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二仙丸加减方含药血清抑制巨噬细胞焦亡的物质基础和作用机制

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中国组织工程研究 2025年第19期29卷 4029-4037页

作者：李思源王瑜茹徐烨郭地南楠刘杨赵杰郝慧琴山西中医药大学第三临床学院山西省晋中市030619 山西中医药大学中西医结合基础实验室山西省晋中市030619 经方扶阳山西省重点实验室山西省太原市030013

背景:课题组前期研究发现二仙丸加减方可以缓解胶原诱导性关节炎大鼠炎症反应,但其作用机制尚需进一步验证。目的:分析二仙丸加减方入血成分,观察二仙丸加减方含药血清对J774A.1巨噬细胞焦亡的影响。方法:①二仙丸加减方入血成分分析:... 详细信息

背景:课题组前期研究发现二仙丸加减方可以缓解胶原诱导性关节炎大鼠炎症反应,但其作用机制尚需进一步验证。目的:分析二仙丸加减方入血成分,观察二仙丸加减方含药血清对J774A.1巨噬细胞焦亡的影响。方法:①二仙丸加减方入血成分分析:采用超高效液相色谱-高分辨质谱(UHPLC-HRMS)对二仙丸加减方及入血成分进行检测和鉴定。②二仙丸加减方含药血清对J774A.1巨噬细胞焦亡的影响:采用分子对接技术对二仙丸加减方入血成分倍半萜类化合物与NLRP3进行初步验证。将J774A.1巨噬细胞随机分为空白对照组、脂多糖+三磷酸腺苷组及脂多糖+三磷酸腺苷+二仙丸加减方含药血清低(2.5%)、中(5%)、高(10%)剂量组。根据试剂盒说明书检测各组细胞上清液中乳酸脱氢酶释放情况;ELISA检测各组细胞上清液中白细胞介素1β、白细胞介素18水平;Hoechst/PI染色法检测各组细胞膜受损情况;Western blot检测各组细胞中NLRP3、Caspase-1、GSDMD及GSDMD-N蛋白表达水平。结果与结论:①共鉴定出二仙丸加减方药效成分32个,入血成分21个,其中入血成分主要包括多种倍半萜类化合物;②分子对接结果显示3-O-Acetyl-13-deoxyphomenone、Incensol oxide、Atractylenolide Ⅲ、Rupestonic acid、3,7-Dihydroxy-9,11-eremophiladien-8-one与NLRP3之间结合活性较好;③与空白对照组相比,脂多糖+三磷酸腺苷组细胞上清中乳酸脱氢酶活性及白细胞介素1β、白细胞介素18水平均显著升高(P细胞数量显著增加。脂多糖+三磷酸腺苷+二仙丸加减方含药血清各组上述指标均显示不同程度降低;④与空白对照组相比,脂多糖+三磷酸腺苷组NLRP3、Caspase-1、GSDMD及GSDMD-N蛋白表达显著升高(P细胞中NLRP3、Caspase-1、GSDMD及GSDMD-N蛋白表达均有不同程度降低(P细胞焦亡。

关键词：二仙丸加减方含药血清细胞焦亡 J774A.1巨噬细胞倍半萜类

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青海牦牛源益生菌分离、鉴定及其益生特性的研究

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动物营养学报 2025年

作者：谢林林曹瑾赵玉琪张欣郝力壮简莹娜孙偲李军训宋洪宁王楠天津科技大学生物工程学院教育部工业发酵微生物学重点实验室青海大学青海省高原放牧家畜动物营养与饲料科学重点实验室青海大学畜牧兽医科学院青海省动物疾病病原诊断与绿色防控技术研究重点实验室青海百分牛生物科技有限公司山东泰山生力源集团股份有限公司

本研究旨在从青海省牦牛源样品中分离筛选可用于改善牦牛腹泻的潜在益生菌菌株,并评价其体外益生特性。试验首先从健康牦牛粪便和酸奶中分离纯化出乳酸菌,通过菌落形态观察、16S rDNA以及对部分菌株进行保守基因rpoA测序,并进行BLAST比... 详细信息

