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嗜盐菌中四氢嘧啶的提取工艺优化与主要成分鉴定

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生物学杂志 2025年第1期42卷 105-111,130页

作者：吕传波朱德锐邢江娃李永臻沈国平青海大学医学院基础医学部西宁810016

为克服四氢嘧啶纯化工艺过程复杂且成本较高等缺点,拟建立一套简单可行的四氢嘧啶纯化方法。首先比较不同处理方法对嗜盐菌胞内四氢嘧啶的提取效果以确定最优提取条件,其次对四氢嘧啶粗提物做脱盐和脱色处理,再结合离子交换法和溶析结... 详细信息

为克服四氢嘧啶纯化工艺过程复杂且成本较高等缺点,拟建立一套简单可行的四氢嘧啶纯化方法。首先比较不同处理方法对嗜盐菌胞内四氢嘧啶的提取效果以确定最优提取条件,其次对四氢嘧啶粗提物做脱盐和脱色处理,再结合离子交换法和溶析结晶进行精细纯化以获得四氢嘧啶纯品,并通过UHPLC-MS联用鉴定四氢嘧啶提取物中的主要成分及残留物。结果表明,乙醇提取法最适用于胞内四氢嘧啶的快速提取,甲醇除盐和活性炭脱色效果显著,HPLC及MS检测所得样品中主要成分为四氢嘧啶无误,四氢嘧啶纯度为95.01%,收率达到46.41%。此方法操作简单且成本较低,可以满足小规模提取四氢嘧啶的需求,为后续四氢嘧啶的高产菌株筛选和应用价值开发提供技术支持。

关键词：嗜盐菌四氢嘧啶分离纯化离子交换树脂

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杜仲多糖对阿尔兹海默症小鼠脑组织神经炎症的改善作用

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西北农林科技大学学报(自然科学版) 2025年 1-8页

作者：赵永康赵文星柴学军任多多朱晓岩陈树林赵善廷西北农林科技大学动物医学院西安医学院基础医学部

【目的】研究杜仲多糖对阿尔兹海默症(Alzheimer’s diseas,AD)小鼠神经炎症的改善作用,为中药治疗阿尔兹海默症提供新思路。【方法】采用三相分离技术提取杜仲多糖。使用3月龄5×FAD小鼠作为AD模型小鼠,以3月龄C57BL/6J小鼠作为野生型... 详细信息

【目的】研究杜仲多糖对阿尔兹海默症(Alzheimer’s diseas,AD)小鼠神经炎症的改善作用,为中药治疗阿尔兹海默症提供新思路。【方法】采用三相分离技术提取杜仲多糖。使用3月龄5×FAD小鼠作为AD模型小鼠,以3月龄C57BL/6J小鼠作为野生型小鼠。将小鼠分为野生型对照组、AD模型组和AD+杜仲多糖组,野生型对照组和AD模型组小鼠饲喂标准饲料,AD+杜仲多糖组小鼠饲喂添加0.25%(质量分数)杜仲多糖的标准饲料,小鼠饲喂至9月龄时终止。采集各组小鼠脑组织,使用免疫荧光染色对神经炎症相关小胶质细胞进行分析,探究杜仲多糖对AD小鼠神经炎症相关胶质细胞的改善作用。【结果】杜仲多糖可极显著抑制AD模型小鼠大脑海马区小胶质细胞和星形胶质细胞的异常增殖,改善小胶质细胞的形态,并可抑制海马区小胶质细胞的异常激活,逆转阿尔兹海默症小鼠中小胶质细胞形态向促炎表型的异常转变。【结论】杜仲多糖能够显著改善AD小鼠神经炎症相关胶质细胞的状态,具有开发为AD治疗药物的潜力。

关键词：杜仲多糖阿尔兹海默症神经炎症小胶质细胞星形胶质细胞

基于二代测序的肝泡型包虫病患者肠道菌群差异性分析

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中华预防医学杂志 2025年第1期59卷 101-109页

作者：马小亚阿祥仁马继登周健武程鹏唐赟青海大学医学院基础医学部西宁810016 青海省人民医院医学检验科西宁810007

本研究通过宏基因组测序技术,探讨肝泡型包虫患者肠道菌群的差异性,寻找疾病进程中可能起作用的肠道微生物成员。采用病例对照研究,纳入2023年10月至2024年1月期间,青海省人民医院收治的肝泡型包虫病患者及就诊健康体检的个体的粪便样... 详细信息

