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伏立诺他通过PI3K/Akt/mTOR信号通路介导的自噬反应调节肾癌细胞的增殖、凋亡和侵袭

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中国老年学杂志 2024年第15期 3797-3803页

作者：滕圣敏赵序雯张秀娟滕州市中心人民医院病理科滕州市工人医院科室病理科

目的基于磷酸肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路介导的自噬探讨伏立诺他(SAHA)对肾细胞癌(RCC)细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法体外培养人RCC系(786-O细胞),分为对照(Control)组、4、8、16μmo... 详细信息

目的基于磷酸肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路介导的自噬探讨伏立诺他(SAHA)对肾细胞癌(RCC)细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法体外培养人RCC系(786-O细胞),分为对照(Control)组、4、8、16μmol/L SAHA组、SAHA+PI3K/Akt/mTOR通路激动剂重组人胰岛素样生长因子(IGF)-1组(16μmol/L SAHA+10μmol/L IGF-1)。细胞克隆形成实验、流式细胞术和Transwell实验检测细胞增殖、凋亡和迁移、侵袭能力；透射电子显微镜(TEM)观察细胞自噬体形成情况；GFP-微管相关蛋白(LC)3质粒转染检测自噬通量；Western印迹检测自噬和PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达。结果 SAHA以剂量依赖性的方式显著降低786-O细胞的增殖、迁移和侵袭能力，并显著诱导细胞凋亡(P<0.05);且SAHA以剂量依赖性的方式显著增加86-O细胞中自噬体数量、GFP-LC3阳性斑点数、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Atg7蛋白表达，显著降低p62蛋白表达和p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR(P<0.05)。PI3K/Akt/mTOR通路激动剂IGF-1可显著拮抗SAHA诱导的自噬，减弱SAHA对786-O细胞恶性行为的抑制作用(P<0.05)。结论 SAHA可能通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路诱导自噬，抑制786-O细胞的增殖、迁移和侵袭，并诱导细胞凋亡。

关键词：伏立诺他肾细胞癌自噬磷酸肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路

miR-511-3p靶向ATP2A2调控内质网应激对肺癌细胞增殖和凋亡的影响

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肿瘤研究与临床 2024年第6期36卷 421-428页

作者：赵吉星黄文聪严武李勇生惠州市中心人民医院胸外科惠州516001

目的探讨miRNA-511-3p(miR-511-3p)对肺癌细胞增殖和凋亡的影响,及ATP2A2、内质网应激在其中的可能作用。方法回顾性收集2020年1月至2022年3月惠州市中心人民医院69例肺癌患者的肺癌组织和癌旁正常组织(距离肿瘤>2 cm)。采用实时荧光定... 详细信息

