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圈养小熊猫疾病研究现状及展望

四川动物 2024年第5期43卷 565-576页

作者：刘颂蕊李运莉岳婵娟齐敦武侯蓉兰景超成都大熊猫繁育研究基地四川省濒危野生动物保护生物学重点实验室成都610081

由于受栖息地丧失和人类活动干扰等的影响,小熊猫Ailurus fulgens野生种群数量锐减。人工圈养对小熊猫遗传多样性的保护发挥了重要作用,同时也促进了对小熊猫疾病的研究。小熊猫疾病是威胁圈养种群健康和发展的重要因素之一,基于此,本... 详细信息

由于受栖息地丧失和人类活动干扰等的影响,小熊猫Ailurus fulgens野生种群数量锐减。人工圈养对小熊猫遗传多样性的保护发挥了重要作用,同时也促进了对小熊猫疾病的研究。小熊猫疾病是威胁圈养种群健康和发展的重要因素之一,基于此,本文总结了病毒(犬瘟热病毒、细小病毒等)、细菌(大肠杆菌Escherichia coli、肺炎克雷伯菌Klebsiella pneumoniae等)、寄生虫(线虫、弓形虫等)和非感染性因素造成的圈养小熊猫疾病及相关研究进展,分析了疾病对圈养小熊猫种群的危害。旨在引起圈养单位对疾病研究的重视,为种群饲养管理和疾病防控提供参考,也为进一步开展圈养小熊猫的疾病相关研究提供借鉴。

关键词：小熊猫圈养感染性疾病非感染性疾病

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大熊猫LIF基因的原核表达及其单克隆抗体的制备与鉴定

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中国兽医科学 2024年第5期54卷 624-631页

作者：刘项宇张梦诗李非平王神飞胡贤彪刘玉良侯蓉蔡开来成都大熊猫繁育研究基地四川省濒危野生动物保护生物学重点实验室四川成都610081

为获得大熊猫LIF单克隆抗体,将大熊猫LIF基因编码区23~203基因片段添加酶切位点合成后连接到pET30a原核表达载体上,转化BL21感受态细胞,经IPTG诱导表达、纯化蛋白后作为免疫原,对BALB/c小鼠进行免疫,并按照常规方法制备杂交瘤细胞,应用... 详细信息

为获得大熊猫LIF单克隆抗体,将大熊猫LIF基因编码区23~203基因片段添加酶切位点合成后连接到pET30a原核表达载体上,转化BL21感受态细胞,经IPTG诱导表达、纯化蛋白后作为免疫原,对BALB/c小鼠进行免疫,并按照常规方法制备杂交瘤细胞,应用间接ELISA方法筛选鉴定阳性杂交瘤细胞株。结果显示,成功构建了LIF(23-202)-pET30a重组质粒,获得了高纯度的LIF重组蛋白免疫原,得到1株能分泌大熊猫LIF单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其分泌的抗体亚型为IgG2b。Western-blot结果显示,LIF-2单克隆抗体可特异性识别大熊猫子宫内膜间质细胞、睾丸支持细胞、皮肤细胞、脐带间充质干细胞及骨髓间充质干细胞中的LIF蛋白。上述结果为阐明LIF的定位和组织表达信息,探讨LIF在大熊猫胚胎着床中的作用奠定了重要基础。

关键词：大熊猫 LIF 单克隆抗体杂交瘤细胞免疫印迹

原核表达的褐黄血蜱唾液腺蛋白和铁蛋白1的免疫保护效果评价

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畜牧兽医学报 2024年第2期55卷 688-697页

作者：陈玲陈浩岳婵娟马锐范雪阳刘颂蕊杨光友成都大熊猫繁育研究基地四川省濒危野生动物保护生物学重点实验室成都610081 四川农业大学动物医学院成都611130

旨在获得褐黄血蜱重组蛋白(rHfFer1和rHfAV422)并评价其作为抗蜱疫苗的免疫保护效果。通过原核表达获得rHfFer1和rHfAV422,然后将22只新西兰兔随机分为3组(皂素对照组和两个免疫组),其中皂素对照组6只,两个免疫组各8只,所有兔均免疫两次... 详细信息

