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环状RNA CDR1as促进小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化和成血管相关基因表达

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口腔疾病防治 2022年第6期30卷 390-397页

作者：杨玮哲韩祥祯郑美洁周琦琪何惠宇新疆医科大学第一附属医院(附属口腔医院)口腔修复科新疆维吾尔自治区乌鲁木齐830054 新疆维吾尔自治区口腔医学研究所新疆维吾尔自治区乌鲁木齐830011

目的探讨环状RNA小脑变性相关蛋白1的反义转录物(antisense to the cerebellar degeneration-related protein 1 transcript,CDR1as)在Balb/C小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)中过表达与低表达后对其成骨和成血管相关基因的影响。方法体外培养及鉴定BMSCs,将含过表达与沉默circRNA CDR1as基因的慢病毒(lentiviruses,LV)载体及对照组慢病毒分别转染至小鼠BMSCs并筛选稳定的细胞株,分为circRNA CDR1as过表达组、过表达对照组、circRNA CDR1as低表达组和低表达对照组。各组成骨诱导14、21 d后分别进行茜素红染色和碱性磷酸酶染色;qRT-PCR检测目的基因circRNA CDR1as、成骨分化特异标志物碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、Runt相关基因2(runt-related transcription factor 2,RUNX2)、骨钙素(osteocalcin,OCN)、骨桥素(osteopontin,OPN)、锌指结构转录因子(osterix,OSX)、Ⅰ型胶原蛋白(collagen-I,COL-1),以及成血管特异标志物血管内皮生长因子(vascular endothelial grown factor,VEGF)、血管生成素-1(angiogenin-1,Ang-1)的mRNA表达水平。结果茜素红和ALP染色均显示:过表达实验组钙沉淀和ALP染色区域多于过表达对照组;而低表达实验组钙沉淀和ALP染色区域少于低表达对照组,随着成骨诱导天数的增加,各组的钙沉淀和ALP染色面积也增大。qRT-PCR结果显示:过表达实验组BMSCs中circRNA CDR1as、ALP、RUNX2、OCN、OPN、OSX、COL-1、VEGF和Ang-1的mRNA表达水平显著升高(P<0.001);低表达实验组BMSCs中circRNA CDR1as、ALP、RUNX2、OCN、OPN、OSX、COL-1、VEGF和Ang-1的m RNA表达水平显著降低(P<0.001)。结论过表达circRNA CDR1as基因可促进BMSCs的成骨分化及血管生成的能力;低表达circRNA CDR1as基因可抑制BMSCs的成骨分化及血管生成的能力。

关键词：骨环状RNA CDR1as 基因沉默小鼠骨髓间充质干细胞 Runt相关基因2 Ⅰ型胶原蛋白血管内皮生长因子成骨分化骨组织工程

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脂多糖干预小鼠骨髓来源巨噬细胞的凋亡

中国组织工程研究 2022年第31期26卷 4962-4966页

作者：郑美洁杨玮哲刘佳林韩祥祯周琦琪何惠宇新疆医科大学第一附属医院(附属口腔医院)口腔修复科新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830054 新疆维吾尔自治区口腔医学研究所新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830054

背景:巨噬细胞是机体应对外界刺激的一道免疫防线,任何生物材料植入体内后的相关反应均与巨噬细胞介导的免疫反应有联系。目的:探讨脂多糖对小鼠骨髓来源巨噬细胞凋亡的影响。方法:体外分离培养C57BL/6小鼠骨髓来源巨噬细胞,分别加入含0... 详细信息