本研究通过宏基因组测序技术,探讨肝泡型包虫患者肠道菌群的差异性,寻找疾病进程中可能起作用的肠道微生物成员。采用病例对照研究,纳入2023年10月至2024年1月期间,青海省人民医院收治的肝泡型包虫病患者及就诊健康体检的个体的粪便样本。包括实验组(AE组)10例肝泡型包虫病的患者,对照组(NC组)9例健康体检者。采用Illumina Novaseq 6000测序平台对这两组样本进行宏基因组测序,使用fastp(v0.20.1)去除接头,bbmap(v38.93-0)去除宿主化序列,MEGAHIT(v1.2.9)进行序列拼接,prodigal(v2.6.3)对拼接的scaffold进行ORF预测并翻译为氨基酸序列,MMSeqs2(v13.45111)构建非冗余基因集,salmon(v1.8.0)与非冗余基因集进行比对。通过非冗余数据库对物种进行注释,计算出各样本中的物种丰度,用Wilcoxon秩和检验对两组进行检验。最后利用线性判别分析统计两组肠道菌群差异,利用冗余分析(RDA)分析肠道差异菌群与临床指标之间的相关性。结果显示,各样本的有效数据量分布在10.41~12.46 G,去冗余后构建gene catalogue(非冗余基因集)中ORF数目为4951408,非冗余基因与NR数据库比对,其注释率为97.97%。两组研究对象年龄分别为:NC组(44.78±4.58)岁,AE组(42.90±10.44)岁,差异无统计学意义(t=0.530,P=0.476)。两组体重指数(BMI)(t=2.368,P=0.142)、性别(χ^(2)=0.200,P=0.655)、饮食习惯相匹配。AE组α多样性没有显著的统计学差异(ACE指数,t=0.942;chao1指数,t=0.947;shannon指数,t=0.813,simpson指数,t=0.613,P>0.05),而β多样性分析显示两组群落的整体结构上存在明显的差异(Stress=0.0545)。在门水平一共注释到120个物种,其中有差异的有2个。而属水平注释到1736个物种,有差异的为69个,在种水平有差异的是309个。AE组属水平上拟杆菌属、埃希氏菌属、梭菌属、另枝菌属、瘤胃球菌属、颤螺菌属丰度排名前6;而NC组中西加特罗拉属(Segatella)、普雷沃氏菌属、粪杆菌属、罗斯氏菌属、有益杆状菌属更为丰富。两组肠道菌群丰富度和多样性存在差异,群落组成结构有显著差异。通过线性判别分析(LDA)统计结果显示,NC组LDA分值>2的包括有益杆状菌属和幼婴粪杆菌属等。AE组中种水平上LDA分值>2的菌种包括波尔特氏肠道梭状菌、肠道梭状菌属中的未知微生物、哈撒韦氏亨盖特氏菌、奥尔登肠道梭状菌,以及难养杆菌属中的未知微生物、小梭形肠道梭状菌。RDA结果显示有益杆状菌属与肝功能指标呈负相关,肠道梭状菌属与肝功能指标呈正相关。综上,肝泡型包虫病患者的肠道菌群丰富度和多样性改变,群落组成结构显著改变,拟杆菌属和肠道梭状菌属等多个菌属均有差异,肠道菌群的失衡可能通过影响肠道代谢产物影响肝脏功能,并且可能对肝泡型包虫病的发展产生影响,这一发现值得进一步深入研究。

关键词：肝泡型包虫病肠道菌群差异性宏基因组测序

急性低氧调控肝细胞线粒体碳代谢通路关键基因的筛选与机制研究

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海南医科大学学报 2025年

作者：李俊秀台艳奇邓钊红徐金芳胥瑾青海大学医学院基础医学部青海大学医学院中医系

目的：本研究旨在结合生物信息学探究急性低氧暴露下肝细胞线粒体碳代谢通路中的关键基因及其调控机制。方法：将人肝细胞系HL7702分别培养在常氧(95%的空气和5% CO2)和低氧(1% O2、94% N2和5% CO2)培养箱中，分别培养24h后提取RNA制作... 详细信息

