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新疆奇台地区某猪场猪链球菌耐药性分析

动物医学进展 2024年第2期45卷 29-34页

作者：吴海潮陈万昭吴慧敏夏盼盼刘泽鹏夏利宁新疆农业大学动物医学学院新疆乌鲁木齐830052 新疆草食动物新药研究与创制重点实验室新疆乌鲁木齐830052

新疆奇台地区某猪场因感染猪链球菌引起病死率升高,为提高抗菌药物对猪链球菌病的疗效,从该猪场健康猪(25头)、患病猪(60头)的鼻拭子样品及病死猪(27头)的脏器和组织液样品中分离猪链球菌,对其进行药敏试验及相关耐药基因检测。对采集的... 详细信息

新疆奇台地区某猪场因感染猪链球菌引起病死率升高,为提高抗菌药物对猪链球菌病的疗效,从该猪场健康猪(25头)、患病猪(60头)的鼻拭子样品及病死猪(27头)的脏器和组织液样品中分离猪链球菌,对其进行药敏试验及相关耐药基因检测。对采集的135份样品(85份鼻拭子样、27份组织液样和23份脏器样)进行猪链球菌的分离鉴定,采用琼脂稀释法进行药敏试验,通过PCR方法检测相关耐药基因和毒力基因。结果表明,共分离到猪链球菌19株,分离率为14.1%,从来自健康猪的样品中未分离到猪链球菌。该场猪链球菌对恩诺沙星、红霉素、四环素、阿米卡星和替米考星5种抗菌药物的耐药率高达100%,对氨苄西林和庆大霉素耐药率高达94.7%,对氟苯尼考和青霉素耐药率较低,分别为26.3%和21.1%;均为多药耐药菌株,7耐的菌株数量最多(57.9%,11/19)。tetM、ermB基因检出率均高于90.0%,tetO、lsa(E)和tetL基因检出率分别为21.2%、21.1%和10.5%,检出3株携带噁唑烷酮类多药耐药基因optrA的菌株,未检出ermA、mefA和cfr基因;6种毒力基因均有检出,其中orf2基因检出率最高,为52.6%,fbps基因检出率最低,为5.2%。除了对青霉素和氟苯尼考较为敏感之外,其余均为6耐以上,耐药基因携带率高,建议该猪场结合猪链球菌的分离率和耐药性检测结果,对猪进行合理的用药安排。

关键词：猪链球菌耐药性耐药基因毒力基因

新疆某自繁自养猪场人、动物和环境中粪肠球菌、屎肠球菌的分离及耐药表型与耐药基因分析

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中国兽医学报 2024年第7期44卷 1430-1437页

作者：夏盼盼吴慧敏陈万昭张晨晖兰佩聪刘泽鹏田芮夏利宁新疆农业大学动物医学学院新疆乌鲁木齐830052 新疆草食动物新药研究与创制重点实验室新疆乌鲁木齐830052

为了解新疆猪场中人、猪和环境源粪肠球菌、屎肠球菌的流行情况及其耐药性差异,探明该场耐药基因流行情况和潜在危害,采集该养殖场工作人员粪便、猪肛拭子及环境样品共858份,进行2种肠球菌的分离鉴定,药敏试验,并检测相关耐药基因。结... 详细信息

