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非小细胞肺癌中PUMA基因外显子突变和mRNA表达的分析

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中华病理学杂志 2009年第2期38卷 121-122页

作者：王玉明金克炜李娅陈韵如段勇昆明医学院第一附属医院检验科 650032 昆明医学院病理学教研室

肺癌是全球死亡第一位的恶性肿瘤，其发生是多步骤、多阶段的病理过程，与调控细胞生存、凋亡、细胞问通信、细胞微环境的改变等相关的基因和基因表型改变有关，细胞的凋亡在肿瘤的发生过程中起着重要的作用。PUMA（p53up-regulated mod... 详细信息

肺癌是全球死亡第一位的恶性肿瘤，其发生是多步骤、多阶段的病理过程，与调控细胞生存、凋亡、细胞问通信、细胞微环境的改变等相关的基因和基因表型改变有关，细胞的凋亡在肿瘤的发生过程中起着重要的作用。PUMA（p53up-regulated modulator of apoptosis）是bcl-2家族BH3only亚家族中的成员，是053介导的下游促凋亡基因，

关键词：基因外显子突变非小细胞肺癌 mRNA表达 PUMA modulator 促凋亡基因 bcl-2家族恶性肿瘤

紫外线与戊二醛双重交联法构建真皮支架的研究

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中华烧伤杂志 2008年第2期24卷 114-117页

作者：顾华何黎刘玲金以超昆明医学院第一附属医院皮肤科 650031 昆明医学院病理学教研室

目的比较不同预冻温度及交联方法对胶原膜内部超微结构及成纤维细胞增殖的影响。方法将牛Ⅰ型胶原溶液（10g／L）分别在-20℃和-80℃预冻12h后，放入-70℃冻干机内冷冻干燥48h。利用扫描电镜测量2种预冻温度下胶原膜的内部孔径，比较戊... 详细信息

目的比较不同预冻温度及交联方法对胶原膜内部超微结构及成纤维细胞增殖的影响。方法将牛Ⅰ型胶原溶液（10g／L）分别在-20℃和-80℃预冻12h后，放入-70℃冻干机内冷冻干燥48h。利用扫描电镜测量2种预冻温度下胶原膜的内部孔径，比较戊二醛交联法及紫外线＋戊二醛双重交联法对胶原孔径的影响，通过噻唑蓝（MTT）法检测人成纤维细胞在不同交联法制备的胶原膜中的增殖情况。结果-20℃预冻胶原膜的孔径为（172±37）μm，-80℃预冻胶原膜孔径为（99±24）μm，选择后者进行后续实验。经戊二醛交联后胶原膜孔径缩小，种植后第8天，成纤维细胞的吸光度值为1．534±0．013；紫外线联合戊二醛双重交联后胶原膜原有孔径不变，种植后第8天成纤维细胞的吸光度值为3．778±0．010，与前者比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论-80℃预冻后经紫外线＋戊二醛双重交联法构建的胶原膜，可作为体外真皮支架替代物。

关键词：胶原戊二醛紫外线成纤维细胞共同培养技术

17-β雌二醇提高巯醇抗氧化物(酶)治疗脊髓损伤的作用

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解剖学报 2010年第2期41卷 185-190页

作者：边立功刘承杏李兴国马爱斌邹智荣李守民孙俊陆地昆明医学院人体解剖学教研室昆明650031 昆明医学院第一附属医院神经内科昆明650032

目的探讨17-β雌二醇治疗脊髓损伤的分子机制,为临床应用雌激素治疗脊髓损伤提供理论依据。方法成年雄性SD大鼠180只,采用改良的Allen法构建大鼠急性脊髓挫伤模型后经17-β雌二醇治疗,采用化学比色法测定脊髓组织中丙二醛(MDA)和内源性... 详细信息

