、C组减轻(P0.05)。术后3、6、12、24、48 h时,A、B组VAS评分低于C组(P0.05)。术后3 d、14 d、1个月,A组膝关节活动度优于C组(P0.05)。各时间点Lyshlom评分及HSS评分组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。ELISA检测术后14 d A、B组患膝关节液中IL-1和IL-6含量低于C组(P0.05);A、B组上述指标差异均无统计学意义(P>0.05)。术后1个月时,上述各项指标组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。术后3、6、12个月时,3组间各软骨区域T2*值比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论ACLR术中关节内联合取腱处注射MDC(罗哌卡因、氨甲环酸、倍他米松)可获得良好早期疗效,且对软骨无明显影响。

关键词：前交叉韧带重建多模式混合药物局部注射早期疗效软骨

西维来司钠抑制中性粒细胞弹性蛋白酶调控肝内胆管MUC5AC表达

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中华危重病急救医学 2024年第6期36卷 609-615页

作者：辜习卯叶海军徐承雷林杼颖李江昆明医科大学第一附属医院肝胆外科云南昆明650032

目的探讨西维来司钠是否能够通过抑制中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)进而减少黏蛋白5AC(MUC5AC)在肝内胆管上皮细胞中的表达,为治疗肝内胆管结石(IBDS)提供新的潜在治疗思路。方法①生信分析:基于基因表达数据库(GEO)对胆结石及胆囊炎的测序... 详细信息

目的探讨西维来司钠是否能够通过抑制中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)进而减少黏蛋白5AC(MUC5AC)在肝内胆管上皮细胞中的表达,为治疗肝内胆管结石(IBDS)提供新的潜在治疗思路。方法①生信分析:基于基因表达数据库(GEO)对胆结石及胆囊炎的测序数据进行差异基因分析,筛选中性粒细胞及黏蛋白相关的显著差异基因,使用基因与蛋白质相互作用检索数据库(STRING)进行蛋白互作分析,以预测NE基因与MUC5AC是否存在互作关系。②动物实验:将18只雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、胆管炎模型组和西维来司钠治疗组,每组6只。结合预实验于大鼠右前叶肝脏一次性注射1.25 mg/kg脂多糖(LPS)建立胆管炎大鼠模型;假手术组肝脏注射等体积生理盐水。建模后,西维来司钠治疗组尾静脉注射西维来司钠100 mg/kg;假手术组和胆管炎模型组尾静脉注射等体积生理盐水;每日1次,连续给药5 d。2周后处死大鼠取肝胆管组织,光镜下观察肝胆管组织病理学改变;免疫组织化学染色检测肝胆管组织NE和MUC5AC表达;蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测肝胆管组织NE、MUC5AC、Toll样受体4(TLR4)的蛋白表达。③细胞实验:将原代人肝内胆管上皮细胞株(HiBEpiC)传代后分为空白对照组、NE组(10 nmol/L NE)、NE+西维来司钠低剂量组(10 nmol/L NE+1×10-8 g/L西维来司钠1 mL)、NE+西维来司钠中剂量组(10 nmol/L NE+1×10-7 g/L西维来司钠1 mL)、NE+西维来司钠高剂量组(10 nmol/L NE+1×10-6 g/L西维来司钠1 mL)。培养48 h后收集细胞,行5-乙炔基-2''-脱氧尿嘧啶核苷(EdU)检测细胞增殖活性;酶联免疫吸附试验(ELISA)和Western blotting检测细胞MUC5AC的表达。结果①生信分析:NE基因(ELANE)与MUC5AC存在互作关系。②动物实验:光镜下显示,胆管炎模型组肝细胞水肿,肝细胞呈弥漫性点、灶状坏死,汇管区纤维组织及肝内胆管增生与炎症细胞浸润;西维来司钠治疗组肝小叶结构清晰,周围炎症细胞浸润程度较胆管炎模型组减轻。免疫组织化学染色显示,胆管炎模型组NE和MUC5AC较假手术组明显高表达,西维来司钠治疗组NE和MUC5AC表达较胆管炎模型组有所下降〔NE(A值):5.23±2.02比116.67±23.06,MUC5AC(A值):5.40±3.09比23.81±7.09,均P<0.05〕。Western blotting检测结果显示,胆管炎模型组肝胆管组织NE、MUC5AC和TLR4的蛋白表达均较假手术组显著升高;西维来司钠治疗组肝胆管组织NE、MUC5AC和TLR4的蛋白表达较胆管炎模型组显著下降(NE/β-actin:0.38±0.04比0.70±0.10,MUC5AC/β-actin:0.37±0.03比0.61±0.05,TLR4/β-actin:0.39±0.10比0.93±0.15,均P<0.05)。③细胞实验:荧光显微镜下显示,各组HiBEpiC细胞的增殖状态良好,阳性细胞比例无明显差异。ELISA法和Western blotting检测结果显示,NE组细胞MUC5AC表达较空白对照组显著升高;NE+西维来司钠各剂量组细胞MUC5AC表达较NE组显著下降,且随西维来司钠浓度升高呈下降趋势,以高剂量组变化最明显〔MUC5AC(μg/L):3.46±0.20比6.33±0.52,MUC5AC/β-actin:0.45±0.07比1.75±0.10,均P<0.05〕。结论LPS作用后可致胆管炎大鼠NE、MUC5AC表达上调,西维来司钠可通过抑制NE减少肝内胆管上皮细胞MUC5AC的表达,为IBDS的治疗提供新的方向。