旨在获得褐黄血蜱重组蛋白(rHfFer1和rHfAV422)并评价其作为抗蜱疫苗的免疫保护效果。通过原核表达获得rHfFer1和rHfAV422,然后将22只新西兰兔随机分为3组(皂素对照组和两个免疫组),其中皂素对照组6只,两个免疫组各8只,所有兔均免疫两次,首免14 d后同等剂量进行二免,二免后一周感染幼蜱,根据蜱的饱血率和蜕皮率为指标评估抗蜱效果。结果显示,rHfFer1和rHfAV422免疫组的饱血率和蜕皮率与对照组均存在显著差异(P研究结果表明,rHfFer1和rHfAV422可以作为抗蜱疫苗研发的候选抗原。

关键词：褐黄血蜱铁蛋白1 Fer1 唾液腺蛋白 AV422 重组蛋白抗蜱效果

不同生活环境下小熊猫皮质醇和肠道微生物的变化规律

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兽类学报 2024年第4期44卷 427-435页

作者：赵星马锐吴蔚李明喜陈超周延山洪明生齐敦武西华师范大学西南野生动植物资源保护教育部重点实验室南充637002 成都大熊猫繁育研究基地四川省濒危野生动物保护生物学重点实验室成都610081

肠道微生物群落易受环境压力的影响,其结构的相对稳定对维持动物机体健康至关重要。皮质醇作为一种应激激素不仅能反映动物应激状况还影响动物的肠道微生物结构,然而小熊猫肠道菌群和粪便皮质醇之间的共变机制尚未被研究。为此,我们通... 详细信息

肠道微生物群落易受环境压力的影响,其结构的相对稳定对维持动物机体健康至关重要。皮质醇作为一种应激激素不仅能反映动物应激状况还影响动物的肠道微生物结构,然而小熊猫肠道菌群和粪便皮质醇之间的共变机制尚未被研究。为此,我们通过比较不同生活环境下(圈养、散养和野生)小熊猫粪便皮质醇和肠道微生物结构的差异,以期阐明其皮质醇和肠道微生物的变化规律。结果发现:(1)圈养环境下皮质醇浓度最低(71.1±21.6)ng/g,散养环境下其浓度为(111.3±5.6)ng/g,而野生环境下最高,为(5094.8±5383.9)ng/g。同时,散养环境下的小熊猫肠道微生物Shannon指数最高(6.178),其次是野生环境下(5.535),圈养环境下最低(3.449)。(2)圈养小熊猫皮质醇浓度与大肠杆菌志贺氏菌属(Escherichia⁃Shigella)呈显著负相关(P熊猫的肠道微生物组成和粪便皮质醇浓度,减少环境的变化频率和强度能有效降低其应激性,维持肠道菌群的健康稳定,这将为小熊猫种群的健康管理提供技术支撑。

关键词：小熊猫肠道微生物 16S rRNA测序皮质醇应激

大熊猫源肠外致病性大肠杆菌的分子分型、耐药表型与耐药基因分析

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四川农业大学学报 2024年第3期42卷 672-680页

作者：王一霖郭向辉彭焜王乙好袁羽刘颂蕊耿毅四川农业大学动物医学院成都611130 成都大熊猫繁育研究基地/四川省濒危野生动物保护生物学重点实验室成都610081

【目的】明确四川大熊猫源肠外致病性大肠杆菌(Ex PEC)的耐药性与耐药基因流行情况,为大熊猫源Ex PEC感染的临床用药提供参考。【方法】从四川省绵阳市和雅安市野外死亡大熊猫的肠外器官采集病料,进行病原菌的分离,通过16S rRNA基因序... 详细信息