为了解新疆猪场中人、猪和环境源粪肠球菌、屎肠球菌的流行情况及其耐药性差异,探明该场耐药基因流行情况和潜在危害,采集该养殖场工作人员粪便、猪肛拭子及环境样品共858份,进行2种肠球菌的分离鉴定,药敏试验,并检测相关耐药基因。结果显示:共分离得到粪肠球菌429株、屎肠球菌222株。不同来源肠球菌种的分布情况不同,猪肛拭子(73.1%,309/423)和人粪便样品(68.4%,26/38)中粪肠球菌分离率较高;环境样品中屎肠球菌(42.3%,168/397)分离率较高。分离自猪源和环境源粪肠球菌及屎肠球菌耐药情况相近,对四环素、多西环素、氟苯尼考和红霉素的耐药率较人源严重,对环丙沙星和左氧氟沙星较为敏感,未检出万古霉素耐药菌株;其中猪源、环境源粪肠球菌和屎肠球菌对利奈唑胺中介率较高,在30.0%以上;粪肠球菌和环境源屎肠球菌以5耐为主,猪源屎肠球菌以6耐为主。耐药基因结果显示,人、动物、环境来源粪肠球菌及屎肠球菌分离株中tet(M)和tet(L)基因检出率均在70.0%以上,与药敏结果相符;此外介导噁唑烷酮类耐药的cfr、optrA及poxtA基因均有不同程度检出,cfr基因仅在5株粪肠球菌和2株屎肠球菌中检出;optrA基因在猪源和环境源中检出率高于人源,检出率高达60.0%以上,猪源和人源屎肠球菌中poxtA基因携带率超过45.0%。上述相近的耐药情况提示人、动物和环境中存在耐药菌相互污染的现象,应从同一个健康的视角考虑,制定全面的消杀方案,阻断耐药菌株及耐药基因在人、动物和环境间的传播途径,规范使用抗菌药物,减少抗菌药物在人、动物和环境中富集,从而降低耐药菌产生的风险。

关键词：粪肠球菌屎肠球菌人、动物和环境耐药性耐药基因

囊泡诱导序列诱导的囊泡蛋白质谱及生物信息学分析

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动物医学进展 2024年第11期45卷 16-22页

作者：贾万欣邹聪张成州李斌王世民新疆农业大学动物医学学院新疆乌鲁木齐830052 新疆草食动物新药研究与创制重点实验室新疆乌鲁木齐830052

囊泡诱导序列(vesicle inducing sequence,VIS)诱导哺乳动物细胞产生的囊泡,能够装载或展示靶蛋白质,具有产量高、易于改造等特征,有望在草食动物疫苗及水产疫苗等领域得到应用。然而,VIS囊泡的结构组成及形成机制目前还不清楚。基于此... 详细信息

囊泡诱导序列(vesicle inducing sequence,VIS)诱导哺乳动物细胞产生的囊泡,能够装载或展示靶蛋白质,具有产量高、易于改造等特征,有望在草食动物疫苗及水产疫苗等领域得到应用。然而,VIS囊泡的结构组成及形成机制目前还不清楚。基于此,将免疫亲和纯化的VIS囊泡进行蛋白质质谱(LC-MS/MS)鉴定,对鉴定结果进行基因本体(gene ontology,GO)功能注释、KEGG代谢通路分析,同时利用Western blot技术验证排名靠前的部分蛋白质。蛋白质质谱技术共鉴定出709种蛋白质。其中,多数蛋白质为细胞囊泡组分,且部分蛋白质参与高尔基体膜泡运输。KEGG通路富集结果显示,VIS囊泡结构蛋白共参与了3条囊泡形成及运输过程相关的代谢通路,分别为吞噬体通路、内吞作用、突触囊泡途径。该研究从蛋白质水平上揭示了VIS囊泡构成及形成机制,对今后VIS囊泡在动物生物制品及疫苗等领域的应用奠定了基础。

关键词：囊泡诱导序列囊泡免疫亲和质谱鉴定高尔基体

基于GEO数据库的玉液汤防治糖尿病肾病lncRNA-miRNA-mRNA转录网络的整合研究

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中药药理与临床 2024年第4期40卷 68-77,109页

作者：吴思宇陈鹏德张文祥郭凤顾惠贤姚蓝新疆医科大学中医学院乌鲁木齐830057 新疆名医名方与特色方剂学重点实验室乌鲁木齐830057

目的:挖掘玉液汤防治糖尿病肾病(Diabetic Nephropathy,DN)的三元转录网络,预测其防治DN的生物标志物及作用机制。方法:利用TCMSP、Pharmmapper、Uniprot数据库预测玉液汤的关键活性成分及其靶蛋白,采用GEO数据库筛查正常及DN患者的差... 详细信息

