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超敏结核分枝杆菌和利福平耐药基因检测技术在结核病诊断中的应用进展

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中国感染与化疗杂志 2024年第4期24卷 469-475页

作者：张永恒岳菀潞秦刚南通大学医学院江苏南通226000 南通大学附属医院感染科

1结核病现状结核病是严重危害人类健康的传染性疾病之一,是仅次于新型冠状病毒感染的第二大传染病杀手,是全球第13大死因[1]。2022年10月27日,世界卫生组织(World Health Organization,WHO)发布《2022全球结核病报告》[2](以下简称报告... 详细信息

1结核病现状结核病是严重危害人类健康的传染性疾病之一,是仅次于新型冠状病毒感染的第二大传染病杀手,是全球第13大死因[1]。2022年10月27日,世界卫生组织(World Health Organization,WHO)发布《2022全球结核病报告》[2](以下简称报告)指出,2021年全球新发结核病患者约1060万人,其中儿童约120万人。受新型冠状病毒的影响,全球结核病发病率与2020年相比上升了3.6%,打破了过去20年间每年约2%的下降趋势。2019年至2021年,全球因结核病死亡人数有所增加,2021年全球共有160万人死于结核病,相当于倒退到2017年的水平。2020年至2021年全球耐药结核病负担增加了3%,2021年报告了45万例利福平耐药结核病例,需要治疗的耐药结核患者中仅有36%的人接受了治疗,并且全球耐药结核的成功治疗率只有60%。2021年全球结核病基本医疗服务支出也从2019年的60亿美元下降至54亿美元,而2022年所需的费用为130亿美元[2],资金缺口巨大。

关键词：结核病分子生物学超敏结核分枝杆菌和利福平耐药基因快速诊断

肝细胞癌m6A相关免疫基因预后模型构建及DDX1在肝细胞癌中的作用

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中华肿瘤防治杂志 2024年第2期31卷 85-94页

作者：邓青吴巍扬州大学医学院江苏扬州225009 无锡市第五人民医院急诊科江苏无锡214001 扬州大学附属医院普通外科江苏扬州225012

目的筛选肝细胞癌中N6-甲基腺苷(m6A)相关免疫基因构建预后模型,并探讨其关键基因DDX1在肝癌细胞中的作用。方法本研究选取癌症基因组图谱(TCGA)数据库中368例肝癌样本数据作为训练数据集,基因表达综合数据库(GEO)GSE 14520数据集中242... 详细信息

目的筛选肝细胞癌中N6-甲基腺苷(m6A)相关免疫基因构建预后模型,并探讨其关键基因DDX1在肝癌细胞中的作用。方法本研究选取癌症基因组图谱(TCGA)数据库中368例肝癌样本数据作为训练数据集,基因表达综合数据库(GEO)GSE 14520数据集中242例肝癌样本数据作为验证数据集,并基于表达相关性进行m6A相关的免疫基因筛选。通过LASSO Cox回归模型筛选与预后相关的m6A免疫基因,并构建风险评分(RS)模型。根据RS中位数值,分别将训练集和验证集中所有样本分为高与低风险组,Kaplan-Meier法评估高低风险组的生存预后差异。使用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测肝癌细胞系(HuH-7、SK-HEP-1、PLC/PRF/5和SNU-449)以及人正常肝细胞系THLE-2中筛选的关键基因表达水平;挑选表达变化较显著的基因,运用功能加强和缺失实验对其功能进行细胞验证。one-way ANOVA法比较多组间统计学差异,其中两两比较采用Tukey法。结果基于共表达分析共获得130个m6A相关免疫基因,最终筛选了5个基因(DDX1、HDAC1、HDAC2、NRAS和PLK1)用于RS模型构建。构建的模型显示,与低风险组比较,高风险组的生存率较低,在TCGA(P<0.001)和GSE 14520数据集(P=0.003)中,差异有统计学意义。与其他基因相比,DDX1在肝癌细胞中高表达。CCK-8实验结果显示,过表达DDX1可促进PLC/PRF/5和SNU-449细胞增殖,差异有统计学意义,P<0.05。Transwell结果显示,与阴性对照组相比,DDX1过表达可促进PLC/PRF/5和SNU-449细胞的迁移(105.00±12.53 vs 173.67±12.22;100.00±10.15 vs 147.33±12.10)和侵袭(83.00±10.81 vs 131.00±13.23;85.33±10.01 vs 135.00±12.49)。DDX1过表达可升高细胞丙二醛(1.01±0.10 vs 1.73±0.13)和活性氧(17.54±1.30 vs 25.97±2.24)水平,但降低超氧化物歧化酶(1.03±0.12 vs 0.52±0.12)的水平。DDX1敲除得到了相反的结果。结论本研究基于5个m6A相关免疫基因构建的预后模型可以有效预测肝癌患者的预后以及对免疫治疗的反应。其中DDX1可促进肝癌进展。