目的：本研究旨在结合生物信息学探究急性低氧暴露下肝细胞线粒体碳代谢通路中的关键基因及其调控机制。方法：将人肝细胞系HL7702分别培养在常氧(95%的空气和5% CO2)和低氧(1% O2、94% N2和5% CO2)培养箱中，分别培养24h后提取RNA制作表达谱基因芯片，通过微阵列实验得到的差异基因与线粒体数据库进行整合分析，分别对差异基因和差异基因与线粒体功能相关的交集基因进行GO与KEGG富集分析挖掘关键通路，并对差异基因与线粒体功能相关的交集基因构建蛋白质相互作用网络进一步筛选关键基因。用小鼠肝细胞系AML12进行低氧造模并验证筛选出的关键基因以及参与线粒体关键通路中的基因。结果：与常氧组相比，低氧组共鉴定出47958个非显著差异基因和1437个差异基因，其中864个基因表达上调，573个表达基因下调；对差异基因进行KEGG富集分析结果显著富集在代谢通路、氨基酸合成、碳代谢、辅酶生物合成等通路中；对差异基因与线粒体功能相关的交集基因进行KEGG富集分析发现，主要富集在碳代谢等通路中；PPI中鉴定出两个关键基因FH和HSPD1并发现急性低氧下FH和HSPD1的mRNA和蛋白表达量显著上调；KEGG富集中共同富集到碳代谢通路中，发现急性低氧胁迫影响线粒体碳代谢通路中GCSH， AGXT， FH， GPT2， IDH2，HIBCH基因的表达。结论：急性低氧胁迫通过上调FH和HSPD1调节肝脏组织线粒体的功能，并通过影响GCSH， AGXT， FH， GPT2， IDH2，HIBCH基因的表达影响肝脏组织中线粒体碳代谢通路应对急性低氧暴露，为进一步理解急性低氧下肝细胞的相关疾病提供了新的视角。

关键词：急性低氧线粒体碳代谢生物信息学

电刺激诱导miR-741-3p调控Radil促进施万细胞的迁移

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中国组织工程研究 2025年第19期29卷 4038-4043页

作者：刘庆高博杨霄姜宇王培承德医学院附属医院河北省承德市067000 承德医学院河北省承德市067000

背景:越来越多的动物实验和临床研究证实电刺激可以促进周围神经损伤修复,具体的机制尚未完全明确。目的:探讨电刺激诱导miR-741-3p调控Radil对施万细胞迁移的影响。方法:①12只雄性SD大鼠,随机分为电刺激组和对照组,电刺激组在坐骨神... 详细信息

背景:越来越多的动物实验和临床研究证实电刺激可以促进周围神经损伤修复,具体的机制尚未完全明确。目的:探讨电刺激诱导miR-741-3p调控Radil对施万细胞迁移的影响。方法:①12只雄性SD大鼠,随机分为电刺激组和对照组,电刺激组在坐骨神经挤压伤后连续电刺激7 d,对照组在坐骨神经挤压后不做任何处理。术后第7天取损伤处神经,利用荧光原位杂交技术检测两组miR-741-3p的表达差异。②通过miRDB、TargetScan和miRWalk数据库预测miR-741-3p靶基因。③将miR-741-3p模拟物及其对照、miR-741-3p抑制物及其对照、Radil siRNA及其对照、miR-741-3p抑制物+Radil siRNA及miR-741-3p抑制物+siRNA对照对施万细胞进行转染,采用RT-PCR检测转染效率,Transwell小室检测施万细胞的迁移能力。结果与结论:①电刺激组神经残端miR-741-3p荧光强度低于对照组;②数据库预测结果显示有69个基因可能是miR-741-3p靶基因,Radil是预测靶基因之一,主要参与细胞黏附和迁移;③与miR-741-3p抑制物对照组相比,miR-741-3p抑制物组施万细胞迁移数增多(P<0.05);与miR-741-3p模拟物对照组相比,miR-741-3p模拟物组施万细胞迁移数减少(P<0.05);与siRNA对照组相比,Radil siRNA组施万细胞迁移数减少(P<0.05);④与miR-741-3p抑制物对照组相比,miR-741-3p抑制物组Radil的表达水平升高;与miR-741-3p模拟物对照组相比,miR-741-3p模拟物组Radil的表达水平降低;⑤与miR-741-3p抑制物+siRNA对照组相比,miR-741-3p抑制物+Radil siRNA组施万细胞迁移数减少(P<0.05)。结果表明,电刺激通过下调miR-741-3p调控Radi的表达来促进施万细胞迁移。

