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基于VEGF-B/AMPKα通路研究香青兰总黄酮对阿霉素诱导内皮细胞损伤的保护作用

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中国药理学通报 2022年第5期38卷 726-732页

作者：李少将苏文灵徐磊李治建刘砥威郑瑞芳邢建国新疆医科大学中医学院新疆乌鲁木齐830011 新疆维吾尔自治区药物研究所新疆乌鲁木齐830002 新疆维吾尔药实验室新疆乌鲁木齐830002 新疆维吾尔自治区维吾尔医药研究所新疆乌鲁木齐830049

目的探究香青兰总黄酮(total flavonoids of Dracocephalum moldavica L.,TFDM)对阿霉素诱导的内皮细胞损伤的保护作用及机制。方法CCK-8法检测细胞活力;显微镜法观察细胞形态;试剂盒法检测LDH、SOD和线粒体膜电位变化;Transwell法检测... 详细信息

目的探究香青兰总黄酮(total flavonoids of Dracocephalum moldavica L.,TFDM)对阿霉素诱导的内皮细胞损伤的保护作用及机制。方法CCK-8法检测细胞活力;显微镜法观察细胞形态;试剂盒法检测LDH、SOD和线粒体膜电位变化;Transwell法检测细胞迁移情况;Western blot法检测内皮功能障碍和VEGF-B/AMPKα通路相关蛋白表达情况。结果与模型组相比,TFDM可明显提高细胞活力,改善阿霉素诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)细胞形态学变化,降低LDH漏出量,升高SOD活力,升高线粒体膜电位,促进内皮细胞迁移,抑制内皮细胞损伤。Western blot结果显示,与模型组比较,TFDM升高非受体酪氨酸激酶(Src)和黏着斑激酶(FAK)表达水平,升高舒血管因子eNOS磷酸化水平,降低内皮素-1(ET-1)蛋白表达水平,从而抑制内皮功能障碍。TFDM明显上调VEGF-B、NRP1、VEGFR1蛋白表达水平明显升高、明显升高p-AMPKα/AMPKα比例。结论TFDM抑制阿霉素诱导的内皮细胞损伤的机制可能与激活VEGF-B/AMPKα通路有关。

关键词：香青兰总黄酮阿霉素心脏毒性内皮功能障碍血管内皮生长因子B 人脐静脉内皮细胞

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新工艺双氢青蒿素片溶出度测定方法研究

中国中药杂志 2019年第6期44卷 1273-1277页

作者：张东仝燕袁涛王锦玉杨岚中国中医科学院中药研究所北京100700 中国科学院新疆理化技术研究所新疆乌鲁木齐830011

改进处方制备新工艺双氢青蒿素片,并建立双氢青蒿素片溶出度测定新方法,为修订标准提供参考。采用2015年版《中国药典》四部通则0931第二法测定新工艺及原工艺双氢青蒿素片的溶出度,溶出介质为0.1 mol·L^(-1)盐酸溶液250mL,转速为100 r... 详细信息

改进处方制备新工艺双氢青蒿素片,并建立双氢青蒿素片溶出度测定新方法,为修订标准提供参考。采用2015年版《中国药典》四部通则0931第二法测定新工艺及原工艺双氢青蒿素片的溶出度,溶出介质为0.1 mol·L^(-1)盐酸溶液250mL,转速为100 r·min^(-1),30 min取样。采用高效液相色谱法测定:Agilent Eclipse XDB-C_(18)色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相乙腈-水(40∶60);流速1.0 mL·min^(-1);柱温30℃;检测波长216 nm;进样体积100μL。双氢青蒿素检测线性范围为1.234 5～79.003 ng(r=1.000 0);定量限为0.308 6 ng,检测限为0.154 3 ng;精密度的RSD<1.0%;回收率98.09%～102.6%(RSD=1.8%,n=9)。在此条件下,3批新工艺双氢青蒿素片的溶出度分别为93.81%,92.61%,92.37%,1批原处方双氢青蒿素片的溶出度为32.67%。该方法重复性好、准确、可靠,能客观地反映双氢青蒿素片的溶出情况,为本品现行药品标准中溶出度项的修订提供了依据。另外,新工艺双氢青蒿素片的溶出度显著高于原处方双氢青蒿素片的溶出度,表明新的处方和工艺更合理。