背景:巨噬细胞是机体应对外界刺激的一道免疫防线,任何生物材料植入体内后的相关反应均与巨噬细胞介导的免疫反应有联系。目的:探讨脂多糖对小鼠骨髓来源巨噬细胞凋亡的影响。方法:体外分离培养C57BL/6小鼠骨髓来源巨噬细胞,分别加入含0(对照),10,100,1000μg/L脂多糖的DMEM完全培养基。培养24 h后,利用流式细胞仪检测细胞凋亡率,Hoechst染色观察细胞形态,RT-PCR检测白细胞介素1、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α及凋亡相关因子Bax、P53的mRNA表达。结果与结论:①各质量浓度脂多糖组的细胞凋亡率均高于对照组(P<0.05),其中100,1000μg/L脂多糖组细胞凋亡率高于10μg/L脂多糖组(P<0.05);②Hoechst染色显示,对照组细胞核正常,细胞发生凋亡时染色质浓缩;各质量浓度脂多糖组细胞发生不同程度凋亡,凋亡细胞的细胞核呈致密浓染或碎块状致密浓染,颜色稍有些发白,尤以1000μg/L最明显;③RT-PCR检测显示,各质量浓度脂多糖组细胞的白细胞介素1、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、Bax及P53 mRNA表达均高于对照组(P<0.01或P<0.001),且随着脂多糖质量浓度的升高,白细胞介素1、白细胞介素6、肿瘤坏死因子αmRNA表达呈先升高后降低的趋势,Bax、P53 mRNA表达呈升高趋势;④结果表明,脂多糖可诱导骨髓来源巨噬细胞的凋亡。

关键词：植入体骨髓巨噬细胞脂多糖凋亡骨组织工程

马鹿角粉浸提液对骨髓来源巨噬细胞生物学行为的影响

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中国组织工程研究 2022年第24期26卷 3840-3845页

作者：单帅董艺刘佳林韩祥祯何惠宇新疆医科大学第一附属医院(附属口腔医院)口腔修复与种植科新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830054 新疆维吾尔自治区口腔医学研究所新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830054

背景:异物反应会导致材料植入失败,近些年来对于免疫学的研究逐渐成为热点,选择具有良好免疫性能的支架材料,对于骨缺损修复具有重要意义。目的:探讨去抗原处理的煅烧马鹿角松质骨及未去抗原处理的马鹿角对骨髓来源M1型巨噬细胞生物行... 详细信息

背景:异物反应会导致材料植入失败,近些年来对于免疫学的研究逐渐成为热点,选择具有良好免疫性能的支架材料,对于骨缺损修复具有重要意义。目的:探讨去抗原处理的煅烧马鹿角松质骨及未去抗原处理的马鹿角对骨髓来源M1型巨噬细胞生物行为的影响。方法:经过物理及化学方法制备煅烧马鹿角松质骨,通过X射线光电子能谱、傅里叶变换红外光谱检测材料理化性质,制备2种材料浸提液并检测浸提液中Ca、P、Mg的元素水平。体外诱导培养骨髓来源巨噬细胞并在脂多糖和干扰素γ刺激下极化为M1型巨噬细胞,然后与各组浸提液共培养,对照组用单纯IMDM完全培养基共培养,CCK-8检测细胞存活率、流式细胞术检测细胞M1型标志物表达率、qPCR检测巨噬细胞相关基因表达水平。结果与结论:①去抗原马鹿角组Ca、P、Mg元素水平高于马鹿角组;②去抗原马鹿角组和马鹿角组主要官能团为OH^(-)、PO_(4)^(3-)、CO_(3)^(2-);③共培养1,3,7 d各组M1型巨噬细胞存活率差异无显著性意义;④共培养1 d时,去抗原马鹿角组细胞表面标志物CD16/32表达率低于对照组;⑤共培养1,3 d时,去抗原马鹿角组促炎因子肿瘤坏死因子α和白细胞介素6的表达明显低于对照组;共培养3 d时,去抗原马鹿角组M2型巨噬细胞主要标记物CD206的表达量明显高于对照组;而在共培养1,3 d时马鹿角组的肿瘤坏死因子α和白细胞介素6表达或与对照组无差异或明显高于对照组,在CD206因子表达方面均与对照组无差异;⑥结果表明,去抗原马鹿角松质骨粉末浸提液可降低M1型巨噬细胞相关促炎因子的表达并促进其向M2型巨噬细胞极化。