关键词：施万细胞电刺激 miR-741-3p Radil 细胞迁移神经再生

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促黄体激素释放激素类似物的制备

化学与生物工程 2025年第1期42卷 49-52页

作者：李松涛杨雪郝婷范彦芳王燕承德医学院中药研究所河北省中药研究与开发重点实验室河北承德067000 承德医学院基础医学院河北承德067000

以Rink Amide树脂为固相载体、N-芴甲氧羰基(Fmoc)保护氨基酸为原料,采用固相多肽合成法制备了一种促黄体激素释放激素(luteinizing hormone-releasing hormone, LHRH)6位经D-构型半胱氨酸(D-Cys)取代的类似物[D-Cys^(6)]-LHRH。优化的... 详细信息

以Rink Amide树脂为固相载体、N-芴甲氧羰基(Fmoc)保护氨基酸为原料,采用固相多肽合成法制备了一种促黄体激素释放激素(luteinizing hormone-releasing hormone, LHRH)6位经D-构型半胱氨酸(D-Cys)取代的类似物[D-Cys^(6)]-LHRH。优化的裂解试剂为三氟乙酸-水-三异丙基硅烷(95.0∶2.5∶2.5,体积比),纯品的HPLC纯度为97.8%,总收率为47.5%。该方法简便高效、总收率高,为LHRH类似物的制备提供了参考,也为进一步构建LHRH受体靶向的多肽-药物偶联物奠定了基础。

关键词：促黄体激素释放激素类似物多肽固相合成 D-构型半胱氨酸

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嗜黏蛋白阿克曼菌及其释放的外膜囊泡缓解应激结直肠癌小鼠的焦虑与抑郁情绪

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中国微生态学杂志 2025年第02期 182-188页

作者：靳顺康鲁艳杰陈彤彤张鑫宇李杨李玉红承德医学院基础医学院肿瘤研究室军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所

目的探究嗜黏蛋白阿克曼菌（A. muciniphila）及其释放的外膜囊泡（OMV）对应激结直肠癌小鼠模型焦虑和抑郁情绪的影响。方法将70只C57BL/6J小鼠分为Control组、CAC组、A. muciniphila组、CS组、CSAM组、OMV组和CSOMV组，每组10只。... 详细信息

目的探究嗜黏蛋白阿克曼菌（A. muciniphila）及其释放的外膜囊泡（OMV）对应激结直肠癌小鼠模型焦虑和抑郁情绪的影响。方法将70只C57BL/6J小鼠分为Control组、CAC组、A. muciniphila组、CS组、CSAM组、OMV组和CSOMV组，每组10只。采用氧化偶氮甲烷与葡聚糖硫酸钠溶液联合用药建立结肠炎相关结直肠癌模型。小鼠每天随机暴露于1～2种轻度应激刺激，持续14 d建立慢性应激模型。采用A. muciniphila菌液和A. muciniphila OMV悬浮液灌胃干预应激结直肠癌小鼠。采用旷场实验检测小鼠焦虑情绪，采用悬尾实验检测小鼠抑郁情绪。16S rDNA基因测序检测小鼠肠道微生物群落的改变。结果与CS组小鼠相比，A. muciniphila干预后慢性应激结直肠癌小鼠旷场箱内探索总路程（t=4.747,P<0.001）和平均速度（t=4.691, P<0.001）均显著增加。悬尾实验的不动时间（t=2.270, P<0.05）和不动时间百分比（t=2.273,P<0.05）显著减少。与CS组小鼠相比，A. muciniphila OMV干预后慢性应激结直肠癌小鼠旷场箱内探索总路程（t=3.167, P<0.05）和平均速度（t=3.264, P<0.01）均显著增加。悬尾实验中不动时间（t=2.409,P<0.05）和不动时间百分比（t=3.969,P<0.01）显著减少。16S rDNA基因测序表明，与CS组比较，CSOMV组中考拉杆菌属、Colidextribacter、布劳特菌属、Faecalibacterium、罕见小球菌属、嗜胆菌属、Olsenella、Angelakisella和酸硫杆菌属的相对丰度显著增加（P<0.05）, Parvibacter相对丰度显著减少（P<0.05）。结论 A. muciniphila及其分泌的外膜囊泡能够有效缓解应激结直肠癌小鼠的焦虑和抑郁情绪，并显著改变慢性应激结直肠癌小鼠的肠道菌群。

