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《中国兽药典》三部编制工作的思考——通用标准的必要性和可行性分析

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中国兽药杂志 2024年第7期 20-25页

作者：王忠田陈光华曹晓钰蒋桃珍张璐郝利华巩忠福中国兽医药品监察所农业农村部畜牧兽医局

本文系统分析了采用通用标准编制《中国兽药典》三部的必要性和可行性，并深入思考了实施通用标准后可能出现的问题及对策，为《中国兽药典》(2025年版)三部通用标准编制工作提供参考。

关键词：中国兽药典三部编制通用标准必要性可行性分析

电导抑制-离子色谱法测定有机酸化剂中11种有机酸含量

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动物营养学报 2024年第3期36卷 2031-2040页

作者：谢秀兰徐菲中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193

本试验旨在建立一种同时检测有机酸化剂中11种有机酸含量的分析方法。样品中有机酸经提取后,以0.5 mmol/L硫酸水溶液∶丙酮∶乙腈=84∶6∶10为淋洗液等度洗脱,经Organic Acids 250/7.8分析柱分离,柱温30℃,流速0.5 mL/min,进样体积20μL... 详细信息

本试验旨在建立一种同时检测有机酸化剂中11种有机酸含量的分析方法。样品中有机酸经提取后,以0.5 mmol/L硫酸水溶液∶丙酮∶乙腈=84∶6∶10为淋洗液等度洗脱,经Organic Acids 250/7.8分析柱分离,柱温30℃,流速0.5 mL/min,进样体积20μL,采用电导抑制检测器进行外标法定量。结果显示:11种有机酸含量在一定范围内线性关系良好(R^(2)≥0.9994),检出限介于0.01~0.11 mg/L,11种有机酸3个不同添加水平加标回收率处于92.9%~112.2%,相对标准偏差均小于2.4%。本方法简便高效,精密度、准确度良好,线性范围宽,能同时分离有机酸化剂中11种有机酸。

关键词：离子色谱有机酸化剂有机酸

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羊尿氮对苜蓿和高羊茅混播草地生物量和氮利用的影响

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草地学报 2024年第6期32卷 1864-1871页

作者：代先林马晓颖仝宗永王瑜李向林柴旭旭何峰中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193

为探究苜蓿(Medicago sativa L.)和高羊茅(Festuca arundinacea Schreb.)混播草地在放牧过程中对羊尿中氮的吸收规律,试验设置了苜蓿单播、高羊茅单播和苜蓿+高羊茅混播3种草地类型,以及是否施用羊尿2种模式,相互组合共计6个处理,研究... 详细信息

为探究苜蓿(Medicago sativa L.)和高羊茅(Festuca arundinacea Schreb.)混播草地在放牧过程中对羊尿中氮的吸收规律,试验设置了苜蓿单播、高羊茅单播和苜蓿+高羊茅混播3种草地类型,以及是否施用羊尿2种模式,相互组合共计6个处理,研究了稳定性同位素15N标记的模拟绵羊尿施入对不同处理地上地下生物量、羊尿氮回收率、生物固氮率与氮转移的变化规律。结果表明:混播地上生物量显著高于单播高羊茅,与不施入羊尿相比,施入羊尿显著提高了混播和高羊茅单播的地上生物量,提高了苜蓿和高羊茅的单株氮素累积量;施入羊尿后,苜蓿的生物固氮效率降低;不施用羊尿处理有9.42%的氮从苜蓿转移到高羊茅中,施入羊尿处理没有发现氮转移现象;混播下羊尿中氮的回收率显著高于苜蓿和高羊茅单播,且混播中高羊茅对羊尿中氮回收率显著高于苜蓿。苜蓿混播草地放牧利用能够兼顾高效生产和环境保护,是一种可持续的草地利用方式。

关键词：紫花苜蓿+高羊茅混播羊尿氮稳定性同位素氮利用

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MsWRKY33转录调控MsACS2影响紫花苜蓿耐盐性的研究