本研究旨在从青海省牦牛源样品中分离筛选可用于改善牦牛腹泻的潜在益生菌菌株,并评价其体外益生特性。试验首先从健康牦牛粪便和酸奶中分离纯化出乳酸菌,通过菌落形态观察、16S rDNA以及对部分菌株进行保守基因rpoA测序,并进行BLAST比对,对筛选菌株进行鉴定。然后,通过评价菌株的生长、耐酸、耐胆盐、自动聚集能力和疏水性等特性筛选出优异菌株,重点考察其对来自腹泻致死牦牛中分离的致病菌的抑制能力,同时对其抗生素耐药性、细胞黏附能力、抗氧化能力[2,2-二苯基-1-苦基肼(DPPH)自由基清除率、羟自由基清除率及还原能力]及抗炎能力[巨噬细胞释放一氧化氮(NO)]进行测定。结果表明:试验共获得8株乳酸菌,其中1株为罗伊氏黏液乳杆菌,3株为植物乳植杆菌,4株为屎肠球菌。其中,罗伊氏黏液乳杆菌QM11具有较强的耐酸和耐胆盐能力;自动聚集率和疏水率分别为(64.07±1.36)%和(26.90±1.51)%;对牦牛源致病性大肠杆菌QH01、QH02和QH03的抑菌率分别为(87.29±0.98)%、(74.67±1.28)%和(86.43±0.21)%,对金黄色葡萄球菌、单增李斯特菌和鼠伤寒沙门氏菌等多种病原指示菌的抑菌率达74%以上;对氨苄西林、青霉素、庆大霉素和链霉素等多种抗生素敏感。与对照菌株鼠李糖乳杆菌GG相比,罗伊氏黏液乳杆菌QM11对结肠细胞的黏附能力更强,黏附率为(54.38±2.15)%;菌悬液的抗氧化能力更强,DPPH自由基清除率、羟自由基清除率和还原能力分别为(4.19±1.03)%、(180.29±9.28)%和(6.07±0.60)%;抑制巨噬细胞释放NO的能力与鼠李糖乳杆菌GG相当。综上所述,本试验筛选出的罗伊氏黏液乳杆菌QM11可作为后续研制用于防治牦牛腹泻益生菌制剂的备选菌株。

关键词：牦牛益生菌筛选益生特性

猪场沼液中四环素对菌藻共生污水处理系统的影响

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生物学杂志 2025年

作者：程俊芳陈恒源郑华宝王敏浙江农林大学环境与资源学院浙江农林大学环境与资源学院浙江省土壤污染生物修复重点实验室

研究四环素质量浓度以及四环素降解菌Serratia entomophila strain TC-1对菌藻共生系统污染物去除率的影响,并通过扫描电镜观察和高通量测序技术,进一步分析微生物群落结构的变化,从而揭示在四环素胁迫下菌藻共生系统的污染物去除规律... 详细信息

研究四环素质量浓度以及四环素降解菌Serratia entomophila strain TC-1对菌藻共生系统污染物去除率的影响,并通过扫描电镜观察和高通量测序技术,进一步分析微生物群落结构的变化,从而揭示在四环素胁迫下菌藻共生系统的污染物去除规律和微生物响应机制。研究结果表明,四环素质量浓度越高,微藻的生物量越低,菌藻共生系统的氨氮去除率越低,当四环素质量浓度为50 mg/L时,叶绿素质量浓度为19.19 mg/L,菌藻共生系统的氨氮去除率最低,为75.27%。通过扫描电镜观察发现,细菌可以通过附着于微藻细胞表面和分泌胞外多聚物来减轻四环素的胁迫效应。通过微生物群落分析表明,四环素质量浓度对细菌群落结构的影响远大于降解菌的接种,降解菌的接种可以减轻低质量浓度四环素对细菌群落结构的影响。优势四环素降解菌Trichococcus减轻了低质量浓度四环素对菌藻共生系统的影响,优势抗逆菌Pseudomonas和反硝化聚磷菌Comamonas减轻了高质量浓度四环素对菌藻共生系统的影响。