关键词：双氢青蒿素片双氢青蒿素溶出度测定高效液相色谱法

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黑河流域中下游黑果枸杞资源调查及保护利用

中国中药杂志 2017年第22期42卷 4419-4425页

作者：林丽晋玲李晓瑾崔治家王振恒马毅甘肃中医药大学甘肃兰州730000 新疆中药民族药研究所新疆乌鲁木齐830002

掌握黑果枸杞在黑河流域中下游的资源种类及分布范围,为合理开发使用上述地区的黑果枸杞提供科学依据。根据黑河流域黑果枸杞的分布情况,采用线路调查、走访调查以及区采药农的方法,进行野外调查记载、采集、室内鉴定、分类研究。运用Ar... 详细信息

掌握黑果枸杞在黑河流域中下游的资源种类及分布范围,为合理开发使用上述地区的黑果枸杞提供科学依据。根据黑河流域黑果枸杞的分布情况,采用线路调查、走访调查以及区采药农的方法,进行野外调查记载、采集、室内鉴定、分类研究。运用Arc GIS软件分析分布区域特点。基本掌握了黑果枸杞的种类、分布范围及蕴藏量,并对其种质资源数量有了了解。为合理开发使用黑果枸杞提供了科学依据,避免因不合理的开发利用而导致对生态环境的破坏。

关键词：黑河流域中下游黑果枸杞资源调查保护利用

阿尔茨海默病差异表达基因生物信息学分析及潜在治疗中药的预测

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中国老年学杂志 2023年第7期43卷 1596-1602页

作者：张宇洁赵佳佳木尼热·艾海提杨俊玲叶红霞吴涛乌鲁木齐市中医医院新疆乌鲁木齐830000 中国科学院新疆理化技术研究所

目的获取阿尔茨海默病(AD)差异表达基因,并进行生物信息学分析,预测潜在的AD治疗药物。方法采用GEO2R在线工具软件分析AD数据集GSE97760,获得AD差异表达基因,将核心差异表达基因利用STRING进行PPI网络构建,并进行GO和KEGG分析,构建靶点... 详细信息

目的获取阿尔茨海默病(AD)差异表达基因,并进行生物信息学分析,预测潜在的AD治疗药物。方法采用GEO2R在线工具软件分析AD数据集GSE97760,获得AD差异表达基因,将核心差异表达基因利用STRING进行PPI网络构建,并进行GO和KEGG分析,构建靶点-信号通路网络图,筛选出在AD发生发展中起着较为重要的关键基因及其潜在的病理机制,运用Coremine Medical平台筛选潜在治疗中药。结果筛选出648个显著差异表达基因,其中有226个基因表达上调,422个基因表达下调。核心靶点:促生长因子胰岛素样生长因子(IGF)1、趋化因子(C-X-C基元)配体CXCL12、犬腺状病毒第一型(CAV)1、IGF2、重组人酸性成纤维细胞生长因子(FGF)1等。富集主要为神经活性配体受体相互作用和单纯疱疹病毒感染信号通路。潜在治疗中药有:茶树根、骨碎补、穿山龙、干姜、红花、人参等。潜在化合物:槲皮素、雌二醇、(-)-表没食子儿茶素没食子酸酯等。结论筛选648个AD关键基因可产生抗病毒、改善血液循环、增强免疫功能、减轻脑组织中神经介质的代谢紊乱、延缓衰老等作用,达到治疗目的,可为AD的临床治疗提供参考依据。

关键词：阿尔茨海默病生物信息学潜在中药

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消渴健脾胶囊制备工艺、质量标准研究

中成药 2023年第9期45卷 2852-2859页

作者：丁然然杨明霞何承辉马美玲新疆医科大学新疆乌鲁木齐830054 乌鲁木齐市中医医院新疆乌鲁木齐830099 新疆维吾尔自治区药物研究所新疆乌鲁木齐830004

目的研究消渴健脾胶囊制备工艺、质量标准。方法在单因素试验基础上,以提取时间、加水量、提取次数为影响因素,落新妇苷、栀子苷、水浸出物含量为评价指标,正交试验优化制备工艺。TLC法鉴别栀子、葛根、丹参、大黄,HPLC法同时测定绿原... 详细信息