目的:挖掘玉液汤防治糖尿病肾病(Diabetic Nephropathy,DN)的三元转录网络,预测其防治DN的生物标志物及作用机制。方法:利用TCMSP、Pharmmapper、Uniprot数据库预测玉液汤的关键活性成分及其靶蛋白,采用GEO数据库筛查正常及DN患者的差异表达的信使核糖核酸(mRNA)和微小RNA(miRNA),将玉液汤预测靶点与DN差异表达的mRNAs(DEmRNAs)取交集得到玉液汤防治DN的靶点,利用String在线平台对其绘制蛋白质相互作用(PPI)网络,并利用Metascape平台对其进行基因本体GO功能富集分析和京都基因与基因组百科全书KEGG通路富集分析;利用Cytoscape 3.6.1软件构建玉液汤防治DN的活性成分-靶点网络。将PPI网络中的玉液汤治疗DN的靶点导入Cytoscape软件进行拓扑分析,利用Cytohubba插件筛选核心靶点,使用miRDB、miRWalk和TargetScan数据库预测核心靶点相关的miRNAs并与DN差异表达的miRNAs(DEmiRNA)取交集,将交集miRNAs导入Starbase数据库预测与之相关的长链非编码核糖核酸(lncRNA),筛选与DN有关的lncRNA;利用Discovery Studio 2019软件进行核心化合物-核心靶点的分子对接验证。链脲佐菌素(STZ)联合高脂高糖饲料诱导DN大鼠模型,给予玉液汤2.6 g/kg干预,观察各组大鼠体质量变化、空腹血糖水平及肾脏组织病理形态,检测尿蛋白、血肌酐和尿素氮含量;采用荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)验证差异基因,利用Cytoscape软件构建玉液汤防治DN的lncRNA-miRNA-mRNA的竞争性内源RNA(ceRNA)网络。结果:预测获得玉液汤防治DN的ceRNA网络由17个关键的lncRNAs、10个关键的miRNAs和13个关键的mRNAs构成。经实验验证,在ceRNA网络中,与模型对照组相比,玉液汤2.6 g/kg组大鼠尿蛋白、血肌酐和尿素氮的含量显著降低(P<0.01),核富集丰富转录本1(Neat1)、X非活性特异性转录本(Xist)、肺腺癌转移性相关转录本1(Malat1)的lncRNA表达和胱天蛋白酶1(Casp1)、组织蛋白酶B(Ctsb)、组织蛋白酶D(Ctsd)的mRNA表达显著下调,miR-361-3p、miR-193a-3p和miR-139-5p的miRNA表达显著上调(P<0.01);GO和KEGG分析发现关键靶点主要通过调控细胞凋亡、NOD样受体信号通路、MAPK信号通路、IL-17信号通路、TGF-β信号通路和PI3K-AKT信号通路等参与肾脏的炎症、纤维化、氧化应激、细胞凋亡和自噬等生物学过程,分子对接结果显示活性成分叶酸、毛蕊异黄酮、槲皮素、淫羊藿苷Ⅰ与核心靶点结合良好。结论:玉液汤可能通过影响糖尿病肾病大鼠lncRNA-miRNA-mRNA转录网络保护肾脏,抑制肾脏炎症,涉及多成分、多靶点、多途径协同作用。

关键词：玉液汤糖尿病肾病三元转录网络网络药理学分子对接

基于HPLC指纹图谱及多指标定量结合熵权TOPSIS法评价不同产地白屈菜药材质量

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中草药 2024年第12期55卷 4194-4203页

作者：张红娟史银基罗玉琴何江王浩杰杨伟俊新疆医科大学药学院新疆乌鲁木齐830004 新疆维吾尔自治区药物研究所新疆维吾尔药重点实验室新疆乌鲁木齐830004 中国科学院新疆理化技术研究所新疆乌鲁木齐830011

目的建立不同产地白屈菜Chelidonium majus的HPLC指纹图谱及多指标含量测定方法,综合评价不同产地白屈菜药材质量,为其进一步研究和开发提供依据。方法采用Agilent Extend C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.1%磷酸水溶液(A)... 详细信息