关键词：菌藻共生系统四环素降解菌污染物去除微生物群落

1例急性淋巴细胞白血病并发黄曲霉菌感染的护理

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现代医药卫生 2025年

作者：杨惠尧刘艳霞张倩倩金京京张文宣赵增鑫解文君赵钰杰杜越冰天津中医药大学中国医学科学院血液病医院(中国医学科学院血液学研究所)/实验血液学国家重点实验室/国家血液系统疾病临床医学研究中心/细胞生态海河实验室

该文结合临床资料并回顾相关文献分析了1例急性淋巴细胞白血病合并皮肤黄曲霉菌真菌病的临床特点及护理经验。该案患者化疗后出现多处皮肤软组织感染，伴高热、高钾血症，合并多种影响创口愈合的因素，病理结果诊断为皮肤黄曲霉菌真菌... 详细信息

该文结合临床资料并回顾相关文献分析了1例急性淋巴细胞白血病合并皮肤黄曲霉菌真菌病的临床特点及护理经验。该案患者化疗后出现多处皮肤软组织感染，伴高热、高钾血症，合并多种影响创口愈合的因素，病理结果诊断为皮肤黄曲霉菌真菌感染。多学科专家会诊后，给予外科清创，配合全身治疗，患者生命体征平稳，好转出院。出院后继续门诊换药，至出院后22 d，全部创口愈合。

关键词：急性淋巴细胞白血病黄曲霉菌护理

经典名方化肝煎复方合煎与单煎化学成分和药效作用的差异性分析

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中国实验方剂学杂志 2025年

作者：王阳张高菊李玲陈莉萍张丽刘晓张玉玉崔源李明隆傅超美严鑫何宇新董芹西华大学食品与生物工程学院食品微生物四川省重点实验室四川省中药饮片有限责任公司成都中医药大学药学院西南中药资源国家重点实验室成都市中草药研究所

目的：通过定性和定量分析经典名方化肝煎合煎和单煎样品之间化学成分的差异，并对二者核心药效进行对比，探讨经典名方化肝煎复方制剂与单味药配方颗粒临床灵活应用的合理性。方法：采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱... 详细信息

目的：通过定性和定量分析经典名方化肝煎合煎和单煎样品之间化学成分的差异，并对二者核心药效进行对比，探讨经典名方化肝煎复方制剂与单味药配方颗粒临床灵活应用的合理性。方法：采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法（UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS）对化肝煎合煎与单煎样品进行定性鉴定分析，同时采用高效液相色谱法（HPLC）对合煎与单煎样品中指标成分栀子苷、芍药苷、橙皮苷、丹皮酚进行定量分析。采用高脂饮食诱导非酒精性脂肪肝大鼠模型比较单煎与合煎样品的药效差异。30只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组，洛伐他汀组(1.8 mg·kg-1)、合煎组(1.26 g·kg-1)、单煎组(1.18 g·kg-1)。造模成功后，洛伐他汀组、合煎组和单煎组每天灌胃给予相应剂量的药物，空白组和模型组灌胃给予等量生理盐水，给药4周后，采集大鼠血清及肝组织，检测大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）和高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）的水平，并对肝组织进行苏木素-伊红（HE）染色和油红O染色进行病理检查。结果：从化肝煎合煎和单煎样品中鉴定并归属70种化学成分，二者在成分组成上无明显差异。进一步测定4种核心指标成分的含量，结果表明，与单煎样品比较，合煎样品中栀子苷、芍药苷、橙皮苷、丹皮酚平均质量分数均显著升高（P细胞脂肪变性、脂肪堆积和炎性细胞浸润等病理变化，合煎和单煎样品在药效差异无统计学意义。结论：化肝煎复方合煎与单煎基准样品在化学组成上未见明显差异，但在4种指标成分含量上差异明显。二者均能显著改善非酒精性脂肪肝大鼠的脂质堆积和肝脏功能，可为经典名方复方制剂与单味药配方颗粒制剂的临床合理应用与评价提供参考依据。

关键词：化肝煎经典名方合煎单煎超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法(UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS) 含量测定非酒精性脂肪肝

