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小鼠顶叶皮层反复轻度创伤性脑损伤抑制延髓NLG-1和PSD-95的表达

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南方医科大学学报 2024年第5期44卷 960-966页

作者：李明明何梁超李天雨鲍岩徐祥陈光皖南医学院法医学院安徽芜湖241000

目的研究反复轻度创伤性脑损伤(rmTBI)对延髓神经元形态和突触可塑性的影响。方法32只雄性ICR小鼠随机分为假手术组(SHAM组,n=8)和rmTBI组(n=24)。使用自由落体打击装置建立rmTBI模型,打击后存活小鼠为rmTBI存活组(rmTBI-S),打击后死亡... 详细信息

目的研究反复轻度创伤性脑损伤(rmTBI)对延髓神经元形态和突触可塑性的影响。方法32只雄性ICR小鼠随机分为假手术组(SHAM组,n=8)和rmTBI组(n=24)。使用自由落体打击装置建立rmTBI模型,打击后存活小鼠为rmTBI存活组(rmTBI-S),打击后死亡小鼠为rmTBI死亡组(rmTBI-D)。使用神经损伤评分、翻正反射和强迫游泳实验检测小鼠神经功能障碍,使用苏木素-伊红及尼氏染色观察神经细胞病理形态改变,使用免疫印迹及免疫荧光染色检测神经连接蛋白1(NLG-1)和突触后致密蛋白95(PSD-95)表达水平。结果SHAM组小鼠无死亡,rmTBI组死亡率41.67%,差异有统计学意义(P<0.05);和SHAM组相比,rmTBI-S组小鼠神经损伤评分降低(P<0.001)、翻正反射恢复时间(P<0.001)和强迫游泳不动时间(P<0.05)增加,神经元尼氏小体消失、肿胀坏死;延髓NLG-1(P<0.05)和PSD-95(P<0.05)表达水平降低;和rmTBI-S组相比,rmTBI-D组NLG-1(P<0.01)和PSD-95(P<0.01)表达水平降低。rmTBI-D组小鼠延髓神经纤维扭曲水肿,神经元密度降低。结论延髓突触结构异常和功能障碍可能与rmTBI导致的死亡及神经功能损害相关。

关键词：反复轻度创伤性脑损伤延髓神经连接蛋白-1 突触后致密蛋白-95 突触可塑性

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束缚应激致高脂血症ApoE^(-/-)小鼠心肌损伤的分子靶标筛选与机制分析

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法医学杂志 2024年第2期40卷 172-178页

作者：陈尚亨董盛仲王智敏洪光辉叶星林子杰林俊毅江洁清王守宇林汉成沈忆文复旦大学基础医学院法医学系上海200032

目的采用蛋白质组学技术筛选慢性束缚应激致高脂血症小鼠心肌损伤的标志物及其潜在机制。方法通过束缚ApoE-/-小鼠建立高脂血症合并慢性应激模型,运用蛋白质组学与生物信息学等技术描绘慢性应激对高脂血症小鼠心肌损伤的特征性分子改变... 详细信息

目的采用蛋白质组学技术筛选慢性束缚应激致高脂血症小鼠心肌损伤的标志物及其潜在机制。方法通过束缚ApoE-/-小鼠建立高脂血症合并慢性应激模型,运用蛋白质组学与生物信息学等技术描绘慢性应激对高脂血症小鼠心肌损伤的特征性分子改变及相关调控机制,并从中探索潜在的诊断标志物。结果蛋白质组学分析结果显示,与高脂血症组相比,高脂血症合并束缚应激组小鼠共有43个显著上调与58个显著下调的差异表达蛋白质。其中,GBP2、TAOK3、TFR1、UCP1是极具诊断潜力的分子标志物。KEGG通路富集分析结果表明,铁死亡是加剧高脂血症合并束缚应激模型心肌损伤的重要机制通路。mmu_circ_0001567/miR-7a/Tfr-1和mmu_circ_0001042/miR-7a/Tfr-1可能是该模型中与铁死亡相关的重要circRNA-miRNA-mRNA调控网络。结论慢性束缚应激可能通过铁死亡加剧高脂血症小鼠的心肌损伤,本研究筛选出4个具有潜在应用价值的心肌损伤分子诊断标志物,为高脂血症合并应激致心脏性猝死的研究提供了新的方向。

关键词：法医病理学生物信息学慢性束缚应激高脂血症铁死亡生物标志物心肌损伤小鼠

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基于磁共振成像技术的牙龄推断研究进展

法医学杂志 2024年第2期40卷 112-117页

作者：施蕾薛冶邱丽蓉鲁婷范飞周宇驰邓振华四川大学华西基础医学与法医学院四川成都610041

牙龄推断是法医学年龄推断的重要内容和实现路径之一,影像技术是牙龄推断的重要技术手段。近年来,有研究初步证实了MRI在评估牙发育方面的可行性,该技术为牙发育评估提供了新的视角和可能性,有望成为更安全且准确的牙龄推断技术手段,但... 详细信息