目的探讨miRNA-511-3p(miR-511-3p)对肺癌细胞增殖和凋亡的影响,及ATP2A2、内质网应激在其中的可能作用。方法回顾性收集2020年1月至2022年3月惠州市中心人民医院69例肺癌患者的肺癌组织和癌旁正常组织(距离肿瘤>2 cm)。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测癌和癌旁组织以及永生化肺上皮细胞株BEAS-2B、人肺细胞株CCD-19Lu、人肺癌细胞株A549、H1975、H1299中miR-511-3p转录水平相对表达量。选择miR-511-3p相对表达水平最低的肺癌细胞株A549进行后续实验。将细胞分为miR对照组(转染miR-511-3p无关序列)、miR-511-3p过表达组(转染miR-511-3p模拟物)、miR-511-3p敲低组(转染miR-511-3p抑制物);另取A549细胞分为ATP2A2过表达对照组(转染空载质粒)、ATP2A2过表达组(转染ATP2A2过表达质粒),以及ATP2A2敲低对照组(转染载有小干扰RNA无关序列的质粒)和ATP2A2敲低组(转染载有ATP2A2小干扰RNA序列的质粒)。采用qRT-PCR法检测各组A549细胞miR-511-3p和ATP2A2转录水平相对表达量;蛋白质印迹法检测各组A549细胞ATP2A2蛋白及内质网应激标志蛋白的相对表达量;双荧光素酶报告基因实验验证miR-511-3p与ATP2A2 mRNA的靶向关系;CCK-8法检测各组A549细胞增殖能力(以吸光度值表示);流式细胞术检测各组A549细胞中凋亡细胞占比;无机磷比色法检测各组A549细胞Ca^(2+)-ATP酶活性;荧光探针法检测各组A549细胞Ca^(2+)浓度。结果69例患者肺癌组织和癌旁组织miR-511-3p转录水平相对表达量分别为0.08±0.03、0.17±0.12,差异有统计学意义(t=6.04,P<0.05)。miR-511-3p过表达组、miR-511-3p敲低组、miR对照组A549细胞中凋亡细胞占比分别为(58.1±6.1)%、(11.0±1.3)%、(22.0±2.1)%,miR-511-3p过表达组较miR对照组高,miR-511-3p敲低组较对照组低,差异均有统计学意义(t值分别为9.70、7.64,均P<0.05)。培养24、48、72 h后,miR-511-3p过表达组A549细胞增殖能力均较miR对照组低,miR-511-3p敲低组均较miR对照组高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。ATP2A2敲低组、ATP2A2敲低对照组A549细胞中凋亡细胞占比分别为(58.2±1.5)%、(23.8±1.0)%,差异有统计学意义(t=33.94,P<0.05);ATP2A2过表达组、ATP2A2过表达对照组A549细胞中凋亡细胞占比分别为(13.8±2.0)%、(23.8±1.0)%,差异有统计学意义(t=7.96,均P<0.05)。miR-511-3p过表达组、miR-511-3p敲低组、miR对照组A549细胞ATP2A2转录水平相对表达量分别为0.11±0.01、1.34±0.19、0.51±0.12,miR-511-3p过表达组较miR对照组低,miR-511-3p敲低组较对照组高,差异均有统计学意义(t值分别为5.76、6.40,均P<0.05);miR-511-3p过表达组A549细胞ATP2A2蛋白相对表达量较其对照组低,miR-511-3p敲低组较其对照组高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验验证miR-511-3p与ATP2A2 mRNA存在靶向关系。对照组、miR-511-3p过表达组、ATP2A2过表达组、miR-511-3p过表达+ATP2A2过表达组A549细胞中凋亡细胞占比分别为(21.5±3.0)%、(58.1±5.0)%、(13.3±1.2)%、(20.5±4.0)%,差异有统计学意义(F=73.28,P<0.001);对照组、miR-511-3p敲低组、ATP2A2敲低组、miR-511-3p敲低+ATP2A2敲低组A549细胞中凋亡细胞占比分别为(23.5±3.0)%、(11.3±1.2)%、(60.1±7.0)%、(25.6±5.0)%,差异有统计学意义(F=78.45,P<0.001)。ATP2A2过表达组A549细胞Ca^(2+)-ATP酶活性高于对照组,ATP2A2敲低组低于对照组,差异均有统计学意义(t值分别为4.61、6.07,均P<0.05);ATP2A2过表达组A549细胞内Ca^(2+)浓度低于对照组,ATP2A2敲低组高于对照组,差异均有统计学意义(t值分别为3.30、3.95,均P<0.05)。miR-511-3p过表达组A549细胞Ca^(2+)-AT

关键词：肺肿瘤微RNAs 内质网应激肌浆网钙转运ATP酶类细胞凋亡细胞增殖

葫芦巴碱通过NF-κB/MMP-9信号通路对肾细胞癌细胞侵袭、迁移的影响

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中国老年学杂志 2024年第8期44卷 1998-2004页

