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葛根芩连汤成分间自组装纳米粒改善伊立替康所致肠毒性作用研究

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中草药 2024年第12期55卷 3987-3997页

作者：吴淑洋杨晓琴成威键李敏李楠章津铭吴亿晗成都中医药大学药学院西南特色中药资源国家重点实验室中药材标准化教育部重点实验室四川成都611137

目的基于中药经典复方葛根芩连汤(Gegen Qinlian decoction,GQD)合煎过程中成分间相互作用,探讨其代表性成分葛根素、小檗碱、汉黄芩苷、黄芩苷、甘草酸、巴马汀体外结合形成自组装纳米粒的性能及改善伊立替康(CPT-11)所致肠毒性作用的... 详细信息

目的基于中药经典复方葛根芩连汤(Gegen Qinlian decoction,GQD)合煎过程中成分间相互作用,探讨其代表性成分葛根素、小檗碱、汉黄芩苷、黄芩苷、甘草酸、巴马汀体外结合形成自组装纳米粒的性能及改善伊立替康(CPT-11)所致肠毒性作用的药理活性,为来源于中药汤剂的活性成分间的自组装纳米粒提供参考。方法采用溶剂挥发法分别制备小檗碱-汉黄芩苷自组装纳米粒(berberine-wogonoside nanoparticles,Ber-Wog NPs)、小檗碱-葛根素自组装纳米粒(berberine-puerarin nanoparticles,Ber-Pue NPs)、黄芩苷-葛根素自组装纳米粒(baicalin-puerarin nanoparticles,Bai-Pue NPs)、黄芩苷-巴马汀自组装纳米粒(baicalin-palmatine nanoparticles,Bai-Pal NPs)、黄芩苷-甘草酸自组装纳米粒(baicalin-glycyrrhizic acid nanoparticles,Bai-GA NPs)5种组分自组装纳米粒,测定其粒径分布、多分散指数(polydispersity index,PDI)、包封率、载药量,采用透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)观察其微观形貌,紫外光谱和傅里叶红外光谱考察成分间相互作用;考察5种组分自组装纳米粒缓解CPT-11致小鼠迟发性腹泻的药理作用。结果组分间按1∶1投药比,制备所得Ber-Wog NPs、Ber-Pue NPs、Bai-Pue NPs、Bai-Pal NPs、Bai-GA NPs的平均粒径分别为(198.09±4.64)、(216.29±5.31)、(173.53±5.46)、(185.75±3.38)、(242.10±12.30)nm;PDI分别为0.14±0.06、0.13±0.06、0.19±0.03、0.19±0.01、0.21±0.05,TEM观察均为球状纳米粒,除Ber-Wog NPs外,其余4种纳米粒包封率均较高。紫外可见吸收光谱和红外光谱提示,5种纳米粒的组装均是通过分子间非共价键作用形成;分子对接模型进一步提示,其形成机制与分子间静电相互作用或氢键相关。药效试验结果显示,制剂组可缓解小鼠体质量降低,腹泻指数降低,结肠组织炎症因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin,IL-1β)含量降低,IL-10含量升高;苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE染色)显示结肠黏膜组织病变显著缓解。结论GQD来源的几种代表性成分可高效自组装形成纳米粒,且具有类似GQD缓解CPT-11所致肠毒性作用,为研究传统中药汤剂药效物质基础形态与药效的相关性提供了新思路。

关键词：葛根芩连汤自组装纳米粒肠毒性成分互作葛根素小檗碱汉黄芩苷黄芩苷甘草酸巴马汀溶剂挥发法腹泻

基于炮制前后质量一致性的清半夏炮制新工艺评价

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天然产物研究与开发 2024年第3期36卷 485-498页

作者：颜雨豪殷莉丽黎智蒋孟莲杨转珍万子玉赖月月李敏成都中医药大学药学院/现代中药产业学院省部共建西南特色中药资源国家重点实验室成都611137

为研究半夏与清半夏的质量传递关系,并评价新工艺蒸法所得炮制品与清半夏的质量一致性,本研究检测了生半夏及3种炮制品的浸出物、有机酸、多糖、核苷、蛋白质含量,使用主成分分析等方法比较3种炮制品的差异。结果表明,与生半夏相比,浸... 详细信息