目的建立不同产地白屈菜Chelidonium majus的HPLC指纹图谱及多指标含量测定方法,综合评价不同产地白屈菜药材质量,为其进一步研究和开发提供依据。方法采用Agilent Extend C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.1%磷酸水溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,检测波长284 nm,柱温25℃,进样量10μL。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》建立4个主产地19批次白屈菜药材的HPLC指纹图谱并分析相似度。使用Origin2022软件进行聚类分析(hierarchical cluster analysis,HCA)、SIMCA-14.1软件进行主成分分析(principal component analysis,PCA)和偏最小二乘法-判别分析(partial least squares-discriminant analysis,PLS-DA)。通过对照品比对指认指标成分并定量测定,结果采用化学模式识别、箱线图以及熵权TOPSIS法进行综合评价。结果19批次白屈菜HPLC指纹图谱共匹配出16个共有峰,指认出白屈菜碱、盐酸黄连碱、紫堇碱、盐酸血根碱和白屈菜红碱。指纹图谱相似度范围为0.745~0.983。HCA将19批白屈菜分为4类;PCA得到5个主成分的累积方差贡献率为84.758%;PLS-DA表明盐酸血根碱和白屈菜红碱等5个成分是不同产地白屈菜药材质量差异的标志性成分。白屈菜碱、盐酸黄连碱、紫堇碱、盐酸血根碱、白屈菜红碱质量分数分别为0.658~1.547、0.718~2.577、0.029~0.108、0.095~0.527、0.069~0.253 mg/g。箱线图与熵权TOPSIS法评价均表明辽宁和陕西产地的白屈菜药材综合质量较优。结论所建立的白屈菜药材HPLC指纹图谱方法分离度好,操作简单;含量测定方法具有较好的稳定性和重复性,可为白屈菜药材质量控制与进一步研究提供参考依据。

关键词：白屈菜指纹图谱白屈菜碱盐酸黄连碱紫堇碱盐酸血根碱白屈菜红碱化学模式识别主成分分析熵权TOPSIS法

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3种流产剂对大鼠妊娠干预作用的比较研究

动物医学进展 2024年第2期45卷 64-69页

作者：王祈帆买占海张晓松纪鹏魏彦明甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 新疆农业大学动物医学院新疆乌鲁木齐830052

为研究米非司酮、溴隐亭和脂多糖3种流产剂对SD大鼠妊娠的影响。通过有无阴栓和阴道分泌物涂片确定SD大鼠是否妊娠,并将妊娠大鼠随机分为空白对照组、米非司酮组、溴隐亭组和脂多糖组。空白对照组于妊娠6~8 d皮下注射生理盐水,其余各组... 详细信息

为研究米非司酮、溴隐亭和脂多糖3种流产剂对SD大鼠妊娠的影响。通过有无阴栓和阴道分泌物涂片确定SD大鼠是否妊娠,并将妊娠大鼠随机分为空白对照组、米非司酮组、溴隐亭组和脂多糖组。空白对照组于妊娠6~8 d皮下注射生理盐水,其余各组皮下注射相应流产剂,建立流产模型。于妊娠12 d观测各组流产率、血液生化指标,ELISA检测炎性细胞因子和孕激素水平,苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)染色检测肝脏及子宫组织的病理学变化。结果显示,空白对照组、米非司酮组、溴隐亭组和脂多糖组的流产率分别为0、100%、50%和33.3%;与空白对照组相比,各流产剂致流产模型组大鼠子宫连胎重、孕激素水平均显著降低(P<0.05),TNF-α、IL-2、IL-12、IL-6、IL-1β水平均显著增加(P<0.05),且均会对肝、肾、子宫组织造成不同程度的代谢和病理性损伤;与空白对照组相比,各组核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)p65的表达更为强烈,雌激素受体(estrogen receptor,ER)表达水平降低。表明溴隐亭用于致流产的效果优于米非司酮和脂多糖,对母体损伤小。

关键词：大鼠流产溴隐亭米非司酮脂多糖

异质结构Ni_(2)P/CoP/FeP_(4)纳米线网络催化剂的原位表面重构实现大电流密度下全水分解

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Chinese Journal of Catalysis 2024年第6期61卷 269-280页

