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甲基化转移酶WTAP调节转录激活因子4表达加剧缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤

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中华危重病急救医学 2024年第3期36卷 279-285页

作者：杨娜曹敏成都市第三人民医院麻醉科四川成都610000 成都市第三人民医院泌尿外科四川成都610000

目的观察甲基化转移酶Wilms肿瘤蛋白1相关蛋白(WTAP)在缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞损伤中的调节作用及其分子机制。方法①实验一:将H9C2心肌细胞分为空白对照组和H/R模型组。采用H/R诱导H9C2细胞建立心肌缺血/再灌注(I/R)损伤模型;空... 详细信息

目的观察甲基化转移酶Wilms肿瘤蛋白1相关蛋白(WTAP)在缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞损伤中的调节作用及其分子机制。方法①实验一:将H9C2心肌细胞分为空白对照组和H/R模型组。采用H/R诱导H9C2细胞建立心肌缺血/再灌注(I/R)损伤模型;空白对照组不进行处理。采用N6-甲基腺苷(m6A)RNA甲基化测定试剂盒检测m6A水平;分别采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测甲基化转移酶〔WTAP、甲基转移酶样蛋白(METTL3、METTL14)〕的基因和蛋白表达水平。②实验二:将H9C2心肌细胞分为空白对照组、H/R+sh-NC组、H/R+sh-WTAP组。H/R+sh-WTAP组转染sh-WTAP以敲降WTAP表达,其余各组制模方法同实验一。转染48 h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡率;采用Western blotting检测WTAP、活化天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)、活化多聚二磷酸腺苷酸核糖聚合酶(PARP)、转录激活因子4(ATF4)、蛋白激酶RNA样内质网激酶(PERK)、磷酸化PERK(p-PERK)和CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的蛋白表达水平;采用免疫荧光染色观察ATF4阳性表达情况。③实验三:将H9C2心肌细胞分为空白对照组、H/R+sh-NC组、H/R+sh-WTAP和H/R+sh-WTAP+ATF4组。H/R+sh-WTAP+ATF4组用过表达质粒ATF4转染H9C2心肌细胞,其余各组制模方法同实验二。采用流式细胞术检测细胞凋亡率;采用Western blotting检测ATF4、CHOP、活化caspase-3和活化PARP的蛋白表达水平。结果①实验一:H/R模型组m6A甲基化水平较空白对照组显著上调。RT-qPCR检测结果显示,H/R模型组METTL3、METTL14和WTAP基因表达水平均较空白对照组显著上调,以WTAP上调最显著;Western blotting检测结果呈相同趋势。提示甲基化转移酶WTAP的表达水平在H/R诱导的心肌细胞中显著上调。②实验二:H/R+sh-WTAP组细胞凋亡水平较H/R+sh-NC组明显减少〔(14.16±1.58)%比(24.51±2.38)%,P<0.05〕。Western blotting检测结果显示,H/R+sh-WTAP组WTAP、活化caspase-3、活化PARP、p-PERK、ATF4和CHOP的蛋白表达水平均较H/R+sh-NC组显著下调。荧光显微镜下显示,H/R+sh-WTAP组ATF4阳性信号较H/R+sh-NC组显著减弱〔(19.36±1.81)%比(32.83±2.69)%,P<0.01〕。提示敲降WTAP可抑制H/R诱导的心肌细胞凋亡和内质网应激。③实验三:H/R+sh-WTAP+ATF4组细胞凋亡水平较H/R+sh-WTAP组显著增加〔(26.61±2.76)%比(17.14±0.87)%,P<0.05〕。Western blotting检测结果显示,H/R+sh-WTAP+ATF4组ATF4、CHOP、活化caspase-3和活化PARP的蛋白表达水平较H/R+sh-WTAP组显著上调。提示过表达ATF4可逆转sh-WTAP对H/R诱导的心肌细胞中内质网应激和细胞凋亡的抑制作用。结论甲基化转移酶WTAP可调节ATF4表达,介导细胞凋亡和内质网应激,促进H/R诱导的心肌细胞损伤。

