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多巴胺受体在小肠的分布与定位

解剖学报 2024年第5期55卷 612-618页

作者：陈钧钧周立苏田王现伟张海龙王志勇新乡医学院人体解剖学与组织学胚胎学系河南新乡453003 河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003 河南大学基础医学院河南开封475000

目的探讨多巴胺受体D3~D5在不同物种小肠的分布和定位。方法应用免疫组织化学和免疫印迹法,分别检测D3~D5在小鼠、大鼠和恒河猴小肠的分布及表达水平,通过免疫荧光双标技术观察小肠固有层(LP)免疫球蛋白A阳性浆细胞(IgA^(+)PC)中D3~D5... 详细信息

目的探讨多巴胺受体D3~D5在不同物种小肠的分布和定位。方法应用免疫组织化学和免疫印迹法,分别检测D3~D5在小鼠、大鼠和恒河猴小肠的分布及表达水平,通过免疫荧光双标技术观察小肠固有层(LP)免疫球蛋白A阳性浆细胞(IgA^(+)PC)中D3~D5的表达。结果D3和D5在小鼠、大鼠和恒河猴小肠的上皮层、LP、黏膜下神经丛(SMP)和肌间神经丛(MP)内广泛分布;D4在小鼠和恒河猴小肠的分布与D3和D5一致,但在大鼠小肠仅分布于上皮层和LP。小鼠和大鼠LP内的IgA^(+)PC均表达D3和D5,不表达D4。结论D3和D5在小鼠、大鼠和恒河猴小肠具有相似的分布和定位模式,D4则存在物种差异。多巴胺可能参与调节IgA^(+)PC的功能。

关键词：多巴胺受体小肠免疫球蛋白A阳性浆细胞免疫印迹法免疫荧光小鼠大鼠恒河猴

CD73对体外心成纤维细胞和心肌细胞增殖与衰老的影响

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解剖学杂志 2024年第1期47卷 15-19,65,F0002页

作者：王琰赵育洁胥良牛思泉王地杨少华秦续谭郭志坤郑州市第七人民医院心内科郑州450000 新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室新乡453000 郑州市第七人民医院河南省心律失常医学重点实验室郑州450000

目的:探讨CD73对心成纤维细胞(CFs)和心肌细胞(CMs)增殖和衰老的影响。方法:体外培养大鼠CFs和CMs,构建慢病毒CD73过表达载体,转染CFs和CMs。实验分为CD73过表达组(OE组)和对照组(NC组)。RT-PCR法检测转染病毒后各组细胞CD73基因表达水... 详细信息

目的:探讨CD73对心成纤维细胞(CFs)和心肌细胞(CMs)增殖和衰老的影响。方法:体外培养大鼠CFs和CMs,构建慢病毒CD73过表达载体,转染CFs和CMs。实验分为CD73过表达组(OE组)和对照组(NC组)。RT-PCR法检测转染病毒后各组细胞CD73基因表达水平;衰老相关β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老;MTT法检测细胞增殖;非损伤细胞功能分析仪检测细胞生长曲线和倍增时间;流式细胞术检测细胞周期;RT-PCR法检测增殖相关信号分子mRNA表达水平。结果:慢病毒转染CFs和CMs 72 h后,OE组CD73 mRNA水平明显高于NC组;NC组CFs和CMs衰老细胞数量多于OE组;OE组CMs转染后3~4 d的增殖能力大于NC组;CFs转染后3~4 d的增殖能力为2组无差异;转染第3天CFs细胞周期变化为2组G1期和S期所占细胞比例无差别,G2期所占比例OE组稍高于NC组;OE组CFs和CMs细胞生长曲线均显示生长指数高于NC组,CMs倍增时间2组差别不显著;CMs转染第3天PI3K和Akt mRNA的表达增高,血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达变化不明显。结论:CD73对CFs增殖无明显影响,但抑制其衰老;CD73促进CMs的增殖且抑制其衰老;CD73可促进CMs高表达PI3K和Akt,但对VEGF表达无明显影响。

关键词： CD73 增殖衰老心肌细胞心成纤维细胞流式细胞术机制

血清FGF21、Sfrp5、miRNA-21对冠心病经皮冠状动脉介入治疗术后支架内再狭窄的预测价值

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分子诊断与治疗杂志 2024年第2期16卷 321-325页

作者：彭红建田香勤贾国立商水县人民医院心内科河南商水466100 新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453000 周口市中心医院心内科河南周口466000