为研究半夏与清半夏的质量传递关系,并评价新工艺蒸法所得炮制品与清半夏的质量一致性,本研究检测了生半夏及3种炮制品的浸出物、有机酸、多糖、核苷、蛋白质含量,使用主成分分析等方法比较3种炮制品的差异。结果表明,与生半夏相比,浸、煮制清半夏的浸出物减少,而蒸制品浸出物增加了264.76%;总酸、多糖含量均显著增加,其中蒸制品的增幅最大;核苷、蛋白质含量均大幅降低;综合分析方法均表明蒸制品与传统方法所得清半夏存在较大的质量差异。由此可知,浸、煮制清半夏质量一致性较好,而蒸法炮制品仍需对其加工工艺、药效做进一步研究。

关键词：半夏清半夏炮制工艺质量传递主成分分析一致性

顶空固相微萃取-GC-MS结合气味活度值分析土鳖虫关键腥臭气成分

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中国现代应用药学 2024年第1期41卷 88-96页

作者：马鸿雁范红刘倩李雪叶慧张定堃管咏梅杨明夏厚林成都中医药大学药学院西南特色中药资源国家重点实验室成都611137 江西中医药大学现代中药制剂教育部重点实验室南昌330004

目的确定土鳖虫腥臭气的主要成分,为土鳖虫去腥除臭提供理论基础。方法采用顶空固相微萃取-气质联用技术鉴定10批次的土鳖虫成分,结合面积归一化法和化学计量法分析不同批次腥臭气物质;采用气味活度值(odor activity value,OAV)评价... 详细信息

目的确定土鳖虫腥臭气的主要成分,为土鳖虫去腥除臭提供理论基础。方法采用顶空固相微萃取-气质联用技术鉴定10批次的土鳖虫成分,结合面积归一化法和化学计量法分析不同批次腥臭气物质;采用气味活度值(odor activity value,OAV)评价气味成分贡献度,确定关键腥臭气味组分。结果共鉴定出87种挥发性气味成分,关键性腥臭气成分(OAV≥1)为间甲基苯酚、二甲基三硫、4-甲基苯酚、2-甲基异冰片、2-茨醇、4-甲基戊酸、异戊酸等;修饰性腥臭气成分(0.1化物,关键腥臭气成分为间甲基苯酚、二甲基三硫、4-甲基苯酚、4-甲基戊酸、异戊酸、丙酸、丁酸等物质。

关键词：土鳖虫顶空固相微萃取-气相色谱-质谱腥臭气气味活度值

川西小黄菊HPLC指纹图谱建立及7种成分含量测定

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中成药 2024年第6期46卷 1794-1799页

作者：李蕊陈文莉康点点孙杰玉孙泽元古锐蒋桂华成都中医药大学药学院西南特色中药资源国家重点实验室/中药材标准化重点实验室四川成都611137 成都中医药大学民族医药学院四川成都611137

目的建立川西小黄菊HPLC指纹图谱,并测定绿原酸、槲皮素-3-O-葡萄糖苷、木犀草素-7-O-葡萄糖苷、木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷、芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷、木犀草素、芹菜素的含量。方法分析采用Agilent ZORBAX Extend C_(18)色谱柱(4.6 m... 详细信息

目的建立川西小黄菊HPLC指纹图谱,并测定绿原酸、槲皮素-3-O-葡萄糖苷、木犀草素-7-O-葡萄糖苷、木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷、芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷、木犀草素、芹菜素的含量。方法分析采用Agilent ZORBAX Extend C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,0.5μm);流动相0.5%磷酸-乙腈,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温35℃;检测波长350 nm。再进行主成分分析、偏最小二乘法判别分析和聚类分析。结果14批样品指纹图谱中有12个共有峰,相似度0.761~0.975。7种成分在各自范围内线性关系良好(R^(2)≥0.9991),平均加样回收率84.00%~105.11%,RSD 1.28%~2.86%。各批样品聚为3类,发现7种差异成分,包括峰4(木犀草素-7-O-葡萄糖苷)、12(芹菜素)、9(芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷)、8、11(木犀草素)、5(木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷)、2。结论该方法精密稳定,专属性强,重复性好,可用于川西小黄菊的质量控制。

关键词：川西小黄菊 HPLC指纹图谱化学成分含量测定主成分分析偏最小二乘法判别分析聚类分析

附子理中丸大蜜丸、水蜜丸和浓缩丸3种剂型的化学特征关键质量属性辨识研究

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中草药 2024年第9期55卷 2955-2966页

作者：杨莎莎林夏郝怡雯周航张月高子希谢福玉张星傅超美张臻成都中医药大学药学院西南特色中药资源国家重点实验室四川成都611137

目的建立附子理中丸(FuziLizhongPills,FLP)处方的大蜜丸(DamiPills,FLP-D)、水蜜丸(Shuimi Pills,FLPS)及浓缩丸(Nongsuo Pills,FLP-N)的HPLC指纹图谱,同时测定7种药效成分含量,寻找FLP处方与剂型关联的化学特征关键质量属性。方法 ... 详细信息

