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高葡萄糖诱导的氧化应激和炎症反应介导髓核细胞的凋亡和细胞外基质代谢失衡

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医学分子生物学杂志 2025年第1期22卷 48-54页

作者：郭晓燕曹胜王玲玲徐昆杨佳琦杨雪王晶承德医学院预防医学教研室河北省承德市067000 承德医学院附属医院脊柱外科河北省承德市067000

目的探讨高浓度葡萄糖处理对大鼠髓核细胞(nucleus pulposus cells,NPC)凋亡和细胞外基质(extracellular matrix,ECM)代谢的影响,并初步探讨可能的潜在机制。方法从雄性Wistar大鼠腰椎组织中分离NPC。将NPC分为6组:对照组,葡萄糖5、15、... 详细信息

目的探讨高浓度葡萄糖处理对大鼠髓核细胞(nucleus pulposus cells,NPC)凋亡和细胞外基质(extracellular matrix,ECM)代谢的影响,并初步探讨可能的潜在机制。方法从雄性Wistar大鼠腰椎组织中分离NPC。将NPC分为6组:对照组,葡萄糖5、15、25 mmol/L组,葡萄糖+NAC组(25 mmol/L葡萄糖+3 mmol/L抗氧化剂NAC),葡萄糖+PDTC组(25 mmol/L葡萄糖+10μmol/L NF-κB通路抑制剂PDTC)。分别采用CCK-8、流式细胞术检测细胞活力和凋亡。采用荧光探针检测细胞内活性氧(reactive ox-ygen species,ROS)水平。酶联免疫吸附法用于检测IL-1β、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。蛋白质印迹检测相关蛋白表达。结果与对照组比较,5 mmol/L葡萄糖组和15 mmol/L葡萄糖组的细胞活力和凋亡无明显变化,而25 mmol/L葡萄糖组细胞活力明显降低、细胞凋亡明显增加(P细胞内ROS水平和上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α水平均明显降低(P细胞p-P65/P65和p-IκBα/IκBα水平均明显降低(P<0.05)。结论高葡萄糖处理可通过诱导氧化应激和炎症反应促进NPC的凋亡和ECM降解,这一过程涉及其对ROS/NF-κB信号通路的激活。

关键词：高糖椎间盘退行性变髓核细胞氧化应激炎症细胞外基质

结直肠癌中KRAS、NRAS基因突变与临床病理特征的关系

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中国老年学杂志 2019年第9期39卷 2110-2113页

作者：潘理会李育庄李春辉承德医学院血流变学与分子细胞学研究室河北承德0670000 承德医学院附属医院病理科河北承德0670000

目的探讨结直肠癌(CRC)中大鼠肉瘤病毒癌基因(KRAS)、大鼠肉瘤病毒转化基因(NRAS)基因的常见突变类型与临床病理参数的关系。方法从CRC石蜡包埋组织中提取基因组DNA,采取实时荧光定量PCR法进行KRAS、NRAS基因扩增,分析其突变状态与CRC... 详细信息

目的探讨结直肠癌(CRC)中大鼠肉瘤病毒癌基因(KRAS)、大鼠肉瘤病毒转化基因(NRAS)基因的常见突变类型与临床病理参数的关系。方法从CRC石蜡包埋组织中提取基因组DNA,采取实时荧光定量PCR法进行KRAS、NRAS基因扩增,分析其突变状态与CRC临床病理参数的关系。结果检测到86例(36.1%)KRAS基因突变,总突变率为11例(4.6%)NRAS基因突变。不同淋巴结转移及Duke分期的组间KRAS突变差异有统计学意义(P学分型、分化程度、浸润深度的组间差异无统计学意义(P>0.05);NRAS突变在不同年龄、性别、肿瘤发生部位、组织学类型、分化程度、淋巴结转移、Duke分期及浸润深度的组间差异均无统计学意义(P>0.05);KRAS与NRAS二者之间突变无相关性。结论 CRC中KRAS突变较高,NRAS突变相对较低;KRAS突变与CRC的侵袭、转移有关,二者在CRC的进程中可能是独立发挥着促进作用。