关键词：肝细胞癌 N6-甲基腺苷预后 DDX1

早期血液炎症指标对重症社区获得性肺炎导致呼吸衰竭患者预后的评估研究

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新医学 2024年第3期55卷 198-203页

作者：孙世瑜朱淼李田田王海波左华芹王薛洁江苏省苏北人民医院扬州大学临床医学院急诊科扬州225001 江苏省苏北人民医院扬州大学临床医学院超声科扬州225001 江苏省苏北人民医院扬州大学临床医学院血液科扬州225001 扬州大学医学院扬州225001

目的探讨早期血液炎症指标对重症社区获得性肺炎导致呼吸衰竭的预后评估价值。方法选择入院诊断为重症肺炎导致呼吸衰竭的186例患者为研究对象。根据患者预后分为死亡组42例、好转组144例。分析患者入院后2 d细胞因子12项、铁蛋白、CRP... 详细信息

目的探讨早期血液炎症指标对重症社区获得性肺炎导致呼吸衰竭的预后评估价值。方法选择入院诊断为重症肺炎导致呼吸衰竭的186例患者为研究对象。根据患者预后分为死亡组42例、好转组144例。分析患者入院后2 d细胞因子12项、铁蛋白、CRP、降钙素原、血常规、血气分析结果,收集患者肺炎严重程度指数(PSI)及急性生理学和慢性健康状况(APACHEⅡ)评分,研究上述指标与患者预后的相关性。结果与好转组患者相比,死亡组患者入院时的血IFN-γ、IL-10、IL-6、IL-8、CRP、降钙素原和铁蛋白水平均较高(P均临床工作中应重点关注该类患者,降低其死亡风险。

关键词：炎症指标细胞因子铁蛋白重症肺炎呼吸衰竭预后

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金荞麦胶囊中间体制备工艺的优选及质量控制

中国民族民间医药 2024年第3期33卷 25-29页

作者：李春霞童晓东陈银银南通瑞慈医院(扬州大学第四临床医学院) 江苏南通226010 南通市中医院(南京中医药大学南通附属医院) 江苏南通226001 南京中医药大学翰林学院江苏泰州225300

目的:优选金荞麦胶囊中间体的制备工艺以及质量控制。方法:以表儿茶素为实验指标,通过正交实验,围绕提取时间、回流时间、回流次数考察选取最佳工艺。结果:当溶剂为药材的6倍量,乙醇浓度为50%,回流为1 h为最佳制备工艺。结论:所建立的... 详细信息

目的:优选金荞麦胶囊中间体的制备工艺以及质量控制。方法:以表儿茶素为实验指标,通过正交实验,围绕提取时间、回流时间、回流次数考察选取最佳工艺。结果:当溶剂为药材的6倍量,乙醇浓度为50%,回流为1 h为最佳制备工艺。结论:所建立的方法操作容易,结果准确可靠重现,可显著提高表儿茶素的提取,可用于金荞麦胶囊中间体的制备。

关键词：金荞麦表儿茶素提取工艺正交试验高效液相

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SLC4A1基因c.2510C>A突变的遗传性球形红细胞增多症并发Gilbert综合征1例报告并文献复习

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中国实用内科杂志 2024年第7期44卷 611-613页