目的建立附子理中丸(FuziLizhongPills,FLP)处方的大蜜丸(DamiPills,FLP-D)、水蜜丸(Shuimi Pills,FLPS)及浓缩丸(Nongsuo Pills,FLP-N)的HPLC指纹图谱,同时测定7种药效成分含量,寻找FLP处方与剂型关联的化学特征关键质量属性。方法采用分层抽样法结合研究实际,随机抽取市售FLP-D 30批,FLP-S 12批,FLP-N 12批,建立以上54批FLP的HPLC指纹图谱,并同时测定甘草苷、苯甲酰新乌头原碱、党参炔苷、6-姜酚、白术内酯Ⅲ、白术内酯Ⅰ、10-姜酚7种有效成分含量;利用主成分分析(principal component analysis,PCA)和偏最小二乘法-判别分析(partial least square s-discriminant analysis,PLS-DA)方法对FLP-D、FLP-S和FLP-N各自的HPLC指纹图谱特征峰及7种有效成分进行分析。结果 FLP-D、FLP-S和FLP-N的HPLC指纹图谱分别标定出20、25、20个特征峰,通过PCA和PLS-DA,筛选出14个差异性标志物,其中8、9、12、17、18、25号峰来自甘草,29、32号峰来自干姜,22号峰来自白术。含量测定结果表明,甘草苷、苯甲酰新乌头原碱、6-姜酚、白术内酯Ⅲ、白术内酯Ⅰ在FLP-D、FLP-S和FLP-N中的含量差异显著,其中6-姜酚为变量重要性投影(variable importance in projection,VIP)值>1.0的差异性标志物。结论建立的HPLC指纹图谱与多成分同时测定方法能有效评价FLP-D、FLP-S和FLP-N的化学成分差异;识别出的14个差异性标志物可作为区分FLPD、FLP-S和FLP-N的潜在化学特征关键质量属性;甘草苷、苯甲酰新乌头原碱、白术内酯Ⅲ、白术内酯Ⅰ可作为区分FLPD与FLP-N或区分FLP-S与FLP-N的化学特征关键质量属性,6-姜酚可作为同时区分FLP-D、FLP-S和FLP-N 3种不同剂型的化学特征关键质量属性。为进一步完善FLP系列制剂的质量标准提供了参考,同时为解决同方异剂中药的质控指标同质化问题提供了新思路。

关键词：附子理中丸 HPLC 指纹图谱甘草苷苯甲酰新乌头原碱党参炔苷 6-姜酚白术内酯Ⅲ 白术内酯Ⅰ 10-姜酚剂型差异化学特征关键质量属性主成分分析偏最小二乘法-判别分析差异性标志物

基于蟾蜍分泌腺转录组对蟾蜍二烯酸内酯合成途径关键基因的挖掘

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中草药 2024年第1期55卷 258-268页

作者：张灵迂王普庆周罗静高继海侯飞侠成都中医药大学药学院西南特色中药资源国家重点实验室四川成都611137

目的挖掘蟾蜍二烯酸内酯(bufadienolides,BDs)生物合成途径的关键基因。方法使用激光捕获显微切割技术捕获中华大蟾蜍分泌腺[耳后浆液腺(CE)、皮肤浆液腺(CK)和皮肤粘液腺(CN)]为实验材料,在DNBseq测序平台进行转录组测序,并进行生信... 详细信息

