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一种检测环氧合酶的新方法——半定量RT-PCR法

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四川大学学报（自然科学版） 2002年第S1期39卷 138-141页

作者：曾宏晏菊芳张健田荷高小平成都地奥集团药物研究所成都610041

作者研究的目的是建立一种较为灵敏、简便的方法检测环氧合酶COX 2 .先设计了一对针对COX 2的特异性引物 ,建立了以半定量逆转录聚合酶链反应 (Semi QuantitativeReverseTranscrip tionPCR ,SQRT PCR)方法检测COX 2的mRNA ,用该方... 详细信息

作者研究的目的是建立一种较为灵敏、简便的方法检测环氧合酶COX 2 .先设计了一对针对COX 2的特异性引物 ,建立了以半定量逆转录聚合酶链反应 (Semi QuantitativeReverseTranscrip tionPCR ,SQRT PCR)方法检测COX 2的mRNA ,用该方法检测 7种结肠癌细胞和非甾体类抗炎药吲哚美辛 ,作用于其中一种细胞后的COX 2mRNA .实验结果显示 ,半定量RT PCR法可以灵敏、快速地反映COX 2mRNA表达水平的变化 ,为寻找新的COX 2选择性抑制剂和分析NSAIDs抗炎作用机理提供了一种新的方法 .

关键词：环氧合酶逆转录聚合酶链反应非体类抗炎药

重组人TRAIL蛋白的原核表达、纯化及鉴定

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四川大学学报（自然科学版） 2002年第S1期39卷 142-145页

作者：周建彭旭东张健高小平成都地奥集团药物研究所成都610041

将含有人TRAIL蛋白表达质粒的大肠杆菌以IPTG诱导表达 ,表达蛋白主要以包涵体形式存在 .经菌体破碎、包涵体分离、抽提及复性 ,用Ni NTASuperflow柱层析及进一步的离子交换色谱分离纯化获得纯蛋白 .SDS PAGE显示纯化的蛋白为 19kD的单... 详细信息

将含有人TRAIL蛋白表达质粒的大肠杆菌以IPTG诱导表达 ,表达蛋白主要以包涵体形式存在 .经菌体破碎、包涵体分离、抽提及复性 ,用Ni NTASuperflow柱层析及进一步的离子交换色谱分离纯化获得纯蛋白 .SDS PAGE显示纯化的蛋白为 19kD的单一条带 .Westernblot鉴定表明 ,纯化的表达产物与抗人TRAIL蛋白的抗体发生特异性免疫反应 .抗肿瘤生物活性测定表明该纯化蛋白对肿瘤细胞的体外生长具有显著的抑制作用 .

关键词： TRAIL 纯化 NiNTASuperflow

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从丹参中筛选血管紧张素转换酶抑制剂

中国中药杂志 2004年第4期29卷 359-362页

作者：高小平徐大勇邓义龙张燕成都地奥制药集团药物研究所四川成都610041

目的 :从丹参中筛选血管紧张素转换酶抑制剂 (ACEI)。方法 :分别提取丹参水溶性和脂溶性部分 ,用荧光检测法筛选抑制血管紧张素转换酶 (ACE)活性的有效部位或成分。结果 :丹参水溶性部分、丹参总酚酸及丹酚酸B显著降低了大鼠肺组织的AC... 详细信息

目的 :从丹参中筛选血管紧张素转换酶抑制剂 (ACEI)。方法 :分别提取丹参水溶性和脂溶性部分 ,用荧光检测法筛选抑制血管紧张素转换酶 (ACE)活性的有效部位或成分。结果 :丹参水溶性部分、丹参总酚酸及丹酚酸B显著降低了大鼠肺组织的ACE活性 ,其IC50 分别为 ( 2 .4 5± 0 .0 7) ,( 0 .2 4± 0 .0 2 ) ,( 0 .0 2± 0 .0 1)g·L-1。含丹参酮Ⅰ ,Ⅱ的菲醌类成分或脂溶性部分没有作用。结论 :丹参具有ACEI作用 ,其活性成分存在水溶性部分中。

关键词：丹参血管紧张素转换酶抑制剂酚酸类荧光检测法药理作用

PPARγ激动剂的设计、合成及其胰岛素增敏活性

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药学学报 2005年第2期40卷 136-140页

作者：钟朝斌朱学军刘忠荣高小平王学超成都地奥制药集团药物研究所四川成都610041

目的　寻找新的高效、低毒的PPARγ激动剂。方法　以JTT 501和JTT 20993为先导化合物,设计并合成新的丙二酸类和异恶唑类化合物,并测定其胰岛素增敏活性。结果　共合成了 8个新化合物,用核磁共振、质谱和红外光谱进行结构确证,并用胰岛... 详细信息

