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基于疏水滤纸的金纳米花SERS基底高灵敏检测牛奶中的三聚氰胺

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化学通报 2024年第2期87卷 235-241页

作者：沈康胡开颜朱雨彤王煦博钱瑾钱亚云扬州大学医学院扬州225001

将海胆状金纳米花(GNFs)疏水滤纸基底和表面增强拉曼散射(SERS)技术相结合,实现了牛奶中三聚氰胺的高灵敏检测。由左旋多巴还原制备的GNFs拥有许多尖锐突起和尖端可激发强局部电磁场增强(EM),产生大量的“热点”,提高SERS检测的灵敏度... 详细信息

将海胆状金纳米花(GNFs)疏水滤纸基底和表面增强拉曼散射(SERS)技术相结合,实现了牛奶中三聚氰胺的高灵敏检测。由左旋多巴还原制备的GNFs拥有许多尖锐突起和尖端可激发强局部电磁场增强(EM),产生大量的“热点”,提高SERS检测的灵敏度。采用疏水滤纸作为衬底,改进了纸基衬底上纳米材料分布不均匀的缺点。进而评估了SERS基底的灵敏度、稳定性和重现性。通过对加标牛奶中三聚氰胺的定量检测,在1×10^(-3)~1×10^(-9) mol/L范围内,牛奶中三聚氰胺的浓度对数与SERS强度呈良好的线性关系,检测限低至43pmol/L,远低于同类检测方法。本方法检测实际样品结果与液相色谱法检测结果对比无显著性差异(p>0.05)。GNFs疏水滤纸SERS基底具有高灵敏度、稳定性、重现性和实用性的优点,为牛奶等其他食品中三聚氰胺的定量检测提供了参考。

关键词：海胆状金纳米花疏水滤纸表面增强拉曼散射三聚氰胺

R环结合蛋白对肺腺癌预后的预测及药物敏感性分析

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浙江大学学报(医学版) 2024年

作者：王婷烨丁彦琳陶丽扬州大学医学院扬州大学转化医学研究院

目的:研究R环结合蛋白对肺腺癌预后与抗肿瘤药物敏感性的影响，为R环在肿瘤生物学中的调控机制研究与临床决策提供科学依据。方法:从R环结合蛋白质组学研究文献与相关数据库中获取R环结合基因，以癌症基因组图谱数据库中的403例肺腺癌... 详细信息

目的:研究R环结合蛋白对肺腺癌预后与抗肿瘤药物敏感性的影响，为R环在肿瘤生物学中的调控机制研究与临床决策提供科学依据。方法:从R环结合蛋白质组学研究文献与相关数据库中获取R环结合基因，以癌症基因组图谱数据库中的403例肺腺癌病例的数据作为训练集，以基因表达综合数据库中GSE14814与GSE31210两个数据集的数据作为验证集，采用加权基因共表达网络分析（WGCNA）、最小绝对收缩和选择算子（LASSO）、多因素Cox比例风险模型逐步筛选具有独立预后作用的临床变量与R环特征基因，Maftools分析R环特征基因的突变特征，构建基于R环特征基因的风险评分和列线图模型，验证该模型对高低分险亚型患者预后预测的能力及其对抗肿瘤药物治疗敏感性的影响。最后采用实验验证R环特征基因表达对抗肿瘤药物敏感性的影响。结果:收集整理得到R环基因1551条，WGCNA筛选得到显著影响临床表型的R环基因78条，LASSO回归保留R环基因14条，多因素Cox筛选到三个与患者预后密切相关的R环基因（HEXIM1、GLI2、PLEC）和一个临床变量（肿瘤分级），根据各参数的回归系数构建预后模型与列线图模型。Kaplan-Meier生存分析显示，高风险组患者预后明显差于低风险组（P<0.01）。时间依赖受试者工作特征曲线表明，该模型在训练集和验证集列队中均具有较好的预测能力。抗肿瘤药物敏感性预测结果表明，高风险组患者对肺癌化疗与靶向治疗药物的敏感性更低。PLEC基因沉默实验表明抑制PLEC的表达能增强表皮生长因子受体野生型非小细胞肺腺癌细胞株对吉非替尼的敏感性。结论:R环结合蛋白是肺腺癌预后的风险因素，联合临床信息和R环特征基因可以有效预测肺腺癌预后，靶向上述R环特征基因可能对提高患者存活率具有重要意义。

