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132种植物种子大小、生活型、传播方式的关系

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石河子大学学报（自然科学版） 2020年第1期38卷 83-90页

作者：郭亚亚王树林车昭碧曹佳敏孙海荣鲁为华石河子大学动物科技学院新疆石河子832003 省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室/新疆农垦科学院新疆石河子832000

为探究种子大小(seed mass,SM)与植物生活型和传播方式的关系,丰富种子消化道传播的理论,通过查阅文献,收集了26科32属132种不同植物种子大小、生活型和传播方式的资料,22种对这些植物种子进行消化道传播的反刍动物的体重数据。整合分... 详细信息

为探究种子大小(seed mass,SM)与植物生活型和传播方式的关系,丰富种子消化道传播的理论,通过查阅文献,收集了26科32属132种不同植物种子大小、生活型和传播方式的资料,22种对这些植物种子进行消化道传播的反刍动物的体重数据。整合分析的结果表明:1)132种植物的SM变化范围较大,从小到大分为A(SM<0.01 g)、B(0.01≤SM<0.10 g)、C(0.10≤SM<1.00 g)、D(1.00≤SM<10.00 g)、E(10.00≤SM<100.00 g)、F(100.00≤SM<1000.00 g)、G(SM≥1000.00 g)7个数量级,C级物种数最多,共计60种,占45%;G级物种数最少,只有1种,占0.08%;杜英科(Elaeocarpaceae)种子平均重量最大,为3497.65 g,景天科(Crassulaceae)平均重量最小,为0.01 g,二者相差35万倍。2)132种植物分为4种生活型,不同生活型的植物种子大小不同,乔木种子平均重量最大,为497.63 g,草本种子平均重量最小,为1.28 g,二者相差388倍;SM由大到小的顺序为:乔木、灌木、藤木、草本,除乔木外,其他3种生活型的植物种子平均大小差异不显著。3)132种植物种子共分为7种传播类型,不同传播方式的种子平均大小各不相同,依靠消化道传播的种子平均重量最大,为150.69 g,依靠风力传播的种子平均重量最小,为0.09 g,二者相差1600多倍;除依靠消化道传播的种子外,其余6种传播类型的种子平均重量差异不显著。4)通过对反刍动物的体重与其消化道所传播的种子大小之间的相关分析发现,二者之间存在负相关性,但相关性不显著。

关键词：种子大小生活型传播方式反刍动物消化道传播

牛源大肠杆菌质粒介导喹诺酮类耐药基因的检测分析

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中国畜牧兽医 2019年第8期46卷 2462-2469页

作者：杨艳丽张星星黄新吴桐忠何延华韩猛立钟发刚新疆农垦科学院省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室石河子832000 新疆农业大学动物医学学院乌鲁木齐830000

为研究近年来新疆地区牛源大肠杆菌中质粒介导喹诺酮类药物耐药基因的分布及其对喹诺酮类抗生素的耐药情况,本研究于2016-2018年从新疆石河子、沙湾、奎屯、玛纳斯和伊犁5个地区12个规模化奶牛场分离出116株牛源大肠杆菌,药敏试验检测... 详细信息

为研究近年来新疆地区牛源大肠杆菌中质粒介导喹诺酮类药物耐药基因的分布及其对喹诺酮类抗生素的耐药情况,本研究于2016-2018年从新疆石河子、沙湾、奎屯、玛纳斯和伊犁5个地区12个规模化奶牛场分离出116株牛源大肠杆菌,药敏试验检测其耐药性,同时利用PCR扩增PMQR耐药基因。药敏试验结果显示,62.93%的菌株对氨苄西林耐药,耐药率最高。对链霉素、四环素、卡那霉素和恩诺沙星的耐药率依次为56.90%、54.31%、43.10%和42.24%。对头孢他啶和头孢噻肟的耐药率较低,分别为7.76%和11.21%。分离菌主要携带qnrA、qnrS和aac(6′)-Ⅰb-cr 3种耐药基因;116株大肠杆菌中有31株携带PMQR的耐药基因,检出阳性率为26.72%,其中26株仅携带1种PMQR耐药基因,占所有菌株的22.41%,4株携带2种PMQR耐药基因,占所有菌株的3.45%,1株携带3种PMQR耐药基因,占所有菌株的0.86%。综上所述,新疆地区牛源大肠杆菌质粒介导喹诺酮类药物基因主要为qnrA、qnrS和aac(6′)-Ⅰb-cr 3种,且对恩诺沙星、诺氟沙星、环丙沙星、左氧氟沙星均产生不同程度的耐药性。

