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MiR-15b-5p靶向FOXO1对缺氧/复氧诱导的人肾小管上皮细胞损伤的调控作用及其机制

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解放军医学杂志 2024年

作者：李华锋张鸿毅肖克兵杨辉李子峰赵刚刚西安医学院第一附属医院泌尿外科

目的　探讨miR-15b-5p靶向叉头框蛋白O1(FOXO1)对缺氧/复氧(H/R)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)损伤的调控作用及其机制。方法　取对数生长期HK-2细胞，设置：(1)对照组(正常培养)、H/R组(H/R诱导培养)。倒置显微镜下观察HK-2细胞形态，... 详细信息

目的　探讨miR-15b-5p靶向叉头框蛋白O1(FOXO1)对缺氧/复氧(H/R)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)损伤的调控作用及其机制。方法　取对数生长期HK-2细胞，设置：(1)对照组(正常培养)、H/R组(H/R诱导培养)。倒置显微镜下观察HK-2细胞形态，采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测mi-15b-5p、FOXO1 mRNA的表达，Western blotting检测FOXO1蛋白的表达。(2)对照组(正常培养)、H/R组(H/R诱导培养)、H/R+mimic对照组(转染mimic对照质粒后H/R诱导培养)、H/R+miR-15b-5p mimic组(转染miR-15b-5p mimic后H/R诱导培养)、H/R+miR-15b-5p mimic+OE-NC组(共转染miR-15b-5p mimi和OE-NC质粒后H/R诱导培养)、H/R+miR-15b-5p mimic+OE-FOXO1组(共转染miR-15b-5p mimi和FOXO1过表达质粒后H/R诱导培养)。采用qRT-PCR检测mi-15b-5p的表达，Western blotting检测FOXO1、cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白的表达，CCK-8法检测细胞活性，TUNEL检测细胞凋亡情况。(3)对照组(正常培养)、H/R组(H/R诱导培养)、H/R+miR-15b-5p mimic组(转染miR-15b-5p mimic后进行H/R诱导培养)、H/R+miR-15b-5p mimic+OE-FOXO1组(共转染miR-15b-5p mimic和OE-FOXO1后进行H/R诱导培养)。采用Western blotting检测LC3、p62、Beclin-1蛋白的表达，LC3免疫荧光检测细胞自噬水平。双荧光素酶报告实验检测miR-15b-5p和FOXO1之间的靶向关系。结果　倒置显微镜下观察显示，对照组细胞数量较多，细胞大多呈典型鹅卵石形态，铺路石状生长；H/R组大部分细胞收缩变圆，贴壁细胞数量明显减少；与对照组比较，H/R组miR-15b-5p相对表达水平明显降低，FOXO1 mRNA和蛋白相对表达水平明显升高(P<0.05)。荧光素酶报告实验结果显示miR-15b-5p直接靶向作用于FOXO1的3’-UTR。miR-15b-5p过表达抑制H/R诱导的HK-2细胞活性，降低细胞凋亡，抑制细胞自噬(P<0.05)。与H/R+miR-15b-5p mimic组相比，H/R+miR-15b-5p mimic+OE-FOXO1组HK-2细胞活性降低，细胞凋亡和自噬水平增高(P<0.05)。结论　miR-15b-5p通过靶向抑制FOXO1降低细胞自噬减缓H/R诱导的HK-2细胞损伤。

关键词： miR-15b-5p 叉头框蛋白O1 人肾小管上皮细胞缺氧/复氧自噬

lncRNA MIF-AS1调节miR-423-5p/PYCR1轴对前列腺癌细胞恶性生物学行为的影响

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实用医学杂志 2024年第18期40卷 2544-2549页

作者：杨剑波邵继春曾治军赵涛王兴成都医学院第二附属医院/核工业四一六医院泌尿外科成都610057

目的探究长链非编码RNA(lncRNA)巨噬细胞移动抑制因子反义RNA1(MIF-AS1)调节miR-423-5p/吡咯啉-5-羧酸还原酶1(PYCR1)轴对前列腺癌(PC)细胞恶性生物学行为的影响。方法体外培养PC3细胞,敲低MIF-AS1或下调miR-423-5p表达,检测PC患者肿瘤... 详细信息