作者：赵婷巩兵兵许贯诚姜佳慧张丽新疆大学化学学院碳基能源化学与利用国家重点实验室新疆乌鲁木齐830017 新疆大学化工学院新疆乌鲁木齐830017

利用可再生能源发电,并通过低温电解水技术生产氢气,被认为是一种环保且可持续的制氢途径,是未来氢能发展的重要方向之一.采用该方法生产的氢气因其环保特性而被称为“绿氢”.然而,目前绿氢高昂的生产成本限制了电解水制氢技术的大规模... 详细信息

利用可再生能源发电,并通过低温电解水技术生产氢气,被认为是一种环保且可持续的制氢途径,是未来氢能发展的重要方向之一.采用该方法生产的氢气因其环保特性而被称为“绿氢”.然而,目前绿氢高昂的生产成本限制了电解水制氢技术的大规模应用.因此,开发先进的非贵金属催化剂和电催化体系以降低电解水制氢成本具有重要意义.界面工程是一种提升非贵金属催化剂电解水性能的有效策略,但目前对其催化活性位点的识别及活性提升机制的研究仍然不足.本文采用简单的水热及低温磷化法制备了具有丰富异质界面的Ni_(2)P/CoP/FeP_(4)/IF催化剂,并研究了其在电解水过程中的催化活性位点及这些位点在提升催化能力方面的协同作用.采用扫描电镜(SEM)证明了Ni_(2)P/CoP/FeP_(4)/IF催化剂呈现纳米线网络结构,这种结构不仅有利于增加催化剂的电化学活性位点和加速反应动力学,而且促进了连续产生的气泡从活性位点逃逸,从而提高了催化剂的机械稳定性.电化学研究结果表明,所制备Ni_(2)P/CoP/FeP_(4)/IF催化剂在1.0 mol L^(‒1)KOH溶液中表现出较好的析氧反应(OER)和析氢反应(HER)活性,分别仅需218和127 mV的过电位,即可达到100 mA cm^(‒2)的电流密度.将Ni_(2)P/CoP/FeP_(4)/IF分别作为阴极和阳极构建双电极电解槽,该装置产生100和500 mA cm^(‒2)的电流密度分别仅需1.68和2.05 V的电压,这一性能优于大多数已报道的自支撑过渡金属磷化物催化剂.多步计时电位测试结果进一步证实了Ni_(2)P/CoP/FeP_(4)/IF作为阳极和阴极材料在水分解过程中具有较好的长期耐久性.X射线光电子能谱和差分电荷分析表明,电子从富电子的FeP_(4)向缺电子的Ni_(2)P和CoP转移,这促使Ni_(2)P和CoP上的电子积累和FeP_(4)上的空穴积累,有利于优化反应中间体的吸附和脱附自由能,提升OER和HER催化性能.结合X射线衍射、扫描电镜、透射电镜、X射线光电子能谱和原位拉曼光谱结果发现,催化剂重构后形成的特定(氧)氢氧化物结构,是OER反应真正的关键活性位点.原位拉曼光谱进一步证实了异质界面促进了OER过程中Ni_(2)P/CoP/FeP_(4)/IF的快速重构.此外,利用密度泛函理论分析了催化剂的HER反应机理.计算结果表明,H2O优先吸附在Fe位点并发生水解,随后产生的H*吸附在Ni位点上并发生解吸,从而促进了催化剂中Fe和Ni活性位点的高效利用.同时,CoP的引入提高了Ni_(2)P/CoP/FeP_(4)/IF催化剂的水吸附和解离能力,进一步提升了其HER活性.综上所述,本文通过简单的水热及低温磷化法制备了具有丰富异质界面的Ni_(2)P/CoP/FeP_(4)/IF过渡金属磷化物纳米线网络催化剂,并将其用于碱性水分解.通过多种表征技术及理论计算结果分析,识别了电解水过程中的关键催化活性位点,即催化剂重构后形成的特定(氧)氢氧化物结构,并揭示了其在OER和HER反应中的催化机制.本研究可为高性能碱性电解水催化剂的理性设计和开发提供参考.

