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猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪δ冠状病毒三重RT-qPCR检测方法的建立

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中国兽医学报 2025年

作者：陈千林李绍梅张邑帆牟豪刘明妮杨柳郭庆勇付利芝国家生猪技术创新中心疫病防控研究院新疆农业大学动物医学学院重庆市畜牧科学院兽医兽药研究所

猪肠道冠状病毒（swine enteric coronaviruses， SeCoV），如猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus， PEDV）、传染性胃肠炎病毒（transmissible gastroenteritis virus， TGEV）和猪德尔塔冠状病毒（porcine delta coronavirus， PDCoV），会引发仔猪严重腹泻，给养猪业造成了巨大的损失。本研究中，我们建立了一种三重实时荧光定量反转录PCR（reverse transcription-quantitative PCR， RT-qPCR）方法，用于同时检测PEDV、TGEV和PDCoV。首先根据PEDV M基因、TGEV ORF 1b基因和PDCoV ORF 1b基因的保守序列分别设计每种病毒的特异性检测引物和探针。优化反应条件后，成功建立了一种能同时检测PEDV、TGEV和PDCoV的三重RT-qPCR方法。该方法对这三种病毒具有良好的特异性，与猪场常见的CSFV、PCV2、PoRVA、PRV和PRRSV等均无交叉反应。对重组质粒pTOPO-PEDV 128、pTOPO-TGEV 116和pTOPO-PDCoV 125线性模板的检测极限分别为16.835、17.61和17.02拷贝/μL。组内、组间变异系数均小于5%，组间差异不显著（P>0.05）。此外，还比较了三重RT-qPCR与标准方法的符合性，结果显示符合率为100%，检测35份组织样本，17份呈PEDV阳性，阳性率为48.57%（17/35），TGEV和PDCoV检测结果均为阴性，未检测到混合感染。综上结果，建立的三重RT-qPCR方法特异、灵敏、稳定、快捷，可同时用于PEDV、TGEV和PDCoV的临床检测和鉴别诊断，为猪腹泻冠状病毒的检测和流行病学调查提供了一种检测方法。

关键词：猪流行性腹泻病毒传染性胃肠炎病毒猪δ冠状病毒 RT-qPCR 检测方法

海南省文昌鸡主要养殖地区鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体的血清学调查与分析

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动物医学进展 2025年第1期46卷 62-67页

作者：薛琛璐张艳刘海隆晁哲魏立民刘光亮新疆农业大学动物医学学院新疆乌鲁木齐830052 海南省农业科学院三亚研究院(海南省实验动物研究中心) 海南三亚572025 海南省农业科学院畜牧兽医研究所/海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室海南海口571100

为探明海南省文昌鸡主要养殖地区鸡毒支原体(MG)和鸡滑液囊支原体(MS)的感染情况,采集来自海口、文昌、琼海、儋州4个文昌鸡主要养殖地区的13个不同规模鸡场未经MG、MS疫苗免疫的文昌鸡血样1726份,采用酶联免疫吸附试验进行MG、MS血清... 详细信息

为探明海南省文昌鸡主要养殖地区鸡毒支原体(MG)和鸡滑液囊支原体(MS)的感染情况,采集来自海口、文昌、琼海、儋州4个文昌鸡主要养殖地区的13个不同规模鸡场未经MG、MS疫苗免疫的文昌鸡血样1726份,采用酶联免疫吸附试验进行MG、MS血清抗体检测。结果显示,MG和MS的抗体总阳性率分别为42.00%和31.75%;4个地区以琼海市的MG抗体阳性率最高,达到68.00%;儋州市的MS抗体阳性率最高,达到36.67%;冬季MG的感染率较高,抗体阳性率达47.48%,夏、秋两季MS的感染率较高,抗体阳性率分别为37.85%和35.87%;成年文昌鸡MG和MS的抗体阳性率高于雏鸡和育成鸡(P<0.05),分别为74.45%和59%;小规模场的MG、MS抗体阳性率最高,分别为54.10%和46.45%;不同养殖类型的文昌鸡以商品代蛋鸡MG的抗体阳性率最高,达到83.33%,商品代肉鸡MS的抗体阳性率最高,达到37.04%。结果表明,海南省文昌鸡主要养殖地区普遍存在MG、MS感染。提示各养殖地区应针对性地加强对文昌鸡MG和MS的防控,以减少疫病发生。