目的探讨血清成纤维细胞生长因子21(FGF21)、分泌型卷曲蛋白5(Sfrp5)、微小RNA-21(miRNA-21)对冠心病(CHD)经皮冠状动脉介入治疗术(PCI)后支架内再狭窄(ISR)的预测价值。方法选择商水县人民医院2021年1月至2022年9月间行PCI手术治疗的CH... 详细信息

目的探讨血清成纤维细胞生长因子21(FGF21)、分泌型卷曲蛋白5(Sfrp5)、微小RNA-21(miRNA-21)对冠心病(CHD)经皮冠状动脉介入治疗术(PCI)后支架内再狭窄(ISR)的预测价值。方法选择商水县人民医院2021年1月至2022年9月间行PCI手术治疗的CHD患者218例为CHD组,同期非心血管疾病的住院患者97例为对照组,比较两组FGF21、Sfrp5及miRNA-21;CHD组术后随访6个月,以是否发生ISR分为ISR组(n=56)及无ISR组(n=162);分析CHD患者行PCI手术后发生ISR的影响因素,分析FGF21、Sfrp5及miRNA-21对ISR的预测价值。结果CHD组FGF21、miRNA-21均高于对照组,Sfrp5水平低于对照组,差异有统计学意义(t=11.196、15.030、13.685,P学意义(t=7.093、7.216、6.388,P病比率高于无ISR组,差异有统计学意义(χ^(2)=6.015、11.295,P病、FGF21、Sfrp5、miRNA-21是CHD患者行PCI术后发生ISR的影响因素(P<0.05);ROC曲线分析显示,FGF21、Sfrp5、miRNA-21三者单独及联合检测预测PCI术后发生ISR的AUC分别为0.772、0.758、0.763、0.905(P<0.05)。结论血清FGF21、Sfrp5、miRNA-21在行PCI手术后发生ISR的CHD患者中表达异常,联合检测三者水平对于预测CHD患者PCI术后发生ISR具有较好的应用价值。

关键词：成纤维细胞生长因子21 分泌型卷曲蛋白5 微小RNA-21 冠心病经皮冠状动脉介入治疗术支架内再狭窄

N-乙酰半胱氨酸通过海马区Notch1/hes1通路改善丙戊酸孤独症模型鼠的学习和记忆能力

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中国临床解剖学杂志 2019年第4期37卷 390-396页

作者：项哲张应花何雪玲王丽君崔卫刚新乡医学院基础医学院新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室新乡市分子神经病学重点实验室

目的探讨N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)能否改善孤独症模型鼠的学习和记忆能力及其作用机制。方法利用丙戊酸(valproic acid,VPA)建立孤独症模型,通过三箱实验鉴定造模成功,Western blotting技术检测模型鼠海马区Notch1/hes1通... 详细信息

目的探讨N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)能否改善孤独症模型鼠的学习和记忆能力及其作用机制。方法利用丙戊酸(valproic acid,VPA)建立孤独症模型,通过三箱实验鉴定造模成功,Western blotting技术检测模型鼠海马区Notch1/hes1通路信号分子Notch1、Notch1胞内活性结构域(Notch intracellular domain,NICD)、Hes1、Jagged1变化,免疫荧光技术检测该通路信号下游靶基因Hes1的表达;然后用NAC干预,检测模型鼠学习和记忆能力的变化及Notch1/hes1信号通路关键信号分子的改变。结果与对照组相比,VPA组大鼠找到平台的时间增加,跨越平台的次数及在靶象限的时间均减少,同时Notch1、NICD、Hes1、Jagged1的蛋白表达水平增加;而NAC干预以后,与VPA组相比,VPA+NAC组大鼠找到平台的时间减少,跨越平台的次数及在靶象限的时间均增加,同时海马脑区NICD、Hes1的蛋白表达均下降。结论 NAC可以改善VPA孤独症模型鼠学习和记忆能力,其作用机制可能与降低Notch1/hes1信号通路的过度活化有关。

关键词：孤独症 N-乙酰半胱氨酸 Notch1 丙戊酸学习记忆能力

兔心包液CD44和波形蛋白阳性细胞具有多项分化潜能

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解剖学报 2019年第6期50卷 735-740页

作者：孙莹孙攀文郭志坤新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室

目的探讨兔心包液内的细胞成分及其分化潜能,为心包液细胞基础研究和临床应用提供形态学依据。方法成年新西兰大白兔30只,无菌开胸,用输液针软管抽取心包液,离心培养。取不同培养代次细胞,倒置显微镜下行细胞形态观察。利用免疫荧光... 详细信息