关键词： R环结合蛋白肺腺癌风险预测模型药物敏感性生物标志物

R环结合蛋白对肺腺癌患者预后的预测及药物敏感性分析

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浙江大学学报（医学版） 2024年第4期53卷 472-480页

作者：王婷烨丁彦琳陶丽扬州大学医学院扬州大学转化医学研究院江苏扬州225009

目的:研究R环结合蛋白对肺腺癌患者预后及抗肿瘤药物敏感性的影响,为R环在肿瘤生物学中的调控机制研究及临床决策提供科学依据。方法:从R环结合蛋白质组学研究文献及相关数据库中获取R环结合基因,以癌症基因组图谱数据库中的403例肺腺... 详细信息

目的:研究R环结合蛋白对肺腺癌患者预后及抗肿瘤药物敏感性的影响,为R环在肿瘤生物学中的调控机制研究及临床决策提供科学依据。方法:从R环结合蛋白质组学研究文献及相关数据库中获取R环结合基因,以癌症基因组图谱数据库中的403例肺腺癌患者的数据作为训练集,以基因表达综合数据库中GSE14814与GSE31210两个数据集的数据作为验证集,采用加权基因共表达网络分析(WGCNA)、最小绝对收缩和选择算子(LASSO)、多因素Cox回归分析逐步筛选具有独立预后预测作用的临床变量及R环特征基因,maftools分析R环特征基因的突变特征,构建基于R环特征基因的风险评分和列线图模型,验证该模型对高、低风险患者预后预测的能力及其对抗肿瘤药物治疗敏感性的影响。最后采用实验验证R环特征基因表达对抗肿瘤药物敏感性的影响。结果:收集整理得到R环特征基因1551个,WGCNA筛选得到显著影响临床表型的R环基因78个,LASSO回归分析保留R环基因14个,多因素Cox回归分析筛选到3个与患者预后密切相关的R环特征基因(HEXIM1、GLI2、PLEC)和一个临床变量(肿瘤分级),根据各参数的回归系数构建预后模型和列线图模型。Kaplan-Meier生存分析显示,高风险组患者预后明显差于低风险组(P<0.01)。时间依赖受试者工作特征曲线表明,该模型在训练集和验证集列队中均具有较好的预测能力。抗肿瘤药物敏感性预测结果表明,高风险组患者对肺癌化疗和靶向治疗药物的敏感性更低。PLEC基因沉默实验表明抑制PLEC的表达能增强表皮生长因子受体野生型非小细胞肺腺癌细胞株对吉非替尼的敏感性。结论:R环结合蛋白是肺腺癌预后的风险因素,联合临床信息和R环特征基因可以有效预测肺腺癌患者的预后,靶向上述R环特征基因可能对提高患者存活率具有重要意义。

关键词： R环结合蛋白肺腺癌预后因子预测模型药物敏感性

低表达SLC1A4在卵巢癌顺铂耐药中的作用研究

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中国现代应用药学 2024年第9期41卷 1204-1213页

作者：苏兰娣彭建明包一笑孙国正周凡超许丁文扬州市职业大学医学院扬州225100

目的探讨溶质载体家族1成员4(solute carrier family 1 member 4,SLC1A4)在卵巢癌铂类化疗耐药性中的作用。方法通过GEO、TCGA数据库分析工具分析SLC1A4在卵巢癌或铂类耐药性卵巢癌中的表达;通过GEO数据库分析SLC1A4在铂类药物处理的卵... 详细信息