关键词：新疆牛源大肠杆菌喹诺酮类药物耐药基因药敏试验

利用CRISPR/Cas9n系统编辑绵羊成纤维细胞生长因子5(FGF5)基因

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畜牧与兽医 2022年第1期54卷 8-15页

作者：蒙亚琦姚旭东任秀美奥郭延华唐红张译元王立民周平石河子大学动物科技学院新疆石河子832000 省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室/新疆农垦科学院新疆石河子832000

成纤维细胞生长因子5(FGF5)是影响毛囊周期性活动及毛发生长的重要生长因子。本研究利用CRISPR/Cas9n系统靶向编辑绵羊成纤维细胞中FGF5基因。首先利用Gibson Assembly法将U6启动子引导表达单导向RNA(sgRNA)的原件构建至pX461质粒中,获... 详细信息

成纤维细胞生长因子5(FGF5)是影响毛囊周期性活动及毛发生长的重要生长因子。本研究利用CRISPR/Cas9n系统靶向编辑绵羊成纤维细胞中FGF5基因。首先利用Gibson Assembly法将U6启动子引导表达单导向RNA(sgRNA)的原件构建至pX461质粒中,获得pX461-U6质粒;再将设计并合成好的1对靶向FGF5基因第3外显子的sgRNA及其互补链,经退火连接形成sgRNA-sg1和sgRNA-sg2双链后,分别克隆至带有BbsⅠ和BsaⅠ黏性末端的pX461-U6质粒。构建好的重组质粒pX461-U6-sg1+sg2经测序鉴定后,以电转染的方式转入绵羊成纤维细胞,72 h后收集细胞进行检测分析。经T7E1酶切检测分析表明,成功获得1对具有靶向效果的sgRNA,PCR扩增的FGF5基因片段经TA克隆后进行测序鉴定,结果sgRNA-sg1+sg2在靶位点的打靶效率为100%;缺失的核苷酸数从10到64个不等;基于预测的3D模型和RT-PCR结果显示,FGF5基因的突变将会影响FGF5蛋白与其受体的结合,导致FGF5蛋白失去其生物学功能。本研究构建了可以在同一载体中同时表达2条sgRNA和Cas9n以及绿色荧光蛋白(GFP)的质粒,瞬时转染至绵羊成纤维细胞后,成功获得了高效靶向绵羊FGF5基因的sgRNA位点,为精确和高效的靶向基因工程提供了科学依据。

关键词：绵羊成纤维细胞生长因子5 CRISPR/Cas9n 基因敲除

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绵羊精子RNA提取方案的优化

黑龙江畜牧兽医 2022年第18期 62-67,141页

作者：任秀美奥姚旭东蒙亚琦郭延华唐红张译元王立民周平石河子大学动物科技学院新疆石河子832000 新疆农垦科学院省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室新疆石河子832000

为了减少绵羊精液中其他体细胞污染和裂解不充分等因素而导致精子RNA回收率低、质量差的问题,试验以新鲜的美利奴羊精液为研究对象,采用Percoll+hSOF和Percoll+PBS密度梯度离心法和PBS直接洗涤法纯化绵羊精液,然后再采用TRIzol(65℃)法... 详细信息

为了减少绵羊精液中其他体细胞污染和裂解不充分等因素而导致精子RNA回收率低、质量差的问题,试验以新鲜的美利奴羊精液为研究对象,采用Percoll+hSOF和Percoll+PBS密度梯度离心法和PBS直接洗涤法纯化绵羊精液,然后再采用TRIzol(65℃)法和TRIzol(65℃)+试剂盒法提取绵羊精子RNA,检测RNA的浓度、纯度和完整性,将RNA反转录为cDNA,PCR扩增PRM1基因(编码鱼精蛋白1)和CDH1基因(编码上皮细胞钙黏蛋白),验证所提取的RNA是否受体细胞RNA和基因组污染。结果表明:用Percoll密度梯度法纯化绵羊精液较PBS直接洗涤法能更好地去除精液中的体细胞,但精子回收率低。Percoll+PBS密度梯度离心法纯化后精子提取的RNA较PBS直接洗涤法纯度较高,但浓度较低;TRIzol(65℃)法提取的精子RNA较TRIzol(65℃)+试剂盒法浓度较高,但纯度较低。两种精液纯化方法(Percoll+PBS密度梯度离心法和PBS直接洗涤法)结合两种精子RNA提取方法[TRIzol(65℃)法和TRIzol(65℃)+试剂盒法]获得的精子RNA均能检测到PRM1基因,未检测出CDH1基因。说明Percoll密度梯度离心法纯化精子结合TRIzol(65℃)+试剂盒法提取精子RNA效果较好,无体细胞污染,且纯度较高。