作者：杨树芹刘伟宋明芮赵序雯滕州市中心人民医院病理科山东滕州277500

目的探讨葫芦巴碱对肾细胞癌细胞侵袭、迁移的影响及其可能的作用机制。方法将786-O细胞分为:对照组、葫芦巴碱低(50μmol/L)、高剂量组(150μmol/L)、舒尼替尼组(2μmol/L)、葫芦巴碱高剂量+脂多糖(LPS)组(150μmol/L葫芦巴碱+1μg/ml ... 详细信息

目的探讨葫芦巴碱对肾细胞癌细胞侵袭、迁移的影响及其可能的作用机制。方法将786-O细胞分为:对照组、葫芦巴碱低(50μmol/L)、高剂量组(150μmol/L)、舒尼替尼组(2μmol/L)、葫芦巴碱高剂量+脂多糖(LPS)组(150μmol/L葫芦巴碱+1μg/ml LPS);CCK-8法和平板克隆实验检测细胞增殖;Transwell实验检测细胞侵袭;划痕实验检测细胞迁移;Western印迹检测细胞周期蛋白(Cyclin)D1、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、核因子(NF)-κB-p65蛋白表达。以QNZ(NF-κB抑制剂)或SB-3CT(MMP-9抑制剂)与150μmol/L葫芦巴碱共处理786-O细胞48 h以验证NF-κB/MMP-9通路上下游关系;将786-O细胞悬液皮下注射到裸鼠体内,30 d后,裸鼠分为裸鼠对照组、裸鼠葫芦巴碱低(25 mg/kg)、高剂量组(50 mg/kg)、裸鼠舒尼替尼组(40 mg/kg)、裸鼠葫芦巴碱高剂量+LPS组(50 mg/kg葫芦巴碱+0.5 mg/kg LPS),给药4 w后,绘制肿瘤生长曲线,麻醉后处死裸鼠分离出肿瘤并称量肿瘤质量;免疫组化染色检测肿瘤中MMP-2、MMP-9蛋白。结果与对照组比较,葫芦巴碱低、高剂量组及舒尼替尼组786-O细胞OD450值(24、48 h)、克隆形成率、划痕愈合率、侵袭细胞数及CyclinD1、MMP-2、MMP-9、NF-κB-p65蛋白表达降低,体内肿瘤体积和质量减小、肿瘤组织中MMP-2、MMP-9蛋白染色得分降低,且葫芦巴碱浓度越高,对应指标的降低趋势越明显(P0.05);LPS减弱了高剂量葫芦巴碱对786-O细胞增殖、侵袭、迁移及体内肿瘤生长的抑制作用。MMP-9为NF-κB通路下游分子。结论葫芦巴碱抑制786-O细胞增殖、迁移、侵袭及体内肿瘤的生长的机制可能与抑制NF-κB/MMP-9通路有关。

关键词：葫芦巴碱核因子-κB/基质金属蛋白酶9信号通路肾细胞癌细胞增殖转移

具有黏液样变的高分化/去分化脂肪肉瘤34例临床病理及分子遗传学特征分析

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中华病理学杂志 2024年第2期53卷 168-173页

作者：薛霜刘秋雨缑向楠赵跃武成琼孔令非河南省人民医院郑州大学人民医院病理科郑州450003 解放军总医院第一医学中心病理科北京100853

目的探讨具有黏液样变的高分化/去分化脂肪肉瘤临床病理及分子遗传学特征,并与具有相似形态的黏液纤维肉瘤相鉴别。方法收集河南省人民医院及解放军总医院第一医学中心2015年1月至2023年3月确诊黏液样变脂肪肉瘤29例、黏液纤维肉瘤5例,... 详细信息