目的探讨溶质载体家族1成员4(solute carrier family 1 member 4,SLC1A4)在卵巢癌铂类化疗耐药性中的作用。方法通过GEO、TCGA数据库分析工具分析SLC1A4在卵巢癌或铂类耐药性卵巢癌中的表达;通过GEO数据库分析SLC1A4在铂类药物处理的卵巢癌细胞系中的表达;通过Kaplan Meier-plotter分析SLC1A4表达量与卵巢癌患者总生存期(overall survival,OS)、无疾病进展生存率(progression free survival,PFS)的相关性;通过DepMap平台分析SLC1A4基因效应与卵巢癌化疗药物敏感相关性;通过流式细胞试验和肿瘤细胞克隆集落形成试验验证低表达SLC1A4介导卵巢癌细胞顺铂耐药;通过TargetScan预测靶向于SLC1A4的微小RNA(miRNA),并在TCGA数据库卵巢癌样本中验证其相关性;运用COREMINE工具进行文本挖掘分析SLC1A4介导卵巢癌化疗耐药性的生物过程。结果SLC1A4在卵巢癌患者及铂类耐药性的卵巢癌中的显著降低(P<0.05),而且与患者的OS、PFS显著相关(P<0.05);铂类药物处理卵巢癌细胞增加SLC1A4的表达;SLC1A4对卵巢癌的基因效应与铂类药物敏感性正相关;过表达SLC1A4增加顺铂引起的卵巢癌细胞凋亡和减少肿瘤细胞克隆集落形成;hsa-let-7c-5p靶向于SLC1A4并在耐药性卵巢癌患者样本中呈显著负相关。结论低表达SLC1A4介导卵巢癌铂类耐药性,并且有可能与hsa-let-7c-5p调控有关。

关键词：溶质载体家族1成员4 卵巢癌铂类耐药性

一株新型广谱阴沟肠杆菌噬菌体ZX14的分离鉴定及生物学特性分析

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中国生物工程杂志 2024年第8期 14-26页

作者：郭开鑫张金城倪畅沈茫茫周昕扬州大学兽医学院

阴沟肠杆菌（Enterobacter cloacae）是一种机会致病菌，有导致鲻鱼等水产动物大量死亡等严重问题。从福建某水产养殖场污水中分离到一株新型裂解性阴沟肠杆菌噬菌体ZX14并对其进行生物学特性及基因组分析，探索ZX14在防治多重耐药阴沟... 详细信息

阴沟肠杆菌（Enterobacter cloacae）是一种机会致病菌，有导致鲻鱼等水产动物大量死亡等严重问题。从福建某水产养殖场污水中分离到一株新型裂解性阴沟肠杆菌噬菌体ZX14并对其进行生物学特性及基因组分析，探索ZX14在防治多重耐药阴沟肠杆菌感染的应用价值。噬菌体ZX14能高效裂解阴沟肠杆菌，效价高达1.5×1010PFU/mL,潜伏期为20 min,爆发量为45 PFU/cell,且在50℃、pH 5～12等环境下具有良好稳定性和适应性。基因组分析显示，ZX14基因组全长173 679 bp, GC含量为39.92%,共编码294个开放阅读框（open reading frame, ORF）和10个tRNA,不含耐药基因和毒力基因，其中122个ORF被注释为功能蛋白。此外，该噬菌体可跨种裂解阴沟肠杆菌、路德维希肠杆菌（Enterobacter ludwigii）和神户肠杆菌（Enterobacter kobei）,并对这三种细菌在体外都显示出高效抗菌活性。研究首次报道了一株可跨种裂解细菌的噬菌体ZX14,该噬菌体具有广阔应用前景，有望为防治多重耐药阴沟肠杆菌感染提供新的解决方案。

关键词：阴沟肠杆菌裂解性噬菌体生物学特性基因组分析

鸡白痢沙门菌噬菌体PC79-13的生物学特性及其荧光标记可视化检测宿主菌

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中国生物工程杂志 2024年第8期 105-115页

作者：陆思源曾宇坤周昕扬州大学兽医学院

目的：通过异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate, FITC)标记分离得到的鸡白痢沙门菌噬菌体PC79-13,建立荧光噬菌体检测鸡白痢沙门菌的流程。方法：从污水中分离得到一株鸡白痢沙门菌(Salmonella pullorum)的烈性噬菌体，透射电... 详细信息

