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一株携带四种β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的检测

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中华流行病学杂志 2010年第1期31卷 111-112页

作者：翁幸鐾糜祖煌宁波市第一医院检验科 315010 无锡市克隆遗传技术研究所生物信息学室

多耐药肺炎克雷伯菌（multi-drug-resistance Klebsiellct pneumoniae, MDRKP ）已是最常见的医院感染病原菌之一。本研究对分离自我国内地的1株MDRKP菌进行β-内酰胺类、氨基糖苷类获得性耐药相关基因及其载体（整合子、转座子）的遗... 详细信息

多耐药肺炎克雷伯菌（multi-drug-resistance Klebsiellct pneumoniae, MDRKP ）已是最常见的医院感染病原菌之一。本研究对分离自我国内地的1株MDRKP菌进行β-内酰胺类、氨基糖苷类获得性耐药相关基因及其载体（整合子、转座子）的遗传标记检测，发现该株菌同时携带4种β-内酰胺酶。

关键词：肺炎克雷伯菌多耐药获得性耐药基因

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20株泛耐药鲍氏不动杆菌亲缘性分析

中华流行病学杂志 2011年第9期32卷 948-949页

作者：翁幸鐾糜祖煌宁波市第一医院检验科 315010 无锡市克隆遗传技术研究所生物信息学室

本研究在长江三角洲4家市级医院收集20株泛耐药鲍氏不动杆菌（pandrug—resistant Acinetobacter baumannii，PDR-ABA），为了解其亲缘性，对这20株菌中的21种β-内酰胺类耐药相关基因、15种氨基糖苷类耐药相关基因以及季胺类耐药相关... 详细信息

本研究在长江三角洲4家市级医院收集20株泛耐药鲍氏不动杆菌（pandrug—resistant Acinetobacter baumannii，PDR-ABA），为了解其亲缘性，对这20株菌中的21种β-内酰胺类耐药相关基因、15种氨基糖苷类耐药相关基因以及季胺类耐药相关基因进行分析。

关键词：鲍氏不动杆菌亲缘性分析

从尿液中分离出aac（6′）-Ⅰb基因新亚型的大肠埃希菌

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中华检验医学杂志 2010年第2期33卷 149-151页

作者：翁幸鐾糜祖煌宁波市第一医院检验科 315010 无锡市克隆遗传技术研究所生物信息学室

迄今为止，已发现的细菌对氨基糖苷类抗菌药物产生的耐药机制主要有5种，其中由获得性耐药基因介导的耐药机制有2种，即产生氨基糖苷类修饰酶（AMEs）和产16SrRNA甲基化酶。为了解Ecoli尿液分离株氨基糖苷类抗菌药物获得性耐药基因存在... 详细信息

迄今为止，已发现的细菌对氨基糖苷类抗菌药物产生的耐药机制主要有5种，其中由获得性耐药基因介导的耐药机制有2种，即产生氨基糖苷类修饰酶（AMEs）和产16SrRNA甲基化酶。为了解Ecoli尿液分离株氨基糖苷类抗菌药物获得性耐药基因存在状况，

关键词：大肠埃希菌氨基糖苷类修饰酶 16SrRNA甲基化酶尿液新亚型 b基因获得性耐药离出

1株同时携带四种β-内酰胺酶的肺炎克雷伯菌(英文)

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中国人兽共患病学报 2014年第3期30卷 329-331页

作者：翁幸鐾糜祖煌宁波市第一医院检验科宁波315010 无锡市克隆遗传技术研究所生物信息学室无锡214026

目的了解1株多耐药肺炎克雷伯菌(MDRKP)获得性耐药基因存在状况。方法我们把1株对14种抗菌药物耐药,仅对亚胺培南、美罗培南敏感的MDRKP菌进行了β-内酰胺类、氨基糖苷类获得性耐药相关基因及其载体(整合子、转座子)的遗传标记检测。结... 详细信息

目的了解1株多耐药肺炎克雷伯菌(MDRKP)获得性耐药基因存在状况。方法我们把1株对14种抗菌药物耐药,仅对亚胺培南、美罗培南敏感的MDRKP菌进行了β-内酰胺类、氨基糖苷类获得性耐药相关基因及其载体(整合子、转座子)的遗传标记检测。结果该株MDRKP菌耐β-内酰胺类药物获得性耐药基因检出TEM-1、SHV-11、OXA-1、DHA-1型(均测序比对证实);耐氨基糖苷类药物获得性耐药基因检出aac(6’)-Ⅰb,无16SrRNA甲基化酶基因检出;Ⅰ类整合子遗传标记intⅠ1、qacE△1-sul1阳性,转座子遗传标记merA阴性。结论该株MDRKP菌呈多重耐药与该菌携带获得性耐药基因TEM-1、SHV-11、OXA-1、DHA-1、aac(6’)-Ⅰb基因相关,碳青霉烯类抗菌药物是治疗此类多耐药菌株的首选药物,也是最有效的药物。