关键词：鹿角锻烧骨浸提液骨髓来源巨噬细胞异物反应巨噬细胞极化

敲低环状RNA mmu_circ_0001775可提高小鼠骨髓间充质干细胞的成骨能力

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中国组织工程研究 2022年第30期26卷 4767-4772页

作者：董艺单帅刘佳林韩祥帧何惠宇新疆医科大学第一附属医院(附属口腔医院)口腔修复与种植科新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830054 新疆维吾尔自治区口腔医学研究所新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830054

背景:近年来利用环状RNA(circRNA)调控干细胞分化成为新的研究热点,将circRNA负载于骨髓间充质干细胞研究其成骨性能,为研发骨缺损修复新型材料具有重要意义。目的:探讨敲低circRNA mmu_circ_0001775对骨髓间充质干细胞成骨能力的影响... 详细信息

背景:近年来利用环状RNA(circRNA)调控干细胞分化成为新的研究热点,将circRNA负载于骨髓间充质干细胞研究其成骨性能,为研发骨缺损修复新型材料具有重要意义。目的:探讨敲低circRNA mmu_circ_0001775对骨髓间充质干细胞成骨能力的影响。方法:生物信息学分析工具推测miR-335-5p关系最为密切的上游circRNA为mmu_circ_0001775,将敲低mmu_circ_0001775的慢病毒、阴性对照病毒转染至骨髓间充质干细胞。qRT-PCR检测各组细胞成骨诱导7,14 d时Runt相关转录因子2、骨钙素、miR-335-5p及mmu_circ_0001775的表达水平,验证其成骨作用,Western blot检测骨形态发生蛋白2、骨桥蛋白的表达。结果与结论:LV-mmu_circ_0001775-BMMSCs组各时间点Runt相关转录因子2、骨钙素表达高于LV-BMMSCs组(P<0.01),骨形态发生蛋白2、骨桥蛋白相对表达量均明显高于LV-BMMSCs组(P<0.05)。结果表明,敲低环状RNA mmu_circ_0001775有利于提高骨髓间充质干细胞的成骨能力。

关键词： circRNA microRNA 成骨分化颌骨缺损组织再生骨髓间充质干细胞分子海绵

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半导体激光在牙周非手术治疗的应用研究进展

口腔疾病防治 2023年第8期31卷 586-591页

作者：迪丽娜尔·艾尔肯马乐古丽努尔·阿吾提新疆医科大学第一附属医院(附属口腔医院)牙周黏膜科新疆维吾尔自治区乌鲁木齐830054 新疆维吾尔自治区口腔医学研究所新疆维吾尔自治区乌鲁木齐830054

慢性牙周炎是由菌斑微生物引起得慢性炎症性疾病,去除菌斑结石是牙周非手术治疗的金标准。然而彻底清创难度较大,尤其在一些复杂的解剖位点,过度刮治又可能造成健康牙骨质的丧失导致术后根面敏感。研究表明半导体激光因其波长(630~1064 ... 详细信息

慢性牙周炎是由菌斑微生物引起得慢性炎症性疾病,去除菌斑结石是牙周非手术治疗的金标准。然而彻底清创难度较大,尤其在一些复杂的解剖位点,过度刮治又可能造成健康牙骨质的丧失导致术后根面敏感。研究表明半导体激光因其波长(630~1064 nm)接近血红素和黑色素的吸收峰值,在有血液的环境中能发挥最佳性能,在口腔领域具有广泛的应用前景。在牙周非手术治疗时半导体激光有软激光疗法、光动力疗法及低能量激光疗法3种治疗模式,可单一使用也可组合使用。虽然半导体激光无法代替机械治疗去除结石,但是其通过光热效应、光化学效应、生物刺激等作用可以去除感染的牙周袋上皮、改变微循环促进创面愈合及止血止痛等。半导体激光治疗效果取决于合适的治疗剂量,需精准掌控输出强度,控制照射时间,避免引起组织的热损伤。未来还需在分子水平上对其进行广泛的研究,了解组织的反应,同时还需更多高质量、大样本的随机对照试验来规范激光在牙周炎中的使用。