目的挖掘蟾蜍二烯酸内酯(bufadienolides,BDs)生物合成途径的关键基因。方法使用激光捕获显微切割技术捕获中华大蟾蜍分泌腺[耳后浆液腺(CE)、皮肤浆液腺(CK)和皮肤粘液腺(CN)]为实验材料,在DNBseq测序平台进行转录组测序,并进行生信分析及对转录组结果进行验证。结果共得到63.01 Gb原始数据和4 550个差异基因,其中CE和CK共有上调差异基因880个,其GO和KEGG富集显示主要在甾类激素生物合成、胆汁酸合成和C21类固醇生物合成等功能;CN上调差异基因主要富集在蛋白质糖基化、细胞黏结、体液免疫应答等功能。在CE、CK组上调的差异基因富集结果中发现有28种与BDs合成相关的物质的代谢、合成及运输等功能,且参与调控的基因有94个。对上述基因进行蛋白互作网络分析(protein-protein interaction network,PPI)分析,结果显示,94个基因中有34个存在互作关系,其中基因AMACR、HSD17B4、SCP2及ACOT8参与调控胆汁酸合成,基因LOC122926609参与调控石胆酸结合,结合文献分析,作者认为初级胆汁酸合成途径是BDs合成的下游途径,石胆酸可能是BDs类成分的重要前体。进一步将存在互作关系的基因关联到表达量矩阵中,结果显示大部分基因在样品CE和CK组中的表达量均大于CN组,且上述5个基因的表达趋势一致(CE、CK>CN),认为这几个基因是调控BDs的下游合成途径的关键基因。在上述基础上选取9个与BDs合成相关的基因进行qRT-PCR分析,结果与转录组测序基因表达趋势一致,认为该结果具有准确性。结论完成了中华大蟾蜍分泌腺的转录组研究,推测出BDs下游合成途径的关键基因,为蟾毒内酯类化合物的生物合成途径研究提供了丰富的参考数据,也为深入研究该类化合物生物合成的分子机制奠定了基础。

关键词：中华大蟾蜍分泌腺蟾蜍二烯酸内酯下游途径关键基因

麝香对Aβ_(1-42)诱导PC12细胞氧化应激损伤的保护作用研究

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中药药理与临床 2024年第4期40卷 83-89页

作者：谢林江秦涛宋才友楚志力邓婷谢丹妮徐颖孙涛成都中医药大学中药材标准化教育部重点实验室西南特色中药资源国家重点实验室成都611137 金堂县第二人民医院成都610404

目的:探讨麝香对阿尔兹海默症(AD)细胞模型氧化应激损伤及凋亡的保护作用。方法:使用LC-MS/MS法分析麝香化学成分。通过β-淀粉样蛋白1-42(Aβ_(1-42))诱导PC12细胞建立体外AD细胞模型,采用CCK-8法测定PC12细胞存活率,考察Aβ_(1-42)对P... 详细信息

目的:探讨麝香对阿尔兹海默症(AD)细胞模型氧化应激损伤及凋亡的保护作用。方法:使用LC-MS/MS法分析麝香化学成分。通过β-淀粉样蛋白1-42(Aβ_(1-42))诱导PC12细胞建立体外AD细胞模型,采用CCK-8法测定PC12细胞存活率,考察Aβ_(1-42)对PC12的细胞毒性及麝香对Aβ_(1-42)诱导PC12细胞损伤的保护作用;采用Annexin V-FITC/PI双染色法检测麝香对Aβ_(1-42)致PC12细胞凋亡的影响,JC-1法检测麝香对Aβ_(1-42)致PC12细胞线粒体膜电位的影响;采用探针DCFH-DA检测麝香对Aβ_(1-42)致PC12细胞内活性氧(ROS)的影响;采用超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)试剂盒检测麝香对Aβ_(1-42)致PC12细胞内抗氧化酶活性水平的影响;采用Western blot法检测PC12细胞内相关凋亡蛋白BAX、BCL-2和Cleaved caspase-3的表达以及核因子红细胞2相关因子2(Nrf-2)、血红素加氧酶-1(HO-1)和Kelch样ECH相关蛋白1(Keap 1)的表达。结果:通过LC-MS/MS法鉴定出麝香的7种化学成分分别为:次黄嘌呤、雄烯二酮、表睾酮、十六碳酰胺、麝香酮、油酸酰胺、硬脂酰胺。与空白对照组比较,模型对照组PC12细胞存活率显著降低(P化应激和凋亡。

关键词：麝香 β-淀粉样蛋白1-42 氧化应激细胞凋亡核因子红细胞2相关因子2/血红素加氧酶-1/Kelch样ECH相关蛋白1信号通路

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牡蛎的本草考证及现代研究进展

中国实验方剂学杂志 2024年

作者：张洪怡王彬刘佳雯胡媛陈林刘友平陈鸿平成都中医药大学药学院西南特色中药资源国家重点实验室

通过查阅历代本草古籍和炮制规范等相关文献资料，对牡蛎的品名、产地、采收、品质、炮制历史沿革、相关炮制规范、现代炮制工艺及炮制前后化学成分和药理作用转变等方面进行系统考证和梳理，以期为牡蛎的炮制工艺研究和质量标准建立提... 详细信息