关键词：甲基转移酶 Wilms肿瘤蛋白1相关蛋白细胞凋亡内质网应激缺氧/复氧

低分子肝素在肿瘤相关静脉血栓栓塞症的出血风险分析

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中国医院药学杂志 2024年

作者：张子雨周后凤张惠玲任常谕廖兰凯成都市第五人民医院药剂科成都市第五人民医院急诊科资阳市第一人民医院肿瘤科

目的：调查肿瘤患者使用低分子肝素防治VTE(venousthromboembolism，VTE)的相关出血风险，为个体化评估肿瘤患者使用低分子肝素防治静脉血栓疾病提供帮助。方法：采用单中心、回顾性观察性队列研究方法，选择2021年1—12月资阳市第一人... 详细信息

目的：调查肿瘤患者使用低分子肝素防治VTE(venousthromboembolism，VTE)的相关出血风险，为个体化评估肿瘤患者使用低分子肝素防治静脉血栓疾病提供帮助。方法：采用单中心、回顾性观察性队列研究方法，选择2021年1—12月资阳市第一人民医院住院的肿瘤患者为观察对象，纳入其中年龄≥18岁并使用低分子肝素防治VTE的患者731例，按照临床结局是否发生出血事件分为出血组和未出血组。结果：单因素分析显示：出血组患者体质量低于未出血组(P=0.009)；出血组使用非甾体类抗炎药占比高于未出血组(P肿瘤分类、LMWH用药持续时间、APTT、FIB及基础疾病状态方面差异无统计学意义(均 P＞0.05)。Logistic 回归分析显示：非甾体类抗炎药、HAS-BLED出血风险评分、低分子肝素使用量、PT 4个变量被纳入模型，模型整体评价采用Omnibus检验，χ2=48.124，P肿瘤患者使用低分子肝素防治VTE的出血危险因素。非甾体类抗炎药、HAS-BLED出血风险评分、低分子肝素使用量、PT可能是预测相关患者出血风险的独立危险因素，但其预测能力并不理想。

关键词：静脉血栓栓塞症(VTE) 低分子肝素(LMWH) 肿瘤出血风险

miR-216a-5p靶向KLF12对肝癌细胞放射敏感性的影响

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中华放射肿瘤学杂志 2024年第1期33卷 56-61页

作者：徐毅黄远东成都市第五人民医院(成都中医药大学附属第五人民医院/第二临床医学院)肿瘤科/成都市肿瘤防治所成都611130

目的探究miR-216a-5p靶向Krüppel样转录因子12(KLF12)对肝癌细胞放射敏感性的影响。方法实时反转录PCR(RT-qPCR)检测人正常肝细胞L-02,人肝癌细胞Huh7、HepG2、Hep3B、MHCC-97H中miR-216a-5p、KLF12 mRNA水平并比较。采用0、2、4、6、8 Gy X射线照射HepG2细胞2 h,比较不同剂量照射组间的miR-216a-5p、KLF12 mRNA水平。采用质粒转染构建miR-216a-5p和/或KLF12过表达的HepG2细胞,并给予4 Gy X射线照射2 h。相应的分组为miR-NC(对照)组、miR-216a-5p组、miR-216a-5p+NC组、miR-216a-5p+KLF12组、IR+miR-NC组、IR+miR-216a-5p组、IR+miR-216a-5p+NC组、IR+miR-216a-5p+KLF12组,比较分组间的miR-216a-5p、KLF12 mRNA水平。克隆形成实验检测细胞放射敏感性;CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡。多组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验。结果与L-02细胞相比,肝癌细胞系中KLF12 mRNA水平升高,miR-216a-5p水平降低(P<0.05)。与0 Gy组相比,2、4、6、8 Gy组KLF12 mRNA水平降低,miR-216a-5p水平升高(P<0.05)。过表达miR-216a-5p或放射处理能够增强细胞放射敏感性和凋亡水平,并降低细胞增殖水平(P<0.05);且过表达miR-216a-5p同时放射处理对细胞上述效果更加明显(P<0.05)。过表达KLF12能部分逆转过表达miR-216a-5p对细胞的上述效果(P<0.05)。结论 miR-216a-5p通过调控KLF12降低细胞增殖能力,增强细胞放射敏感性和细胞凋亡。

关键词：肝肿瘤 Krüppel样转录因子12 miR-216a-5p 放射敏感性

正交千/兆伏级图像评估OSI系统在非共面放疗中的精确性

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中华放射肿瘤学杂志 2024年第1期33卷 40-48页