关键词：全水分解多界面磷化物表面重构大电流密度

新疆伊犁地区马疱疹病毒1型分离的及其gM基因分子特征研究

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中国动物传染病学报 2024年

作者：撒瑞雪张嗣玉李银涛邓智超贾晗铎赵敏付玉杨一明冉多良加尔肯刘建华新疆农业大学动物医学学院新疆草食动物新药研究与创制重点实验室

为了解新疆伊犁地区EHV-1毒株流行特征和gM蛋白功能，研究通过PCR方法对伊犁某规模化马场22份流产胎儿组织进行检测。将PCR检测为阳性的9份组织样品研磨后接种至RK-13细胞，3份出现CPE，其中1份样品盲传15代后PCR鉴定仍为阳性。经透射... 详细信息

为了解新疆伊犁地区EHV-1毒株流行特征和gM蛋白功能，研究通过PCR方法对伊犁某规模化马场22份流产胎儿组织进行检测。将PCR检测为阳性的9份组织样品研磨后接种至RK-13细胞，3份出现CPE，其中1份样品盲传15代后PCR鉴定仍为阳性。经透射电镜观察，病毒形态符合EHV-1特征；蛋白免疫印记、间接免疫荧光试验鉴定为EHV-1，将其命名EHV-1/China/YL2023；扩增EHV-1/China/YL2023分离株gM基因序列并进行遗传进化及蛋白分子特征分析。结果显示，下载的EHV-1毒株gM基因同源性达99.2％，蛋白预测显示，gM蛋白含8个跨膜螺旋结构域，二级结构以α-螺旋为主，未见有信号肽，第364 ～ 450位氨基酸具有较好的抗原性。研究成功分离1株EHV-1，并初步分析了gM基因和蛋白生物学特征，为深入研究EHV-1流行毒株特性及gM蛋白功能奠定基础。

关键词：马疱疹病毒1型分离鉴定 gM基因分子特征

鸽屠宰加工环节金黄色葡萄球菌肠毒素、生物膜形成能力及其相关基因的检测

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现代食品科技 2024年

作者：豆涛刘英玉王金泉马兰张柳青胡芸新疆农业大学动物医学学院新疆草食动物新药研究与创制重点实验室

为了解鸽屠宰加工环节中金黄色葡萄球菌的肠毒素、生物被膜形成能力、肠毒素及生物被膜形成相关基因的情况。采用金黄色葡萄球菌肠毒素酶联免疫分析试剂盒和结晶紫染色法检测41株金黄色葡萄球菌的肠毒素含量和生物被膜形成能力，同时通... 详细信息

为了解鸽屠宰加工环节中金黄色葡萄球菌的肠毒素、生物被膜形成能力、肠毒素及生物被膜形成相关基因的情况。采用金黄色葡萄球菌肠毒素酶联免疫分析试剂盒和结晶紫染色法检测41株金黄色葡萄球菌的肠毒素含量和生物被膜形成能力，同时通过PCR方法扩增金黄色葡萄球菌12种肠毒素基因和10种生物被膜形成相关基因。41株金黄色葡萄球菌在肠毒素酶联免疫法检测中，有30株为产肠毒素的菌株。肠毒素基因的检测中，有35株菌含肠毒素基因，检出率为85.36%，且有携带一种或多种肠毒素基因的情况。经典肠毒素基因的检出率分别为：sea(29.27%)、seb(29.27%)、sec(4.88%)、sed(65.85%)和see(2.44%)；新型肠毒素基因的检出率分别为：sel(36.59%)、seg(29.27%)、sem(17.07%)、seu(17.07%)、sei(14.63%)、seh(7.32%)和sek(0.00%)。结晶紫染色法测定菌株生物被膜形成能力弱、中等和强的检出率分别为39.02%、43.90%和17.07%。生物被膜形成相关基因的检测中，clf B、lux S和clf A的检出率最高均为100.00%，其次是sar A和ccp均为97.56%,sig B、cna、ica A、agr C的检出率分别为85.37%、65.85%、41.46%、2.44%,bap未检出。此外，所有菌株均有携带多种生物被膜相关基因的情况，以携带7种基因的菌株最多（15/41,36.59%）。鸽屠宰加工环节污染中金黄色葡萄球菌存在较多的肠毒素且生物被膜形成能力较高，预测该鸽屠宰加工环节中金黄色葡萄球菌具有致病性，存在引起食物中毒的潜在风险。

关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素生物被膜形成能力生物被膜形成相关基因