关键词：鸡毒支原体鸡滑液囊支原体血清学文昌鸡海南省

维、哈、汉三种不同民族性别的人发中微量元素含量测定

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光谱学与光谱分析 2000年第3期20卷 368-370页

作者：郑春霞王文全胡志林新疆农业大学环境系乌鲁木齐830052 新疆农业大学分院乌鲁木齐830052

本文采用火焰原子吸收法分别对 40 0例汉、维、哈三种不同民族 ,不同性别的人发中 ,微量元素 K、Na、Ca、Mg、Zn、Fe、Cu和 Sr九种元素的含量进行测定 ,为开展对不同民族学生的身体健康研究。

关键词：微量元素人发原子吸收光谱法

不同组合及剂量植物甾醇对体外瘤胃微生物发酵的影响

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南京农业大学学报 2025年第1期48卷 190-196页

作者：朱玉喜曹雨涵吕东海高健郭孟娇孙展英孙晓妮成艳芬刘锁珠刘艳丰南京农业大学动物消化道营养国家级国际联合研究中心/消化道微生物研究室江苏南京210095 南京诺齐生物科技有限公司江苏南京210008 西藏农牧学院动物科技学院西藏林芝860000 新疆畜牧科学院饲料研究所新疆乌鲁木齐830013

[目的]本研究旨在评价植物甾醇的组成和剂量在体外对瘤胃微生物发酵的影响。[方法]采用双因素试验设计设置菜油甾醇、菜籽甾醇、谷甾醇和β-谷甾醇4种植物甾醇组合和添加剂量(0、0.03、0.10和0.20 μg·mL^(-1)),将植物甾醇添加到含60 m... 详细信息

[目的]本研究旨在评价植物甾醇的组成和剂量在体外对瘤胃微生物发酵的影响。[方法]采用双因素试验设计设置菜油甾醇、菜籽甾醇、谷甾醇和β-谷甾醇4种植物甾醇组合和添加剂量(0、0.03、0.10和0.20 μg·mL^(-1)),将植物甾醇添加到含60 mL瘤胃培养基和0.60 g全混合日粮的血清瓶中,置于恒温培养箱中39 ℃培养24 h。培养过程中动态测定血清瓶中的总气体和甲烷产量,在发酵结束时分别收集剩余培养基和发酵底物,分析底物消失率和微生物代谢参数,包括乳酸、氨态氮、挥发性脂肪酸和微生物蛋白的浓度。[结果]0.20 μg·mL^(-1) β-谷甾醇条件下的产气量高于其他处理(P<0.05),并且增加植物甾醇剂量可提高瘤胃微生物代谢所产生的总挥发性脂肪酸的浓度(P<0.01),尤其提高了乙酸的百分比,其中以β-谷甾醇的效果最好。针对各处理中不同植物甾醇组合及比例进行线性回归,分析结果显示,植物甾醇组合中的菜油甾醇和β-谷甾醇对微生物生长代谢有促进作用,而菜籽甾醇和豆甾醇对微生物活动有抑制作用。[结论]添加菜油甾醇和β-谷甾醇可促进体外瘤胃微生物的生长与代谢,且以0.20 μg·mL^(-1) β-谷甾醇效果最好。

关键词：瘤胃微生物体外发酵植物甾醇菜油甾醇 β-谷甾醇挥发性脂肪酸

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冰草品种旱作栽培比较试验

中国草地 1998年第5期20卷 31-34页

作者：马瑞昌宋书娟玛尔米拉新疆农业大学畜牧分院

三年的品种比较试验表明，冰草属牧草在乌鲁木齐地区（年降水量２３０ｍｍ左右）不灌水、不施肥的旱作栽培条件下，生长正常，表现良好，其中以萨米特冰草表现最好，无论从产草量、产种量还是营养成分等方面均表现最佳。参试的牧草中产... 详细信息

三年的品种比较试验表明，冰草属牧草在乌鲁木齐地区（年降水量２３０ｍｍ左右）不灌水、不施肥的旱作栽培条件下，生长正常，表现良好，其中以萨米特冰草表现最好，无论从产草量、产种量还是营养成分等方面均表现最佳。参试的牧草中产量最高的还有航道冰草及两种沙芦草。

关键词：冰草品种比较试验旱作栽培

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关于新疆发展可持续农业的思考

中国农村经济 1999年第9期 62-66页

作者：布娲鹣.阿布拉新疆农业大学经贸分院

可持续农业是当前世界农业发展中的一个新趋向，也是中国农业与农村发展的一种新战略。新疆是以农业为主的地区，农业发展与新疆经济发展密切相关。经过几十年的发展，新疆农业既取得了很大的成就，也存在不少问题。最主要的是水土流失... 详细信息

可持续农业是当前世界农业发展中的一个新趋向，也是中国农业与农村发展的一种新战略。新疆是以农业为主的地区，农业发展与新疆经济发展密切相关。经过几十年的发展，新疆农业既取得了很大的成就，也存在不少问题。最主要的是水土流失严重，农业资源日益减少，生态环境遭...