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草地学报 2024年第1期32卷 54-65页

作者：李心武敬也陈菲儿樊璐马琳王学敏中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193

乙烯作为重要的植物激素之一,在植物逆境胁迫应答中发挥重要作用。ACS基因是乙烯合成过程中的关键限速酶(ACC合成酶)基因,本研究通过探究紫花苜蓿MsWRKY33转录因子对ACS基因的调控关系,为MsWRKY33参与紫花苜蓿耐盐胁迫响应的具体调控机... 详细信息

乙烯作为重要的植物激素之一,在植物逆境胁迫应答中发挥重要作用。ACS基因是乙烯合成过程中的关键限速酶(ACC合成酶)基因,本研究通过探究紫花苜蓿MsWRKY33转录因子对ACS基因的调控关系,为MsWRKY33参与紫花苜蓿耐盐胁迫响应的具体调控机制奠定理论基础。利用同源克隆、载体构建、酵母单杂交、酵母双杂交、qRT-PCR等技术,验证MsWRKY33对AtACS2和MsACS2的转录调控,并对盐胁迫下转基因株系中MsACS2表达模式进行分析。结果显示:MsWRKY33转录因子可以与W-box元件特异性结合,且对AtACS2和MsACS2具有转录调控作用;MsWRKY33转基因株系中MsWRKY33基因的表达量显著高于对照,转基因株系中MsACS2的表达是在MsWRKY33基因大量表达后呈上升趋势,进一步说明紫花苜蓿MsACS2基因的表达可能受MsWRKY33转录因子的正向调控。因此,紫花苜蓿受到盐胁迫时可诱导MsWRKY33的表达,MsWRKY33转录因子通过正向调控MsACS2表达,可能影响乙烯合成,从而影响紫花苜蓿的盐胁迫响应。

关键词：紫花苜蓿酵母单杂交 MsWRKY33 MsACS2 耐盐性

猪传染性胃肠炎病毒RT-CPA检测方法构建及初步应用

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中国动物传染病学报 2024年

作者：赵子惠陈伯祥王佳成伟伟杨明李元新甘肃省畜牧兽医研究所

为开发一种猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）RT-CPA快速且准确的检测方法。本试验根据TGEV S基因的D序列，设计了3对引物，使用构建的重组质粒作为标准阳性对照，通过优化筛选条件并应用可视化核酸试纸条，成功建立了一种一步法TGEV RT-CPA... 详细信息

为开发一种猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）RT-CPA快速且准确的检测方法。本试验根据TGEV S基因的D序列，设计了3对引物，使用构建的重组质粒作为标准阳性对照，通过优化筛选条件并应用可视化核酸试纸条，成功建立了一种一步法TGEV RT-CPA检测方法。本实验筛选最优条件为：Mg2+浓度1.0 mmol/L，dNTP浓度0.8 mmol/L，Betaine浓度1.0 mol/L，BstDNA聚合酶浓度8.0U，反应温度63℃，反应时间60 min，AMV逆转录酶5U。本研究的扩增产物通过凝胶电泳显示出梯形条带，证明了其对TGEV的特异性检测和良好的重复性，灵敏度高达10拷贝/μL。初步应用显示，该方法与TGEV抗原快速检测试剂盒的符合率超过90%，显示了高灵敏度。TGEV RT-CPA方法免去了RNA提取和cDNA合成的步骤，能够完成一步检测。此外，该方法不需要特殊仪器，适用于现场快速检测TGEV，为快速诊断和防控猪传染性胃肠炎提供了新技术。

关键词：猪传染性胃肠炎病毒 RT-CPA S基因检测方法

紫花苜蓿MsSPL17的克隆及生物学功能验证

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中国农业科学 2024年第17期57卷 3335-3351页