关键词：结直肠癌 KRAS基因 NRAS基因突变

侧脑室注射促性腺激素抑制激素/RF酰胺相关肽-3对卵巢摘除术后补充雌激素大鼠子宫腔液影响的蛋白质组学分析

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解剖学报 2021年第4期52卷 499-505页

作者：赵雪莹司丽娜魏萌乔跃兵杨松鹤程露阳承德医学院免疫学教研室承德医学院人体解剖学与组织学胚胎学教研室河北承德067000

目的运用生物信息学方法分析侧脑室注射促性腺激素抑制激素(GnIH)/RF酰胺相关肽-3(RFRP-3)对卵巢摘除术补充雌激素(OEP)大鼠子宫腔液蛋白的影响,探索GnIH/RFRP-3影响子宫的分子机制。方法本研究通过液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术结... 详细信息

目的运用生物信息学方法分析侧脑室注射促性腺激素抑制激素(GnIH)/RF酰胺相关肽-3(RFRP-3)对卵巢摘除术补充雌激素(OEP)大鼠子宫腔液蛋白的影响,探索GnIH/RFRP-3影响子宫的分子机制。方法本研究通过液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术结合生物信息学分析侧脑室微量注射GnIH对OEP模型大鼠(n=30)子宫腔液蛋白的影响。比较侧脑室注射GnIH/RFRP-3实验组(n=15,给予2 g/L RFRP-3,16μl/kg)与生理盐水对照组(n=15,给予生理盐水16μl/kg) 6 h后子宫腔液的蛋白质组分,利用Uni Prot数据库筛选差异蛋白并对所得差异蛋白进行基因本体论(GO)富集分析和京都基因与基因百科全书(KEGG)通路分析。从STRING数据库获得蛋白相互作用数据,利用Cytoscape 3.7.1软件构建蛋白相互作用网络(PPI)并筛选中心节点蛋白。结果应用LC-MS/MS技术所得质谱数据利用Uni Prot数据库进行搜索鉴定,筛选出差异蛋白419个,其中279个上调,138个下调;GO功能富集分析显示,差异蛋白主要富集于对有机物质的反应,对内源性刺激的反应,对含氧化合物的反应等生物过程;KEGG通路分析显示,差异蛋白在糖酵解、碳代谢、肌动蛋白骨架调节、甲状腺激素合成等代谢途径富集(P<0.05);分析蛋白相互作用网络获得5个中心节点蛋白:白蛋白(Alb)、α-烯醇化酶1(Eno1)、过氧化物酶6(Prdx6)、组织型基质金属蛋白酶抑制剂1(Timp1)、Ras相关C3肉毒素底物1 (Rac1)。结论本实验结果提示,GnIH可能通过下丘脑-垂体生殖轴调节子宫腔液蛋白的分泌,并可能通过上调Alb、Eno1和Prdx6,下调Timp1和Rac1,调节子宫生理及病理过程。

关键词：促性腺激素释放激素子宫腔液卵巢摘除术补充雌激素生物信息学大鼠

333例社区获得性肺炎住院儿童中人偏肺病毒和博卡病毒的分子流行及临床特征

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中华实验和临床病毒学杂志 2019年第3期33卷 261-266页

作者：王倩苏萌李丹杜娈英章青王宏刘建英谢广成承德医学院病原生物学教研室承德医学院病原生物学教研室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所承德医学院病原防控研究室承德医学院病原生物学教研室承德医学院病原防控研究室承德医学院病原防控研究室承德医学院第二临床教学医院

目的了解人偏肺病毒和博卡病毒在肺炎住院儿童中的分子流行及临床特征。方法 2017年11月至2018年5月收集因社区获得性肺炎在承德医学院第二临床学院儿科住院儿童的咽拭子标本333份,并收集患者的临床信息。血清学检测腺病毒,呼吸道合胞... 详细信息