肠型胃癌的超级增强子重塑特征及上调迁移诱导蛋白CEMIP表达的作用

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陆军军医大学学报 2025年

作者：彭仕银谭玉婷薛锐李先锋王涛储召乐刘碧颖陈东风王斌重庆大学医学院陆军特色医学中心消化内科消化系统肿瘤精准防治重庆市重点实验室

目的绘制肠型胃癌的超级增强子重塑图谱，揭示超级增强子的肿瘤生物学功能及可能激活的下游靶基因。方法收集陆军特色医学中心消化内科2022年1—12月就诊患者中的31例正常胃黏膜组织、23例肠型胃癌组织及9例肠型胃癌类器官进行靶向组... 详细信息

目的绘制肠型胃癌的超级增强子重塑图谱，揭示超级增强子的肿瘤生物学功能及可能激活的下游靶基因。方法收集陆军特色医学中心消化内科2022年1—12月就诊患者中的31例正常胃黏膜组织、23例肠型胃癌组织及9例肠型胃癌类器官进行靶向组蛋白H3K27ac修饰的染色质靶向捕获(Cleavage under targets and tagmentation， Cut&Tag)测序，基于生信工具描绘肠型胃癌的超级增强子重塑特征并鉴定关键靶基因；利用CRISPRi技术干预超级增强子，Western blot检测靶基因的表达，并检测对照组细胞及干预组细胞的增殖、迁移、侵袭能力。结果肠型胃癌发生了显著的超级增强子重塑，癌组织中的活性超级增强子可能抑制免疫应答和淋巴细胞增殖，并调节细胞黏附等恶性生物学行为；干预肿瘤细胞获得性超级增强子可下调细胞迁移诱导蛋白CEMIP表达，并抑制肿瘤细胞生长、侵袭及迁移。结论肠型胃癌发生显著的超级增强子重塑，后者可上调CEMIP基因表达，促进癌细胞生长、迁移和侵袭，可能是肿瘤治疗的候选新靶点。

关键词：肠型胃癌组蛋白H3K27ac 超级增强子细胞迁移诱导蛋白CEMIP

Nf1基因沉默对小鼠主动脉平滑肌细胞增殖与迁移及表型转化的影响

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中国动脉硬化杂志 2025年

作者：杨阳姚智超霍丽蓉首都医科大学附属复兴医院中心实验室

目的探究Nf1(neurofibromatosis type 1， Nf1)基因沉默对平滑肌细胞增殖和迁移的作用及可能的机制。方法以小鼠主动脉平滑肌细胞(mouse aortic vascular smooth muscle cells， MOVAS)为研究对象，用 Nf1 siRNA 转染 MOVAS后，RT-qPC... 详细信息

目的探究Nf1(neurofibromatosis type 1， Nf1)基因沉默对平滑肌细胞增殖和迁移的作用及可能的机制。方法以小鼠主动脉平滑肌细胞(mouse aortic vascular smooth muscle cells， MOVAS)为研究对象，用 Nf1 siRNA 转染 MOVAS后，RT-qPCR实验验证Nf1 siRNA转染MOVAS效率，实验分为Control 组、siRNA NC 组、Nf1 siRNA组。采用Ki-67免疫荧光实验检测MOVAS增殖情况，划痕实验、Transwell实验被用来评估Nf1基因沉默对 MOVAS迁移能力的差异，Western blot 实验检测Nf1基因沉默对MOVAS表型标志蛋白表达水平的影响，同时还检测了Ras下游信号ERK、p-ERK、AKT、p-AKT表达水平的差异。结果与对照组（Control组）相比，Nf1 siRNA组MOVAS增殖能力显著提高（升高33.23%，P＜0.05）、迁移能力显著增强（划痕实验表明增强35.47%，P＜0.01；Transwell 实验结果表明增强39.33%，P＜0.05），同时表现出收缩型蛋白平滑肌22α蛋白(smooth muscle 22α， SM22α)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin， α-SMA)、钙调蛋白1(calponin 1， CNN1)的表达降低(分别降低18.91%，P＜0.05；23.38%，P＜0.01；25.08%，P＜0.01)，合成型蛋白骨桥蛋白(osteopontin， OPN)表达增加 (增加58.70%，P＜0.05)，且ERK， AKT磷酸化的水平显著增加（分别增加33.30%，P＜0.05；2.42倍，P＜0.001）。结论Nf1基因沉默使MOVAS增殖与迁移能力显著增强并发生由收缩型向合成型的表型转化。