作者：陈菲儿张志鹏蒋庆雪马琳王学敏中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

【目的】分枝是决定紫花苜蓿产量的重要影响因子，SPL家族基因是一类重要的转录因子，其成员参与多种植物的分枝（分蘖）发育过程。研究紫花苜蓿MsSPL17的生物学功能，鉴定MsSPL17在调控紫花苜蓿分枝发育中的作用，为紫花苜蓿高产生物... 详细信息

【目的】分枝是决定紫花苜蓿产量的重要影响因子，SPL家族基因是一类重要的转录因子，其成员参与多种植物的分枝（分蘖）发育过程。研究紫花苜蓿MsSPL17的生物学功能，鉴定MsSPL17在调控紫花苜蓿分枝发育中的作用，为紫花苜蓿高产生物育种提供重要参考。【方法】运用生物信息学方法分析MsSPL17序列，并构建系统进化树；采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法分析MsSPL17在紫花苜蓿中的组织表达特异性；利用烟草瞬时表达系统确定MsSPL17蛋白的亚细胞定位；利用酵母系统检测MsSPL17的转录自激活活性；利用农杆菌介导转化的方法获得转基因紫花苜蓿并进行表型分析；利用转录组分析，筛选出在转基因株系中的差异表达基因，并验证用于后续研究。【结果】MsSPL17包含一个长度为1 011 bp的开放阅读框，编码由366个氨基酸构成的蛋白，属于SBP蛋白家族。系统进化分析表明，MsSPL17及其同源基因的进化与物种的分化高度相似，表明其是一个功能保守的基因。MsSPL17在紫花苜蓿分枝发育关键时期中的各组织包括茎、茎节、叶、顶端中均有表达，暗示该基因对紫花苜蓿分枝性状具有重要调控作用。亚细胞定位试验表明，MsSPL17蛋白定位于细胞核中。转录自激活试验表明，MsSPL17不具有自激活活性，可后续进行互作蛋白的筛选。MsSPL17转基因沉默株系出现分枝数和茎节数明显增多、节间长度缩短、营养品质升高的显著表型。【结论】成功克隆了紫花苜蓿MsSPL17，其在紫花苜蓿分枝发育关键组织中均有表达，它编码的蛋白定位于细胞核中且无转录自激活活性。获得具有多分枝性状的转基因株系，其产量方面出现分枝数显著增多等表型，品质方面粗蛋白含量提高。

关键词：紫花苜蓿 SPL基因分枝发育转录组 RNAi沉默

坡向对三江源区3种栽培植物生长及光合特征的影响

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草业科学 2024年第1期41卷 134-142页

作者：宋志萍王晓丽胡晓晴刘和青海省畜牧兽医科学院青海西宁810000

坡向作为主要地形因子,影响植物的生长和光合特征。本研究以果洛州达日县两种坡向(阴坡、阳坡)、3种栽培植物[青海草地早熟禾(Poa pratensis‘Qinghai’)、垂穗披碱草(Elymus nutans)和发草(Deschampsia cespitosa)]为对象,监测分析不... 详细信息

坡向作为主要地形因子,影响植物的生长和光合特征。本研究以果洛州达日县两种坡向(阴坡、阳坡)、3种栽培植物[青海草地早熟禾(Poa pratensis‘Qinghai’)、垂穗披碱草(Elymus nutans)和发草(Deschampsia cespitosa)]为对象,监测分析不同坡向不同植物的生长及光合特征,筛选出不同植物适宜的生境,为三江源区“黑土山”植被修复提供科学依据。结果显示:1)发草生长特性(株高、叶长、茎粗、叶面积和地上生物量)为阴坡显著高于阳坡(P0.05)。2)青海草地早熟禾的蒸腾速率(T_(r))、气孔导度(G_(s))为阳坡显著高于阴坡(P<0.05);垂穗披碱草的胞间CO_(2)浓度(C_(i))为阴坡显著高于阳坡(P<0.05);发草的C_(i)、G_(s)为阳坡显著高于阴坡(P<0.05)。研究结果表明,发草适宜在阴坡生长,阳坡生境利于青海草地早熟禾光合作用,垂穗披碱草在阳坡种植有利于其生长。

