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卷叶贝母FcLEA-D29基因的克隆及原核表达分析

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中国中药杂志 2022年第23期47卷 6373-6379页

作者：肖茂桃胡于琴赵琦李锐成都大学食品与生物工程学院四川成都610106 成都大学川藏特色药用植物资源开发利用工程研究中心四川成都610106 阿坝县神禾农业发展有限公司四川阿坝624600

卷叶贝母作为传统名贵中药材川贝母的最珍贵来源,产量和品质易受逆境影响。为开展对卷叶贝母抗逆基因的发掘研究,该研究基于卷叶贝母转录组数据,获得1个胚胎晚期丰富蛋白(LEA)基因,命名为FcLEA-D29。通过生物信息学分析该基因序列特征... 详细信息

卷叶贝母作为传统名贵中药材川贝母的最珍贵来源,产量和品质易受逆境影响。为开展对卷叶贝母抗逆基因的发掘研究,该研究基于卷叶贝母转录组数据,获得1个胚胎晚期丰富蛋白(LEA)基因,命名为FcLEA-D29。通过生物信息学分析该基因序列特征及蛋白结构特点,qRT-PCR检测不同组织及温度胁迫响应表达,并通过原核表达系统验证了FcLEA-D29耐受低温的生物学功能。结果显示,FcLEA-D29基因开放阅读框为777 bp,编码258个氨基酸,多重序列比对预测分析该蛋白属于LEA3家族的LEA-D29亚族;qRT-PCR结果表明FcLEA-D29在鳞茎中特异性表达,响应低温诱导,重组表达菌低温胁迫后的生长情况明显好于对照菌,表明FcLEA-D29可能在卷叶贝母鳞茎发育和低温响应中发挥作用。该研究结果将为进一步探讨FcLEA-D29基因在卷叶贝母低温胁迫下次生代谢产物尤其是生物碱积累机制中的作用奠定了基础,为揭示卷叶贝母低温适应提供直接的分子依据。

关键词：卷叶贝母再生鳞茎 LEA 原核表达

波棱瓜子乙醇提取物抑制DNA同源重组修复增敏顺铂诱导三阴性乳腺癌细胞凋亡的研究

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中药材 2024年 2598-2604页

作者：刘琪裴俊霞曾馨李福伦邓禹成都大学/川藏特色药用植物资源开发利用工程研究中心上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院

目的:研究传统藏药波棱瓜子乙醇提取物(EHC)增敏顺铂诱导三阴性乳腺癌细胞凋亡的作用及其机制。方法:制备波棱瓜子乙醇提取物。将人乳腺癌细胞(MDA-MB-231、MDA-MB-468)分为空白对照组、波棱瓜子乙醇提取物组、顺铂组和联合组。采用CCK-... 详细信息

目的:研究传统藏药波棱瓜子乙醇提取物(EHC)增敏顺铂诱导三阴性乳腺癌细胞凋亡的作用及其机制。方法:制备波棱瓜子乙醇提取物。将人乳腺癌细胞(MDA-MB-231、MDA-MB-468)分为空白对照组、波棱瓜子乙醇提取物组、顺铂组和联合组。采用CCK-8法检测细胞存活率;Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡;Western Blot检测Caspase-3、cleaved Caspase-3、γ-H2AX、RAD51、ATM、BRCA1、FANCD2蛋白表达;免疫荧光法检测γ-H2AX修复斑(Foci)数量的变化;超高效液相-飞行时间联用质谱仪(UPLC-Q-TOF-MS)分析波棱瓜子乙醇提取物中化合物。结果:波棱瓜子乙醇提取物与顺铂联合处理有良好协同效应,能进一步降低三阴性乳腺癌细胞的存活率,增加其DNA双链断裂数量,升高凋亡率及Caspase-3、cleaved Caspase-3、γ-H2AX蛋白表达,降低RAD51、ATM、FANCD2、BRCA1蛋白表达。通过UPLC-Q-TOF-MS鉴别出波棱甲素(Herpetrione)、波棱醇(Herpetotriol)、波棱四醇(Herpetetrol)为波棱瓜子乙醇提取物的主要成分。结论:波棱瓜子乙醇提取物可能通过抑制三阴性乳腺癌细胞的同源重组修复能力增敏顺铂对肿瘤细胞凋亡的诱导能力。