目的探讨具有黏液样变的高分化/去分化脂肪肉瘤临床病理及分子遗传学特征,并与具有相似形态的黏液纤维肉瘤相鉴别。方法收集河南省人民医院及解放军总医院第一医学中心2015年1月至2023年3月确诊黏液样变脂肪肉瘤29例、黏液纤维肉瘤5例,采用免疫组织化学、荧光原位杂交(FISH)检测相关指标情况,并复习文献。结果34例患者中男性24例,女性10例,年龄41~73岁;发病部位包括腹膜后(17例)、腹腔(9例)、下肢(5例)、阴囊(1例)、上肢(1例)和腋下(1例)。高分化脂肪肉瘤以脂肪瘤样型多见(12例);去分化脂肪肉瘤的去分化成分包括低级别(13例)和高级别(2例)形态,呈低至高级别黏液纤维肉瘤样、隆突性皮肤纤维肉瘤样、低级别纤维肉瘤结构。29例脂肪肉瘤均具有不同比例的黏液样形态,16例伴多少不等肿瘤性坏死。黏液样形态表现为黏液样脂肪肉瘤样,呈分叶状生长,特征性的纤细、分支状毛细血管网,类似于鸡爪样形态,富含黏液的间质和肺水肿样形态,肿瘤细胞呈梭形及卵圆形,伴多少不等多空泡状脂肪母细胞。FISH法检测MDM2基因显示成簇扩增(29/29),DDIT3分离探针均未发生断裂,但显示成簇扩增(24/29);黏液纤维肉瘤中1例存在DDIT3分离探针簇状扩增(1/5),无基因断裂,且MDM2基因无扩增。结论具有黏液样变的高分化/去分化脂肪肉瘤以腹膜后和腹腔最为多见,大多呈DDIT3分离探针扩增,但该扩增现象并非脂肪肉瘤特异性表现。对于穿刺标本或极少数发生在四肢的肿瘤,当组织学具有黏液间质、黏液样脂肪肉瘤样形态时,应避免误诊为黏液样脂肪肉瘤或其他具有黏液样形态的非脂肪源性肿瘤。

关键词：软组织肿瘤脂肪肉瘤,黏液样基因扩增

肠镜活检组织类似结直肠原发癌的转移性女性生殖系统恶性肿瘤10例临床病理学分析

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中华病理学杂志 2024年第6期53卷 610-612页

作者：赵丽娜袁静萍黄奥玲王春红武汉大学人民医院病理科武汉430060 三亚中心医院病理科三亚572000

目的探讨消化道转移性女性生殖系统来源的恶性肿瘤临床病理及免疫表型特征。方法收集武汉大学人民医院2020—2023年诊治的7例及三亚市中心医院2021—2022年诊治的3例肠镜活检标本,分析10例结直肠转移性女性生殖系统来源的恶性肿瘤的临... 详细信息

目的探讨消化道转移性女性生殖系统来源的恶性肿瘤临床病理及免疫表型特征。方法收集武汉大学人民医院2020—2023年诊治的7例及三亚市中心医院2021—2022年诊治的3例肠镜活检标本,分析10例结直肠转移性女性生殖系统来源的恶性肿瘤的临床病理资料,观察其组织形态及免疫表型特征,并复习相关文献。结果在结直肠继发的肿瘤中,高级别浆液性癌(high grade serous carcinoma,HGSC)8例,低级别浆液性癌(low grade serous carcinoma,LGSC)1例,人乳头状瘤病毒(HPV)相关性宫颈腺癌1例。年龄40~69岁,平均57岁,均位于结直肠,临床表现以消化道症状为主,血中肿瘤标志物CA125升高。镜下观察,肿瘤均分布在黏膜固有层及黏膜肌层,浆液性癌以微乳头结构为主,转移性宫颈腺癌呈管状、绒毛状腺癌排列。免疫表型,浆液性癌肿瘤细胞表达细胞角蛋白(CK)7、PAX8、WT-1、雌激素受体,高级别浆液性癌p53为突变型,p16弥漫强阳性或高表达;低级别浆液性癌p53为野生型;宫颈腺癌CK7、PAX8、p16呈弥漫一致的强阳性表达。所有病例SATB2、CK20、CDX2均阴性,Ki-67阳性指数50%~80%。结论在缺乏临床肿瘤病史的前提下,对于结直肠内镜活检组织明确诊断继发性恶性肿瘤具有挑战性,再者因内镜表现与原发癌相似,增加了诊断难度。二者的治疗方案及预后均不同,需提高对该类病变的认识,以提供更精准及时的治疗方案。