目的　寻找新的高效、低毒的PPARγ激动剂。方法　以JTT 501和JTT 20993为先导化合物,设计并合成新的丙二酸类和异恶唑类化合物,并测定其胰岛素增敏活性。结果　共合成了 8个新化合物,用核磁共振、质谱和红外光谱进行结构确证,并用胰岛素筛选模型初步评价了这些化合物的胰岛素增敏活性。化合物 1A-4A显示胰岛素增敏活性,其中化合物 1A和 3A有较强活性。结论　化合物 1A和 3A值得进一步评价。

关键词： PPARγ激动剂合成胰岛素增敏活性

用IE-HPLC、PAGE分析合成的硫代寡核苷酸相关物质“n-1”、“n-2”和“n-3”

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药物分析杂志 2002年第5期22卷 371-375页

作者：李麒麟周建王小行高小平成都地奥制药集团药物研究所成都610041

目的:分析合成的n=20-mer硫代寡核苷酸中相关物质“n-1”、“ n-2”和“ n-3”杂质失败序列。方法:离子交换高效液相色谱(IE-HPLC)法和聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PAGE)。色谱柱为Gen-Pak^(TM)FAX离子交换柱(4.6 mm×100mm),流动相A为62.5mmo... 详细信息

目的:分析合成的n=20-mer硫代寡核苷酸中相关物质“n-1”、“ n-2”和“ n-3”杂质失败序列。方法:离子交换高效液相色谱(IE-HPLC)法和聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PAGE)。色谱柱为Gen-Pak^(TM)FAX离子交换柱(4.6 mm×100mm),流动相A为62.5mmol·L^(-1)三羟甲基氨基甲烷盐酸(Tris·Cl),pH 8.15,流动相B为62.5mmol·L^(-1) Tris·Cl,pH 8.15,2.5 mol·L^(-1) LiCl,流动相C为100％乙腈;梯度洗脱条件为B:30％→50％ 30 min,C:恒为20％;流速为0.75mL·min^(-1);检测波长为260nm。PAGE分析采用20％变性聚丙烯酰胺凝胶,恒定功率25W进行电泳。结果:IE-HPLC分离纯化出3种相关物质,通过PAGE印证了它们是由于合成偶联不完全而产生的n-1、n-2和n-3的杂质失败序列。结论:所用离子交换高效液相色谱法能将合成的硫代寡核苷酸中相关物质“n-1”、“n-2”和“n-3”杂质失败序列与全序列n一一分离出来,对硫代寡核苷酸的纯化和分析具有重要的参考价值。

关键词：硫代反义寡核苷酸相关物质离子交换高效液相色谱法聚丙烯酰胺凝胶电泳法 “n-1” “n-2” “n-3”

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地榆促造血作用的有效部位筛选

中国天然药物 2006年第2期4卷 137-140页

作者：高小平吴建明邹文俊刘忠荣李伯刚成都地奥制药集团药物研究所成都610041

目的:筛选地榆促造血作用的有效部位。方法:小鼠骨髓造血细胞培养在96孔培养板中,加入不同浓度的地榆提取物培养10 d,用ATP/生物发光法检测骨髓细胞增殖,体外筛选地榆促造血作用的有效部位;用1、0.5、0.1 ***-1,地榆有效部位连续灌胃给... 详细信息

目的:筛选地榆促造血作用的有效部位。方法:小鼠骨髓造血细胞培养在96孔培养板中,加入不同浓度的地榆提取物培养10 d,用ATP/生物发光法检测骨髓细胞增殖,体外筛选地榆促造血作用的有效部位;用1、0.5、0.1 ***-1,地榆有效部位连续灌胃给予小鼠14 d,分别计数骨髓有核细胞、外周血白细胞、红细胞和血小板,进一步验证体外筛选所获有效部位的促造血作用。结果:地榆皂苷显示增强细胞因子刺激的小鼠骨髓细胞体外增殖,鞣质和黄酮类成分没有作用;以1、0.5、0.1 ***-1总皂苷处理小鼠14 d后,显著增加了小鼠骨髓有核细胞数量,外周血白细胞、红细胞以及血小板数量也显著升高。结论:地榆皂苷是促小鼠骨髓细胞体外增殖的主要活性部位,地榆皂苷也能升高骨髓抑制小鼠骨髓有核细胞和外周血白细胞、红细胞以及血小板的数量。

关键词：地榆地榆皂苷造血细胞白细胞红细胞血小板

吸水链霉菌抗金黄色葡萄球菌代谢产物(英文)