目的探究长链非编码RNA(lncRNA)巨噬细胞移动抑制因子反义RNA1(MIF-AS1)调节miR-423-5p/吡咯啉-5-羧酸还原酶1(PYCR1)轴对前列腺癌(PC)细胞恶性生物学行为的影响。方法体外培养PC3细胞,敲低MIF-AS1或下调miR-423-5p表达,检测PC患者肿瘤组织与癌旁组织和细胞中MIF-AS1、miR-423-5p和PYCR1 mRNA的表达;检测细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭;Western blot检测PYCR1蛋白表达;验证miR-423-5p和MIF-AS1、PYCR1的关系。结果MIF-AS1、PYCR1 mRNA在肿瘤组织中呈高表达,miR-423-5p呈低表达。沉默MIF-AS1可抑制PC3细胞增殖、迁移、侵袭及PYCR1表达,上调miR-423-5p表达,诱导细胞凋亡(P<0.05);抑制miR-423-5p表达可逆转沉默MIF-AS1对PC3细胞恶性行为的抑制作用(P<0.05)。MIF-AS1、PYCR1与miR-423-5p存在靶向调控关系。结论沉默MIF-AS1可能通过上调miR-423-5p来抑制PYCR1表达,抑制PC细胞的恶性行为。

关键词：长链非编码RNA巨噬细胞移动抑制因子反义RNA1 miR-423-5p 吡咯啉-5-羧酸还原酶1 前列腺癌恶性生物学行为

多模化仿生应力调节膀胱平滑肌细胞的生物学功能

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生物医学工程学杂志 2024年第2期41卷 321-327页

作者：韦堂墙陈林胡海峰杨进成都大学附属医院泌尿外科成都610081

以往研究表明,经过多代培养后的细胞会出现生长停滞、去分化和丧失原有功能等问题,其原因是缺乏应力刺激。为探讨多模化仿生应力(MMBS)对人膀胱平滑肌细胞(HBSMCs)生物学功能的影响,本实验建立了MMBS培养系统来模拟膀胱所受的应力环境,... 详细信息

以往研究表明,经过多代培养后的细胞会出现生长停滞、去分化和丧失原有功能等问题,其原因是缺乏应力刺激。为探讨多模化仿生应力(MMBS)对人膀胱平滑肌细胞(HBSMCs)生物学功能的影响,本实验建立了MMBS培养系统来模拟膀胱所受的应力环境,并对HBSMCs加载不同强度的仿生应力持续24 h,然后检测细胞生长、增殖及功能分化。结果显示,MMBS可以促进HBSMCs的生长和增殖,以80 cm H_(2)O压力附加4%牵张应力,对促进HBSMCs的生长、增殖以及α—平滑肌肌动蛋白和平滑肌蛋白22—α的表达最有效。综上,在构建组织工程膀胱时,MMBS培养系统将有助于调节HBSMCs的生长、增殖以及功能分化成熟。

关键词：组织工程膀胱平滑肌细胞应力细胞增殖细胞分化

阿托伐他汀对肾结石大鼠Tamm-Horsfall蛋白水平及内质网应激-自噬途径的影响

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中国老年学杂志 2024年第16期 3963-3970页

作者：李挺云周治彦周邦奋王声兴梁培育海南医学院第一附属医院泌尿外科

目的探究阿托伐他汀对肾结石大鼠的影响及其作用机制。方法将40只SD大鼠按数字随机表法分为对照组、模型组、阿托伐他汀组、阿托伐他汀+内质网应激激动剂组，每组10只，除对照组外，其余3组均采用乙二醇+氯化铵溶液灌胃法构建肾结石... 详细信息