牙龄推断是法医学年龄推断的重要内容和实现路径之一,影像技术是牙龄推断的重要技术手段。近年来,有研究初步证实了MRI在评估牙发育方面的可行性,该技术为牙发育评估提供了新的视角和可能性,有望成为更安全且准确的牙龄推断技术手段,但仍需进一步验证其准确性和适应性。本文综述了MRI技术在牙发育和年龄推断中的研究现状、研究瓶颈和局限性,为基于MRI技术的牙龄推断研究提供参考和借鉴。

关键词：法医人类学法医齿科学年龄推断磁共振成像牙龄牙发育综述

束缚应激通过激活Rho/ROCK通路诱导大鼠杏仁核血脑屏障的损伤

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南方医科大学学报 2024年第3期44卷 411-419页

作者：许光明高安迪丛斌中央司法警官学院法医学教研室河北保定071000 河北医科大学法医学院//河北省法医学重点实验室河北石家庄050017

目的探讨Rho/ROCK信号通路在束缚应激诱导大鼠杏仁核血脑屏障损伤过程中的作用及机制。方法选取60只SPF级雄性SD大鼠建立束缚应激模型,将大鼠分为4组:Control组(n=15,每日禁食水6 h);Stress组(n=15,每日束缚6 h);Stress+Fasudil组(n=15... 详细信息

目的探讨Rho/ROCK信号通路在束缚应激诱导大鼠杏仁核血脑屏障损伤过程中的作用及机制。方法选取60只SPF级雄性SD大鼠建立束缚应激模型,将大鼠分为4组:Control组(n=15,每日禁食水6 h);Stress组(n=15,每日束缚6 h);Stress+Fasudil组(n=15,每日束缚6 h,束缚前0.5 h给予腹腔注射1 mg/100 g Fasudil溶液);Fasudil组(n=15,每日给予腹腔注射1 mg/100 g Fasudil溶液)。用高架十字迷宫实验(EPM)检测各组大鼠行为学变化,ELISA检测血清CORT和S100B水平,检测脑组织伊文思蓝(EB)的渗漏情况以评估渗透性的改变,免疫荧光法和Western blotting方法检测紧密连接蛋白Claudin-5、Occludin、ZO-1的表达变化,Pull-down实验和Western blotting检测Rho/ROCK通路的激活情况,透射电镜观察脑微血管内皮细胞超微结构的形态变化。结果与Control组相比,Stress组和Stress+Fasudil组大鼠表现出了明显的焦虑样行为;Stress组和Stress+Fasudil组血清CORT含量均显著高于Control组(P<0.001);与Control组和Stress+Fasudil组相比,Stress组EB渗漏含量和S100B含量均显著升高(P<0.05);Stress组紧密连接蛋白的表达显著低于Control组和Stress+Fasudil组(P<0.05);Pull-down实验和Western blot分析证实,Stress组RhoA-GTP(P<0.001)、ROCK2(P<0.001)、p-MLC2(P<0.05)的表达显著高于Control组和Stress+Fasudil组;脑微血管内皮细胞超微结构显示,Stress组呈现显著的形态学改变。结论束缚应激能够通过激活Rho/ROCK信号通路诱导大鼠杏仁核血脑屏障的损伤。

关键词：束缚应激血脑屏障杏仁核 Rho/ROCK通路紧密连接渗透性

补体C1s对食管鳞状细胞癌生物学行为的影响

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中国免疫学杂志 2024年第1期40卷 127-133页

作者：任玲陈昱伶徐凤敏蒙春梅李倩倩胡为民川北医学院基础医学与法医学院南充637100

目的:探究补体分子C1s对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞增殖、迁移、黏附以及裸鼠移植瘤生长的影响。方法:利用NCBI-GEO数据库分析ESCC组织和癌旁正常组织(ANTs)中C1S mRNA的表达;采用RT-qPCR和Western blot检测ESCC细胞系中C1s的表达;利用C1... 详细信息