作者：刘首鹏赖佳路周灵慧毛尔布周楫黄洋刘登洪钟仁明成都市第五人民医院肿瘤科成都611130 四川大学华西医院肿瘤中心放射物理技术中心成都610041

目的评估光学体表成像(OSI)系统立体定向放射外科(SRS)算法在单中心非共面治疗多发性脑转移瘤过程中成像的精确性。方法回顾性分析2022年2—4月在四川大学华西医院行单中心非共面放疗的15例多发性脑转移瘤患者和剂量模体的数据。患者和... 详细信息

目的评估光学体表成像(OSI)系统立体定向放射外科(SRS)算法在单中心非共面治疗多发性脑转移瘤过程中成像的精确性。方法回顾性分析2022年2—4月在四川大学华西医院行单中心非共面放疗的15例多发性脑转移瘤患者和剂量模体的数据。患者和模体均在非共面角度下,分别采用千/兆伏级系统和OSI系统成像,以千/兆伏级成像为参考图像,分析OSI对模体和患者成像的精确性。将OSI系统与千/兆伏级系统之间的差异定义为精确性,其差异绝对值≤1.00 mm/0.50°的百分比定义为阈值合格率。使用Origin软件绘制雷达图和Bland-Altman图做统计分析。结果OSI系统对模体成像时,在左右、头脚、腹背、偏转、翻滚、俯仰六维方向上的平均差异分别为0.03 mm、-0.09 mm、-0.27 mm、0.04°、0.17°、-0.19°,最大值分别为-2.20 mm、-2.30 mm、-1.20 mm、0.60°、-1.00°、-1.00°。OSI系统对15例患者成像时,在六维方向上的平均差异分别为0.44 mm、0.16 mm、-0.20 mm、-0.11°、0.10°、-0.12°,最大值分别为-1.80 mm、2.00 mm、0.90 mm、-0.90°、-0.70°、0.80°。其中平移误差均主要出现在左右和头脚方向。OSI系统对模体和患者成像时,左右方向上的阈值合格率分别为77%和75%,在头脚方向上分别为82%和89%,在六维方向上同时满足±1.00 mm和±0.50°阈值条件的占比分别为57%和56%。结论采用新型SRS算法的OSI系统不能满足多发性脑转移瘤单中心非共面放疗的高精度要求,特别是在左右和头脚方向,不建议将其用于非共面图像引导。

关键词：光学体表成像系统千/兆伏级立体定向放射外科算法多发脑转移瘤非共面放射疗法

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数字放射诊断胸部创伤的临床效果

中文科技期刊数据库（文摘版）医药卫生 2024年第2期 0005-0008页

作者：蒋竹英成都市郫都区人民医院四川成都611730

分析诊断胸部创伤使用数字放射的临床效果。方法选择放射科100例胸部创伤患者;对其数据进行分析;分组后;研究组使用数字放射CT诊断;对照组使用数字放射X线检查;对比组间差异。结果对比对照组;研究组临床诊断符合率明显更高;胸部创伤... 详细信息

分析诊断胸部创伤使用数字放射的临床效果。方法选择放射科100例胸部创伤患者;对其数据进行分析;分组后;研究组使用数字放射CT诊断;对照组使用数字放射X线检查;对比组间差异。结果对比对照组;研究组临床诊断符合率明显更高;胸部创伤完全治愈率明显更高;P<0.05。结论诊断胸部创伤使用数字放射的临床效果理想;推荐使用数字放射CT诊断。

关键词：数字放射诊断胸部创伤临床效果

结直肠癌根治术后患者Tim-3、galectin-9表达水平与其临床病理特征及预后的关系

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四川大学学报（医学版） 2024年第2期55卷 375-382页

作者：张怡然邓丹尹万罗俊刘金星谢臣健季星利马立张莉夏仙根程胜君黄安亮杨帆成都中医药大学医学与生命科学学院成都611137 成都市第五人民医院(成都中医药大学附属第五人民医院/第二临床医学院)病理科成都市肿瘤防治所成都611137 成都市第二人民医院检验科成都610017