目的探究阿托伐他汀对肾结石大鼠的影响及其作用机制。方法将40只SD大鼠按数字随机表法分为对照组、模型组、阿托伐他汀组、阿托伐他汀+内质网应激激动剂组，每组10只，除对照组外，其余3组均采用乙二醇+氯化铵溶液灌胃法构建肾结石模型，阿托伐他汀组和阿托伐他汀+内质网应激激动剂组均以10 mg/kg阿托伐他汀灌胃，每日1次，28 d后，阿托伐他汀+内质网应激激动剂组再以1 mg/kg内质网应激激动剂衣霉素单次灌胃。处理结束后，检测各组尿液钙离子(Ca2+)、尿草酸（Ox）、尿柠檬酸（CA）水平及血清Ca2+、尿素氮（BUN）、肌酐（SCr）水平，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测不同时间点尿液中Tamm-Horsfall蛋白（THP）含量，苏木素-伊红（HE）染色和VonKossa染色观察肾组织病理学损伤与草酸钙结晶沉积情况，TUNEL染色检测肾组织细胞凋亡水平，免疫组化染色检测肾组织内THP和自噬标志物人微管结合蛋白1轻链（LC）3B表达，透射电子显微镜观察肾组织内自噬变化，Real-time聚合酶链反应（PCR）实验测定肾组织内CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）与葡萄糖调节蛋白（GRP）78 mRNA表达水平，Western印迹法测定肾组织内CHOP、GRP78、胱天蛋白酶（Caspase）-12、自噬相关蛋白（Beclin）-1表达水平及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ。结果相较于模型组，阿托伐他汀组尿液Ca2+、Ox水平降低，CA水平升高，血清Ca2+、BUN及SCr水平降低，在处理后第1、2、4、8周尿液中THP含量降低，肾组织内肾小管管腔扩张、病变现象减轻，草酸钙结晶沉积也明显减少，TUNEL阳性率减少，THP和LC3B阳性面积降低，自噬泡数量减少，同时，肾组织内CHOP与GRP78 mRNA相对表达量、CHOP、GRP78、Caspase-12、Beclin-1蛋白相对表达量及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ降低，差异具有统计学意义（P<0.05）;与阿托伐他汀组比较，阿托伐他汀+内质网应激激动剂组尿液Ca2+与Ox水平升高、CA水平降低，血清Ca2+、BUN、SCr水平均升高，在处理后第1、2、4、8周尿液中THP含量较高，肾组织内肾小管管腔扩张且草酸钙结晶沉积增多，TUNEL阳性率增加，THP和LC3B阳性面积升高，自噬泡数量增加，肾组织内CHOP与GRP78 mRNA相对表达量、CHOP、GRP78、Caspase-12、Beclin-1蛋白相对表达量及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ升高，差异具有统计学意义（P<0.05）。结论阿托伐他汀能够减少大鼠肾结石形成并改善肾功能，其作用机制可能是抑制THP水平，降低内质网应激-自噬水平从而减少肾组织细胞凋亡的发生。

关键词：肾结石阿托伐他汀 Tamm-Horsfall蛋白内质网应激自噬

剑突下单孔胸腔镜手术在肺部疾病中的应用进展

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中国微创外科杂志 2024年第4期24卷 294-297页

作者：王洪(综述) 伍治强(审校) 成都医学院第一附属医院胸心外科成都610500

胸腔镜手术(video-assisted thoracoscopic surgery,VATS)目前已广泛应用于肺部常见疾病的诊断和治疗中。经过20多年的发展,VATS已由多孔逐渐发展为以单孔胸腔镜手术(uniportal video-assisted thoracoscopic surgery,UVATS)为主的手术方式[1],且在国内已得到广泛应用[2]。近年来,为避免肋间神经损伤,减轻患者术后疼痛,加速患者术后康复,胸外科医生在肺部手术中开始采用剑突下单孔胸腔镜手术(subxiphoid uniportal video-assisted thoracoscopic surgery,SUVATS)。

关键词：单孔胸腔镜手术胸外科医生肺部手术肋间神经剑突下肺部疾病术后疼痛 VATS

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剑突下单孔胸腔镜在前纵隔肿瘤中的应用进展

中国微创外科杂志 2024年第7期24卷 511-514页

作者：王洪(综述) 伍治强(审校) 成都医学院第一附属医院胸心外科成都610500

前纵隔肿瘤切除的传统方法是正中开胸手术,创伤大,术后并发症多,已转变为经肋间入路多孔或两孔电视胸腔镜手术(video-assisted thoracoscopic surgery,VATS)。近年来,单孔电视胸腔镜手术(uniportal VATS,U-VATS)在胸部疾病的诊疗中得到... 详细信息