目的探讨17-β雌二醇治疗脊髓损伤的分子机制,为临床应用雌激素治疗脊髓损伤提供理论依据。方法成年雄性SD大鼠180只,采用改良的Allen法构建大鼠急性脊髓挫伤模型后经17-β雌二醇治疗,采用化学比色法测定脊髓组织中丙二醛(MDA)和内源性巯醇抗氧化物(酶):还原型谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量;免疫组织化学分析凋亡相关因子Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白的表达变化。结果17-β雌二醇治疗组与脊髓损伤组比较,BBB评分明显增加;在多个时间点MDA含量明显降低;巯醇抗氧化物(酶)GSH、SOD和GSH-Px含量显著增加;Caspase-3和Bax表达的阳性细胞数明显减少;Bcl-2表达的阳性细胞数明显增加(P<0.05)。结论大剂量的17-β雌二醇治疗可能通过调控内源性巯醇抗氧化物(酶),提高肢体运动功能,抑制细胞凋亡,从而减轻脊髓损伤程度。

关键词： 17-β雌二醇脊髓损伤巯醇抗氧化物酶凋亡相关蛋白化学比色法免疫组织化学大鼠

含笑内酯对骨髓增殖性肿瘤细胞系UKE-1和SET-2中细胞因子表达的作用及机制研究

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北京中医药大学学报 2025年

作者：陈猛刘晋琴张莹史哲新肖志坚天津中医药大学第一附属医院国家中医针灸临床医学研究中心中国医学科学院血液病医院(中国医学科学院血液学研究所)

目的探讨含笑内酯通过信号传导和转录激活因子3(STAT3)/核转录因子-κB (NF-κB)信号通路，对骨髓增殖性肿瘤细胞系中细胞因子表达的影响。方法选取UKE-1和SET-2作为研究对象，采用CCK-8法筛选含笑内酯的实验浓度，将UKE-1和SET-2分... 详细信息

目的探讨含笑内酯通过信号传导和转录激活因子3(STAT3)/核转录因子-κB (NF-κB)信号通路，对骨髓增殖性肿瘤细胞系中细胞因子表达的影响。方法选取UKE-1和SET-2作为研究对象，采用CCK-8法筛选含笑内酯的实验浓度，将UKE-1和SET-2分为对照组和2.5、5、10μmol/L含笑内酯组，各给药组分别加入终浓度为2.5、5、10μmol/L含笑内酯溶液1mL，对照组仅加入等体积的培养基。采用实时荧光PCR法检测各组细胞白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和趋化因子2(CCL2)mRNA表达抑制率，采用蛋白印迹法检测各组细胞STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)的蛋白表达水平。