关键词：西维来司钠中性粒细胞弹性蛋白酶黏蛋白5AC 肝内胆管结石

Ras相关C3肉毒杆菌毒素底物1在肺部疾病中作用及机制的研究进展

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中国病理生理杂志 2024年第7期40卷 1338-1344页

作者：许文霞方育昆明医科大学第一附属医院麻醉科云南昆明650000

Ras相关C3肉毒杆菌毒素底物1(Ras-related C3 botulinum toxin substrate 1,RAC1)是Ras GTPase超家族的重要成员,在细胞的运动、增殖、黏附等方面发挥核心作用,同时还参与调节血管通透性以及细胞屏障功能。近年来,RAC1在多种肺部疾病发... 详细信息

Ras相关C3肉毒杆菌毒素底物1(Ras-related C3 botulinum toxin substrate 1,RAC1)是Ras GTPase超家族的重要成员,在细胞的运动、增殖、黏附等方面发挥核心作用,同时还参与调节血管通透性以及细胞屏障功能。近年来,RAC1在多种肺部疾病发生、发展过程的作用逐渐受到关注,并逐渐成为肺部疾病研究的新方向。本文系统阐述了RAC1的生物学特性并总结了其在肺肿瘤、慢性阻塞性肺疾病、肺损伤和动脉型肺动脉高压中的功能及分子机制,以期为肺部疾病的治疗提供新思路。

关键词： Ras相关C3肉毒杆菌毒素底物1 肺癌慢性阻塞性肺疾病肺损伤动脉型肺动脉高压

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基于诱导多能干细胞治疗急性心肌梗死的临床前研究进展

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浙江大学学报（医学版） 2024年第2期53卷 244-253页

作者：蔡松晏戴青原昆明医科大学第一附属医院心内科云南昆明650032

诱导多能干细胞(iPSC)是通过导入外源基因或在培养基中加入化学物质等方法使体细胞去分化而获得。与胚胎干细胞类似,iPSC可以分化形成三种胚层细胞系。iPSC能通过二维分化方法(如单层细胞培养和共培养),或拟胚体诱导法和基于支架的三维... 详细信息

诱导多能干细胞(iPSC)是通过导入外源基因或在培养基中加入化学物质等方法使体细胞去分化而获得。与胚胎干细胞类似,iPSC可以分化形成三种胚层细胞系。iPSC能通过二维分化方法(如单层细胞培养和共培养),或拟胚体诱导法和基于支架的三维细胞培养方法分化为心肌细胞。iPSC分化成心肌细胞的过程还需通过激活或抑制特定的信号通路(如Wnt、BMP、Notch信号通路)来模拟体内心脏发育过程。近年来,通过生物反应器进行细胞悬浮培养,已能产生足够数量的iPSC衍生的心肌细胞(iPSC-CM)。iPSC-CM在移植前需要通过代谢调节和细胞分选等方法进行纯化,以消除可能导致畸胎瘤形成的未分化iPSC。目前,iPSC-CM的主要移植方法为细胞悬液注射和细胞片移植。动物实验研究表明,将iPSC-CM移植到梗死心肌中能改善心脏功能。本文综述了上述关于iPSC-CM治疗急性心肌梗死的临床前相关研究,并讨论了iPSC-CM在临床应用中的局限性和挑战,以期为iPSC-CM的临床转化研究提供参考。

关键词：诱导多能干细胞心肌细胞急性心肌梗死再生医学综述