关键词：绵羊精液 RNA提取 Percoll溶液 PBS溶液鱼精蛋白1 上皮细胞钙黏蛋白 TRIzol

BVDV新疆分离株非结构蛋白NS3生物信息学分析

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黑龙江畜牧兽医 2020年第14期 73-76,152,153页

作者：张倩何延华韩猛立黄新张星星吴桐忠钟发刚王震新疆农垦科学院省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室新疆石河子832000 石河子大学动物科技学院新疆石河子832000

为了了解牛病毒性腹泻病毒(BVDV)非结构蛋白NS3的基本结构与生物学功能,试验利用Protparam,ProtScale,TMHMM,SignalP,Virus-mPLoc,SOPMA,Phyre 2,NetOGlyc 4.0 Server,NetPhos 3.1 Server,NetAcet 1.0 Server,Predicting Anti-genic Peptides,ABCpred,NetMHCIIpan 3.1 Server等软件,对BVDV新疆分离株非结构蛋白NS3进行生物信息学分析,包括NS3蛋白的理化性质、亲水性、跨膜区、信号肽和亚细胞定位,预测二级结构和三级结构、抗原决定簇、潜在的B细胞抗原表位和T细胞抗原表位,评估糖基化、磷酸化和乙酰化修饰位点。结果表明:BVDV新疆分离株(GenBank登录号为JN704144.1)的非结构蛋白NS3共有683个氨基酸,包含20种氨基酸,分子式为C3338H5328 N914 O1009 S27,相对分子质量为75274.16,理论等电点为8.15。266个氨基酸参与无规律卷曲的形成,213个氨基酸参与α-螺旋的形成,147个氨基酸参与延伸链的形成,57个氨基酸参与β-转角的形成;构建的三级结构模型可信度为100%,蛋白覆盖率为91%;该蛋白质含有20个潜在的糖基化修饰位点,74个磷酸化修饰位点。该蛋白含有26个潜在抗原决定簇,其中B细胞抗原表位7个。对非结构蛋白NS3的CD4+抗原表位进行预测,得到78个肽段,其中有15个强结合肽段和63个弱结合肽段。说明该蛋白具有较好的免疫原性,为亲水性蛋白,无跨膜区和信号肽,定位于宿主的细胞质中。

关键词：牛病毒性腹泻病毒非结构蛋白NS3 抗原表位跨膜区信号肽修饰化位点

萨福克羊呼吸道感染多杀性巴氏杆菌生物学特性研究

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中国预防兽医学报 2021年第6期43卷 591-596页

作者：马雪张丽媛陶乔孝慈操义恒李劼周霞韩猛立黄新吴桐忠张星星钟发刚石河子大学动物科技学院新疆石河子832003 新疆农垦科学院省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室新疆石河子832000

为确定引起新疆石河子及周边地区因呼吸道感染致死的多胎萨福克羊细菌性病原及其生物学特性,本研究收集2018年2月~2020年1月期间7个规模化养殖场13份因呼吸道感染致死的多胎萨福克羊的肺、肝、脾、淋巴组织样品,采用常规细菌分离方法结... 详细信息