目的:探究补体分子C1s对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞增殖、迁移、黏附以及裸鼠移植瘤生长的影响。方法:利用NCBI-GEO数据库分析ESCC组织和癌旁正常组织(ANTs)中C1S mRNA的表达;采用RT-qPCR和Western blot检测ESCC细胞系中C1s的表达;利用C1s小干扰RNA(siRNA)、C1s短发夹RNA(shRNA)或C1s过表达慢病毒对ESCC细胞进行C1s的敲低或过表达,CCK-8法检测细胞增殖,细胞划痕实验检测细胞迁移,细胞-基质黏附实验检测细胞黏附能力;Western blot检测基质金属蛋白酶MMP1和MMP13表达;裸鼠皮下成瘤实验检测C1s对裸鼠移植瘤生长的影响,免疫组织化学法检测移植瘤中CD34表达,分析肿瘤微血管的形成。结果:ESCC组织中C1S mRNA表达明显高于ANTs,敲低C1s可明显抑制ESCC细胞的增殖、迁移、细胞-基质黏附以及裸鼠移植瘤的生长,而过表达C1S则具有相反的效果;C1s敲低的ESCC细胞TE-1中MMP1和MMP13的表达降低;与对照组相比,C1s过表达组移植瘤中的微血管更加丰富。结论:C1s在ESCC组织中显著上调,并促进ESCC细胞的增殖、迁移、细胞-基质黏附以及裸鼠移植瘤的生长。C1s可能在ESCC发生发展中发挥重要作用。

关键词：补体C1s 食管鳞状细胞癌增殖迁移黏附

法医学混合斑研究现状及趋势的文献计量和可视化分析

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法医学杂志 2024年第1期40卷 20-29页

作者：范庆炜李凌杨慧凌邓婷婷徐冬冬王韵杜冰严江伟川北医学院基础医学与法医学研究所四川南充637000 川北医学院司法鉴定中心四川南充637000 山西医科大学法医学院山西太原030001

目的通过文献计量学方法,探明法医学混合斑研究的脉络与热点变化。方法以2011—2022年Web of Science数据库核心合集所收录的法医学混合斑文献为研究对象,利用基于R语言Bibliometrix 1.1.6包和VOSviewer 1.6.18软件对年发文量、国家(... 详细信息

目的通过文献计量学方法,探明法医学混合斑研究的脉络与热点变化。方法以2011—2022年Web of Science数据库核心合集所收录的法医学混合斑文献为研究对象,利用基于R语言Bibliometrix 1.1.6包和VOSviewer 1.6.18软件对年发文量、国家(地区)、机构、期刊、关键词等方面进行文献计量和可视化分析。结果 2011—2022年共纳入732篇法医学混合斑研究的文献,年发文量及年被引频次总体展现逐年平稳上升的趋势。59个发文国家(地区)中最多为美国246篇,其次为中国153篇;文献来源于104本期刊,发文量前10的期刊上发文总数为633篇,FORENSIC SCI INT GENET发文量为307篇,排名第1;利用VOSviewer软件可视化分析显示,关键词可被区分为4个研究聚类,分别为遗传标记发展组(蓝色)、混合斑分型分析理论组(红色)、测序分析组(黄色)、案件样本研究组(绿色);从不同时段上可分为发展早期(2011—2013年)、发展中期(2014—2016年)、快速发展期(2017—2020年)、最新发展期(2021—2022年)4个发展阶段。结论国内外学者在法医学混合斑研究的发文量呈现较为平稳的趋势,机器学习、下一代测序等研究是近年来最受关注的热点主题,有望使法医学混合斑研究在混合斑分型分析理论和测序分析研究等方面得到更进一步的发展。

关键词：法医遗传学文献计量学混合斑可视化分析 Web of Science

基于蛋白质组学探究三七总皂苷对2型糖尿病小鼠肝脏的保护作用

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药学学报 2024年

作者：刘文虎张金花吴敏谢楠王爽常晋霞张帆 1.川北医学院药学院 2.川北医学院基础医学与法医学院川北医学院药学院川北医学院基础医学与法医学院

肝脏是机体糖脂代谢的主要器官，持续性高血糖是导致肝损伤的常见原因。三七总皂苷 (Panax notoginsenosides， PNS) 是三七中的主要活性成分，具有抗炎、抗氧化等作用。本研究拟采用定量蛋白质组学结合实验验证探究PNS对2型糖尿病 (t... 详细信息