关键词：慢性应激结直肠癌肠道菌群嗜黏蛋白阿克曼菌外膜囊泡

十枣汤加味散联合塞来昔布胶囊治疗湿热瘀闭型膝骨关节炎性滑膜炎临床研究

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辽宁中医杂志 2025年第1期52卷 83-86页

作者：陈星燃晏飞王领弟邵月李连泰王书君王玉满承德医学院附属医院河北承德067000 承德医学院河北承德067000

目的观察十枣汤加味散联合塞来昔布胶囊治疗湿热瘀闭型膝骨关节炎性滑膜炎的临床疗效。方法选取2021年12月—2023年5月承德医学院附属医院诊治的膝骨关节炎性滑膜炎患者120例,采用随机数字表法分为观察组和对照组,每组60例,对照组采用... 详细信息

目的观察十枣汤加味散联合塞来昔布胶囊治疗湿热瘀闭型膝骨关节炎性滑膜炎的临床疗效。方法选取2021年12月—2023年5月承德医学院附属医院诊治的膝骨关节炎性滑膜炎患者120例,采用随机数字表法分为观察组和对照组,每组60例,对照组采用通络祛痛膏联合塞来昔布胶囊治疗,观察组采用十枣汤加味散联合塞来昔布胶囊治疗,治疗2周。比较两组治疗前后疼痛视觉模拟评分法(VAS)、膝关节肿胀程度评分、膝关节功能(HSS)评分、滑囊积液深度、临床疗效和不良反应。结果两组治疗后VAS评分、膝关节肿胀程度评分、滑囊积液深度均较治疗前降低,HSS评分较治疗前升高,差异具有统计学意义(P0.05),两组间治疗后各指标比较,差异具有统计学意义(P0.05)。结论十枣汤加味散联合塞来昔布胶囊治疗湿热瘀闭型膝骨关节炎性滑膜炎患者的疗效显著,能明显缓解患者疼痛,消除膝关节肿胀,有效促进膝关节功能恢复,且不良反应少,治疗安全性较高。

关键词：十枣汤滑膜炎膝骨关节炎膝关节中药外用

牡丹皮乙醇提取物对热带念珠菌毒力因子的影响

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中华检验医学杂志 2025年第02期48卷 258-264页

作者：唐赟阿祥仁程鹏周健武马继登马小亚青海大学医学院基础医学部西宁青海省人民医院医学检验科西宁

目的探究牡丹皮乙醇提取物(EAEMC)对热带念珠菌的体外抑菌效果, 以及对毒力因子包括天冬氨酸蛋白酶、溶血素、磷脂酶、酯酶、脂肪酶的活性和生物膜的影响。方法通过超声提取、减压浓缩和冻干得到EAEMC粉末;以微量稀释法测定EAEMC对21株... 详细信息

目的探究牡丹皮乙醇提取物(EAEMC)对热带念珠菌的体外抑菌效果, 以及对毒力因子包括天冬氨酸蛋白酶、溶血素、磷脂酶、酯酶、脂肪酶的活性和生物膜的影响。方法通过超声提取、减压浓缩和冻干得到EAEMC粉末;以微量稀释法测定EAEMC对21株热带念珠菌临床菌株和1株标准菌株的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC);通过平板法检测热带念珠菌的5种胞外酶活性以及EAEMC对其影响, 结果采用方差分析;体外构建热带念珠菌生物膜模型, 噻唑蓝法评价EAEMC对热带念珠菌生物膜抑制率。结果 EAEMC对热带念珠菌BNCC335988的MIC为12.5 g/L, MBC为25 g/L, 对临床菌株的MIC为12.5～25 g/L, MBC为25～50 g/L;热带念珠菌的天冬氨酸蛋白酶、酯酶和溶血素活性均为阳性, 磷脂酶和脂肪酶均为阴性;EAEMC浓度为1/2MIC时能完全抑制热带念珠菌的天冬氨酸蛋白酶和溶血素活性, 为MIC时能完全抑制酯酶活性;EAEMC浓度为2MIC时对热带念珠菌BNCC335988生物膜的抑制率达到70%以上, 浓度为4MIC时达到80%以上, 浓度为8MIC时抑制率达90%以上。结论 EAEMC可通过降低热带念珠菌的天冬氨酸蛋白酶、酯酶和溶血素的活性, 以及抑制生物膜的形成来达到抑菌作用。

关键词：念珠菌, 热带牡丹皮乙醇提取物毒力因子胞外酶生物膜