关键词：血管平滑肌细胞细胞增殖细胞迁移表型转化

突发性聋患者中性粒细胞与淋巴细胞比值的特点及临床意义

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临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2025年第1期 34-41页

作者：陈一博安云芳赵长青索利敏山西医科大学第二医院耳鼻咽喉头颈外科山西省气道炎性疾病神经免疫实验室

目的:炎症已被证实在突发性聋的发生发展中起重要作用，中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)是与炎症程度呈正相关的生物标志物，本研究旨在寻找突发性聋患者与正常人群之间血清NLR的差异性，检验NLR对突发性聋发生及预后的预测效能，以期对... 详细信息

目的:炎症已被证实在突发性聋的发生发展中起重要作用，中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)是与炎症程度呈正相关的生物标志物，本研究旨在寻找突发性聋患者与正常人群之间血清NLR的差异性，检验NLR对突发性聋发生及预后的预测效能，以期对突发性聋的临床诊疗起到指导作用。方法:本研究收集2023年1月至2024年3月收治的96例诊断为突发性聋的患者为病例组，以及同期收治的96例诊断为声带息肉的患者作为对照组。所有数据均在入院后收集，采用多因素logistic回归评估独立相关因素，构建列线图预测突发性聋发生的概率，使用受试者工作特性(ROC)曲线、校准曲线评估预测的准确性。结果:多因素逻辑回归结果显示，高水平NLR(OR2.215;95%CI 1.597～3.073;P<0.001)与突发性聋的发生独立相关，高龄(OR 1.036;95%CI 1.009～1.067;P=0.012)、高水平FIB(OR 2.35;95%CI 1.176～4.96;P=0.019)是突发性聋发生的危险因素，结合这3个因素进行森林图及列线图的绘制，ROC曲线及校准曲线表明该模型具有良好的临床实用性；低水平NLR(OR 0.598;95%CI0.439～0.816;P<0.001)与突发性聋的良好预后显著相关。结论:升高的NLR可作为预测突发性聋发生的独立危险因素；基于多因素logistic回归结果制作的列线图模型具有良好的预测效力；降低的NLR与突发性聋预后良好显著相关。

关键词：突发性聋中性粒细胞/淋巴细胞比值中性粒细胞/胆红素比值系统免疫炎症指数列线图

猪调节性T细胞分子标记物FoxP3单克隆抗体的制备与鉴定

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畜牧与兽医 2025年第1期57卷 43-49页

作者：蒋丹林佳琦胡鹏程郭博伦林新马燕梅福建农林大学动物科学学院/福建省畜禽病原感染与免疫学重点实验室福建福州350002

调节性T细胞(Treg)是具有免疫调节活性的淋巴细胞,通过抑制各种效应性淋巴细胞来诱导自身免疫耐受。FoxP3是CD4^(+)CD25^(+)Treg细胞重要的转录因子,对其分化发育和功能维持有着重要的调控作用,因此联合FoxP3抗原可以更好地识别CD4^(+)C... 详细信息

调节性T细胞(Treg)是具有免疫调节活性的淋巴细胞,通过抑制各种效应性淋巴细胞来诱导自身免疫耐受。FoxP3是CD4^(+)CD25^(+)Treg细胞重要的转录因子,对其分化发育和功能维持有着重要的调控作用,因此联合FoxP3抗原可以更好地识别CD4^(+)CD25^(+)Treg细胞。为了制备出特异性的猪Treg细胞表面标记物FoxP3的单克隆抗体,本研究选择抗原性较强的基因编码片段,构建了FoxP3抗原表位区段(1~840 bp)的原核表达质粒,诱导表达并纯化后,用目的蛋白免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合,通过间接ELISA、Western blot和间接免疫荧光的方法筛选能稳定分泌抗体的阳性杂交瘤细胞。结果:筛选到了5株效价较高的FoxP3单克隆抗体产生细胞(F4B9、F4A9、F1E12、F1A11和F4A10),均具有良好的特异性,能识别内源性和外源性FoxP3蛋白,且能稳定地分泌抗体,为定性或定量检测猪Treg细胞以及验证Treg细胞的功能奠定了基础。

关键词：猪 Treg细胞 FoxP3 抗体制备单克隆抗