肝脏是机体糖脂代谢的主要器官，持续性高血糖是导致肝损伤的常见原因。三七总皂苷 (Panax notoginsenosides， PNS) 是三七中的主要活性成分，具有抗炎、抗氧化等作用。本研究拟采用定量蛋白质组学结合实验验证探究PNS对2型糖尿病 (type 2 diabetes mellitus， T2DM) 小鼠肝损伤的保护作用及其潜在机制。所有动物实验经川北医学院实验动物伦理委员会批准 (批准号: NSMC2022023)。采用苏木精-伊红染色 (hematoxylin-eosin staining， H&E) 和透射电镜分析PNS对T2DM小鼠肝脏结构及形态的影响; 通过脱氧核苷酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记 (TdT-mediated dUTP nick-end labeling， TUNEL) 染色分析PNS对T2DM小鼠肝细胞凋亡的影响; 采用活性氧 (reactive oxygen species， ROS) 和丙二醛 (malonaldehyde， MDA) 试剂盒探究PNS对T2DM小鼠肝脏氧化损伤的影响作用。基于定量蛋白质组学探究T2DM和T2DM+PNS组小鼠肝脏蛋白质表达谱变化。利用倍数变化及显著性水平分析T2DM和T2DM+PNS组间差异表达蛋白; 采用GeneAnalytics数据库通路富集分析; 使用Metascape数据库基因本体分析; 基于STRING数据库构建蛋白-蛋白互作网络; 采用Western blot检测蛋白表达水平。结果表明， PNS能够改善T2DM小鼠肝脏结构，抑制肝细胞凋亡，改善线粒体和内质网形态。蛋白质组数据显示， 489种基因在T2DM小鼠肝脏中表达显著改变， PNS治疗后42种基因表达改变且向正常组转归。通路富集表明， T2DM组固醇激素生物合成、AMP依赖蛋白激酶 (adenosine 5′-monophosphate-activated protein kinase， AMPK) 通路、氧化压力、胰岛素信号、磷脂酰肌醇通路、肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor-α， TNF-α) 介导的炎症、胰岛素抵抗及mTOR信号异常改变， PNS能够激活AMPK、TNF-α、凋亡及胰岛素通路。Western blot表明， PNS抑制Bax、Grp78和Chop的表达，降低cleaved casp6/casp6比值，增加pAMPKα、HO-1和核内Nrf2的表达，提示PNS可能通过激活AMPK/Nrf2/HO-1信号通路减轻氧化应激和内质网应激，抑制细胞凋亡进而发挥对糖尿病小鼠的肝脏保护作用。

关键词：三七总皂苷降糖作用 AMPK/Nrf2/HO-1信号通路氧化应激内质网应激保肝作用

CRISPR/Cas12a联合催化发夹自组装的mi RNA21检测

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分析试验室 2024年第4期43卷 559-563页

作者：李甜邹红敏陈菲游芸张莉萍河南科技大学基础医学与法医学院洛阳471023

构建了一种基于CRISPR/Cas12a和催化发夹自组装(CHA)的miRNA21检测方法。目标物miRNA21可引发CHA,产生大量的双链DNA复合物。作为Cas12a的底物,双链DNA复合物包含原型间隔序列毗邻基序(5′-TTTN-3′),可激发Cas12a的附属切割活性,剪切... 详细信息

构建了一种基于CRISPR/Cas12a和催化发夹自组装(CHA)的miRNA21检测方法。目标物miRNA21可引发CHA,产生大量的双链DNA复合物。作为Cas12a的底物,双链DNA复合物包含原型间隔序列毗邻基序(5′-TTTN-3′),可激发Cas12a的附属切割活性,剪切一端带有荧光基团、另一端带有猝灭基团的单链DNA荧光报告探针,产生可检测的荧光信号。考察了CHA反应温度、发夹探针浓度、荧光报告探针浓度和Cas12a切割时间的影响。在优化条件下,荧光信号与miRNA21浓度的对数呈良好的线性关系,线性相关系数R2=0.9924,检出限为1.1 pmol/L。利用本方法对miRNA21加标的胎牛血清样品进行分析,20 pmol/L和100 pmol/L miRNA21的回收率分别为(92.0±4.2)%和(94.1±4.7)%。CRISPR/Cas12a联合催化发夹自组装的miRNA检测方法,使miRNA检测摆脱了热循环仪器,操作简单,通用性强,具有实际应用潜力。

关键词：催化发夹自组装 CRISPR/Cas12a miRNA21 荧光

胸部挤压伤致声带麻痹、发声障碍法医学鉴定1例

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法医学杂志 2024年第1期40卷 101-103页

作者：虢洪松刘晓贺韦红红李长征济宁医学院法医学与医学检验学院山东济宁272002 济宁医学院司法鉴定中心山东济宁272002

1案例1.1简要案情桑某,女,13岁,某年10月6日因意外被挤伤胸部后出现声带麻痹、发声障碍。受某法院委托,要求就其声带麻痹、发声障碍与胸部挤压伤之间是否存在因果关系及原因力大小进行法医学鉴定。1.2病史摘要某年10月6日桑某因“被机... 详细信息

1案例1.1简要案情桑某,女,13岁,某年10月6日因意外被挤伤胸部后出现声带麻痹、发声障碍。受某法院委托,要求就其声带麻痹、发声障碍与胸部挤压伤之间是否存在因果关系及原因力大小进行法医学鉴定。1.2病史摘要某年10月6日桑某因“被机器挤压胸部后不省人事、烦躁不安1 h”入住甲医院。体格检查:神志不清,烦躁不安;前胸及后背皮肤散在擦伤;双肺呼吸音粗,可闻及大量湿啰音。胸部CT示:双肺上叶挫伤并肺气囊形成;双侧气胸(肺组织压缩约10%);肋骨多发骨折。

关键词：法医学胸部损伤挤压伤声带麻痹发声障碍