【目的】明确四川大熊猫源肠外致病性大肠杆菌(Ex PEC)的耐药性与耐药基因流行情况,为大熊猫源Ex PEC感染的临床用药提供参考。【方法】从四川省绵阳市和雅安市野外死亡大熊猫的肠外器官采集病料,进行病原菌的分离,通过16S rRNA基因序列分析与Ex PEC多重PCR鉴定,继而对分离的Ex PEC进行系统进化群分群、MLST分型和PFGE分型,并采用K-B法与Wafergen Smartchip超高通量qPCR进行耐药表型测定和耐药基因分析。【结果】分离出9株Ex PEC,系统进化群分别为B2群和A群;MLST和PFGE分型均为3种分子型,其中MLST为ST555、U10和ST127型,PFGE为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型;9株Ex PEC对多黏菌素B、亚胺培南、左氧氟沙星与萘啶酸敏感率达100%;对β-内酰胺类、氨基糖苷类、四环素类等9类抗生素耐药基因(ARGs)的检测发现,β-内酰胺类和多重耐药类ARGs检出率较高。【结论】分离鉴定的9株大熊猫源Ex PEC系统进化群主要为B2群,MLST和PFGE分型主要为ST127/PFGE基因Ⅰ型,具有明显的多重耐药性,且β-内酰胺类和多重耐药类ARGs检出率较高,主要通过抗生素失活(antibiotic deactivate)和抗生素外排泵(efflux pump)两种耐药机制介导耐药性。

关键词：肠外致病性大肠杆菌大熊猫分子分型耐药性耐药机制

基于乙肝病毒C蛋白的嵌合犬瘟热病毒样颗粒疫苗的构建

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中国动物传染病学报 2024年

作者：李声苏小艳郑维超赵天燕霞冯娜薛炳钰谢军金周芋伶侯蓉刘颂蕊李林成都大熊猫繁育研究基地四川省濒危野生动物保护生物学重点实验室四川省大熊猫科学研究院医学科学院长春军事兽医研究所

为了更好地保护大熊猫等珍稀野生动物免受犬瘟热（CD）的威胁，研制安全且有效的CD疫苗十分必要。本研究以乙肝病毒C蛋白为核心，通过将其分别与犬瘟热病毒（CDV）的H和F蛋白基因进行重组，利用毕赤酵母GS115对其进行表达，构建嵌合CD... 详细信息

为了更好地保护大熊猫等珍稀野生动物免受犬瘟热（CD）的威胁，研制安全且有效的CD疫苗十分必要。本研究以乙肝病毒C蛋白为核心，通过将其分别与犬瘟热病毒（CDV）的H和F蛋白基因进行重组，利用毕赤酵母GS115对其进行表达，构建嵌合CD病毒样颗粒（VLPs）疫苗；并通过模型动物比格犬进行免疫保护效果试验。PCR检测和测序结果显示，CDV的H和F基因成功重组到了毕赤酵母的线粒体基因组中；Western blot和电镜试验结果显示，H和F基因在毕赤酵母中得到了稳定表达，并形成了VLPs；免疫原性检测结果显示，2 mg疫苗免疫的动物其抗体最高，1 mg疫苗免疫抗体水平一般，对照组没有抗体。攻毒保护试验结果显示，对照组动物出现了结膜炎、呕吐以及身体消瘦等症状，而疫苗组无肉眼可见的临床症状；剖解结果显示，对照组动物肺、脾脏病变明显，而疫苗组动物症状较为轻微。因此，本研究的结果表明，CDV疫苗在毕赤酵母GS115中得到了稳定表达，并形成了VLPs，具有较好的免疫效果。

关键词：犬瘟热病毒样颗粒毕赤酵母免疫评估

微单倍型遗传标记的研究进展及在动物保护上的应用潜力

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野生动物学报 2024年第1期45卷 193-203页

作者：谢大鑫许蔚沈富军张修月四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室成都610065 成都大熊猫繁育研究基地成都610081 四川省濒危野生动物保护生物学重点实验室成都610081

新型遗传标记微单倍型,凭借高稳定性、无“stutter”峰干扰、高多态性、短扩增片段和SNP位点需求量少等显著优势逐渐受到法医物证学、种群遗传学等领域研究人员的关注,并在亲缘关系分析与亲子鉴定方面得到较好应用。本文逐一综述了微单... 详细信息

新型遗传标记微单倍型,凭借高稳定性、无“stutter”峰干扰、高多态性、短扩增片段和SNP位点需求量少等显著优势逐渐受到法医物证学、种群遗传学等领域研究人员的关注,并在亲缘关系分析与亲子鉴定方面得到较好应用。本文逐一综述了微单倍型的发展、命名规则与筛选标准等,回顾了微单倍型数据获取、分析与检测的研究进展,首次对微卫星、SNP和微单倍型3种遗传标记进行了全面比较,并介绍了微单倍型遗传标记在动物学领域的应用潜力及面临的挑战与机遇,期冀为相关研究提供参考。