通过查阅历代本草古籍和炮制规范等相关文献资料，对牡蛎的品名、产地、采收、品质、炮制历史沿革、相关炮制规范、现代炮制工艺及炮制前后化学成分和药理作用转变等方面进行系统考证和梳理，以期为牡蛎的炮制工艺研究和质量标准建立提供文献依据。经考证可知，牡蛎入药历史悠久，各时期出现的别名和俗称较多，《神农本草经》始以“牡蛎”为其正名并沿用至今，尚有牡蛤、左顾牡蛎、蠔壳等别称。该药材道地性广泛，采收时期多不固定。古人多认为其左壳质优，但现代并未见此说法。牡蛎的炮制方法包括研、熬、煅、炒、煨、炙、醋淬、盐淬、酒淬、童便制、米泔水制等，煅法沿用至今。1963—2020年版《中国药典》均仅收载煅牡蛎，各地方炮制规范主要收录有煅牡蛎、盐牡蛎和醋牡蛎3种炮制品。现代研究主要集中在其炮制工艺优化、化学成分及药理作用转变方面，且研究方法较为单一。总体来说，目前存在炮制规范不统一、工艺参数不明确、质量标准不完善等问题，不利于牡蛎的质量控制和临床规范用药。因此，进一步探究牡蛎及其炮制品的药效物质基础以阐明其炮制机理、规范其炮制工艺、完善其质量标准是十分必要的。

关键词：牡蛎本草考证炮制沿革质量控制化学成分药理作用

石决明（皱纹盘鲍）药材、饮片及标准汤剂的物相变化及量质传递分析

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：杨智涵王伟超罗创钟晨雨陈鸿平王福胡媛刘友平陈林成都中医药大学药学院西南特色中药资源国家重点实验室

目的：通过分析石决明（皱纹盘鲍）药材-饮片-标准汤剂的物相及组成变化，探索其量质传递过程，为有效控制其质量提供参考。方法：收集20批不同产地的石决明（皱纹盘鲍）药材，制备煅制饮片和标准汤剂，分别测定三者CaCO3含量并计算出... 详细信息

目的：通过分析石决明（皱纹盘鲍）药材-饮片-标准汤剂的物相及组成变化，探索其量质传递过程，为有效控制其质量提供参考。方法：收集20批不同产地的石决明（皱纹盘鲍）药材，制备煅制饮片和标准汤剂，分别测定三者CaCO3含量并计算出膏率和转移率；采用X射线荧光光谱法（XRF）研究三者的元素组成及其相对含量的变化；采用X射线衍射法（XRD）研究三者的物相组成变化并建立各自的XRD特征图谱；采用傅里叶变换红外光谱法（FTIR）研究三者的化学组成及含量变化并建立各自的FTIR特征图谱，同时结合聚类分析（HCA）、主成分分析（PCA）及正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）找寻三者的共同及差异性特征，探寻标准汤剂制备过程中的量质传递关系。结果：20批石决明药材、饮片、标准汤剂CaCO3含量范围分别为93.87%～98.95%、96.02%～99.97%、38.29%～51.96%，标准汤剂出膏率范围为1.71%～2.37%，饮片-标准汤剂的CaCO3转移率范围为0.68%～1.27%；XRF测定表明，石决明药材、饮片所含元素种类及其相对含量具有较高相似度，饮片、标准汤剂所含元素种类无明显差异，但相对含量差异明显，主要体现在Ca元素相对含量的减少和Na元素相对含量的增加；XRD测定表明，石决明药材主要含文石和方解石2种晶型的CaCO3；而饮片仅含方解石一种晶型的CaCO3；标准汤剂主要含方解石晶型的CaCO3和钠长石晶型的Na2CO3；FTIR测定表明，石决明药材中存在O-H、C-H、C=O、HCO3-及CO32-基团的内部振动，饮片及标准汤剂中中主要存在O-H、HCO3-及CO32-基团的振动。结论：药材-饮片的变化主要是煅制后CaCO3含量的增加、CaCO3文石晶型向方解石晶型的转变及有机成分的消失，饮片-标准汤剂的变化主要是CaCO3含量的减少及Na2CO3相对含量的增加。该研究建立的方法可用于贝壳类药材-饮片-标准汤剂的质量控制，为贝壳类中药配方颗粒质量控制研究提供新思路。

关键词：石决明皱纹盘鲍标准汤剂质量传递特征图谱 X射线衍射法 X射线荧光光谱法傅里叶变换红外光谱法