关键词：激光半导体激光慢性牙周炎牙周非手术治疗龈下刮治软激光疗法光动力疗法低能量疗法光敏剂

关节腔注射医用臭氧对早期颞下颌骨关节炎模型大鼠髁突组织学的影响

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中国组织工程研究 2024年第4期28卷 505-509页

作者：买斯吐热木·黑力力张婉霞尼加提·努尔穆罕默德买买提吐逊·吐尔地新疆医科大学第一附属医院(附属口腔医院)口腔颌面创伤正颌外科新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830054 新疆维吾尔自治区口腔医学研究所新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830054

背景:在临床以及动物实验中均已证实关节腔内注射医用臭氧可有效改善颞下颌关节炎的症状,减缓疾病的发展,但注射医用臭氧的最理想浓度及其范围仍有争议。目的:观察颞下颌关节腔内注射不同质量浓度医用臭氧对颞下颌骨关节炎大鼠髁突软骨... 详细信息

背景:在临床以及动物实验中均已证实关节腔内注射医用臭氧可有效改善颞下颌关节炎的症状,减缓疾病的发展,但注射医用臭氧的最理想浓度及其范围仍有争议。目的:观察颞下颌关节腔内注射不同质量浓度医用臭氧对颞下颌骨关节炎大鼠髁突软骨的影响。方法:从42只SD大鼠中随机抽取6只作为健康对照组,剩余大鼠采用关节腔内一次性注射碘乙酸钠法建立颞下颌骨关节炎模型,在建模成功的36只大鼠中选择6只作为模型参照组,其余的30只为20,30,40 mg/L医用臭氧组,每组10只。建模成功后医用臭氧组大鼠关节腔内分别注射质量浓度为20,30,40 mg/L医用臭氧,每周1次,连续注射3周,模型参照组和健康对照组分别注射等体积生理盐水,末次注射后1周,取单侧颞下颌关节组织,ELISA法检测髁突软骨中血管内皮生长因子水平,并取另一侧颞下颌关节组织进行苏木精-伊红染色和番红O-固绿染色,应用改良Mankin’s评分法评价颞下颌关节组织病理变化程度。结果与结论:①与健康对照组相比,模型参照组、医用臭氧20,30,40 mg/L组大鼠髁突软骨中血管内皮生长因水平显著升高(P<0.05);与模型参照组、医用臭氧40 mg/L组相比,医用臭氧20,30 mg/L组髁突软骨中血管内皮生长因子水平明显下降(P<0.05);与医用臭氧30 mg/L组相比,医用臭氧20 mg/L组髁突软骨中血管内皮生长因子水平较低(P<0.05);②组织学观察结果显示医用臭氧20,30,40 mg/L组及模型参照组改良Mankin’s评分均高于健康对照组(P<0.05),医用臭氧20,30 mg/L组改良Mankin’s评分低于模型参照组、医用臭氧40 mg/L组(P<0.05);③结果表明,关节腔内注射质量浓度分别为20,30 mg/L医用臭氧时,能明显缓解大鼠颞下颌骨关节炎的进展,尤其是注射20 mg/L医用臭氧时效果更佳,但是当臭氧质量浓度上升到40 mg/L时,反而会加重大鼠颞下颌骨关节炎的病变程度。

关键词：颞下颌关节紊乱病骨关节炎臭氧血管内皮生长因子

釉基质蛋白衍生物辅助治疗牙龈退缩临床效果的系统评价

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口腔疾病防治 2023年第4期31卷 261-266页

作者：徐若男魏奕茹杨欣潼古丽努尔·阿吾提新疆医科大学第一附属医院(附属口腔医院)牙周黏膜科新疆维吾尔自治区乌鲁木齐830054 新疆维吾尔自治区口腔医学研究所新疆维吾尔自治区乌鲁木齐830011