目的：通过异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate, FITC)标记分离得到的鸡白痢沙门菌噬菌体PC79-13,建立荧光噬菌体检测鸡白痢沙门菌的流程。方法：从污水中分离得到一株鸡白痢沙门菌(Salmonella pullorum)的烈性噬菌体，透射电镜表征其形貌，液体培养宿主后感染测定噬菌体一步生长曲线、热稳定性、pH稳定性、紫外线稳定性及最佳感染复数，以及利用生物信息学方法分析其基因组，了解其生物学特性和基因特征。最后用FITC标记此噬菌体获得一种荧光噬菌体探针。结果：此株鸡白痢沙门菌噬菌体(命名为PC79-13)可在鸡白痢沙门菌C79-13双层琼脂平板上形成大小均一、清晰而透亮的噬菌斑。电镜观察显示：噬菌体PC79-13头部为直径约60 nm的正二十面体，长尾，属于有尾噬菌体属长尾噬菌体科。以鸡白痢沙门菌C79-13为宿主菌测得该噬菌体最佳感染复数为0.01,一步生长曲线显示噬菌体PC79-13的潜伏期为30 min,爆发期为80 min。此外，噬菌体PC79-13对酸碱环境皆有较大耐受性，pH=7.0为其最适酸碱度。其抗紫外线照射和高温能力也较强。FITC标记的荧光PC79-13,宿主鸡白痢沙门菌C79-13感染滴度有少量损失(小于10%)。荧光标记的噬菌体PC79-13能高效结合鸡白痢沙门菌C79-13及其他3株鸡白痢沙门菌，在荧光显微镜下显示绿色荧光棒状结构。荧光PC79-13不结合实验室保存的4株鼠伤寒沙门菌、4株肠炎沙门菌及52株大肠杆菌菌株。结论：分离到一株特异性裂解鸡白痢沙门菌的噬菌体PC79-13。荧光标记的PC79-13仍然保持特异性吸附实验室保存的4株鸡白痢沙门菌菌株的能力，在暗场显微镜下可见目标沙门菌呈现亮绿色荧光，检测限为10 CFU/mL,检测时间少于20 min。因此，构建的荧光噬菌体快速检测法，有潜力未来应用于临床常见鸡白痢沙门菌快检。

关键词：鸡白痢沙门菌噬菌体生物学特性异硫氰酸荧光素(FITC) 快速检测

7,8-二羟基黄酮对脂多糖诱导心肌细胞损伤的保护作用及机制研究

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中国药理学通报 2024年第4期40卷 716-722页

作者：李启航马紫微张曼茹于华青葛凤琴宋雨晨郭丹丹赵静杭鹏洲朱华扬州大学临床医学院苏北人民医院江苏扬州225001 扬州大学医学院江苏扬州225009 大连医科大学辽宁大连116000

目的研究7,8-二羟基黄酮(7,8-dihydroxyflavone,7,8-DHF)在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导心肌细胞损伤中的作用及机制。方法传代培养H9c2心肌细胞系,随机分为对照组(Ctrl)、LPS组、LPS+7,8-DHF组和7,8-DHF单独处理组,给药24 h后观察细胞形态,分别采用MTT法检测细胞活力、Live/Dead染色检测细胞活死比例、Mitosox染色检测细胞线粒体氧化应激水平,Western blot技术检测Akt、核因子κB(NF-κB)p65、信号传导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)等蛋白表达水平。结果7,8-DHF增加LPS诱导的心肌细胞活力,减少氧化应激水平和细胞死亡。7,8-DHF激活LPS诱导的心肌细胞Akt信号,抑制STAT3磷酸化水平和NF-κB p65蛋白表达。结论7,8-DHF可能通过激活Akt、抑制磷酸化STAT3和NF-κB p65信号分子减轻LPS诱导的心肌细胞损伤。