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应用与环境生物学报 2010年第2期16卷 261-263页

作者：龚雨梅陈军杨涛李宗珍李国友中国科学院成都生物研究所成都610041 成都地奥集团药物研究所成都610041

通过活性跟踪,从吸水链霉菌1.358(Streptomyces hygroscopicus 1.358)发酵液的乙酸乙酯萃取物中分离得到3个化合物(1～3).利用波谱技术,这些化合物分别鉴定为抗生素RK955A(1)、尼日尼亚菌素(2)和阿扎霉素(3).化合物1～3具有显著的抗金... 详细信息

通过活性跟踪,从吸水链霉菌1.358(Streptomyces hygroscopicus 1.358)发酵液的乙酸乙酯萃取物中分离得到3个化合物(1～3).利用波谱技术,这些化合物分别鉴定为抗生素RK955A(1)、尼日尼亚菌素(2)和阿扎霉素(3).化合物1～3具有显著的抗金黄色葡萄球菌活性.

关键词：金黄色葡萄球菌吸水链霉菌尼日尼亚菌素阿扎霉素次生代谢产物抗菌活性

薯蓣皂甙元氨基酸酯的合成及其动物实验——薯蓣皂甙元衍生物的研究Ⅱ

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天然产物研究与开发 2003年第5期15卷 401-404页

作者：王学超叶仲林刘忠荣李伯刚王六堂何民成都地奥制药集团药物研究所成都610041

以薯蓣皂甙元为原料,经过与氨基酸缩合,合成了6个新化合物,甘氨酸薯蓣皂甙元酯(1),DL-组氨酸薯蓣皂甙元酯醋酸盐(2),L-赖氨酸薯蓣皂甙元酯(3),N-L-赖氨酰基甘氨酸薯蓣皂甙元酯醋酸盐(4),N-L-精氨酰基甘氨酸薯蓣皂甙元酯醋酸盐(5),N-DL-... 详细信息

以薯蓣皂甙元为原料,经过与氨基酸缩合,合成了6个新化合物,甘氨酸薯蓣皂甙元酯(1),DL-组氨酸薯蓣皂甙元酯醋酸盐(2),L-赖氨酸薯蓣皂甙元酯(3),N-L-赖氨酰基甘氨酸薯蓣皂甙元酯醋酸盐(4),N-L-精氨酰基甘氨酸薯蓣皂甙元酯醋酸盐(5),N-DL-组氨酰基甘氨酸薯蓣皂甙元酯醋酸盐(6),并对结构进行了鉴定。同时发现这6个化合物具有抗大鼠实验性心肌梗死作用。

关键词：薯蓣皂甙元衍生物合成抗心肌梗死心肌缺血

薯蓣皂甙元丁二酸单酯氨基酸盐的合成及其动物实验——薯蓣皂甙元衍生物的研究I

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天然产物研究与开发 2003年第4期15卷 304-307页

作者：叶仲林王学超刘忠荣李伯刚孙仕勇邓林根何民成都地奥制药集团药物研究所成都610041

以薯蓣皂甙元丁二酸单酯为原料 ,经过与氨基酸缩合 ,合成了 5个新化合物 ,4 L (N 丁二酸 2 基 )胺基 4 氧代丁酸薯蓣皂甙元酯二钠盐 (1) ,4 (N 乙酸 2 基 )胺基 4 氧代丁酸薯蓣皂甙元酯钠盐(2 ) ,4 L (N (5 胍基 )戊酸 2 基 )... 详细信息

以薯蓣皂甙元丁二酸单酯为原料 ,经过与氨基酸缩合 ,合成了 5个新化合物 ,4 L (N 丁二酸 2 基 )胺基 4 氧代丁酸薯蓣皂甙元酯二钠盐 (1) ,4 (N 乙酸 2 基 )胺基 4 氧代丁酸薯蓣皂甙元酯钠盐(2 ) ,4 L (N (5 胍基 )戊酸 2 基 )胺基 4 氧代丁酸薯蓣皂甙元酯醋酸盐 (3) ,4 (N (3 咪唑 4 基 )丙酸 2 基 )胺基 4 氧代丁酸薯蓣皂甙元酯醋酸盐 (4) ,4 (N 戊二酸 2 基 )胺基 4 氧代丁酸薯蓣皂甙元酯二钠盐(5 ) ,并对其进行了结构鉴定 ,同时发现这 5个化合物对大鼠都具有抗心肌梗死活性。

关键词：薯蓣皂甙元丁二酸单酯氨基酸盐合成动物实验薯蓣皂甙元衍生物抗心肌梗死