作者：张军孙梅华宝来王方方扬州大学临床医学院江苏省苏北人民医院血液科江苏扬州225001 首都医科大学附属北京世纪坛医院血液科北京100038

遗传性球形红细胞增多症(hereditary spherocytosis,HS)是一种由编码红细胞膜蛋白的基因突变引起的遗传性溶血性贫血,其特征是外周血中存在渗透脆性弱的球形红细胞,典型症状包括贫血、黄疸和脾肿大[1]。常见的编码红细胞膜和细胞骨架蛋... 详细信息

遗传性球形红细胞增多症(hereditary spherocytosis,HS)是一种由编码红细胞膜蛋白的基因突变引起的遗传性溶血性贫血,其特征是外周血中存在渗透脆性弱的球形红细胞,典型症状包括贫血、黄疸和脾肿大[1]。常见的编码红细胞膜和细胞骨架蛋白的基因包括锚蛋白(ANK1基因)、带3蛋白(SLC4A1基因)、α-血影蛋白(SPTA1基因)、β-血影蛋白(SPTB基因)和蛋白4.2(EPB42基因)[2]。

关键词：遗传性球形红细胞增多症 Gilbert综合征贫血高胆红素血症

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MRI特征评分模型预测增殖型肝细胞癌

中国医学影像技术 2024年第6期40卷 874-879页

作者：鲁梦恬张学琴张涛瞿琦闫祖仪顾春燕徐磊姜吉锋南通大学医学院江苏南通226006 南通市第三人民医院放射科江苏南通226006 南通市第三人民医院病理科江苏南通226006

目的观察MRI特征评分模型预测增殖型肝细胞癌(HCC)的价值。方法回顾性分析241例经病理证实HCC患者,包括90例增殖型HCC、151例非增殖型HCC;采用单因素及多因素logistic回归分析比较组间临床及基于2018版肝脏影像报告和数据系统评估的MRI... 详细信息

目的观察MRI特征评分模型预测增殖型肝细胞癌(HCC)的价值。方法回顾性分析241例经病理证实HCC患者,包括90例增殖型HCC、151例非增殖型HCC;采用单因素及多因素logistic回归分析比较组间临床及基于2018版肝脏影像报告和数据系统评估的MRI表现,筛选增殖型HCC的独立预测因素,根据其权重赋分并构建评分模型。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC),评估模型预测效能;根据评分最佳截断值将患者分为高、低增殖风险亚组,比较组间及亚组间无复发生存(RFS)率和早期RFS率。结果MRI显示肿瘤晕状强化、动脉期环形高强化、瘤内血管、大量病灶实质低强化及边缘不规则均为增殖型HCC的独立预测因素(OR=3.287、2.362、4.542、2.997、2.379,P均<0.05),分别赋分7、5、9、7、5分,总分0~33分;以之建立的评分模型预测增殖型HCC的AUC为0.818。以9分为最佳截断值进行判断,高、低增殖风险分别为97例及144例。组间、亚组间RFS率及早期RFS率差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论MRI特征评分模型可有效预测增殖型HCC。

关键词：癌肝细胞磁共振成像肝脏影像报告和数据系统

PRDX2调控HPV16 E6对宫颈癌Siha细胞活性的影响

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诊断病理学杂志 2024年第9期31卷 847-850页

作者：张林艳郑荣荣姜文静扬州大学建湖临床医学院妇科江苏盐城224700 南通大学江苏南通226000

目的探究PRDX2在宫颈癌组织中的表达以及对宫颈癌Siha细胞的恶性生物学行为的影响。方法免疫组化方法检测宫颈癌组织以及癌旁组织中PRDX2的表达;将宫颈癌Siha细胞设置为4个组:Siha组、siRNA NC组、siRNA PRDX2组与siRNA HPV16 E6组。ED... 详细信息