目的了解人偏肺病毒和博卡病毒在肺炎住院儿童中的分子流行及临床特征。方法 2017年11月至2018年5月收集因社区获得性肺炎在承德医学院第二临床学院儿科住院儿童的咽拭子标本333份,并收集患者的临床信息。血清学检测腺病毒,呼吸道合胞病毒,流感病毒,副流感病毒的IgM抗体,RT-PCR或PCR检测人偏肺病毒,人博卡病毒,腺病毒,呼吸道合胞病毒和人冠状病毒。结果血清学检测显示43例患者为乙型流感病毒IgM阳性、19例患者为副流感病毒IgM阳性、3例患者为呼吸道合胞病毒IgM阳性、2例患者为腺病毒IgM阳性。PCR或RT-PCR结果显示80例患者为人偏肺病毒感染(其中71例为单独感染、8例为共感染、1例为三重感染)、22例患者为人博卡病毒感染(其中14例为单独感染、7例为共感染、1例为三重感染)、6例患者为腺病毒感染(其中4例为单独感染、1例为共感染、1例为三重感染)、呼吸道合胞病毒和人冠状病毒感染患者各1例且为单独感染。80例人偏肺病毒感染患者中5岁以下患者为39例(11.7%)、5岁以上患者为41例(12.3%)。重症组病毒阳性率为45.0%(18/40),轻症组病毒阳性率为27.99%(82/293),重症组病毒阳性率高于轻症组(P＝0.042)。重症患者在年龄(P＝0.000)、发热高峰(P＝0.035)、住院时间(P＝0.000)、中性粒细胞比例(P＝0.000)和淋巴细胞比例(P＝0.000)与轻症患者相比有显著差异。结论多种呼吸道病毒感染可引起社区获得性肺炎、应加强对人偏肺病毒和人博卡病毒的流行监测。

关键词：社区获得性肺炎人偏肺病毒人博卡病毒住院儿童

2022—2023年承德市呼吸道合胞病毒的暴发流行及其临床特征研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2024年第2期44卷 155-161页

作者：马倩格高姝畅郭心悦严梦瑶户祖熙谢广成李涛承德医学院第二临床学院儿科承德067000 承德医学院病原生物学教研室承德067000

目的确定呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)在承德市的流行情况及临床特征。方法收集2022年8月—2023年6月因呼吸道感染在承德市中心医院儿科住院治疗的患儿咽拭子478份及其临床信息,实时定量PCR检测A亚型和B亚型RSV的... 详细信息

目的确定呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)在承德市的流行情况及临床特征。方法收集2022年8月—2023年6月因呼吸道感染在承德市中心医院儿科住院治疗的患儿咽拭子478份及其临床信息,实时定量PCR检测A亚型和B亚型RSV的分子流行情况,对RSV感染患者的临床特征进行分析。结果67.57%(323/478)的住院患儿为RSV阳性,RSV呈暴发流行且均为RSV-A型,2022年11—12月和2023年5—6月为RSV-A型的2次感染高峰。RSV-A型阳性患儿中,86.07%(278/323)为合并其他病原体检出病例,其中与细菌共检出的例数最多,以肺炎链球菌为主,肺炎克雷伯菌次之。流感病毒A型是最常见的共检出病毒。与RSV-A型共检出患儿组相比,RSV-A型单独检出组的乳酸脱氢酶(Z=2.396,P=0.017)较高,且高于正常高值;RSV-A型共检出组的白细胞计数(Z=2.417,P=0.016)、中性粒细胞比例(Z=3.218,P=0.001)、C-反应蛋白(Z=1.998,P=0.046)和肌酐(Z=2.107,P=0.035)较高,淋巴细胞比例(Z=3.205,P=0.001)较低,但位于正常值范围。RSV-A型合并检出细菌或其他病毒的患儿临床特征无差异(P均>0.05)。结论RSV-A型是承德市2022—2023年呼吸道感染患儿的主要病原体,且多与细菌共检出。RSV-A型检测阳性患儿的临床特征与RSV-A型是否合并其他呼吸道病原体情况相关。