目的对釉基质蛋白衍生物(enamel matrix derivative,EMD)辅助结缔组织瓣(connective tissue graft,CTG)治疗牙龈退缩的临床效果进行评价。方法通过检索The Cochrane Library、PubMed、EMbase、Web of Sci⁃ence、万方公共数据库、VIP数据库和中国知网数据库,搜索有关EMD辅助CTG治疗牙龈退缩的随机对照试验(randomized controlled trial,RCT),检索时间由建库至2022年9月23日,试验组为EMD+CTG,对照组为单纯采用CTG。应用Review Manager 5.4.1及Stata12.0软件进行Meta分析。结果Meta分析结果显示,试验组仅在治疗后12个月在探诊深度(probing depth,PD)及临床附着丧失(clinical attachment loss,CAL)这两个结局指标上优于对照组,差异有统计学意义[MD_(PD)=-0.10,95%CI(-0.19,-0.01),P=0.03],[MD_(CAL)=-0.38,95%CI(-0.71,-0.04),P=0.03];其余指标试验组和对照组均无显著差异。结论EMD辅助CTG治疗牙龈退缩对PD及CAL的减少存在益处。

关键词：釉基质蛋白衍生物结缔组织瓣牙龈退缩角化组织宽度探诊深度临床附着丧失随机对照试验 Meta分析系统评价

牙周源性牙周牙髓联合病变常见病原菌的分布及其意义

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口腔疾病防治 2022年第1期30卷 20-26页

作者：江阿力·帕孜力别克米热阿依克孜·马木提赵莉鲁皓新疆医科大学口腔医学院新疆维吾尔自治区乌鲁木齐830001 石河子大学口腔医学系新疆维吾尔自治区石河子832000 新疆维吾尔自治区人民医院口腔科新疆维吾尔自治区乌鲁木齐830000

目的研究牙周源性牙周牙髓联合病变常见病原菌分布及其相关性,为临床治疗提供依据。方法选择2018年1月至2020年6月于新疆维吾尔自治区人民医院口腔科就诊的牙周源性牙周牙髓联合病变患者43例43颗牙作为实验组,重度牙周炎患者41例41颗牙... 详细信息

目的研究牙周源性牙周牙髓联合病变常见病原菌分布及其相关性,为临床治疗提供依据。方法选择2018年1月至2020年6月于新疆维吾尔自治区人民医院口腔科就诊的牙周源性牙周牙髓联合病变患者43例43颗牙作为实验组,重度牙周炎患者41例41颗牙作为对照组。分别采集根管内组织和龈下菌斑,构建含有8种待测细菌基因片段的重组质粒,建立定量标准,应用实时荧光定量PCR技术检测福赛斯坦纳菌(Tannerella forsythia,Tf)、牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)、具核梭杆菌(Fusobacterium nu⁃cleatum,Fn)、中间普氏菌(Prevotella intermedia,Pi)、齿垢密螺旋体(Treponema denticola,Td)、消化性链球菌(Digestive streptococcus,Ds)、粪肠球菌(Enterococcus faecalis,Ef)、牙髓卟啉单胞菌(Porphyromanus endodontics,Pe)数量。结果实验组根管内组织与其龈下菌斑中Ds、Pe数量差异无统计学意义(Ρ>0.05),其余6种病原菌数量差异均有统计学意义(P<0.05);实验组与对照组龈下菌斑中Ds数量差异无统计学意义(P=0.241),其余7种病原菌数量差异均有统计学意义(P<0.05);实验组根管内组织与其龈下菌斑中Ef、Pe、Pg、Td、Tf细菌数量密切相关,Ef(r=0.347,Ρ<0.05)、Pe(r=0.363,Ρ<0.05)、Pg(r=0.437,Ρ<0.01)、Td(r=0.471,Ρ<0.01)、Tf(r=0.679,Ρ<0.01)。结论牙周源性牙周牙髓联合病变常见病原菌在根管内组织中数量低于龈下菌斑但根管内病原菌数量与龈下菌斑密切相关,临床治疗期间在控制牙周组织感染的同时,还应重视牙髓组织感染的控制。