关键词：新疆农业可持续发展对策

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东西部发展差距的区域特征及对策选择

农业经济问题 1996年第6期17卷 36-38页

作者：尼合迈提.霍嘉新疆农业大学经贸分院

一个国家经济的发展和增长客观上是不平衡的，我们的国家也不例外。“三级梯度”格局的形成不仅是国内各地区的地理、交通、区位、人文、基础诸条件和历史机遇不均等等一般原因所造成的必然后果，而且还有其深层原因，譬如一是体制性原... 详细信息

一个国家经济的发展和增长客观上是不平衡的，我们的国家也不例外。“三级梯度”格局的形成不仅是国内各地区的地理、交通、区位、人文、基础诸条件和历史机遇不均等等一般原因所造成的必然后果，而且还有其深层原因，譬如一是体制性原因，长期以来实行的高度的计划经济条...

关键词：东部地区西部地区经济发展差距区域特征

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新疆幼畜和人非典型轮状病毒的调查和鉴定

病毒学报 1995年第4期11卷 336-341页

作者：王正党单文鲁黄嘉驷张福萍刘明军新疆农业大学畜牧学院

自１９８４至１９９４年１０年间，在新疆采集了绵羊、山羊羔、仔猪、犊牛、骆驼羔和鸡的粪样１９５９份，以及住院腹泻婴幼儿、无症状新生儿和成人腹泻的粪样２５５份，共２２１４份。用ＰＡＧＥ法检测了这些粪样中的轮状病毒和非典型... 详细信息

自１９８４至１９９４年１０年间，在新疆采集了绵羊、山羊羔、仔猪、犊牛、骆驼羔和鸡的粪样１９５９份，以及住院腹泻婴幼儿、无症状新生儿和成人腹泻的粪样２５５份，共２２１４份。用ＰＡＧＥ法检测了这些粪样中的轮状病毒和非典型轮状病毒。按Ｓａｉｆ电泳型分组法，检出的各组轮状病毒是：Ａ组２７６份，在成人腹泻和驼羔中未检出；Ｂ组２６份，都是从羊羔和仔猪中检出；Ｃ组２２份，都是从仔猪中检出；Ｄ组２份，在鸡中检出；似Ｅ组１份，从仔猪中检出。取检出的各组非典型轮状病毒９株，即羊羔Ｂ组２株（ＫＢ－６３和ＬＢ－６０），仔猪Ｂ组４株（ＭＰＢ－１、２，ＳＰＢ－３、４），仔猪Ｃ组２株（ＳＰＣ－１１、ＺＰＣ－１２），仔猪似Ｅ组１株（ＭＰＢ－５），口服接种剥夺初乳的本种动物，接种后１２－１６小时动物都发生急性水样腹泻，并检出大量病毒。对这９株病毒和１株成人腹泻轮状病毒（ＡＤＲＶ），用ＥＬＩＳＡ和对流免疫电泳检测Ａ、Ｂ组组抗原，结果ＡＤＲＶ、羊羔Ｂ组、仔猪Ｂ组和似Ｅ组共８株病毒都只有Ｂ组组抗原。用Ａ、Ｂ组轮状病毒生物素核酸探针斑点杂交分别检测８株和１０株病毒，血清学检测为Ｂ组者都只与Ｂ组有杂交信号。Ｃ组的两株则既无Ａ、Ｂ组组抗原，也不与Ａ、Ｂ?

关键词：非典型轮状病毒轮状病毒调查

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论林产品市场的培育

林业经济 1997年第3期 44-46页

作者：兰海涛马兰菊新疆农业大学林学分院新疆农业大学林学分院乌鲁木齐 830052

成熟的林产品市场是林业企业确立市场经济体制的关键性标志之一。分析了林产品市场的结构及特性。针对林产品市场培育中存在的问题,提出了相应的解决对策。

关键词：林产品市场市场培育林业发展中国