关键词：女性生殖系统浆液性癌原发癌宫颈腺癌肠镜活检内镜活检阳性指数 CK20

COX-2/PGE2/EP4轴诱导巨噬细胞功能活化在NSCLC发展过程中的作用

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中国肺癌杂志 2024年第4期27卷 245-256页

作者：赵娟朱倩莹张宇黎贵芸张映林李方方边莉昆明医科大学第一附属医院病理科昆明650032 遂宁市中心医院病理科遂宁629000 文山市人民医院文山663000

背景与目的肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)是肿瘤发生、发展的重要因素之一,其中肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)进展中起着重要作用。然而,TAMs在NSCLC发展过程中的作用机制仍不清楚,因此本研究旨在探讨TAMs在NSCLC发展过程中的作用,并寻找潜在的治疗靶点。方法使用GEPIA(Gene Expression Profiling Interactive Analysis)数据库分析前列腺素E2受体4(prostaglandin E2 receptor 4,EP4)mRNA在NSCLC和正常肺组织中的表达情况;利用免疫组化(immunohistochemistry,IHC)方法检测120例NSCLC组织及24例癌旁组织标本中环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、EP4、分化簇86(cluster of differentiation 86,CD86)、CD163、CD31的蛋白表达水平;建立裸鼠肺腺癌细胞A549与巨噬细胞RAW264.7共移植瘤模型,使用EP4抑制剂E7046灌胃,收集样本行苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)、IHC和免疫荧光(immunofluorescence,IF)染色,免疫印迹(Western blot)检测各组裸鼠肿瘤组织上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transformation,EMT)相关蛋白表达情况;全长转录组测序技术筛选引起肿瘤肝转移的关键基因并进行KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)富集分析。结果EP4 mRNA在NSCLC组织中表达水平普遍低于正常肺组织(P病理参数中存在差异;RAW264.7缩短了A549的成瘤潜伏期,促进肿瘤增殖及肿瘤肝转移,E7046可降低裸鼠肿瘤细胞增殖活性、肿瘤组织血管密度及M2型巨噬细胞浸润;IF染色显示巨噬细胞主要分布在肿瘤转移灶周围;Western blot结果显示与A549单独移植组相比,A549与RAW264.7共移植组小鼠肿瘤组织中E-钙黏蛋白(E-cadherin)相对表达量明显降低,差异具有统计学意义(P0.05);全长转录组差异基因主要富集的通路为PI3K-AKT、MAPK信号通路。结论在NSCLC发生发展过程中,COX-2/PGE2/EP4轴可能通过诱导巨噬细胞功能活化来促进肿瘤的进展,EP4可能是具有潜力的肿瘤免疫治疗新靶点。本研究为深入探讨NSCLC的发生发展机制提供了新的视角和思路,同时为开发新的NSCLC治疗策略提供了理论依据。

关键词：肺肿瘤 PGE2 EP4 巨噬细胞肿瘤免疫

肝脏原发多发性EB病毒阳性炎性滤泡树突细胞肉瘤1例

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中华医学杂志 2024年第26期104卷 2455-2456页

作者：严礼平龚伟毛卫波曹淑艳浙江省丽水市中心医院病理科丽水山西省临汾市人民医院病理科临汾

EB病毒阳性炎性滤泡树突细胞肉瘤(EBV+IFDCS)是一种具有滤泡树突细胞分化特征的罕见低度恶性肿瘤, 好发于肝脏和脾脏。本文报道1例肝脏原发多发性EBV+IFDCS, 并结合文献分析其可能发病机制、诊断、治疗和预后, 以提高对本疾病的认识, ... 详细信息