关键词：微单倍型遗传标记发展演变动物学应用潜力

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唐家河国家级自然保护区同域分布六种偶蹄类动物的活动节律与空间利用

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兽类学报 2024年第5期44卷 598-610页

作者：韩一敏肖梅何梦楠李明富侯蓉吴鹏程何芳谌利民胡杰陈鹏西华师范大学生命科学学院西南野生动植物资源保护教育部重点实验室南充637009 成都大熊猫繁育研究基地四川省濒危野生动物保护生物学重点实验室成都610086 四川唐家河国家级自然保护区管理处青川628109

了解群落中具有相似生态位的同域分布物种的时空分布是群落生态学研究的主要内容之一。本研究于2021年1—12月在四川唐家河国家级自然保护区境内应用红外相机技术进行大中型哺乳动物的监测,共布设红外相机82台,总相机工作日为18710 d。... 详细信息

了解群落中具有相似生态位的同域分布物种的时空分布是群落生态学研究的主要内容之一。本研究于2021年1—12月在四川唐家河国家级自然保护区境内应用红外相机技术进行大中型哺乳动物的监测,共布设红外相机82台,总相机工作日为18710 d。采用核密度估计法(Kernel density estimation)和占域模型(Occupancy model)分析冷季和暖季该保护区内6种偶蹄类的时空分布。研究结果表明:(1)毛冠鹿(Elaphodus cephalophus)和小麂(Muntiacus reevesi)在冷季和暖季的日活动节律高度重叠(△≥0.80),中华扭角羚(Budorcas tibetana)、中华斑羚(Naemorhedus griseus)、中华鬣羚(Capricornis milneedwardsii)和野猪(Sus scrofa)为中度重叠(△值为0.50~0.80);(2)毛冠鹿、小麂、中华扭角羚、中华斑羚和野猪的日活动模式均为双峰型,且都具有晨昏习性,中华鬣羚偏夜行性,日活动模式为多峰型;(3)在冷季,中华扭角羚的占域率最高(0.70),在暖季,中华斑羚的占域率最高(0.96),中华鬣羚在冷季和暖季的占域率均最低,分别是0.18和0.19;(4)海拔、坡度、坡向、距水源地距离及距道路距离是影响这6种偶蹄类空间分布的重要因子。研究显示,唐家河国家级自然保护区内6种偶蹄类动物的活动节律与空间利用在冷季和暖季具有一定的差异性。本研究结果初步揭示了不同季节偶蹄类动物的时空分布特征及影响因素,为今后该区域制定针对性的保护管理措施提供科学依据。

关键词：红外相机偶蹄类动物季节性活动节律空间利用占域模型

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中国鸟类分布新记录种——印度八色鸫

动物学杂志 2024年第1期59卷 158-159页

作者：阙品甲任永红刘祯祥殷后盛陈珏忻刘阳成都大熊猫繁育研究基地四川省濒危野生动物保护生物学重点实验室成都610081 成都观鸟会成都610041 天全县二郎山生态文化研究会雅安625500 中山大学生态学院深圳518107

2023年6月15日,在四川省雅安市天全县城厢镇滨河路(30°03′10″N,102°45′47″E,海拔749 m)发现1只死亡的八色鸫(Pitta sp.),其身体形态完好,无明显伤痕。该鸟头顶具显著的黑色冠纹,由前额延伸至后颈;冠纹两侧为米黄色;黑色宽阔贯眼... 详细信息

2023年6月15日,在四川省雅安市天全县城厢镇滨河路(30°03′10″N,102°45′47″E,海拔749 m)发现1只死亡的八色鸫(Pitta sp.),其身体形态完好,无明显伤痕。该鸟头顶具显著的黑色冠纹,由前额延伸至后颈;冠纹两侧为米黄色;黑色宽阔贯眼纹自眼先经耳羽延伸至颈后与冠纹相交,其上为米白色眉纹;眼下方具一道米白色短线状斑。

关键词：四川省雅安市城厢镇身体形态天全县