关键词：心肌细胞 7,8-二羟基黄酮脂多糖氧化应激核因子κB 信号转导和转录激活因子3

新城疫病毒F蛋白和禽致病性大肠杆菌OmpA嵌合蛋白的表达及双特异性抗体制备

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黑龙江畜牧兽医 2024年第1期 103-108页

作者：袁橙王永娟郭梦娇刘思琪周雨豪江苏农牧科技职业学院动物医学院江苏泰州225300 扬州大学兽医学院江苏扬州225009

为获得Ⅶ型新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)融合蛋白(fusion protein,F蛋白)和O18型禽致病性大肠杆菌(avian pathogenic Escherichia coli,APEC)外膜基因A(outer-membrane proteases,OmpA)嵌合蛋白和双特异性抗体,试验首先采用基因合成技术获得Ⅶ型NDV F基因和O18型APEC的OmpA基因片段,使用同源重组技术将F基因插入到OmpA基因中,再将重组基因片段插入到原核表达载体pGEX-4T-1中构建嵌合表达质粒,对重组质粒中的插入基因序列进行测序鉴定;将序列正确的嵌合表达质粒转入大肠杆菌BL21(Rosetta)感受态细胞中,利用IPTG诱导嵌合蛋白表达,使用SDS-PAGE和Western-blot检验嵌合蛋白的表达情况;纯化嵌合蛋白后免疫兔获得抗血清,抗血清再经抗原亲和纯化层析柱纯化获得多克隆抗体,采用间接酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定抗体效价。结果表明:成功合成了Fo和OmpA1、OmpA2基因片段,构建并表达了重组质粒pGEX-O1-Fo-O2,纯化后的嵌合蛋白O1FoO2在大肠杆菌中以包涵体形式存在,制备的多克隆抗体对O1FoO2的效价约为1.1×10^(6),对GST的效价约为4.1×10^(4)。说明制备的嵌合蛋白和双特异性抗体质量较好。

关键词：新城疫病毒F蛋白大肠杆菌OmpA蛋白嵌合蛋白原核表达多克隆抗体

纳米颗粒应用于非小细胞肺癌治疗的研究热点:文献计量学方法分析

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中国胸心血管外科临床杂志 2024年第8期31卷 1139-1147页

作者：徐翔宇袁磊孙飞沈志明单一波卢毅朱剑炜陈文轩史宏灿扬州大学临床医学院江苏扬州225009 扬州大学医学院(转化医学研究院) 江苏扬州225009 江苏省中西医结合老年病防治重点实验室江苏扬州225009

目的分析当前纳米颗粒在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)治疗中的应用现状和研究热点,预测未来发展趋势。方法检索Web of Science数据库中关于纳米颗粒在NSCLC治疗中应用的研究,检索时间为建库至2022年11月。采用CiteSp... 详细信息

目的分析当前纳米颗粒在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)治疗中的应用现状和研究热点,预测未来发展趋势。方法检索Web of Science数据库中关于纳米颗粒在NSCLC治疗中应用的研究,检索时间为建库至2022年11月。采用CiteSpace、VOSviewer和文献计量在线分析平台(https://***/)对文献数量、来源期刊、作者、机构、国家和关键词进行可视化分析。结果最终纳入英文文献742篇,文献发表数量从2011年开始逐年递增,2020年达到年发表量顶峰。纳米颗粒与NSCLC治疗的研究主要集中在中国、美国、印度和日本。我国是该领域的研究大国,但是缺少与其他国家或相关机构的合作。众多研究机构中,中国科学院是该研究领域发文量最多的机构,研究成果较为突出。关键词分析发现,从2018年开始“聚乳酸羟基乙酸共聚物纳米颗粒”和“光热疗法”成为最新的突现词。不仅如此,“药物递送”等相关关键词的出现频率显著增加,表明聚乳酸羟基乙酸共聚物纳米颗粒在光热疗法中的应用可能是当前NSCLC治疗的研究热点和未来的发展趋势。结论目前纳米颗粒与NSCLC治疗的国内研究在全球处于领先地位,选取不同材料的纳米颗粒并与其他NSCLC疗法进行有机结合有望改善NSCLC患者预后;在未来尝试开发不同来源与结构的纳米颗粒并辅以光热疗法进行NSCLC治疗可能成为纳米颗粒在NSCLC治疗中的研究热点。

关键词：纳米颗粒非小细胞肺癌文献计量学可视化