关键词：肺炎克雷伯菌多耐药获得性耐药基因治疗

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尿液中检出迟钝爱德华菌一例

中华传染病杂志 2017年第2期35卷 118-119页

作者：翁幸鐾糜祖煌宁波市第一医院检验科浙江省315010 无锡市克隆遗传技术研究所生物信息学室

以下内容和版式版权归属中华医学会，未经授权不得转载×患者女，89岁，因膀胱肿瘤、右肾积水于2012年1月30日收住于宁波市第一医院泌尿外科，尿培养示迟钝爱德华菌〉100 000 cfu/mL，予氨曲南2.0 g每天两次治疗。2012年2月5日复查尿培... 详细信息

以下内容和版式版权归属中华医学会，未经授权不得转载×患者女，89岁，因膀胱肿瘤、右肾积水于2012年1月30日收住于宁波市第一医院泌尿外科，尿培养示迟钝爱德华菌〉100 000 cfu/mL，予氨曲南2.0 g每天两次治疗。2012年2月5日复查尿培养，无细菌、真菌生长，提示尿路感染治愈。用VITEK-2细菌鉴定仪及配套革兰阴性菌鉴定卡鉴定菌种，标准菌株为产酸克雷伯菌ATCC700324。挑纯培养菌落置入0.5 mL离心管内（内预置200 μg/L蛋白酶K溶液200 μL，56 ℃水浴2 h，改95 ℃水浴10 min，15 000 r/min（离心半径8 cm）离心30 s。上清液即为基因检测的模板液，－20 ℃冰箱保存备用。分子鉴定采用PCR法检测管家基因gyrA。靶基因引物识别序列P1： 5′-CAGGTAGTAGTGACCGTCAC-3′；P2： 5′-AAGCGTGTCGAAGGCATCAG-5′；目的产物长度501 bp。

关键词：爱德华菌细菌鉴定仪宁波市第一医院 VITEK-2 尿液产酸克雷伯菌基因检测中华医学会

泛耐药铜绿假单胞菌16S rRNA甲基化酶、氨基糖苷类修饰酶基因研究

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中华医院感染学杂志 2008年第12期18卷 1656-1658页

作者：糜祖煌秦玲无锡市克隆遗传技术研究所生物信息研究室江苏无锡214026

目的探讨泛耐药铜绿假单胞菌(PDRPA)氨基糖苷类耐药机制。方法应用聚合酶链反应(PCR)检测16S rRNA甲基化酶基因、氨基糖苷类修饰酶基因。结果33株PDRPA 16S rRNA甲基化酶rmtB阳性14株(42.4%);氨基糖苷类修饰酶aac(3)-Ⅱ阳性17株(51.5%)... 详细信息

目的探讨泛耐药铜绿假单胞菌(PDRPA)氨基糖苷类耐药机制。方法应用聚合酶链反应(PCR)检测16S rRNA甲基化酶基因、氨基糖苷类修饰酶基因。结果33株PDRPA 16S rRNA甲基化酶rmtB阳性14株(42.4%);氨基糖苷类修饰酶aac(3)-Ⅱ阳性17株(51.5%)、aac(6′)-Ⅰb阳性14株(42.4%)、aac(6′)-Ⅱ阳性19株(57.6%)、ant(3″)-Ⅰ阳性16株(48.5%)、ant(2″)-Ⅰ阳性21株(63.6%),共有32株查出氨基糖苷类修饰酶基因;1株PDRPA氨基糖苷类修饰酶基因阴性者查出16S rRNA甲基化酶rmtB基因。结论PDRPA氨基糖苷类耐药机制与产16S rRNA甲基化酶和产氨基糖苷类修饰酶相关。

关键词：泛耐药铜绿假单胞菌耐药机制

大肠埃希菌尿液分离株β-内酰胺酶基因、AmpC酶基因和膜孔蛋白ompC基因研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2010年第12期30卷 1083-1084页

作者：翁幸鐾糜祖煌宁波市第一医院检验科 315010 无锡市克降遗传技术研究所生物信息学室

近年来,国内关于***产β-内酰胺酶和AmpC酶耐β-内酰胺类药物的研究报道已有不少,但所涉及基因种类不够全面.为系统性地了解***尿液分离株β-内酰胺酶基因、AmpC酶基因和膜孔蛋白ompC基因的存在和变异情况,本研究进行了***可能存在的15... 详细信息

近年来,国内关于***产β-内酰胺酶和AmpC酶耐β-内酰胺类药物的研究报道已有不少,但所涉及基因种类不够全面.为系统性地了解***尿液分离株β-内酰胺酶基因、AmpC酶基因和膜孔蛋白ompC基因的存在和变异情况,本研究进行了***可能存在的15种β-内酰胺酶基因、6种AmpC酶基因和膜孔蛋白ompC基因检测,结果3类基因均有检出,并发现了3株ompC基因新亚型,已登录美国GenBank（NB015：HQ333474,NB020：GQ501059,NB027：GQ501066）.