目的探究PRDX2在宫颈癌组织中的表达以及对宫颈癌Siha细胞的恶性生物学行为的影响。方法免疫组化方法检测宫颈癌组织以及癌旁组织中PRDX2的表达;将宫颈癌Siha细胞设置为4个组:Siha组、siRNA NC组、siRNA PRDX2组与siRNA HPV16 E6组。EDU染色法检测Siha细胞的生长活性;Transwell实验方法分析Siha细胞的侵袭数量;流式细胞术检测Siha细胞的凋亡情况;蛋白免疫印迹方法分析Siha细胞中PRDX2/HPV16 E6蛋白的表达水平。结果与宫颈癌旁组织比较,宫颈癌组织PRDX2的表达上调。与Siha组和siRNA NC组比较,siRNA PRDX2和siRNA HPV16 E6组的Siha细胞增殖能力下降(P<0.05);siRNA PRDX2和siRNA HPV16 E6组的Siha细胞侵袭数量下降(P<0.05);siRNA PRDX2和siRNA HPV16 E6组的Siha细胞凋亡率增加(P<0.05);siRNA PRDX2组的Siha细胞的HPV16 E6蛋白表达下调(P<0.05)。结论PRDX2在宫颈癌组织中表达增加,抑制PRDX2表达后,Siha细胞的增殖速度与侵袭数量降低,凋亡率增加,该机制与PRDX2调节HPV16 E6蛋白的表达相关。

关键词： PRDX2 增殖 HPV16 E6 侵袭宫颈癌转移凋亡 Siha

3例N-甲基-D-天冬氨酸受体和髓鞘少突胶质细胞糖蛋白双抗体阳性脑炎分析

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实用临床医药杂志 2024年第2期28卷 49-54,59页

作者：朱琳蒋 俞龙吴健殷梦媚黄君文马灿灿扬州大学临床医学院/扬州大学附属苏北人民医院神经内科江苏扬州225000 扬州大学临床医学院/扬州大学附属苏北人民医院老年医学科江苏扬州225000 扬州大学临床医学院/扬州大学附属苏北人民医院影像科江苏扬州225000

目的观察3例罕见的髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)抗体相关疾病和抗N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)脑炎重叠综合征(MNOS)患者的临床表现,旨在拓宽对此类综合征临床谱的认识。方法回顾性分析MOG抗体和NMDAR抗体双阳性的3例MNOS患者的资料,... 详细信息

目的观察3例罕见的髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)抗体相关疾病和抗N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)脑炎重叠综合征(MNOS)患者的临床表现,旨在拓宽对此类综合征临床谱的认识。方法回顾性分析MOG抗体和NMDAR抗体双阳性的3例MNOS患者的资料,收集患者临床特征、神经影像学特征及转归,采用基于细胞转染的间接免疫荧光法(CBA)进行诊断。结果1例同时出现MOG抗体和NMDAR抗体阳性,但临床表现为典型的抗NMDAR脑炎症状;1例为继抗NMDAR脑炎后复发出现脱髓鞘疾病的临床和头颅磁共振成像(MRI)特征,复发时表现为肢体麻木无力、视物模糊、复视等MNOS非典型症状;1例同时出现MOG抗体和NMDAR抗体阳性,但临床表现为典型的抗NMDAR脑炎症状。在MNOS中,MOG抗体相关疾病和抗NMDAR脑炎可同时出现,也可先后出现,癫痫为其最常见的症状;头颅MRI显示患者均存在且主要为幕上病灶,也可累及脑干,未见脊髓病灶,脑脊液均轻度异常。患者发病急性期对一线免疫治疗反应良好,预后较好,但多数患者易复发。结论MNOS患者中抗NMDAR脑炎可同时或相继出现脱髓鞘疾病的临床和/或MRI特征,患者临床表现复杂且多样。对于存在不典型的症状的患者,要求提高对MNOS的认识,并及时治疗。

关键词：髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗N-甲基-D-天冬氨酸受体脑炎重叠综合征

微小隐孢子虫GP900^(829~1099)蛋白的表达及其对小鼠巨噬细胞的免疫调节作用

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2024年第1期42卷 55-62页

作者：杨玲王龙王佳阳周坤铮闫宝龙赵威黄慧聪温州医科大学基础医学院寄生虫教研室浙江温州325035 江苏省扬州市中医院检验科扬州225002

目的初步探究微小隐孢子虫微线体蛋白(MIC)糖蛋白900(GP900) 829~1 099aa片段(GP^(900^(829~1099)))通过核因子-κB (NF-κB)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路对小鼠巨噬细胞(RAW264.7细胞)的免疫调节作用。方法从NCBI数据库中获取... 详细信息

