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五倍子水提物对UVB诱导光老化成纤维细胞的保护作用

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中国皮肤性病学杂志 2024年

作者：陈志伟周磊王殷杰陈赤清向杰石召华胡俊杰湖北中医药大学药学院五峰赤诚生物科技有限公司湖北本草时代大健康产业有限公司湖北中医药大学中药资源与中药复方教育部重点实验室

目的探究五倍子水提取物(galla chinensis extract GCE)对中波长紫外线（UVB）诱导的人真皮成纤维细胞（HSF）光老化的保护作用及机制。方法通过自由基清除实验、弹性蛋白酶抑制实验评价五倍子水提物的抗衰老能力；建立UVB诱导的细胞... 详细信息

目的探究五倍子水提取物(galla chinensis extract GCE)对中波长紫外线（UVB）诱导的人真皮成纤维细胞（HSF）光老化的保护作用及机制。方法通过自由基清除实验、弹性蛋白酶抑制实验评价五倍子水提物的抗衰老能力；建立UVB诱导的细胞光老化模型，给予五倍子水提物干预，通过CCK-8法检测细胞存活率，β-半乳糖苷酶染色法检测细胞衰老水平，细胞流式仪检测活性氧（ROS），试剂盒检测细胞中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、丙二醛（MDA）的活性；通过酶联免疫吸附试验（ELISA）检测基质金属蛋白酶-1（MMP-1）、白细胞介素-6（IL-6）、I型胶原蛋白（COL-1）含量。蛋白免疫印迹法（western blot）检测相关蛋白表达水平。结果五倍子水提物具有清除自由基、抑制弹性蛋白酶活性、提高UVB诱导的HSF细胞存活率、COL-1含量、抗氧化物酶活性（CAT、SOD）等作用；还可以抑制UVB诱导的HSF细胞衰老、ROS、IL-6、MMP-1和MDA生成以及抑制丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路中p-ERK1/2、p-JNK、p-p38蛋白的表达水平。结论五倍子水提物通过提高抗氧化酶活力以及抑制MAPK信号通路的激活，发挥抗光老化作用。

关键词：五倍子水提物光老化人真皮成纤维细胞

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赭石致小鼠多脏器损伤研究

中国中药杂志 2024年第11期49卷 3031-3039页

作者：卢闵王程程饶佳丽甘焕新李娟郑国华曹艳湖北中医药大学药学院湖北武汉430065 健民药业集团股份有限公司湖北武汉430052

赭石是一种常用的矿物类中药,《中华本草》第2卷矿物药篇中记载其有毒性,不可久服。该研究考察赭石及煅赭石对小鼠的多脏器损伤作用,并从代谢组学的角度探索其相关脏器的毒性机制。小鼠随机分为对照组、赭石低剂量组、赭石高剂量组、煅... 详细信息

赭石是一种常用的矿物类中药,《中华本草》第2卷矿物药篇中记载其有毒性,不可久服。该研究考察赭石及煅赭石对小鼠的多脏器损伤作用,并从代谢组学的角度探索其相关脏器的毒性机制。小鼠随机分为对照组、赭石低剂量组、赭石高剂量组、煅赭石高剂量组,共4组,每组12只,雌雄各半。赭石煎剂连续灌胃给药10 d,然后观察一般情况并取材,检测各项指标。结果显示,赭石高剂量组小鼠表现出明显毒性反应,肠道、肝脏、脾脏、肺脏出现不同程度毒性损伤;赭石低剂量组小鼠无毒性反应;煅赭石高剂量组较赭石高剂量组毒性明显减轻,小鼠仅肺脏出现毒性损伤。利用代谢组学技术检测对照组及赭石高剂量组小鼠肺组织,共检测出15种显著的差异代谢物,主要涉及通路为癌症中的胆碱代谢通路、鞘脂代谢通路、甘油磷脂代谢通路。免疫组化结果显示,赭石高剂量组小鼠肺组织INSIG1蛋白表达显著高于对照组。综上所述,大剂量、长时间的赭石煎剂使用会造成多种脏器损伤,相同剂量的煅赭石毒性小于赭石,低剂量赭石无明显毒性作用。鞘脂代谢和甘油磷脂代谢等脂质代谢通路紊乱可能是赭石诱导肺毒性的重要因素。该研究为赭石肺毒性机制的进一步深入研究提供了参考。