目的研究消渴健脾胶囊制备工艺、质量标准。方法在单因素试验基础上,以提取时间、加水量、提取次数为影响因素,落新妇苷、栀子苷、水浸出物含量为评价指标,正交试验优化制备工艺。TLC法鉴别栀子、葛根、丹参、大黄,HPLC法同时测定绿原酸、葛根素、毛蕊花糖苷、大豆苷、落新妇苷、丹酚酸B、大豆苷元的含量。结果最佳条件为提取时间1 h,加水量10倍,提取次数2次。TLC斑点清晰,阴性无干扰。7种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.9994),平均加样回收率96.9%~100.5%,RSD 0.82%~2.62%。结论该方法简便准确,可用于消渴健脾胶囊的质量控制。

关键词：消渴健脾胶囊制备工艺质量标准正交试验 TLC HPLC

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新塔花查耳酮合成酶基因克隆及表达分析

中草药 2022年第10期53卷 3134-3141页

作者：程波满尔哈巴·海如拉何江新疆维吾尔自治区药物研究所新疆维吾尔药重点实验室新疆乌鲁木齐830004

目的克隆新塔花Ziziphora bungena黄酮类化合物生物合成途径中关键酶查耳酮合成酶(chalcone synthase,CHS)基因,对其进行组织表达特异性分析,构建原核表达载体并进行重组蛋白诱导表达。方法结合新塔花转录组数据设计特异性引物,通过RT-... 详细信息

目的克隆新塔花Ziziphora bungena黄酮类化合物生物合成途径中关键酶查耳酮合成酶(chalcone synthase,CHS)基因,对其进行组织表达特异性分析,构建原核表达载体并进行重组蛋白诱导表达。方法结合新塔花转录组数据设计特异性引物,通过RT-PCR克隆新塔花查耳酮合成酶zbCHS基因,对其进行生物信息学分析,通过RT-PCR进一步分析其组织表达特异性,构建原核表达载体pET28a-chs,并转化至BL21(DE3)感受态细胞,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白的表达。结果zbCHS基因长1226 bp,包含一个长度为1176 bp的开放阅读框,编码319个氨基酸,其理论相对分子质量为42848.37。该编码蛋白定位于细胞质中,不存在跨膜区及信号肽,为非分泌蛋白,有1个糖基化位点和31个磷酸化位点。α-螺旋是该蛋白多肽链中大量的结构元件,散布于整个肽链之中。系统进化树分析表明,新塔花zbCHS基因与丹参、藿香、紫苏等亲缘关系最为接近。RT-PCR结果显示zbCHS基因在各组织中均有所表达,在叶中表达量较高,花相对表达量次之,根、茎中表达量相对较低。原核表达载体pET28a-chs在BL21(DE3)感受态细胞表达系统中,经IPTG诱导后,有明显的重组蛋白表达,其相对分子质量为42800,与预测相符合。结论通过对zbCHS基因的全长cDNA克隆、组织表达特异性分析和原核表达载体的构建,为进一步研究zbCHS基因在新塔花黄酮类化合物生物合成与基因调控提供依据,最终为该药材品质的提升奠定基础。

关键词：新塔花查耳酮合成酶基因克隆 RT-PCR 原核表达

维吾尔族药睡莲花中多种活性成分同步测定的质量控制方法建立

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中国实验方剂学杂志 2023年第9期29卷 202-209页

作者：陈两绵祖里皮亚·塔来提玉素甫江·艾力李建梅霍仕霞高慧敏王智民新疆维吾尔自治区维吾尔医药研究所乌鲁木齐830011 中国中医科学院中药研究所中药质量控制技术国家工程实验室北京100700

目的:针对睡莲花质量控制指标选择较为单一、整体质量控制水平较低等问题,建立睡莲花中多种活性成分同步测定的质量控制方法。方法:采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS/MS)鉴别并选择质量控制指标,色谱条件为流动... 详细信息