关键词：波棱瓜子三阴性乳腺癌顺铂 DNA损伤修复

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毛筒壳科真菌次级代谢产物生物活性的评价

菌物学报 2019年第4期38卷 560-574页

作者：范翠卢永仲康冀川王鲁雷帮星陈丽庄贵州大学药学院贵州贵阳550025 贵州大学西南特色药用生物资源开发利用教育部工程研究中心贵州贵阳550025

毛筒壳科Tubeufiaceae真菌具有产新结构、新活性次级代谢产物的潜力,目前对该科真菌次级代谢产物的研究较少。为了寻找具有生物活性的新化合物,有必要对毛筒壳科真菌次级代谢产物及其活性进行系统深入的研究。本文采用平板对峙法、生长... 详细信息

毛筒壳科Tubeufiaceae真菌具有产新结构、新活性次级代谢产物的潜力,目前对该科真菌次级代谢产物的研究较少。为了寻找具有生物活性的新化合物,有必要对毛筒壳科真菌次级代谢产物及其活性进行系统深入的研究。本文采用平板对峙法、生长速率法和MTT法,分别测定已分离得到的19株该科真菌活体菌株抑菌活性、发酵物抑菌活性以及发酵物粗提物对不同人体肿瘤细胞株增殖的抑制作用。通过平板对峙法,试验共筛选获得13株活性菌株,其中,红棕毛筒腔菌菌株Tubeufia rubra PF02-2对7种植物病原真菌有明显的抑菌效果,抑制率均高于60%且抑菌谱广。采用生长速率法,发现红棕毛筒腔菌菌株PF02-2经液体发酵后,发酵液对其中4种植物病原真菌仍有一定的抑制作用,且菌丝体部分的乙酸乙酯提取物对马铃薯早疫病病菌Alternariasolani(ZYB)的抑制效果最好。通过MTT法,发现发酵物粗提物对3种肿瘤细胞均具有不同程度的细胞毒活性,其中在300μg/mL时,剑叶莎毛筒腔菌菌株Tubeufia machaerinaeML03-2发酵液部分的乙酸乙酯提取物对人宫颈癌细胞株HeLa和人前列腺癌细胞株PC-3的抑制率(%)分别达到了98.92±0.15和97.86±0.18,在400μg/mL时,对人肝癌细胞株HEPG2的抑制率(%)达到了98.88±0.04;在500μg/mL时,明孢新旋卷孢菌菌株Neohelicosporium hyalosporum ML05-1菌丝体部分的乙酸乙酯提取物对人宫颈癌细胞株HeLa细胞的抑制率(%)为98.32±0.02,在600μg/mL时,对人肝癌细胞株HEPG2的抑制率(%)达到了97.62±0.20,在300μg/mL时,对人前列腺癌细胞株PC-3的抑制率(%)达到了98.91±0.02。该研究结果为开发利用毛筒壳科真菌提供了科学依据。

关键词：毛筒壳科水生真菌次级代谢产物活性筛选

碱促进CO_(2)参与C-H键羰基化反应研究进展

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成都大学学报（自然科学版） 2024年第3期43卷 231-237页

作者：谢锈玫陈雪玲李俊杰覃镜巩少轩敬方舟张振成都大学机械工程学院四川成都610106 成都大学川藏特色药用植物资源开发利用工程研究中心四川成都610106

碱促进CO_(2)参与C-H键羰基化反应因反应体系简洁,最终产物重要而得到了较大的发展,但同时该类反应存在反应温度高与碱用量大等诸多问题,因而系统地对此类反应进行总结和归纳对于问题的解决至关重要.基于此,将CO_(2)参与的羰基化反应分... 详细信息

碱促进CO_(2)参与C-H键羰基化反应因反应体系简洁,最终产物重要而得到了较大的发展,但同时该类反应存在反应温度高与碱用量大等诸多问题,因而系统地对此类反应进行总结和归纳对于问题的解决至关重要.基于此,将CO_(2)参与的羰基化反应分为内酯化反应和内酰胺化反应2大类(其对应的产物分别为酯类和内酰胺类杂环化合物),并依次对各类反应的最新研究进展进行综述,以期为该领域的研究和发展提供借鉴,并在最后对该领域的发展提出了展望.