关键词：赭石小鼠脏器损伤肺组织代谢组学脂质代谢

头痛宁胶囊对偏头痛大鼠模型和脂多糖诱导神经小胶质细胞的影响及作用机制

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世界中医药 2024年第11期 1632-1637页

作者：支文冰刘洋宗时宇王春柳孙婷婷李晔刘峰张红陕西省中医药研究院/陕西省中医医院陕西步长制药有限公司

目的：探讨头痛宁胶囊(TTN)对偏头痛大鼠模型和脂多糖(LPS)诱导神经小胶质细胞的影响及作用机制。方法：将21只无特定病原体(SPF)级斯泼累格·多雷(SD)雄性大鼠按照随机数字表法分为3组，分别为空白组、模型组、头痛宁给药组(TTN给药组)... 详细信息

目的：探讨头痛宁胶囊(TTN)对偏头痛大鼠模型和脂多糖(LPS)诱导神经小胶质细胞的影响及作用机制。方法：将21只无特定病原体(SPF)级斯泼累格·多雷(SD)雄性大鼠按照随机数字表法分为3组，分别为空白组、模型组、头痛宁给药组(TTN给药组)。TTN给药组大鼠给予TTN 640 mg/kg灌胃，空白组和模型组给予等体积生理盐水灌胃，均1次/d,预给药7 d。末次给药后30 min, TTN给药组和模型组大鼠给予皮下注射硝酸甘油注射液10 mg/kg造模，空白组给予皮下注射等体积生理盐水。用酶联免疫吸附试验法测定大鼠血清5-HT的水平、脑组织中DA。脂多糖(LPS)诱导神经小胶质细胞(BV2)模拟中枢敏化，将细胞分为空白组、脂多糖组和头痛宁高、低剂量给药组，噻唑蓝实验检测TTN和LPS对BV2细胞活力的影响；硝酸还原酶法检测细胞上清中一氧化氮(NO);酶联免疫吸附试验法检测细胞上清中脑源性生长因子(BDNF)、5-HT、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平；免疫组织化学法和蛋白质印迹法检测BV2细胞中Toll样受体4(TLR4)和磷酸化p65(p-p65 NF-κB)蛋白表达。结果：模型组大鼠血清5-HT、脑组织中DA水平低(P<0.05),TTN给药组血清5-HT、脑组织中DA水平高(P<0.05)。TTN(1.25～20μg/mL)及LPS(1、2、4和8μg/mL)对BV2细胞活力无显著影响。与空白组比较，LPS组细胞上清液中BDNF、5-HT水平低(P<0.05),NO、IL-6、TNF-α水平高(P<0.05),细胞中TLR4、p-p65 NF-κB蛋白表达高(P<0.05);与LPS组比较，TTN给药组细胞上清液中BDNF、5-HT水平高(P<0.05),NO、IL-6、TNF-α水平高低(P<0.05),细胞中TLR4、p-p65 NF-κB蛋白表达低(P<0.05)。结论：头痛宁胶囊通过抑制TLR4/NF-κB信号通路，减轻了LPS诱导的BV2细胞炎症反应，缓解大鼠偏头痛症状。

关键词：偏头痛头痛宁胶囊大鼠神经小胶质细胞 Toll样受体4/核因子κB信号通路中枢敏化炎症反应脂多糖

加味四君子汤通过影响5-羟色胺及其受体对斑马鱼肠道出血模型的止血效应及其机制探讨

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北京中医药大学学报 2024年第4期47卷 516-522页