目的初步探究微小隐孢子虫微线体蛋白(MIC)糖蛋白900(GP900) 829~1 099aa片段(GP^(900^(829~1099)))通过核因子-κB (NF-κB)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路对小鼠巨噬细胞(RAW264.7细胞)的免疫调节作用。方法从NCBI数据库中获取微小隐孢子虫GP^(900^(829~1099))氨基酸序列进行生物信息学分析。以微小隐孢子虫卵囊cDNA为模板,PCR扩增gp900^(829~1099)基因片段,构建pET-32a-gp900^(829~1099)重组质粒并转化至BL21感受态细胞中诱导表达。纯化、超滤浓缩重组蛋白并去除内毒素。采用0.16、0.80、4.00、20.00、100.00、500.00μg/ml的GP^(900^(829~1099))重组蛋白刺激RAW264.7细胞24 h后,CCK-8法检测其对RAW264.7细胞活力的调节作用。以0.16、0.80、4.00μg/ml的GP^(900^(829~1099))重组蛋白刺激RAW264.7细胞,以PBS为对照组,脂多糖(1μg/ml)为阳性对照,24 h后流式细胞术检测CD86表达量,qPCR检测RAW264.7细胞中IL-6和TNF-α mRNA的相对转录水平,ELISA检测RAW264.7细胞培养上清中IL-6、TNF-α的表达水平。采用蛋白质免疫印迹分析NF-κB和MAPK信号通路中P65蛋白和细胞外调节蛋白激酶(ERK)蛋白磷酸化水平。结果 GP^(900^(829~1099))蛋白二级结构中β转角占比9.23%,无规则卷曲占比64.58%,且含有较丰富的T、B细胞抗原表位。表达的GP^(900^(829~1099))重组蛋白的相对分子质量约为49 000。CCK-8结果显示,GP^(900^(829~1099))对细胞没有毒性作用,后续实验采用0.16、0.80和4.00μ/g/ml作为作用浓度。流式细胞术结果显示,CD86+的阳性表达率分别为(13.500±0.815)%、(18.670±0.657)%、(20.470±1.271)%,后两者均高于对照组的(14.500±0.872)%(t=3.818、3.872,P <0.05)。qPCR结果显示,0.16、0.80和4.00μg/ml组RAW264.7细胞的IL-6 mRNA相对转录水平分别为1.409±0.050、2.052±0.098和3.284±0.097,均高于对照组的1.010±0.096 (t=3.700、7.595、16.700,均P<0.05);TNF-α mRNA相对转录水平分别为1.077±0.034、1.440±0.021和2.378±0.037,后两者均高于对照组1.000±0.025(t=13.380、30.850,均P<0.05)。ELISA检测结果显示,RAW264.7细胞培养上清中,0.16、0.80和4.00μg/ml组IL-6的表达水平分别为(535.400±17.230)、(572.800±8.286)、(555.600±23.940) mg/L,均高于对照组的(454.400±18.630) mg/L (t=3.193、5.809、3.339,P<0.05);TNF-α细胞因子的表达水平分别为(351.800±12.270)、(386.400±10.250)、(489.800±10.540) mg/L,后两者均高于对照组的(324.200±11.070) mg/L (t=4.125、10.830,P<0.05)。蛋白质免疫印迹结果显示,0.16、0.80和4.00μg/ml组RAW264.7细胞p-P65、p-ERK蛋白的相对表达水平分别为2.294±0.254、1.714±0.205、1.877±0.309,1.522±0.054、1.760±0.066、1.582±0.027,均高于对照组的1.0±0.0 (t=5.100、3.489、2.836,9.737、11.450、21.900,均P<0.05)。结论不同浓度GP^(900^(829~1099))重组蛋白刺激巨噬细胞后,通过激活NF-κB和MAPK信号通路诱导巨噬细胞活化,通过促进TNF-α和IL-6 mRNA的转录参与巨噬细胞的免疫调节。

关键词：微小隐孢子虫微线体蛋白GP900 RAW264.7 NF-κB MAPK