为确定引起新疆石河子及周边地区因呼吸道感染致死的多胎萨福克羊细菌性病原及其生物学特性,本研究收集2018年2月~2020年1月期间7个规模化养殖场13份因呼吸道感染致死的多胎萨福克羊的肺、肝、脾、淋巴组织样品,采用常规细菌分离方法结合kmt基因检测方法分离鉴定出6株(46.15%)多杀性巴氏杆菌(Pm);利用多重PCR检测分离株荚膜血清分型、脂多糖分型,结果显示荚膜血清D型2株(33.3%)、A型1株(16.7%)、未定型3株(50%);脂多糖L3型3株(50%)、L6型2株(33.3%)、未定型1株(16.7%);利用PCR方法检测分离株25种毒力基因、11种耐药基因,结果显示6株Pm毒力基因exbB、exbD、tonB、ompA、oma87、psl、sodC、plpB、fimA、fur、sodA检出率最高为100%,未检测到hsf1、hsf2、tbpA、plpE、ptfA、tadD、toxA基因,其中携带毒力相关基因pmHAS、hgbB、pfhA、ompH、nanB、nanH、hgbA的菌株数分别为5株(83.3%)、4株(66.7%)、4株(66.7%)、4株(66.7%)、4株(66.7%)、3株(50%)、2株(33.3%)。利用K-B纸片法检测分离菌株的耐药表型,结果显示所有菌株均对复方新诺明(磺胺类)耐药,对头孢菌素类药物中介;大部分菌株对青霉素、阿莫西林等19种抗生素敏感。6株Pm均携带喹诺酮类耐药相关基因blaTEM,未检测到其他耐药相关基因。分离菌株对磺胺类药物耐药性较强,但不携带磺胺类耐药基因,表明分离株的耐药性是由多种耐药机制共同作用的结果。本研究结果为Pm致萨福克羊呼吸道感染的流行病学和临床治疗提供参考依据。

关键词：多杀性巴氏杆菌荚膜脂多糖毒力基因耐药基因

多胎萨福克羊与哈萨克羊级进杂交后代生长性能、屠宰性能、肉品质及血液生理生化指标分析

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中国畜牧兽医 2024年第1期51卷 125-134页

作者：余乾杨永林杨华王苗苗张宾张文喆新疆农垦科学院省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室石河子832000 新疆生产建设兵团科技发展促进中心乌鲁木齐830000

【目的】了解天然放牧条件下多胎萨福克羊与哈萨克羊级进杂交羔羊的生长性能、屠宰性能和肉品质等,评估多胎萨福克羊对哈萨克羊的级进杂交改良效果。【方法】试验以3月龄体况、体型基本一致的多胎萨福克羊及其与哈萨克羊级进杂交F1、F2... 详细信息

【目的】了解天然放牧条件下多胎萨福克羊与哈萨克羊级进杂交羔羊的生长性能、屠宰性能和肉品质等,评估多胎萨福克羊对哈萨克羊的级进杂交改良效果。【方法】试验以3月龄体况、体型基本一致的多胎萨福克羊及其与哈萨克羊级进杂交F1、F2代和哈萨克公羊为研究对象,天然放牧条件下饲养,试验预试期10 d,正试期90 d。试验结束后选择接近组内平均体重羔羊各10只,屠宰前测定各试验羊体尺指标,屠宰后分别测定屠宰性能、肉品质、营养成分及血液生理生化指标。【结果】(1)多胎萨福克羊、级进杂交F1和F2代羔羊的体高、胸深、宰前活重、胴体重、屠宰率、肉骨比、眼肌面积均显著高于哈萨克羊(P<0.05);级进杂交F1代羔羊和哈萨克羊的背脂厚度、尾脂重显著高于多胎萨福克羊和级进杂交F2代羔羊(P<0.05)。(2)级进杂交F1代羔羊背最长肌水分含量显著高于多胎萨福克羊、级进杂交F2代羔羊和哈萨克羊(P<0.05);哈萨克羊背最长肌中铁、锌、镁和粗脂肪含量均显著高于多胎萨福克羊、级进杂交F1和F2代(P<0.05)。(3)多胎萨福克羊、级进杂交F1和F2代羔羊血液中白细胞数、嗜碱性粒细胞数、中性粒细胞数、嗜酸性粒细胞数、淋巴细胞数等显著高于哈萨克羊,嗜碱性粒细胞百分比、嗜酸性粒细胞百分比、血小板总数、平均血小板体积等均显著低于哈萨克羊(P<0.05)。(4)多胎萨福克羊、级进杂交F1和F2代羔羊血清中碱性磷酸酶活性显著高于哈萨克羊,总蛋白含量显著低于哈萨克羊(P<0.05);级进杂交F1代羔羊血清中谷丙转氨酶活性、铁含量均显著低于哈萨克羊(P<0.05);多胎萨福克羊血清白蛋白含量显著高于级进杂交F1、F2代和哈萨克羊(P<0.05)。【结论】天然放牧条件下,多胎萨福克羊及其级进杂交后代的产肉性能高于哈萨克羊,随着杂交代数的增加,屠宰性能明显提升、肉品质得到改善。