目的探讨兔心包液内的细胞成分及其分化潜能,为心包液细胞基础研究和临床应用提供形态学依据。方法成年新西兰大白兔30只,无菌开胸,用输液针软管抽取心包液,离心培养。取不同培养代次细胞,倒置显微镜下行细胞形态观察。利用免疫荧光技术对心包液细胞进行免疫显色,观察CD44、CD45、波形蛋白(vimentin)的表面标记。取第3代细胞进行成骨、成脂诱导。利用PCR技术检测CD44、CD45、vimentin相关分子表达情况及分析表达量的差异。结果成年兔心包液中含有形态较为均匀、生长状态良好、增殖能力强的细胞群。免疫荧光结果显示,CD44、vimentin阳性表达,不表达CD45。成脂和成骨诱导后,可向成骨和成脂细胞分化。结论兔心包液中含有多项分化潜能的细胞,它们可能对心肌修复具有积极意义。

关键词： CD44 CD45 波形蛋白心包液免疫荧光新西兰白兔

Notch信号通路在孤独症谱系障碍中的研究进展

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中国临床解剖学杂志 2018年第3期36卷 357-359页

作者：项哲何雪玲崔卫刚张应花新乡医学院基础医学院河南新乡453003 新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003 新乡市分子神经病学重点实验室河南新乡453003

孤独症谱系障碍（Autism spectrum disorders,ASDs）是一组病因复杂、发病机制尚不明确的神经发育障碍性疾病。ASDs包括典型孤独症、阿斯伯格综合症、Rett综合征、童年瓦解性障碍及其它待分类的非特异性广泛发育障碍。其主要的行为表现... 详细信息

孤独症谱系障碍（Autism spectrum disorders,ASDs）是一组病因复杂、发病机制尚不明确的神经发育障碍性疾病。ASDs包括典型孤独症、阿斯伯格综合症、Rett综合征、童年瓦解性障碍及其它待分类的非特异性广泛发育障碍。其主要的行为表现有社交障碍、语言发育障碍以及重复刻板的兴趣或行为等。近年来,ASDs由于发病率在不同国家均有所上升,而成为研究的一大热点。

关键词：信号通路 Wnt 信号传导神经系统发育神经系统疾病孤独症谱系障碍 Notch

5-氮杂胞苷诱导大鼠心脏成纤维细胞向心肌样细胞分化进程相关基因的表达差异

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解剖学报 2020年第6期51卷 861-867页

作者：常玉巧贾阳阳韩贝郭志坤新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003

目的探讨5-氮杂胞苷(5-aza)诱导心脏成纤维细胞(CFs)向心肌样细胞分化5 d、7 d、14 d、21 d和28 d相关基因的表达差异。方法新生1~3 d SD大鼠12只,胰蛋白酶/胶原酶联合消化法分离培养新生大鼠CFs,采用CFs分子标记盘状结构域受体2(DDR2)... 详细信息

目的探讨5-氮杂胞苷(5-aza)诱导心脏成纤维细胞(CFs)向心肌样细胞分化5 d、7 d、14 d、21 d和28 d相关基因的表达差异。方法新生1~3 d SD大鼠12只,胰蛋白酶/胶原酶联合消化法分离培养新生大鼠CFs,采用CFs分子标记盘状结构域受体2(DDR2)并行细胞免疫荧光染色。含15μmol/L 5-aza心肌细胞诱导液培养第3代CFs,Real-time PCR检测心肌化诱导不同时间点相关基因vimentin、DDR2、Nanog、sox2、c-kit、sca-1、Tbx5、CD73、CD34、c Myc、klf4、Gata4、Oct4、Mef2c和心肌肌钙蛋白T(c Tn T)的表达差异,细胞免疫荧光检测心肌化诱导后5 d、7 d、14 d、21 d和28 d肌钙蛋白T(c Tn T)的表达。透射电子显微镜观察心肌化诱导28 d CFs的超微结构变化。结果 5-aza诱导CFs后3 d细胞生长速率减慢,部分细胞由三角形、梭形向圆形和杆状转变。诱导后7 d、14 d、21 d和28 d,与诱导前相比,DDR2表达稳定,vimentin在14 d表达下降,Nanog、c-kit、sox2和Tbx5伴随着心肌化进程呈现表达下降趋势,而CD73、Mef2c、CD34、Gata4、Oct4和c Tn T表达逐步增加,sca-1在7 d表达上升又下降,c Myc和klf4在14 d表达上升又下降。诱导后5 d少量细胞表达c Tn T,14~21 d c Tn T阳性细胞数明显增高,28 d表达c Tn T较多且趋于稳定。透射电子显微镜显示,CFs心肌化诱导28 d,细胞与细胞间出现端-端连接,细胞质内出现大量的肌原纤维,排列较为规律,但肌节不明显,H带、Z线和M线显示不清。结论 CFs经5-aza诱导,可向心肌样细胞分化,但不能形成成熟的心肌细胞。