以UKE-1为研究对象，进行还原性谷胱甘肽和双硫苏糖醇的逆转实验，将UKE-1分为对照组、含笑内酯组、含笑内酯+还原性谷胱甘肽组、含笑内酯+双硫苏糖醇组、还原性谷胱甘肽和双硫苏糖醇组，采用蛋白印迹法检测各组细胞STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)的蛋白表达水平。采用TNF-α（5000ng/L）刺激UKE-1，以复制细胞因子过度分泌的病理模型，将UKE-1分为对照组、模型组及2.5、5、10μmol/L含笑内酯组，采用实时荧光PCR法检测上述指标，酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测各组细胞培养基中CCL2含量，蛋白质印迹法检测STAT3、p-STAT3及NF-κb信号通路相关蛋白的蛋白表达水平。结果实时荧光PCR法结果显示，与对照组比较，2.5、5、10和20μmol/L含笑内酯组UKE-1在24、48、72h的增殖抑制率均升高，5、10和20μmol/L含笑内酯组SET-2在48、72h的增殖抑制率均升高（均P<0.05），为排除高浓度含笑内酯可能导致细胞数量减少对后续结果的影响，后续研究选用2.5、5和10μmol/L。与对照组比较，2.5、5和10μmol/L含笑内酯组UKE-1及SET-2的TNF-αmRNA表达抑制率均升高，5、10μmol/L含笑内酯组UKE-1及SET-2的IL-1βmRNA表达抑制率亦升高，10μmol/L含笑内酯组UKE-1及SET-2中CCL2mRNA表达抑制率升高（均P<0.05）。使用TNF-α刺激后，与模型组比较，2.5、5、10μmol/L含笑内酯组UKE-1中TNF-α、IL-1β、CCL2mRNA表达抑制率均升高（均P＜0.05）。ELISA法结果显示，与对照组比较，模型组UKE-1中CCL2含量升高；与模型组比较，2.5、5、10μmol/L含笑内酯组UKE-1中CCL2含量降低（均P＜0.05）。蛋白质印迹法结果显示，与对照组比较，5、10μmol/L含笑内酯组UKE-1和SET-2中p-STAT3蛋白表达水平下调，SET-2中STAT3蛋白表达水平下调（均P<0.05）；还原性谷胱甘肽和双硫苏糖醇逆转实验中，与对照组比较，含笑内酯组UKE-1中p-STAT3表达水平降低，与含笑内酯组比较，含笑内酯+双硫苏糖醇组和含笑内酯+还原型谷胱甘肽组UKE-1中p-STAT3蛋白表达水平升高（均P< 0.05）；使用TNF-α刺激后，与对照组比较，模型组p-STAT3、p-IκKα/β、p-IκBα、p-NF-κBp65蛋白表达升高，IκBα蛋白表达降低，与模型组比较，2.5、5、10μmol/L含笑内酯组p-IκKα/β、p-IκBα、p-STAT3、p-NF-κBp65蛋白表达降低，5、10μmol/L含笑内酯组IκBα蛋白表达升高(均P< 0.05)。结论含笑内酯能够抑制JAK2V617F突变的UKE-1和SET-2中IL-1β、TNF-α和CCL2 mRNA表达，以及UKE-1细胞对CCL2的分泌，这种抑制作用可能与其抑制STAT3的磷酸化激活及NF-κB信号通路的激活相关。