前纵隔肿瘤切除的传统方法是正中开胸手术,创伤大,术后并发症多,已转变为经肋间入路多孔或两孔电视胸腔镜手术(video-assisted thoracoscopic surgery,VATS)。近年来,单孔电视胸腔镜手术(uniportal VATS,U-VATS)在胸部疾病的诊疗中得到广泛应用[1]。相较于经肋间入路U-VATS,剑突下U-VATS(subxiphoid U-VATS,SU-VATS)能够完整地显示前纵隔间隙,更好地暴露并保护双侧膈神经,彻底切除前纵隔脂肪组织,尤其是两侧心膈角的脂肪组织,并能完整显露并切除左无名静脉上方组织,同时,可避免肋间神经损伤,减轻术后疼痛,有助于术后咳嗽及早期下床活动,促进快速康复。

关键词：前纵隔肿瘤电视胸腔镜手术早期下床活动肋间神经膈神经单孔胸腔镜心膈角脂肪组织

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双侧输尿管肾源性腺瘤1例报告

中华泌尿外科杂志 2024年第2期45卷 148-149页

作者：周世英何书明海南医学院第二附属医院泌尿外科海口570311

肾源性腺瘤发生于输尿管罕见。本文报道1例双侧输尿管肾源性腺瘤患者,术前CT检查示膀胱癌累及双侧输尿管壁内段和盆段。行膀胱镜活检,病理检查示肾源性腺瘤。行左侧输尿管镜检查+双侧输尿管下段切除术+右侧输尿管膀胱吻合术+左侧膀胱瓣... 详细信息

肾源性腺瘤发生于输尿管罕见。本文报道1例双侧输尿管肾源性腺瘤患者,术前CT检查示膀胱癌累及双侧输尿管壁内段和盆段。行膀胱镜活检,病理检查示肾源性腺瘤。行左侧输尿管镜检查+双侧输尿管下段切除术+右侧输尿管膀胱吻合术+左侧膀胱瓣输尿管下段成形术。术后病理诊断为肾源性腺瘤。术后随访26个月,患者无复发和转移。

关键词：输尿管输尿管肿瘤肾源性腺瘤

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中华泌尿外科杂志 2024年第3期45卷 161-167页

作者：徐云泽孔文曹明孙光曦赵劲歌刘嵩阳张志凌何立儒杨晓群张海洲徐烈雨于妍斐王杭祁洪刚许天源杨博袁易初陈东宁林登强周芳坚魏强薛蔚马鑫董培曾浩张进上海交通大学医学院附属仁济医院泌尿科上海200125 四川大学华西医院泌尿外科成都610041 中山大学附属肿瘤医院泌尿外科广州510030 上海交通大学医学院附属瑞金医院病理科上海200025 无锡市惠山区第二人民医院泌尿外科无锡214000 江西省人民医院泌尿外科南昌330000 北京大学第一医院泌尿外科北京100034 复旦大学附属中山医院泌尿外科上海200030 浙江大学医学院第一附属医院泌尿外科杭州310003 同济大学附属第十人民医院泌尿外科上海200070 华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植科武汉430030 浙江大学医学院附属第二医院泌尿外科杭州310003 福建医科大学附属第一医院泌尿外科福州350000 复旦大学附属中山医院厦门医院泌尿外科厦门361009 解放军总医院泌尿外科北京100853

目的探讨我国遗传性平滑肌瘤病和肾细胞癌综合征相关性肾癌(HLRCC-RCC)患者的临床特征以及系统治疗的有效性。方法去回顾性分析2008年1月至2021年12月在国内15家医疗中心基因诊断明确有FH胚系突变的119例HLRCC-RCC患者的临床资料。男73... 详细信息