关键词： 5-氮杂胞苷心脏成纤维细胞心肌样细胞基因表达实时定量聚合酶链反应大鼠

小鼠脂肪源和骨髓源间充质干细胞表面标记表达的比较

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解剖学报 2016年第2期47卷 203-208页

作者：余霞李琼任明芬牛艳菲甘黎郭志坤新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室新乡医学院第二附属医院心内科河南新乡453003

目的探讨小鼠脂肪源间充质干细胞（ADMSCs）和骨髓源间充质干细胞（BMSCs）表面标记表达的差异。方法分别对小鼠脂肪源和骨髓源间充质干细胞进行成骨、成脂、成心肌分化诱导、鉴定;流式细胞术与细胞免疫荧光法检测CD29、CD44、CD45和CD7... 详细信息

目的探讨小鼠脂肪源间充质干细胞（ADMSCs）和骨髓源间充质干细胞（BMSCs）表面标记表达的差异。方法分别对小鼠脂肪源和骨髓源间充质干细胞进行成骨、成脂、成心肌分化诱导、鉴定;流式细胞术与细胞免疫荧光法检测CD29、CD44、CD45和CD73的表达并进行比较。结果 BMSCs形态均一,呈长梭形;ADMSCs形态多样,呈梭形、星形、多角形等,胞体较大,表面分泌物较多;两者均可诱导分化为成骨细胞、脂肪细胞和心肌样细胞。流式细胞术检测显示,BMSCs表面分子CD29、CD44和CD73表达率分别为（83.43±1.97）%、（90.33±0.81）%、（2.63±0.42）%;ADMSCs表面分子CD29和CD44的表达率分别为（53.1±1.05）%、（34.8±2.1）%,CD73表达不稳定,在1.8%~19.7%之间波动。两种细胞均不表达造血干细胞标记物CD45。免疫荧光显示,CD73分子与部分CD29、CD44阳性细胞共表达。结论小鼠BMSCs和ADMSCs均具有成脂、成骨、成心肌分化能力,但是在形态上和分子表达上均存在差异。BMSCs的CD44和CD29表达高于ADMSCs;而CD73的表达则相反,CD73在两种细胞的表达均较低,在ADMSCs的表达不稳定。

关键词： CD73 CD29 CD44 间充质干细胞免疫荧光法流式细胞术小鼠

心肌细胞来源的外泌体在心血管疾病中的研究进展

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医学综述 2024年第1期30卷 24-29页

作者：姚瑶许亚平郭志坤新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003 郑州市第七人民医院河南省心脏重构与移植重点实验室郑州450006

心肌损伤后心肌组织自我修复能力降低,限制了其再生与修复,目前尚无理想的心肌损伤治疗药物。几乎所有的细胞均分泌外泌体,外泌体可将蛋白质、信使RNA、微RNA等生物活性分子转运至受体细胞,并通过多种信息分子传递细胞信号,介导各种病... 详细信息

心肌损伤后心肌组织自我修复能力降低,限制了其再生与修复,目前尚无理想的心肌损伤治疗药物。几乎所有的细胞均分泌外泌体,外泌体可将蛋白质、信使RNA、微RNA等生物活性分子转运至受体细胞,并通过多种信息分子传递细胞信号,介导各种病理生理过程。近年来,外泌体在心血管疾病中的生理病理作用备受关注,深入研究心肌细胞来源的外泌体的生物发生、分离技术、生物标志物及其在心血管疾病诊疗中的作用,可以为相关疾病的治疗提供新思路。

关键词：心血管疾病外泌体心肌细胞生物学功能