关键词：含笑内酯骨髓增殖性肿瘤细胞因子信号传导和转录激活因子3 核转录因子-κB

高活性脐带间充质干细胞干预老年树鼩衰老脾脏的作用与机制

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中国组织工程研究 2025年第19期29卷 4000-4010页

作者：叶丽田川赵晓娟陈梦蝶叶倩倩李强廖珠银李晔朱向情阮光萍何志旭舒莉萍潘兴华贵州医科大学基础医学院免疫学教研室组织工程与干细胞实验中心贵州省贵阳市550004 中国人民解放军联勤保障部队第九二〇医院干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合工程实验室云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室昆明市干细胞与再生医学重点实验室基础医学实验室云南省昆明市650032 遵义医科大学附属医院儿科学教研室贵州省遵义市563100

背景:脾脏具有储血、造血和免疫功能,随着年龄增长,脾脏结构退变、功能衰退引起免疫系统功能受损,进而加速机体衰老进程,而高活性脐带间充质干细胞治疗树鼩脾脏衰老尚未见报道。目的:探讨高活性脐带间充质干细胞对树鼩脾脏衰老的干预作... 详细信息

背景:脾脏具有储血、造血和免疫功能,随着年龄增长,脾脏结构退变、功能衰退引起免疫系统功能受损,进而加速机体衰老进程,而高活性脐带间充质干细胞治疗树鼩脾脏衰老尚未见报道。目的:探讨高活性脐带间充质干细胞对树鼩脾脏衰老的干预作用及机制。方法:从剖腹产的新生树鼩脐带组织中分离、培养和获得高活性脐带间充质干细胞,三系分化试剂盒检测成脂、成骨、成软骨分化能力,流式细胞术检测细胞周期和表面标志物。以感染复数值分别为100,120,140,160,180,200的吉凯基因绿色荧光蛋白转染第2代高活性脐带间充质干细胞,筛选最佳转染条件;转染后的第4代高活性脐带间充质干细胞尾静脉输注给老年治疗组树鼩,青年对照组和老年模型组不予特殊处理,治疗4个月时取脾脏组织,苏木精-伊红染色观察脾脏组织结构;β-半乳糖苷酶染色检测衰老相关半乳糖苷酶活性;免疫组织化学染色检测p21和p53蛋白表达水平;Ki67和PCNA免疫荧光染色检测细胞增殖活性;免疫荧光染色检测脾脏自噬蛋白分子Beclin1和APG5L/ATG5表达水平;活性氧荧光染色检测脾脏组织的活性氧含量;CD3免疫荧光染色检测总T淋巴细胞比例变化;酶联免疫吸附实验检测脾脏组织白细胞介素1β和转化生长因子β1分泌水平;DAPI复染细胞核观察绿色荧光蛋白标记的高活性脐带间充质干细胞在脾脏组织的分布情况。结果与结论:①高活性脐带间充质干细胞呈核小短梭形、鱼群样生长,G_(0)/G_(1)期占比大,具有向成脂、成骨和成软骨分化潜能。②感染复数为140且转染72 h为吉凯基因绿色荧光蛋白标记树鼩高活性脐带间充质干细胞的最佳条件。③与老年模型组相比,老年治疗组树鼩脾脏组织细胞排列紧密,白髓面积增加(P0.05),脾脏组织衰老相关半乳糖苷酶活性水平降低(P0.05)。与青年对照组相比,以上检测指标在老年治疗组中均有显著差异(P<0.05)。④冰冻组织切片观察可见老年治疗组树鼩脾脏组织中有绿色荧光蛋白标记的绿色荧光细胞。结果表明:静脉输注高活性脐带间充质干细胞可迁移至脾脏组织,抑制活性氧产生,下调衰老相关蛋白分子表达,诱导细胞自噬,促进细胞增殖,降低慢性炎症,进而改善脾脏组织结构和功能。

关键词：高活性脐带间充质干细胞树鼩脾脏衰老免疫自噬炎症

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寰椎椎动脉沟与颈性眩晕

中华外科杂志 1990年第10期28卷 592-594页

作者：孙静宜张琼珍 650071，昆明医学院第一附属医院骨科昆明医学院解剖教研室

本文报道了69例寰椎椎动脉沟环的临床体征、X线表现及诊断依据。在923例颈性眩晕患者中发病率为7.4%,其中6例行手术治疗。文内对形成沟环的骨桥和环径进行了形态学的分析,认为其是人类进化中的形态学的退化痕迹。椎动脉解剖行径及其与... 详细信息

本文报道了69例寰椎椎动脉沟环的临床体征、X线表现及诊断依据。在923例颈性眩晕患者中发病率为7.4%,其中6例行手术治疗。文内对形成沟环的骨桥和环径进行了形态学的分析,认为其是人类进化中的形态学的退化痕迹。椎动脉解剖行径及其与寰椎沟环的关系研究证实头颈的活动伴有推动脉在寰椎沟环区的活动时,狭窄的沟环是造成颈性眩晕和Barre-Lieou征的原因之一。诊断的主要依据是颈椎侧位X线片和临床体征结合诱发眩晕的椎动脉扭曲试验。手术以切除形成椎动脉沟环的骨小桥或骨赘,扩大椎动脉的通道,并剥离切断该区与椎动脉联系的交感神经纤维为目的。术后症状消退,疗效满意。