关键词： β-内酰胺酶基因 AmpC酶基因 ompC 膜孔蛋白 C基因分离株大肠埃希菌尿液

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大肠埃希菌尿液分离株可移动遗传元件研究

中华医院感染学杂志 2010年第5期20卷 607-610页

作者：翁幸鐾糜祖煌宁波市第一医院检验科浙江宁波315010 无锡市克隆遗传技术研究所生物信息学室江苏无锡214026

目的调查大肠埃希菌尿液分离株中质粒、转座子和整合子等可移动遗传元件的存在情况。方法收集宁波市第一医院2008年10月～2009年3月患者尿液标本中分离的大肠埃希菌共28株,采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析10种可移动遗传元件... 详细信息

目的调查大肠埃希菌尿液分离株中质粒、转座子和整合子等可移动遗传元件的存在情况。方法收集宁波市第一医院2008年10月～2009年3月患者尿液标本中分离的大肠埃希菌共28株,采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析10种可移动遗传元件:traA、trbC、tnpA、tnpU、tnp513、tnsA、merA、intⅠ1、intⅠ2、intⅠ3。结果28株大肠埃希菌共检出3种基因:traA、trbC、intⅠ1,其余7种基因未检出;各种基因阳性率以traA最高25株(89.3%),intⅠ1次之19株(67.9%),trbC8株(28.6%);所有28株(100.0%)至少检出1种基因,各菌株基因阳性数1～3种,5株ECO同时检出3种基因,13株同时检出2种基因,10株仅检出1种基因。结论同时检测10种可移动遗传元件是国内首次报道,traA和intⅠ1基因阳性率较高,而trbC基因阳性率较低;可移动遗传元件介导各种耐药基因使受体菌表现为多药耐药,检出trbC基因为国内首次报道。

关键词：大肠埃希菌尿液质粒转座子整合子可移动遗传元件多药耐药

多药耐药肺炎克雷伯菌尿液分离株检出gyrA基因新亚型

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中华医院感染学杂志 2011年第21期21卷 4426-4430页

作者：陈刚糜祖煌翁幸鐾孙定河宁波市第一医院检验科浙江宁波315010 无锡市克隆遗传技术研究所生物信息学室江苏无锡214026

目的了解1株多药耐药肺炎克雷伯菌的遗传学背景。方法采用聚合酶链反应(PCR)的方法分析1株多药耐药肺炎克雷伯菌可能存在的65种耐药相关基因:包括β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类耐药相关基因及可移动的遗传元件(整合子、转座子、接... 详细信息

目的了解1株多药耐药肺炎克雷伯菌的遗传学背景。方法采用聚合酶链反应(PCR)的方法分析1株多药耐药肺炎克雷伯菌可能存在的65种耐药相关基因:包括β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类耐药相关基因及可移动的遗传元件(整合子、转座子、接合性质粒)遗传标记、抗菌制剂外排泵基因。结果该株多药耐药肺炎克雷伯菌耐β-内酰胺类药物基因检出blaTEM,耐氨基糖苷类药物基因检出aph(3′)-Ⅰ,耐喹诺酮类药物基因检出gyrA,Ⅰ类整合子遗传标记检出intⅠ1,转座子遗传标记检出tnp513,接合性质粒遗传标记检出trbC;抗菌制剂外排泵基因检出qacE△1-sul1,gyrA基因是新亚型(GenBank登录号:JN232083),83位密码子突变方式为TCG→TTC,导致氨基酸从丝氨酸(S)→苯丙氨酸(F);87位密码子突变方式为GAC→GCC,导致氨基酸从天冬氨酸(D)→丙氨酸(A)。结论携带多药耐药基因和抗菌制剂外排泵基因是这株肺炎克雷伯菌呈多药耐药的主要原因,携带多种可移动遗传元件使细菌的耐药性在同种细菌菌株之间,甚至不同种细菌菌株之间得以快速传播。

关键词：多药耐药肺炎克雷伯菌耐药相关基因整合子转座子质粒抗菌制剂外排泵基因 gyrA基因突变