关键词：牙周源性牙周牙髓联合病变病原菌分布根管内组织龈下菌斑福赛斯坦纳菌牙龈卟啉单胞菌具核梭杆菌中间普氏菌齿垢密螺旋体消化性链球菌粪肠球菌牙髓卟啉单胞菌

关节腔内注射医用臭氧治疗颞下颌关节骨关节炎模型大鼠的合适剂量

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中国组织工程研究 2022年第23期26卷 3700-3705页

作者：张婉霞尼加提·努尔穆罕默德买斯吐热木·黒力力柳江龙刘迪买买提吐逊·吐尔地新疆医科大学第一附属医院(附属口腔医院)口腔颌面创伤正颌外科新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830054 新疆维吾尔自治区口腔医学研究所新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830054

背景:医用臭氧是臭氧与氧气的混合物,与体液接触能快速产生活性氧,并激活机体的抗氧化系统。在临床上,关节腔内注射医用臭氧可有效缓解骨关节炎的进展。目的:观察关节腔内注射医用臭氧对大鼠颞下颌关节骨关节炎的治疗作用。方法:采用关... 详细信息

背景:医用臭氧是臭氧与氧气的混合物,与体液接触能快速产生活性氧,并激活机体的抗氧化系统。在临床上,关节腔内注射医用臭氧可有效缓解骨关节炎的进展。目的:观察关节腔内注射医用臭氧对大鼠颞下颌关节骨关节炎的治疗作用。方法:采用关节腔内一次性注射碘乙酸钠法建立大鼠颞下颌关节骨关节炎模型后,向大鼠关节腔内注射质量浓度分别为20,30,40 mg/L医用臭氧,1次/周,连续注射3周,模型组及对照组注射等量生理盐水,最后一次注射后1周,通过锥形束CT检查评价颞下颌关节的结构变化,然后取一侧颞下颌关节组织并抽取腹主动脉血,ELISA法检测髁突软骨及血浆中肿瘤坏死因子α水平,取另一侧颞下颌关节组织,经苏木精-伊红染色及番红O-固绿染色,采用改良Mankin’s评分法评估颞下颌关节组织的病理变化程度。结果与结论:①锥形束CT观察结果:对照组大鼠颞下颌关节髁突形状规则,表面光滑;医用臭氧20,30 mg/L组大鼠髁突形变及表面缺损程度较模型组、医用臭氧40 mg/L组小;②ELISA法检测结果:与对照组相比,模型组、医用臭氧20,30,40 mg/L组大鼠髁突软骨及血浆中肿瘤坏死因子α表达水平显著升高(P<0.05);与模型组、医用臭氧40 mg/L组相比,医用臭氧20,30 mg/L组髁突软骨及血浆中肿瘤坏死因子α表达水平明显下降(P<0.05);③组织学观察结果:医用臭氧20,30,40 mg/L组及模型组改良Mankin’s评分均高于对照组(P<0.05),医用臭氧20,30 mg/L组改良Mankin’s评分低于模型组、医用臭氧40 mg/L组(P<0.05);④结果表明,关节腔内注射质量浓度分别为20,30 mg/L医用臭氧时,能明显缓解大鼠颞下颌关节骨关节炎的进展,但是当臭氧质量浓度上升到40 mg/L时,反而会加重大鼠颞下颌关节骨关节炎的病变程度。

关键词：颞下颌关节紊乱病颞下颌关节骨关节炎臭氧关节腔注射治疗大鼠