关键词：寰椎椎动脉颈椎眩晕手术

中国风湿免疫病患者活动性结核病患病情况多中心横断面研究:亚组分析

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中国防痨杂志 2025年第1期47卷 22-28页

作者：张丽帆陈艳张月秋张奉春曾小峰赵岩刘升云左晓霞张志毅吴华香陈盛李鸿斌朱平武丽君齐文成刘毅张缪佳刘花香周宝桐侍效春阮桂仁刘晓清中国风湿免疫病人群活动性结核病的流行病学调查和治疗效果及预后研究课题组中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院疑难重症及罕见病国家重点实验室感染内科北京100730 中国医学科学院北京协和医学院国际临床流行病学网临床流行病学教研室北京100730 中国医学科学院北京协和医学院结核病研究中心北京100730 中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院风湿免疫科国家皮肤与免疫疾病临床医学研究中心疑难重症及罕见病国家重点实验室风湿免疫病学教育部重点实验室北京100730 郑州大学第一附属医院风湿免疫科郑州450052 中南大学湘雅医院风湿免疫科长沙410008 哈尔滨医科大学附属第一医院风湿免疫科哈尔滨150001 浙江大学医学院附属第二医院风湿免疫科杭州310009 上海交通大学医学院附属仁济医院风湿免疫科上海200001 内蒙古医科大学附属医院风湿免疫科呼和浩特010000 第四军医大学西京医院临床免疫科西安710032 新疆维吾尔自治区人民医院风湿免疫科乌鲁木齐830001 天津市第一中心医院风湿免疫科天津300192 四川大学华西医院风湿免疫科成都610041 南京医科大学第一附属医院风湿免疫科南京210029 山东大学齐鲁医院风湿免疫科济南250012 不详

目的:了解中国风湿免疫病(rheumatic diseases,RD)患者活动性结核病(active tuberculosis,ATB)的患病情况。方法:采用分层多阶段整群抽样方法,纳入2014年9月至2016年3月期间,来自全国东、中、西部13家三级甲等综合医院的进行ATB筛查的R... 详细信息

目的:了解中国风湿免疫病(rheumatic diseases,RD)患者活动性结核病(active tuberculosis,ATB)的患病情况。方法:采用分层多阶段整群抽样方法,纳入2014年9月至2016年3月期间,来自全国东、中、西部13家三级甲等综合医院的进行ATB筛查的RD患者作为调查对象,共计13550例。估算RD患者的ATB患病率,并按照RD病种、患者年龄和性别进行亚组分析。结果:13550例调查对象中,105例合并ATB,其中,48例(45.7%)无咳嗽、咳痰、发热、盗汗、体质量减轻表现;在病原学和(或)组织病理学确诊的ATB患者中,无症状者占35.3%(12/34);在菌阳肺结核患者中,无症状者占30.8%(8/26)。累及肺外部位的结核病有41例(39.0%),其中单纯肺外结核28例(68.3%),肺结核合并肺外结核13例(31.7%)。亚组分析结果显示,系统性血管炎综合征患者ATB患病率最高,为1915/10万(13/679,95%CI:881/10万~2948/10万),其次为弥漫性结缔组织病患者(1002/10万,58/5789,95%CI:745/10万~1259/10万)。RD患者中16~34岁组ATB患病率最高,为1162/10万(43/3700,95%CI:817/10万~1508/10万),男性ATB患病率为919/10万(30/3264,95%CI:592/10万~1247/10万),明显高于女性(729/10万,75/10286,95%CI:565/10万~894/10万)。结论:中国RD患者中亚临床结核病、肺外结核及结核病播散负担较高,ATB患病率在不同RD患者病种、年龄、性别间存在明显差异。

关键词：结核风湿性疾病共病现象患病率横断面研究

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云南个旧及宣威地区肺癌p14^ARF和E2F-1水平的改变

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中华劳动卫生职业病杂志 2009年第7期27卷 411-415页

作者：杨志鸿阮永华金克炜高倩张林云南医学高等专科学校病理教研室昆明650031 昆明医学院病理教研室昆明医学院第一附属医院病理科

目的探讨阅读框架基因p14^ARF和核转录因子E2F-1在云南个旧地区矿工肺癌，宣威地区农民肺癌组织中的表达及相互关系，寻找肺癌早期诊断特异性标记物及为治疗提供实验依据。方法采用免疫组化S-P法，检测30例个旧地区矿工肺癌和30例宣威... 详细信息