作者：王珺郎海燕周佳丽张雪莹亢炎红张蕴陈信义马薇浙江中医药大学附属第一医院(浙江省中医院) 杭州310000 北京中医药大学东直门医院杭州环特生物科技股份有限公司

目的探讨加味四君子汤(党参、茯苓、白术、炙甘草、黄芪、阿胶、茜草)通过影响5-羟色胺(5-HT)及其受体(5-HT2aR、5-HT2bR)对斑马鱼肠道出血模型的止血作用及其机制。方法以受精后4 d的斑马鱼为研究对象,6μmol/L辛伐他汀诱导24 h建立肠... 详细信息

目的探讨加味四君子汤(党参、茯苓、白术、炙甘草、黄芪、阿胶、茜草)通过影响5-羟色胺(5-HT)及其受体(5-HT2aR、5-HT2bR)对斑马鱼肠道出血模型的止血作用及其机制。方法以受精后4 d的斑马鱼为研究对象,6μmol/L辛伐他汀诱导24 h建立肠道出血模型。将斑马鱼利用随机数字表法分为正常组,模型组,加味四君子汤低、中、高质量浓度组(55.6、167、500 mg/L),造模后,给予相应质量浓度加味四君子汤,24 h后收样。观察血小板计数(PLT)及出血情况,比色法检测5-HT含量及Caspase 3/7活性,实时PCR法检测5-HT2aR、5-HT2bR、5-HT转运蛋白(SERT)基因表达,蛋白质印迹法检测蛋白激酶B(AKT)、磷酸化AKT(p-AKT)、细胞外调解蛋白激酶(ERK)、磷酸化ERK(p-ERK)蛋白表达。结果模型组肠道出血发生率为70.0%,加味四君子汤低、中、高质量浓度组出血发生率为36.7%、40.0%、80.0%,肠道止血作用分别为54%、52%、7%。与模型组比较,加味四君子汤低、中质量浓度组PLT减少;各质量浓度组5-HT含量升高、5-HT2aR及5-HT2bR基因表达上调,低、中质量浓度组SERT基因表达上调;中、高质量浓度组Caspase 3/7活性降低;低、中质量浓度组p-AKT、p-ERK蛋白表达上调(均P<0.05)。结论加味四君子汤可减少斑马鱼肠道出血模型的出血发生率及出血程度,其机制可能是通过5-HT及其受体激活AKT和ERK信号通路实现的。

关键词：免疫性血小板减少症加味四君子汤 5-羟色胺 5-羟色胺受体蛋白激酶B 细胞外调解蛋白激酶斑马鱼

电喷雾萃取电离-串联质谱法测定不同水样中全氟辛酸

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质谱学报 2024年第4期 492-499页

作者：幸慧玉陈兰芳占发旺方小伟陈焕文江西中医药大学生命样品直接质谱分析研究室南昌大学第一附属医院江西万拓环境检测有限公司

全氟辛酸（PFOA）是一种持久性有机污染物，长期环境暴露会对生态系统与人类健康造成极大的风险，因此，发展快速定量监测水中PFOA的方法至关重要。本研究采用电喷雾萃取电离-串联质谱（EESI-MS/MS）法检测自来水、江水、河水中的痕量P... 详细信息

全氟辛酸（PFOA）是一种持久性有机污染物，长期环境暴露会对生态系统与人类健康造成极大的风险，因此，发展快速定量监测水中PFOA的方法至关重要。本研究采用电喷雾萃取电离-串联质谱（EESI-MS/MS）法检测自来水、江水、河水中的痕量PFOA。结果表明，在优化的实验条件下，PFOA在1～500 ng/L浓度范围内的线性关系良好，线性相关系数（R2）为0.997 6，方法检出限（LOD）为0.57 ng/L，定量限（LOQ）为1.73 ng/L，回收率为92.1%～105.2%，相对标准偏差（RSD,n=6）为1.89%～5.45%。本方法具有灵敏度高、准确性好、分析速度快等优点，在监测环境水体污染物方面具有良好的应用前景。