目的结直肠癌经根治术治疗后仍有部分患者易复发且预后较差,因此,寻找结直肠癌根治术患者预后判断的潜在生化标志物和药物靶点,对于优化此类群体临床结局具有积极意义。近年来新发现T细胞免疫球蛋白及黏蛋白结构域分子3(T cell immunog... 详细信息

目的结直肠癌经根治术治疗后仍有部分患者易复发且预后较差,因此,寻找结直肠癌根治术患者预后判断的潜在生化标志物和药物靶点,对于优化此类群体临床结局具有积极意义。近年来新发现T细胞免疫球蛋白及黏蛋白结构域分子3(T cell immunoglobulin and mucin domain protein 3, Tim-3)及其配体半乳糖凝集素9(galactose lectin 9,galectin-9)在包括结直肠癌等多种肿瘤引起的免疫功能障碍中扮演着关键角色,但是其在结直肠癌中的表达、生物学作用与预后的价值尚不明确,故而本文旨在探究结直肠癌根治术患者Tim-3、galectin-9表达水平与其临床病理特征及预后的关系。方法选择2018年2月–2019年3月于成都市第五人民医院进行结直肠癌根治术治疗患者171例,采用免疫组化测定患者癌组织样本及癌旁组织中Tim-3、galectin-9的表达情况,并分析其与患者基线参数的关系。利用Kaplan-Meier法分析Tim-3、galectin-9与结直肠癌患者无复发生存期(relapse-free survival, RFS)和总生存期(overall survival, OS)的关系,Cox回归分析影响患者预后不良因素。结果免疫组化结果显示,结直肠癌组织中Tim-3、galectin-9的高表达率分别为70.18%(120/171)、32.16%(55/171),而低表达率分别为29.82%(51/171)、67.84%(116/171)。同时,结直肠癌组织Tim-3的表达评分相较于配对癌旁组织偏高,而galectin-9的表达评分则偏低(P区间(confidence interval, CI):1.20~5.68]以及Tim-3高表达(HR=0.80,95%CI:0.33~0.91)、galectin-9低表达(HR=1.80,95%CI:1.33~4.70)均为影响患者RFS和OS的独立危险因素(P<0.05)。结论结直肠癌组织中Tim-3、galectin-9呈现异常表达,其中高表达Tim-3、低表达galectin-9与不良临床病理特征及预后关系紧密,是患者不良预后事件的独立影响因素,有望成为新的治疗靶点和临床指标。

关键词：结直肠癌 T细胞免疫球蛋白及黏蛋白结构域分子3 半乳糖凝集素9 临床病理特征预后判断

误诊为肺癌骨转移的播散性隐球菌病1例报道及文献复习

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中国真菌学杂志 2024年第3期19卷 277-280页

作者：李妮张纪良陈济成都市第七人民医院肿瘤科成都610000

报道1例播散性的骨隐球菌感染的高龄男性患者的诊疗情况并文献复习,旨在加深对该病的认识,为临床医生提供经验,避免误诊。患者,男,83岁,因左侧髋部疼痛来院就诊,影像学检查提示肺癌伴骨转移可能性大,后行左侧大腿受累股骨穿刺活检术,病... 详细信息

报道1例播散性的骨隐球菌感染的高龄男性患者的诊疗情况并文献复习,旨在加深对该病的认识,为临床医生提供经验,避免误诊。患者,男,83岁,因左侧髋部疼痛来院就诊,影像学检查提示肺癌伴骨转移可能性大,后行左侧大腿受累股骨穿刺活检术,病理诊断示骨隐球菌感染,经氟康唑治疗半年余疼痛逐渐好转,并定期门诊随访。隐球菌病累及骨较为罕见,易与肿瘤、结核等疾病相混淆,主要通过组织活检确诊,经抗真菌、手术治疗可好转或治愈,预后可。

关键词：隐球菌误诊骨肺癌

基于超声指标的甲状腺结节良恶性Nomogram预测模型的建立与验证

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联勤军事医学 2024年第8期 672-677页

作者：阿衣尔红陈志远韩立明周文秀魏星张旭胜成都医学院第三附属医院(成都市郫都区人民医院)超声科成都医学院第三附属医院(成都市郫都区人民医院)检验科

目的建立基于超声指标的甲状腺结节良恶性Nomogram预测模型并进行验证。方法收集2021-04/2023-07月在作者医院行甲状腺结节手术、病历完整且术后甲状腺结节良恶性病理诊断明确的423例患者的临床资料。根据入院时间将患者分为模型组(n=... 详细信息