关键词：多胎萨福克羊哈萨克羊级进杂交屠宰性能肉品质生理生化指标

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Beltex羊肺源多杀性巴氏杆菌和溶血曼氏杆菌的分离鉴定及耐药性分析

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中国兽医学报 2022年第9期42卷 1823-1829,1850页

作者：王子杰操义恒马雪张丽媛王燕周霞黄新吴桐忠张星星钟发刚石河子大学动物科技学院新疆石河子832003 新疆农垦科学院省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室新疆石河子832000

为了确定新疆石河子地区某羊场引起呼吸道感染的4月龄病羊的细菌性病原、血清型、毒力基因以及耐药性特点,本研究采用细菌常规分离鉴定及PCR鉴定方法从病变肺脏组织中分离鉴定细菌,并对分离株进行血清型分型、毒力基因检测、药物敏感性... 详细信息

为了确定新疆石河子地区某羊场引起呼吸道感染的4月龄病羊的细菌性病原、血清型、毒力基因以及耐药性特点,本研究采用细菌常规分离鉴定及PCR鉴定方法从病变肺脏组织中分离鉴定细菌,并对分离株进行血清型分型、毒力基因检测、药物敏感性及耐药基因检测。结果显示,从肺脏组织中分离到了2株菌,确定为多杀性巴氏杆菌(Pm)和溶血性曼氏杆菌(Mh),且荚膜血清型分别为D型和A6型。对分离菌株进行了7类25种毒力基因检测,Pm检测到了exbB、exbD、tonB、hgbA、fur、oma87、psl、sodA、sodC、tbpA、fimA、toxA共5类12种毒力基因,Mh检测到了1种毒力基因sodA。2株菌均对青霉素耐药,对大部分药物敏感。对8类21种耐药基因检测表明,2株菌未检测到相关耐药基因。结果为本地区绵羊呼吸道疾病的流行病学调查与临床治疗提供理论依据。

关键词： Beltex羊多杀性巴氏杆菌溶血性曼氏杆菌毒力基因

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细粒棘球绦虫锌指蛋白基因的克隆、序列分析及在不同发育阶段的表达分析

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西北农业学报 2018年第12期27卷 1707-1715页

作者：徐梦飞卢平萍马勋张艳艳王炜烨孟季蒙王正荣薄新文石河子大学动物科技学院新疆石河子832000 新疆农垦科学院畜牧兽医研究所省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室新疆石河子832000

旨在分析并预测细粒棘球绦虫锌指蛋白(Echinococcus granulosus zinc finger peotein,Eg-ZFP)结构、功能及其在细粒棘球绦虫发育过程中的表达模式,预测其在细粒棘球绦虫防治中潜在的作用。通过对前期细粒棘球绦虫原头蚴(protoscolex,PSC... 详细信息

旨在分析并预测细粒棘球绦虫锌指蛋白(Echinococcus granulosus zinc finger peotein,Eg-ZFP)结构、功能及其在细粒棘球绦虫发育过程中的表达模式,预测其在细粒棘球绦虫防治中潜在的作用。通过对前期细粒棘球绦虫原头蚴(protoscolex,PSC)转录组高通量测序结果中Unigene进行筛选,克隆Eg-ZFP基因并进行序列分析,实时荧光定量PCR(Realtime fluorescence quantitative PCR,qPCR)分析Eg-ZFP在原头蚴及成虫中的表达特征,利用全量组织原位杂交(Whole mount in situ hybridization,WISH)检测该蛋白mRNA在原头蚴和成虫组织中的分布情况。结果显示,细粒棘球绦虫Eg-ZFP基因的CDS序列长852bp,具有完整的开放阅读框(852bp),编码283个氨基酸,预测表明Eg-ZFP分子质量大小及等电点为31.6ku和8.89;qPCR检测发现,Eg-ZFP在原头蚴及成虫阶段均有表达,且在成虫阶段表达量高;全量组织原位杂交检测结果表明,Eg-ZFP mRNA在原头蚴及成虫中分布广泛,且在成虫的生殖系统中丰度较高,提示Eg-ZFP与虫体生殖发育有关。结果表明Eg-ZFP在细粒棘球绦虫发育过程中具有重要作用,为进一步研究Eg-ZFP在***防治中的作用奠定基础。

关键词：细粒棘球绦虫锌指蛋白基因克隆生物信息学分析实时定量PCR 全量组织原位杂交