关键词：呼吸道合胞病毒流行特征临床特征儿童

干细胞转录因子OCT4在结直肠癌组织中的表达及其意义

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临床与实验病理学杂志 2018年第1期34卷 86-88页

作者：程玉赵醒次云哲严鹏纪海茹承德医学院病理教研室承德067000 承德医学院附属医院病理科承德067000 承德医学院组织与胚胎学教研室承德067000 承德医学院形态学实验中心承德067000

目的探讨干细胞转录因子OCT4在结直肠癌组织中的表达及临床意义。方法应用免疫组化EnVision两步法及Western blot法检测60例结直肠癌手术切除组织及癌旁正常组织中OCT4的表达,分析其与结直肠癌临床病理特征的关系,运用Kaplan-Meier法分... 详细信息

目的探讨干细胞转录因子OCT4在结直肠癌组织中的表达及临床意义。方法应用免疫组化EnVision两步法及Western blot法检测60例结直肠癌手术切除组织及癌旁正常组织中OCT4的表达,分析其与结直肠癌临床病理特征的关系,运用Kaplan-Meier法分析OCT4表达与结直肠癌患者总生存率的关系。结果结直肠癌组织中OCT4的阳性率为80.00%,高于癌旁正常组织(16.67%),差异有统计学意义(P0.05)。Western blot实验显示:结直肠癌组织中OCT4蛋白的相对表达量为7.70±0.07,高于癌旁正常组织(0.70±0.07),差异有统计学意义(P0.05)。生存分析显示:OCT4阳性患者的总生存期低于阴性患者。结论 OCT4在结直肠癌中过表达,可作为预测结直肠癌患者预后的潜在分子标志物。

关键词：结直肠肿瘤干细胞转录因子 OCT4 免疫组织化学 Western blot 预后

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质谱法分析旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白的组分

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2016年第1期34卷 53-57页

作者：罗婧梅程露阳关晓东李丹于莉杜娈英承德医学院病原生物学教研室承德067000 承德医学院免疫学教研室承德067000 承德石油高等专科学校机械工程系承德067000

目的分析旋毛虫（Trichinella spiralis）肌幼虫排泄分泌蛋白（excretory-secretory protein,ESP）的组分,寻找其抗肿瘤活性组分。方法收集纯净的旋毛虫脱囊肌幼虫,制备旋毛虫肌幼虫ESP。采用15%十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS... 详细信息

目的分析旋毛虫（Trichinella spiralis）肌幼虫排泄分泌蛋白（excretory-secretory protein,ESP）的组分,寻找其抗肿瘤活性组分。方法收集纯净的旋毛虫脱囊肌幼虫,制备旋毛虫肌幼虫ESP。采用15%十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分离ESP,将分离获得的所有蛋白条带进行胰蛋白酶酶解,采用液质联用质谱法（LC-MS/MS）进行鉴定。利用Gene Ontology（GO）对已鉴定蛋白质进行细胞组分、分子功能和生物过程的富集分析。结果经SDS-PAGE电泳分离获得清晰的蛋白质条带,相对分子质量（Mr）为10 000~142 000。质谱分析共鉴定出162种蛋白质,其中63种为已明确鉴定的蛋白质,34种为假定蛋白质,65种为未鉴定的蛋白质。鉴定出6种与抗肿瘤相关的蛋白质,即原肌球蛋白、组蛋白H2A、剪切聚腺苷酸化特异因子亚基2、Kazal 4型丝氨酸蛋白酶抑制剂、犰狳极性蛋白和真核起始因子4A。GO富集分析显示,已鉴定的蛋白质具有54种不同的分子功能,参与细胞构成并参与382种生物过程。结论旋毛虫肌幼虫ESP组分复杂,有多种未鉴定的蛋白质,从已知的63种蛋白质中筛选出6种与抗肿瘤相关的蛋白质。