关键词：电喷雾萃取电离-串联质谱(EESI-MS/MS) 快速检测全氟辛酸(PFOA) 水

电喷雾萃取电离-串联质谱测定不同水样中的全氟辛酸

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质谱学报 2024年

作者：幸慧玉陈兰芳占发旺方小伟陈焕文江西中医药大学生命样品直接质谱分析研究室南昌大学第一附属医院江西万拓环境检测有限公司

全氟辛酸(PFOA)是一种持久性有机污染物，长期环境暴露会对生态系统与人类健康造成极大风险，因此，发展快速定量监测水中PFOA的方法至关重要。本研究采用电喷雾萃取电离-串联质谱(EESI-MS/MS)检测自来水、江水、河水中的痕量PFOA。结... 详细信息

全氟辛酸(PFOA)是一种持久性有机污染物，长期环境暴露会对生态系统与人类健康造成极大风险，因此，发展快速定量监测水中PFOA的方法至关重要。本研究采用电喷雾萃取电离-串联质谱(EESI-MS/MS)检测自来水、江水、河水中的痕量PFOA。结果表明，在优化的条件下，在1～500 ng/L浓度范围内线性关系良好，线性相关系数(R2)为0.9976，方法检出限(LOD)为0.57 ng/L，定量限(LOQ)为 1.73 ng/L，回收率为92.1%～105.2%，相对标准偏差(RSD，n=6)为1.89%～5.45%。本方法具有灵敏度高、准确性好、分析速度快等优点，在监测环境水体污染物方面具有良好的应用前景。

关键词：电喷雾萃取电离-串联质谱(EESI-MS/MS) 快速检测全氟辛酸(PFOA) 水

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葛渣膳食纤维对小鼠胃肠蠕动促进作用研究

江西中医药大学学报 2024年第2期36卷 94-96,106页

作者：游剑张洁李梦楚吴东龚建平江西中医药大学南昌330006 江西本草天工科技有限责任公司南昌330006

目的:检验葛渣中水不溶性膳食纤维是否具有促进肠胃蠕动的作用,并检测不同浓度的葛渣膳食纤维对肠胃蠕动促进效果的差异。方法:建立小肠正常蠕动的抑制模型(便秘模型),然后采用小肠运动实验和小鼠排便实验2个实验检测葛渣的水不溶性膳... 详细信息

目的:检验葛渣中水不溶性膳食纤维是否具有促进肠胃蠕动的作用,并检测不同浓度的葛渣膳食纤维对肠胃蠕动促进效果的差异。方法:建立小肠正常蠕动的抑制模型(便秘模型),然后采用小肠运动实验和小鼠排便实验2个实验检测葛渣的水不溶性膳食纤维是否具有促进胃肠蠕动的作用,从而判断葛渣膳食纤维是否具有润肠通便的效果。结果:与模型对照组比较,小肠运动实验中高、中、低剂量组的小肠墨汁推进长度和推进率均有显著性差异,小鼠排便实验的高、中、低剂量组小鼠在首便时间、6 h粪便粒数和6 h粪便总量均有显著性差异(P<0.05)。结论:葛渣水不溶性膳食纤维具有润肠通便的作用。

关键词：葛渣膳食纤维小肠运动实验通便实验

基于UHPLC-Q-TOF-MS技术分析假北紫堇入血成分及代谢产物

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江西中医药 2024年第2期55卷 76-80页

作者：余惠敏李婉亭刘海燕何明珍冯育林钟国跃江西中医药大学南昌330006 南昌海关技术中心南昌330006 江西本草天工科技有限责任公司南昌330006

目的:采用UHPLC-Q-TOF-MS技术快速分析鉴定假北紫堇在大鼠体内的入血成分及代谢产物,为假北紫堇的药效物质研究提供基础。方法:以SD大鼠为实验对象,灌胃给予假北紫堇提取物,收集血浆样品,采用Welech-C_(18)(2.1 mm×100 mm,1.8μm)色谱... 详细信息