关键词：二氧化碳羰基化内酯化反应内酰胺化反应

对马铃薯具促生抗病作用的砖红镰刀菌及其遗传转化体系构建

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菌物学报 2021年第8期40卷 2008-2023页

作者：汪健康肖青查兴平何张江康冀川贵州大学西南特色药用生物资源开发利用教育部工程研究中心贵州贵阳550025 贵州大学生命科学学院贵州贵阳550025

本研究从药用植物马比木Nothapodytes pittosporoides的花瓣中分离获得了1株真菌,经形态学与ITS分子共同鉴定为砖红镰刀菌Fusarium lateritium。使用该菌处理马铃薯后发现,显著增强了马铃薯对晚疫病菌的耐受性,处理组植株感染率为37.5%... 详细信息

本研究从药用植物马比木Nothapodytes pittosporoides的花瓣中分离获得了1株真菌,经形态学与ITS分子共同鉴定为砖红镰刀菌Fusarium lateritium。使用该菌处理马铃薯后发现,显著增强了马铃薯对晚疫病菌的耐受性,处理组植株感染率为37.5%,相较对照组87.5%的感染率显著降低;植株生长测定发现,处理组的马铃薯生物量、株高、根系生物量和主根数相较于对照组分别提高了1.25、1.19、2.3、1.47倍,表明该真菌对马铃薯还具有促生作用。为探究砖红镰刀菌促生抗病的分子机理,检测了植物生长素合成和免疫防御相关基因的表达模式,结果表明处理组植株生长素合成相关基因(StYUC5)显著上调,而免疫相关激素茉莉酸和水杨酸合成相关基因(StPI-I、StPAL和StPR1A)也不同程度上调。由此推测,砖红镰刀菌通过调控植物激素相关基因的表达介导马铃薯的促生和抗病。为了进一步探究砖红镰刀菌对马铃薯促生抗病的分子基础,构建了其遗传转化体系,并进行了优化,获得了GFP标记菌株。

关键词：内生真菌砖红镰刀菌抗病促生长遗传转化

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五指毛桃水提液制备泡腾片工艺优化

食品工业科技 2024年第8期45卷 200-207页

作者：杨琳江蓉倩张杭颖李树玉武马璐张君诚三明学院资源与化工学院药用植物开发利用福建省高校工程研究中心福建三明365000

为研究五指毛桃泡腾片制备工艺,以水为溶剂,超声辅助提取五指毛桃中活性成分,采用高效液相色谱质谱联用技术(HPLC-MS/MS)测定提取物种类,通过单因素实验和正交试验优化五指毛桃泡腾片配方。结果表明,五指毛桃水提液检测到433种物质,种... 详细信息

为研究五指毛桃泡腾片制备工艺,以水为溶剂,超声辅助提取五指毛桃中活性成分,采用高效液相色谱质谱联用技术(HPLC-MS/MS)测定提取物种类,通过单因素实验和正交试验优化五指毛桃泡腾片配方。结果表明,五指毛桃水提液检测到433种物质,种类最多的三种物质分别是羧酸及其衍生物(103种)、脂肪酰基(45种)和苯及其取代衍生物(36种)。主要活性成分糖类23种(含量6.71%),黄酮9种(含量0.22%),酚类16种(含量1.65%),香豆素类化合物5种(含量0.51‰),苯丙素类9种。五指毛桃泡腾片最佳制备工艺条件为:25%五指毛桃水提液干粉,50%崩解剂(柠檬酸与碳酸氢钠质量比为1:1.5),20%甘露醇,5%PEG-6000。此工艺条件下制得的五指毛桃泡腾片溶液呈棕黄色,且澄清透明,口感酸甜适口,对DPPH自由基的清除率IC50为1.65 mg/mL。五指毛桃水提液制备泡腾片含有丰富的活性成分且具备抗氧化活性。

关键词：五指毛桃水提液活性成分泡腾片制备工艺

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蛹虫草化学活性成分的研究进展

分子植物育种 2015年第9期13卷 2147-2154页

作者：孟泽彬陈林会韩近雨姜金仲文庭池康冀川贵州师范学院贵州特色生物资源开发利用重点实验室贵阳550018 贵州大学西南药用生物资源教育部工程研究中心贵阳550025