目的:针对睡莲花质量控制指标选择较为单一、整体质量控制水平较低等问题,建立睡莲花中多种活性成分同步测定的质量控制方法。方法:采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS/MS)鉴别并选择质量控制指标,色谱条件为流动相0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0~2 min,3%~8%B;2~4 min,8%~10%B;4~13 min,10%~15%B;13~19 min,15%~20%B;19~26 min,20%~45%B),流速0.4 mL·min-1,检测波长350 nm;质谱条件为电喷雾离子源,负离子扫描模式,离子源温度120℃,扫描范围m/z 100~1 200,低能量扫描时传输碰撞能量6 eV,高能量扫描时传输碰撞能量25~50 eV。采用高效液相色谱法(HPLC)建立睡莲花多指标成分同步测定的质量控制方法,流动相0.2%磷酸水溶液(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0~30 min,12%~15%B;30~60 min,15%~22%B;60~90 min,22%~40%B),检测波长350 nm;含量测定的供试品溶液制备方法为加80倍量70%甲醇水浴回流60 min。结果:通过对样品中主要成分的保留时间、紫外吸收特征、一级和二级质谱信号与对照品进行比对,从睡莲花中定性鉴别出短叶苏木酚酸、鞣花酸、芦丁、烟花苷、紫云英苷、槲皮素、槲皮素-3-甲基醚和山柰酚8种含量较高的活性成分,选择其作为质量控制指标。在建立的HPLC条件下,上述8种成分均能达到基线分离(分离度>1.5),其质量浓度分别在1.99~99.6、1.76~176、1.52~75.8、3.60~180、0.964~96.4、1.18~118、1.94~96.8、1.04~104 mg·L^(-1)与峰面积呈良好线性关系(r=0.999 9),检测限10~49μg·L^(-1),定量限34~164μg·L^(-1);平均回收率97.12%~103.1%,相对标准偏差(RSD)1.1%~2.2%。结论:建立了睡莲花中多种活性成分同步测定的质量控制方法,该方法简便、准确、重复性良好,可为睡莲花的质量标准制订提供科学依据,并为含睡莲花的维吾尔族医院制剂向新药转化奠定研究基础。

关键词：睡莲花超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS/MS) 定性分析高效液相色谱法(HPLC) 方法学考察酚酸黄酮类

Box-Behnken响应面法优选海马益智方提取工艺

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中国医院药学杂志 2023年第4期43卷 394-398页

作者：朱晓东陈红霞郭君婷木太里普·吐逊杨明翰杨明霞张佳佳乌鲁木齐市中医医院药学部新疆乌鲁木齐830000 新疆维吾尔自治区药物研究所新疆乌鲁木齐830004 新疆医科大学中医学院新疆乌鲁木齐830011

目的:利用Box-Behnken响应面法优选海马益智方提取工艺。方法:以远志■酮Ⅲ和3,6′-二芥子酰基蔗糖含量及复方浸膏得率为评价指标,采用多指标综合评分法,以加水量、提取时间、提取次数作为考察因素,在单因素试验基础上运用Box-Behnken... 详细信息

目的:利用Box-Behnken响应面法优选海马益智方提取工艺。方法:以远志■酮Ⅲ和3,6′-二芥子酰基蔗糖含量及复方浸膏得率为评价指标,采用多指标综合评分法,以加水量、提取时间、提取次数作为考察因素,在单因素试验基础上运用Box-Behnken响应面法对海马益智方的提取工艺进行优化,并进行验证试验。结果:优选得出的最佳提取工艺为:加水量10倍,提取时间1.5 h,提取次数2次。验证试验中预测综合评分为98.66,而实际综合评分均值为97.34,与预测值间的差异较小。结论:优选的海马益智方提取工艺稳定可行、重现性良好,可为海马益智方的研究开发提供参考依据及技术支持。

关键词：海马益智方 Box-Behnken响应面法提取工艺远志志■酮Ⅲ 3 6′-二芥子酰基蔗糖

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麻叶荨麻化学成分、药理作用及应用研究进展

中国野生植物资源 2022年第10期41卷 54-59页

作者：李亚楠马哈亚·艾斯江瞿菁晨卡米西别克·努尔哈买提地达尔·巴合提坚拉扎提·吐尔逊拜木拉提·克扎衣别克伊犁师范大学新疆伊宁835000 伊犁哈萨克自治州中医医院哈萨克医药研究所新疆伊宁835000

麻叶荨麻在我国分布广泛,资源丰富,药用价值极大,具有抗炎、抗菌、抗氧化及抑制前列腺增生的药理作用,在我国各民族医学上都被广泛地进行药用。该文归纳了近年来麻叶荨麻在化学成分、药理作用及应用价值方面的研究进展,旨在为其更好地... 详细信息

麻叶荨麻在我国分布广泛,资源丰富,药用价值极大,具有抗炎、抗菌、抗氧化及抑制前列腺增生的药理作用,在我国各民族医学上都被广泛地进行药用。该文归纳了近年来麻叶荨麻在化学成分、药理作用及应用价值方面的研究进展,旨在为其更好地发挥药用价值以及进一步的开发应用提供参考。

关键词：麻叶荨麻化学成分药理作用应用