目的建立基于超声指标的甲状腺结节良恶性Nomogram预测模型并进行验证。方法收集2021-04/2023-07月在作者医院行甲状腺结节手术、病历完整且术后甲状腺结节良恶性病理诊断明确的423例患者的临床资料。根据入院时间将患者分为模型组(n=296)和验证组(n=127)。收集所有患者的一般资料、常规超声、实时弹性成像与超声造影检查结果。根据病理检查结果将模型组患者分为良性组(n=93)与恶性组(n=203),比较两组患者的一般资料、常规超声、实时弹性成像及超声造影指标，以最小绝对值收敛和选择算子算法(least absolute shrinkage and selection operator, LASSO)回归筛选潜在变量后行多因素Logisitic回归，然后建立Nomogram预测模型并进行验证。结果多因素Logistic回归分析结果显示：年龄、结节数目、结节纵横比、结节边界、平均弹性值(elasticity mean, Emean)、均匀度、峰值强度(peak intensity, PI)、曲线下面积(area under the curve, AUC)为甲状腺结节良恶性的独立影响因素(P均区间(confidence interval, CI)为0.787～0.886,特异度为68.80%,灵敏度为81.80%;验证组列线图预测甲状腺结节的良恶性的AUC为0.808,95%CI为0.752～0.863,特异度为72.00%,灵敏度为82.10%。校准曲线分析结果显示：模型组与验证组的预测曲线与标准曲线基本拟合。决策曲线结果显示当模型预测值为18.20%～88.50%时患者净获益率>0。结论甲状腺结节的良恶性与年龄、结节数目、结节纵横比等因素有关，基于超声指标的Nomogram预测模型可预测甲状腺结节的良恶性。

关键词：超声指标甲状腺结节良性恶性甲状腺癌多因素分析 Nomogram预测模型

强直性脊柱炎患者H3K27me3表达水平及其调控Th17细胞分化的表观遗传机制

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四川大学学报（医学版） 2024年第3期55卷 744-748页

作者：程明贾龙薛志远杨涛周雪赵冠兰成都市金牛区人民医院康复科成都610036 四川省医学科学院•四川省人民医院骨科成都610072

目的探讨强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis, AS)中组蛋白H3K27me3甲基化及其调节酶JMJD3和EZH2在Th17细胞分化中的作用,以揭示其在AS发病机制中的潜在作用。通过分析H3K27me3的甲基化状态及其与Th17相关因子之间的相互作用,为AS的... 详细信息

目的探讨强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis, AS)中组蛋白H3K27me3甲基化及其调节酶JMJD3和EZH2在Th17细胞分化中的作用,以揭示其在AS发病机制中的潜在作用。通过分析H3K27me3的甲基化状态及其与Th17相关因子之间的相互作用,为AS的临床治疗提供新的策略和靶点。方法采集84名AS的患者(活跃期、稳定期各42例)和84名健康志愿者(对照组)血液样本,ELISA检测Th17细胞及相关细胞因子(IL-21、IL-22和IL-17),RT-PCR分析Th分化关键信号通路RORc、JAK2、STAT3基因的表达,蛋白质印迹法检测RORc、JAK2/STAT3通路蛋白、H3K27me3及相关蛋白酶EZH2、JMJD3的表达。对活动期AS患者H3K27me3、EZH2、JMJD3与Th分化关键信号通路分子的关联性进行Pearson相关分析。结果 RORc、JAK2、STAT3 mRNA表达,活动期组>稳定期组,差异有统计学意义(P稳定期组>对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。活动期组Th17比例及其炎性因子的表达水平高于其他两组(P<0.05)。H3K27me3与RORc、JAK2、STAT3、IL-17负相关,JMJD3与JAK2、STAT3、IL-17正相关,而EZH2与JAK2、STAT3、IL-17负相关(P<0.05)。结论 AS中H3K27me3的低表达受到基因位点JMJD3和EZH2的影响,可以调节Th17细胞的分化,从而在AS的发病和进展中发挥作用。

关键词：强直性脊柱炎 H3K27me3 Th17细胞分化表观遗传调控