目的探讨阅读框架基因p14^ARF和核转录因子E2F-1在云南个旧地区矿工肺癌，宣威地区农民肺癌组织中的表达及相互关系，寻找肺癌早期诊断特异性标记物及为治疗提供实验依据。方法采用免疫组化S-P法，检测30例个旧地区矿工肺癌和30例宣威地区农民肺癌及20例正常肺组织中p14^ARF和E2F-1蛋白的表达；采用原位分子杂交方法随机检测上述标本中25例个旧地区矿工肺癌、25例宣威地区肺癌及10例正常肺组织中E2F—1mRNA的表达。两种检测结果应用HPIAS-100计算机图文分析系统进行定量分析。结果个旧和宣威地区肺癌组织的p14^ARF蛋白表达明显低于正常肺组织，而E2F-1蛋白表达和mRNA表达均明显高于正常肺组织。p14^ARF和E2F-1蛋白表达的阳性单位在个旧肺癌组为16．44±4．85和47．39±5．43，宣威肺癌组为16．79±3．55和48．15±9．11，与正常肺组织组比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）。个旧肺癌组E2F-1mRNA表达的阳性单位为48．58±7．75，宣威肺癌组为49．41±8．53，明显高于正常肺组织组，差异有统计学意义（P〈0．01）。在个旧、宣威肺癌组和正常肺组织组中，E2F—1mRNA和E2F-1蛋白表达的阳性单位呈正相关（r=0．833，P〈0．01），p14^ARF和E2F-1蛋白表达的阳性单位呈负相关（r=-0．830，P〈0．01）。结论个旧和宣威两地区肺癌组织中存在E2F-1基因的表达上调和p14^ARF基因的表达下调。

关键词：肺肿瘤 p14^ARF 转录因子 E2F-1 个旧宣威

全髋关节置换扩大后路软组织修补关节囊切开线的解剖学研究

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中国修复重建外科杂志 2008年第7期22卷 784-789页

作者：李琪张力成杨国敬蔡春元汤呈宣余汝堂杨新东董缪武朱华温州医学院附属第三医院骨科浙江温州325200 温州医学院解剖教研室温州医学院病理解剖教研室

目的研究髋后方关节囊的解剖特点及胶原纤维的分布差异,探讨能保留最佳力学强度的髋后方关节囊切开线。方法采用10个(20侧)福尔马林固定的成人尸体髋标本,男6个,女4个;年龄28～64岁。右侧10髋解剖出髋后方关节囊,将其划分为3区(Ⅰ～Ⅲ... 详细信息

目的研究髋后方关节囊的解剖特点及胶原纤维的分布差异,探讨能保留最佳力学强度的髋后方关节囊切开线。方法采用10个(20侧)福尔马林固定的成人尸体髋标本,男6个,女4个;年龄28～64岁。右侧10髋解剖出髋后方关节囊,将其划分为3区(Ⅰ～Ⅲ区)9部(ⅠA～C、ⅡD～F、ⅢG～I),测量髋后方关节囊各部厚度,观察坐股韧带走行。左侧10髋选取5髋对其较厚的Ⅰ区和Ⅱ区进行Masson染色观察和胶原纤维含量分析。采用自愿捐赠的冰冻新鲜尸体标本2髋与固定标本比较,设计最佳的切口线并临床应用。结果各部髋后方关节囊厚度分别为:ⅠA(2.30±0.40)、ⅠB(4.68±0.81)、ⅠC(2.83±0.69)、ⅡD(2.80±0.79)、ⅡE(4.22±1.33)、ⅡF(2.50±0.54)、ⅢG(1.57±0.40)、ⅢH(2.60±0.63)、ⅢI(1.31±0.28)mm,具有不均一性,差异有统计学意义(P一性(P<0.01),ⅠB部和ⅡE部与其余4部比较差异有统计学意义(P<0.01)。新鲜冰冻标本的厚度和坐股韧带分布特点经观察与固定标本无明显差别。在标本上设计并应用包括大部坐股韧带主干且连带部分臀小肌束的髋后方关节囊切开线。结论全髋关节置换扩大后路软组织修补虽不断深入研究和发展,但术后脱位率仍未完全消除;优化关节囊切开线,保留最佳力学强度部分,使坐股韧带发挥其固有生物力学功能,具有较大意义。

关键词：髋后方关节囊坐股韧带胶原纤维全髋关节置换应用解剖