关键词：坡向发草垂穗披碱草青海草地早熟禾生长特性光合特征

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基于16S rRNA测序分析敲除基因ZBED6后巴马猪肠道微生物菌群的变化

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畜牧兽医学报 2024年第10期 4302-4310页

作者：徐成田文杰马月辉王圣楠蒋琳王丹丹中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

旨在探究在巴马猪中ZBED6基因敲除之后肠道菌群的变化和肌肉表型的关联。本研究以5月龄野生型和ZBED6敲除型广西巴马小型猪为研究对象，按性别和基因型分成3组进行比较，分别是野生型公猪比野生型母猪(公WT:母WT)、野生型母猪比敲除型母... 详细信息

旨在探究在巴马猪中ZBED6基因敲除之后肠道菌群的变化和肌肉表型的关联。本研究以5月龄野生型和ZBED6敲除型广西巴马小型猪为研究对象，按性别和基因型分成3组进行比较，分别是野生型公猪比野生型母猪(公WT:母WT)、野生型母猪比敲除型母猪(母WT:母KO)、野生型公猪比敲除型公猪(公WT:公KO),利用16S rRNA基因的高通量测序技术分析各肠段微生物组成。结果表明：1)在巴马猪中，大肠的菌群多样性显著高于小肠；2)与雌性野生型猪相比，雄性野生型猪瘦肉率更高，回肠苏黎世杆菌属、盲肠链球菌属、直肠消化链球菌属在雄性野生型猪中显著富集，回肠乳杆菌属在雌性野生型猪中显著富集；3)敲除ZBED6之后，猪的肌肉生长增加。肠道菌群组成显示，母猪的回肠中乳杆菌含量显著下降，盲肠中SMB53的含量显著上升。敲除ZBED6后，公猪直肠中普雷沃菌属和瘤胃球菌属的含量显著上升，盲肠中SMB53的含量显著上升。结果提示，苏黎世杆菌属、链球菌属、消化链球菌属和乳杆菌属在肠道内的差异可能会影响能量代谢从而促进雄性野生型猪的肌肉生长；敲除了ZBED6之后，猪的盲肠中SMB53丰度的显著增加可能是导致肌肉增多的一个因素。

关键词：巴马猪 ZBED6 肠道微生物 SMB53

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猪卵母细胞玻璃化冷冻损伤的缓解策略

畜牧兽医学报 2024年

作者：孙雅雯陈思颍李伉冷璇王栋庞云渭中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

卵母细胞的冷冻保存是人类和动物辅助生殖中长期储存遗传资源的重要策略之一。然而，由于卵母细胞的表面积/体积比小、细胞渗透性差，在冷冻过程中极易受到冰晶形成、渗透性休克、氧化应激和冷冻保护剂毒性等损伤，严重降低其解冻后的... 详细信息

卵母细胞的冷冻保存是人类和动物辅助生殖中长期储存遗传资源的重要策略之一。然而，由于卵母细胞的表面积/体积比小、细胞渗透性差，在冷冻过程中极易受到冰晶形成、渗透性休克、氧化应激和冷冻保护剂毒性等损伤，严重降低其解冻后的发育能力。与其他动物相比，猪卵母细胞中丰富的脂滴含量降低了其低温耐受性，冷冻保存难度更大。尽管可以从玻璃化未成熟卵母细胞中获得活仔猪，但与新鲜卵母细胞相比，玻璃化冷冻卵母细胞的发育能力还有待进一步提升。本文主要从玻璃化冷冻猪卵母细胞的损伤类型、受损机制、缓解冷冻损伤的策略等方面进行综述，为进一步建立和完善猪卵母细胞玻璃化冷冻保存方案提供参考。

关键词：猪卵母细胞玻璃化冷冻冷冻损伤