目的:采用UHPLC-Q-TOF-MS技术快速分析鉴定假北紫堇在大鼠体内的入血成分及代谢产物,为假北紫堇的药效物质研究提供基础。方法:以SD大鼠为实验对象,灌胃给予假北紫堇提取物,收集血浆样品,采用Welech-C_(18)(2.1 mm×100 mm,1.8μm)色谱柱,流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈溶液,梯度洗脱,流速0.3 mL/min,柱温40℃,进样量3μL,采用电喷雾离子源,正离子模式下检测。结果:分析鉴定了31个入血成分,其中包括20个原型成分和11个代谢产物。结论:利用UHPLC-QTOF-MS分析方法鉴定假北紫堇的入血成分,为进一步阐明假北紫堇的药效物质基础及其作用机制提供了依据,为假北紫堇的进一步开发利用提供了基础。

关键词：假北紫堇入血成分 UHPLC-Q-TOF-MS

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基于传统品质评价的淡豆豉质量分析

中国实验方剂学杂志 2024年第1期30卷 31-42页

作者：王艺涵林王敏张水利俞冰南铁贵康利平李国凤何锡远詹志来黄璐琦中国中医科学院中药资源中心道地药材国家重点实验室北京100700 浙江中医药大学药学院杭州310053 成都宝芎中药材有限公司四川彭州611930

目的:基于历代本草总结的淡豆豉“香美而浓者佳”的品质评价经验,对黑豆与淡豆豉所含化学成分进行系统对比分析,并对淡豆豉不同发酵时间的主要发酵产物进行定量分析,以明确炮制过程内在成分的转化规律,为淡豆豉现代质量控制提供科学依... 详细信息

目的:基于历代本草总结的淡豆豉“香美而浓者佳”的品质评价经验,对黑豆与淡豆豉所含化学成分进行系统对比分析,并对淡豆豉不同发酵时间的主要发酵产物进行定量分析,以明确炮制过程内在成分的转化规律,为淡豆豉现代质量控制提供科学依据。方法:采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)对黑豆及淡豆豉的化学成分进行结构鉴定,借助Progenesis QI v2.3软件,采用负离子模式进行主成分分析(PCA)及正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA),绘制S-plot图,选取|P|>0.1的化合物作为备选差异性成分。采用UPLC测定淡豆豉发酵期间异黄酮类化合物含量,前酵期间每8 h取样,后酵期间每2 d取样,并分析不同发酵阶段异黄酮含量动态变化。采取异硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生,利用高效液相色谱法(HPLC)检测淡豆豉不同发酵阶段样品及黑豆中氨基酸和核苷酸的含量,通过味道强度值(TAV值)探讨各呈味物质对淡豆豉“美”味的贡献度。结果:从黑豆和淡豆豉中共筛选出19种差异成分,以大豆皂苷类和异黄酮类成分为主,发酵后含量均显著减少甚至消失。淡豆豉前酵过程主要发生苷键水解反应,黑豆中所含异黄酮苷类物质大量降解转化为对应的苷元类物质,氨基酸等风味物质含量增势较为平缓;后酵过程则主要发生蛋白质降解反应,后酵8 d后异黄酮类化合物含量基本稳定,而各氨基酸总含量平均上升8~40倍,不同的氨基酸形成了淡豆豉特殊的风味,如鲜味物质谷氨酸TAV值始终领先于其他呈味物质,甜味物质如丙氨酸、缬氨酸对淡豆豉的贡献同样较大。结论:基于成分转化规律,结合传统“香美而浓”的评价指标,淡豆豉现有标准较难控制其发酵程度,建议细化淡豆豉性状描述,改为“气香,味鲜,微甘”,同时增加谷氨酸、丙氨酸和缬氨酸等后酵程度指标性化合物为淡豆豉质控指标,以规范淡豆豉制作工艺,提高淡豆豉质量。

关键词：淡豆豉黑豆品质评价超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF-MS) 异黄酮氨基酸呈味物质