关键词：旋毛虫排泄分泌蛋白 LC-MS/MS 质谱分析

旋毛虫肌幼虫ESPs作用于小细胞肺癌H446细胞蛋白组分变化分析

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中国人兽共患病学报 2020年第10期36卷 821-826页

作者：李美辰潘靖丹范泽华陈万楼陈彩铃吴合亮李天歌孙亚杰杜娈英承德医学院病原生物学教研室承德067000

目的分析旋毛虫(Trichinella spiralis)肌幼虫排泄分泌蛋白(excretory-secretory proteins,ESPs)作用于小细胞肺癌H446细胞后蛋白组分的变化。方法制备旋毛虫肌幼虫ESPs,把H446细胞分成实验组和对照组。实验组加入0.85 mg/mL ESPs,对照... 详细信息

目的分析旋毛虫(Trichinella spiralis)肌幼虫排泄分泌蛋白(excretory-secretory proteins,ESPs)作用于小细胞肺癌H446细胞后蛋白组分的变化。方法制备旋毛虫肌幼虫ESPs,把H446细胞分成实验组和对照组。实验组加入0.85 mg/mL ESPs,对照组加入不含血清的RPMI1640培养基,24 h后收集细胞并提取总蛋白,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离蛋白后酶解,采用液质联用质谱法(LC-MS/MS)对酶解产物进行鉴定,通过Gene Ontology(GO)分析,对鉴定出的实验组与对照组有差异的蛋白质的细胞组分、分子功能和生物过程进行富集分析。结果实验组共鉴定出240种蛋白质,其中有204种为已明确鉴定的蛋白质,22种为未明确鉴定的蛋白质,14种为假定蛋白质。从已知的204种蛋白质中检索出1种与存在于旋毛形肌幼虫排泄分泌蛋白中且与抗肿瘤相关的蛋白质H2A(histone 2A)。对照组鉴定出233种蛋白质。实验组和对照组重合蛋白质191种,非重合蛋白分别有49种和42种。结论旋毛虫肌幼虫ESPs作用于H446细胞后,细胞内蛋白组分发生了复杂变化,提示其抗肿瘤作用机制和过程复杂。

关键词：旋毛虫排泄分泌蛋白 LC-MS/MS 质谱分析

Th1型细胞因子在胶原蛋白诱导性关节炎小鼠血清中的动态变化

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细胞与分子免疫学杂志 2014年第3期30卷 250-253页

作者：郭明封桂英郭亚春宋鸿儒邢恩鸿潘福栋安高承德医学院承德医学院附属医院

目的研究鸡Ⅱ型胶原蛋白诱导性关节炎(CIA)小鼠血清Th1型细胞因子IFN-γ、IL-2、TNF-α的动态变化。方法 72只DBA1/J小鼠随机分为正常对照组(每组6只)和模型组(每组12只),分别在加强免疫后第7、14、21、35天,无菌摘眼球取血清,应用流式... 详细信息

目的研究鸡Ⅱ型胶原蛋白诱导性关节炎(CIA)小鼠血清Th1型细胞因子IFN-γ、IL-2、TNF-α的动态变化。方法 72只DBA1/J小鼠随机分为正常对照组(每组6只)和模型组(每组12只),分别在加强免疫后第7、14、21、35天,无菌摘眼球取血清,应用流式细胞术检测各组小鼠血清中细胞因子IFN-γ、IL-2、TNF-α在关节炎不同时期的动态变化情况。结果模型组IFN-γ在加强免疫后第7天和第14天显著升高(P0.05);模型组IL-2和TNF-α在加强免疫后第7天上升明显,与正常组比较有统计学意义(P学意义(P>0.05)。结论 CD4+Th1型细胞因子参与CIA发病全过程,而且在不同的发病阶段其相关细胞因子的变化与关节炎的炎症进展有一定关系。

关键词：胶原蛋白诱导性关节炎细胞因子流式细胞术 IL-2