蛹虫草是虫草属的模式标本物种,含有多种生物活性成分,具有广泛的药理作用,有很高的价值。作为我国名贵的中药材,它在功能食品和医药等方面有很好的实用价值,已经能实现规模生产,目前已被国家科技部批准为冬虫夏草的替代品和新资源食品... 详细信息

蛹虫草是虫草属的模式标本物种,含有多种生物活性成分,具有广泛的药理作用,有很高的价值。作为我国名贵的中药材,它在功能食品和医药等方面有很好的实用价值,已经能实现规模生产,目前已被国家科技部批准为冬虫夏草的替代品和新资源食品。本文总结了近年来野生和人工培养蛹虫草的化学活性成分相关研究情况,将对蛹虫草的深度开发、临床应用等提供科学参考。

关键词：蛹虫草化学活性成分生物活性

粉被虫草液体静置发酵产N6-（2-羟乙基）腺苷培养基优化

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分子植物育种 2021年

作者：廖兴刚孟泽彬贺凤姣文庭池贵州师范学院贵州省茶籽资源开发利用工程技术研究中心贵州大学西南药用生物资源教育部工程研究中心

为了获得粉被虫草中高产N6-（2-羟乙基）腺苷（HEA）的培养基，采用液体静置发酵的方式，以菌丝体HEA的产量为指标，HPLC法检测含量，采用单因素实验法研究培养基中8种碳源、8种氮源和8种无机盐对粉被虫草产HEA的影响；用正交实验筛选... 详细信息

为了获得粉被虫草中高产N6-（2-羟乙基）腺苷（HEA）的培养基，采用液体静置发酵的方式，以菌丝体HEA的产量为指标，HPLC法检测含量，采用单因素实验法研究培养基中8种碳源、8种氮源和8种无机盐对粉被虫草产HEA的影响；用正交实验筛选最佳培养基组合。结果显示，蛋白胨、果糖和ZnSO4是粉被虫草产HEA的最适氮源、最适碳源和最适无机盐；其最佳培养基组合为蛋白胨15 g/L，果糖40 g/L，硫酸锌0.5 g/L，此时的HEA产量为（92.311±2.209） mg/L，是目前报道粉被虫草中的最高产量。本试验将为粉被虫草规模生产HEA提供试验参考。

关键词：粉被虫草 N -(2-羟乙基)腺苷液体静置发酵培养基

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内生砖红镰刀菌对番茄生长和抗病的影响

华中农业大学学报 2022年第3期41卷 173-180页

作者：肖青李永杰汪健康查兴平黄建明何张江康冀川贵州大学西南特色药用生物资源开发利用教育部工程研究中心贵阳550025 贵州大学生命科学学院贵阳550025

为探究内生真菌砖红镰刀菌在番茄生长及抗病过程中的作用,使用1×10^(7) CFU/mL砖红镰刀菌芽生孢子悬液浸根处理发芽的番茄,结果显示:处理50 d后番茄株高较对照组增加了1.15倍;叶绿素a、叶绿素b含量较对照组分别增加1.16倍和1.47倍;根... 详细信息

为探究内生真菌砖红镰刀菌在番茄生长及抗病过程中的作用,使用1×10^(7) CFU/mL砖红镰刀菌芽生孢子悬液浸根处理发芽的番茄,结果显示:处理50 d后番茄株高较对照组增加了1.15倍;叶绿素a、叶绿素b含量较对照组分别增加1.16倍和1.47倍;根系生物量较对照增加1.38倍;砖红镰刀菌处理组对番茄枯萎病的病情指数(45.16%)较对照组(74.15%)下降;浸根处理20 d时植物生长素合成关键基因SlYUC5、水杨酸合成关键基因SlICS1表达水平与未处理对照组相比无显著差异;处理30及40 d后,SlYUC5表达水平较对照组相比表达显著上升,SlICS1表达水平较对照组显著降低;茉莉酸合成途径关键基因SlLOXD在20 d时表达水平较对照组显著下调38.73%(P植物抗性相关蛋白基因SlPR1a在20、30和40 d的表达量被显著上调了7.89倍、5.77倍和1.8倍(P植物激素相关基因表达从而影响植株的长生发育和抗病。

关键词：内生真菌砖红镰刀菌番茄促生抗病