目的探讨我国遗传性平滑肌瘤病和肾细胞癌综合征相关性肾癌(HLRCC-RCC)患者的临床特征以及系统治疗的有效性。方法去回顾性分析2008年1月至2021年12月在国内15家医疗中心基因诊断明确有FH胚系突变的119例HLRCC-RCC患者的临床资料。男73例,女46例;中位年龄38(13,74)岁;中位肿瘤直径6.5(1.0,20.5)cm。I~Ⅱ期38例(31.9%),Ⅲ~V期81例(68.1%)。本组119例中11例同时表现为皮肤平滑肌瘤,46例女性HLRCC-RCC患者中44例有子宫肌瘤病史。总结患者的病理特点、治疗方法,以及患者预后生存情况。结果本研究119例中,共86例患者接受手术治疗,其中根治性肾切除术70例,肾部分切除术5例,减瘤性肾切除术11例;其余33例初诊转移患者行肾穿刺活检术。基因检测结果显示119例均存在FH基因胚系突变,其中94例FH基因点突变,18例FH基因插人/缺失突变,4例FH基因剪接突变,2例FH基因大片段缺失,1例FH基因拷贝数变异。免疫组化染色结果显示113例患者2-SC强阳性,FH阴性。本组共102例患者接受系统治疗,包括44例初诊转移患者和58例术后转移患者。其中酪氨酸激酶抑制剂(TKI)联合免疫检查点抑制剂(ICI)治疗组33例,贝伐单抗联合厄洛替尼治疗组8例,TKI单药治疗组61例。所有患者均获得随访,中位随访时间17(3,82)个月。生存分析结果显示TKI联合ICI治疗组中位PFS为18(5,38)个月,中位OS未达到;贝伐单抗联合厄洛替尼治疗组中位PFS为12(5,14)个月,中位OS为30(10,32)个月;TKI单药治疗组中位PFS为10(364)个月,中位OS为44(10,74)个月。TKI联合ICI治疗组的PFS(P=0.009)和OS(P=0.006)均优于贝伐单抗联合厄洛替尼治疗组;TKI联合ICI治疗组的PFS(P=0.003)和OS(P=0.028)均优于TKI单药治疗组。结论HLRCC-RCC罕见,具有家系遗传特性,恶性程度高,预后不佳,易出现转移。免疫组化染色2-SC强阳性及FH阴性可为临床诊断提供重要依据,基因检测显示FH基因胚系突变可明确诊断。初步研究结果证实TKI联合ICI治疗转移性HLRCC-RCC的临床效果较好,但有待大样本多中心随机对照临床研究进一步验证。

关键词：癌,肾细胞遗传性平滑肌瘤病和肾细胞癌综合征延胡索酸水合酶缺陷基因检测临床特征疗效

国产单孔手术机器人在保留肾单位手术中的应用价值

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中华医学杂志 2024年第35期104卷 3323-3327页

作者：黄庆波李智彭程郭宏骞刘光香王行环王共先李小航徐俊楠王保军张旭马鑫解放军总医院泌尿外科医学部北京南京大学医学院附属鼓楼医院泌尿外科南京武汉大学中南医院泌尿外科武汉南昌大学第一附属医院泌尿外科南昌

目的探讨国产精锋?单孔手术机器人在保留肾单位手术中的应用价值。方法回顾性纳入2023年9至11月解放军总医院、南京大学医学院附属鼓楼医院、武汉大学中南医院以及南昌大学第一附属医院应用国产精锋?机器人单孔腹腔镜行保留肾单位手术... 详细信息

目的探讨国产精锋?单孔手术机器人在保留肾单位手术中的应用价值。方法回顾性纳入2023年9至11月解放军总医院、南京大学医学院附属鼓楼医院、武汉大学中南医院以及南昌大学第一附属医院应用国产精锋?机器人单孔腹腔镜行保留肾单位手术的肾肿瘤患者的临床资料。总结患者围手术期情况、病理学检查结果以及术后并发症等情况。结果共纳入12例患者, 男8例, 女4例, 年龄26～75(56±16)岁;体质指数为(25.1±2.7)kg/m2, 左、右侧肾脏病变各6例;手术途径经腹腔9例, 经后腹腔3例。肿物最大径为(2.7±0.7)cm, 热缺血时间[M(Q1, Q3)]为19(15, 26)min, 手术时间180(149, 216)min, 术中失血量50(28, 100)ml, 术后受试者疼痛视觉模拟评分为(2.9±1.5)分。术后病理恶性肾透明细胞癌9例, 其中核分级1级、2级、3级均为3例, 病理TNM分期8例为pT1aN0M0, 1例为pT3aN0M0, 切缘未见癌;良性肾血管平滑肌脂肪瘤3例。术后均未输血, 未出现发热、漏尿和切口愈合不良等并发症。结论初步经验显示国产精锋?单孔腹腔镜机器人在泌尿外科保留肾单位手术中具有良好的临床应用价值。

关键词：肾肿瘤微创性机器人手术单孔保留肾单位术