EB病毒阳性炎性滤泡树突细胞肉瘤(EBV+IFDCS)是一种具有滤泡树突细胞分化特征的罕见低度恶性肿瘤, 好发于肝脏和脾脏。本文报道1例肝脏原发多发性EBV+IFDCS, 并结合文献分析其可能发病机制、诊断、治疗和预后, 以提高对本疾病的认识, 避免误诊。

关键词： EB病毒肉瘤滤泡树突细胞

超声及绘图定位在评估自体动静脉内瘘成熟及术后狭窄中的应用价值

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中国超声医学杂志 2024年第4期40卷 463-465页

作者：王珊杨晨林一钦惠州市中心人民医院超声医学科

目的探讨超声及绘图定位在自体动静脉内瘘(AVF)术后成熟度及血管狭窄评估中的应用价值。方法将107例AVF术后患者根据临床使用情况分为成熟组及未成熟组。对比两组术后血流动力学参数，采用受试者工作特征(ROC)曲线评估超声血流动力学... 详细信息

目的探讨超声及绘图定位在自体动静脉内瘘(AVF)术后成熟度及血管狭窄评估中的应用价值。方法将107例AVF术后患者根据临床使用情况分为成熟组及未成熟组。对比两组术后血流动力学参数，采用受试者工作特征(ROC)曲线评估超声血流动力学参数对内瘘成熟的诊断价值。选取AVF术后出现血管狭窄并进行经皮血管腔内成形术(PTA)的患者32例，对比术前进行超声辅助下绘图定位组与未进行绘图定位组的手术成功率及手术时间。结果成熟组肱动脉流量、桡动脉内径、桡动脉流量大于未成熟组(P0.05)。ROC曲线结果显示肱动脉流量和桡动脉流量对内瘘成熟的诊断价值较高，灵敏度及特异度分别为90.5%/81.8%、90.5%/78.8%。超声辅以绘图定位组PTA手术时间较未绘图定位组缩短(P<0.05)。结论超声辅以绘图技术在AVF术后成熟度及狭窄的评估中具有重要应用价值。

关键词：自体动静脉内瘘超声血管成形术绘图定位

f/t-PSA、PSAD、p2PSA、PHI检测在PI-RADS 2.0评分3分患者中的预测价值

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中外医药研究 2024年第24期3卷 148-150页

作者：缪伟贤陈佳曾丽华惠州市中心人民医院泌尿一区广东惠州516001 惠州市中心人民医院病理科广东惠州516001

目的:探讨游离/总前列腺特异性抗原(f/t-PSA)比值、前列腺特异性抗原密度(PSAD)、前2肽前列腺特异性抗原(p2PSA)及前列腺健康指数(PHI)在前列腺影像报告和数据系统(PI-RADS)2.0评分为3分的疑似前列腺癌患者中的预测价值。方法:回顾性分... 详细信息

目的:探讨游离/总前列腺特异性抗原(f/t-PSA)比值、前列腺特异性抗原密度(PSAD)、前2肽前列腺特异性抗原(p2PSA)及前列腺健康指数(PHI)在前列腺影像报告和数据系统(PI-RADS)2.0评分为3分的疑似前列腺癌患者中的预测价值。方法:回顾性分析2022年1月—2024年2月于惠州市中心人民医院进行前列腺多参数磁共振成像(mpMRI)检查并接受前列腺穿刺的PI-RADS 2.0评分3分患者60例的病历资料。根据前列腺穿刺结果,将患者分为阳性组和阴性组,各30例。比较两组f/t-PSA、PSAD、p2PSA及PHI水平,并采用受试者工作特征曲线(ROC)分析上述指标对前列腺癌的预测价值。结果:阳性组f/t-PSA、PSAD、p2PSA及PHI水平均高于阴性组(P<0.001);ROC结果显示,f/t-PSA、PSAD、p2PSA及PHI水平预测PI-RADS 2.0评分3分患者发生前列腺癌的AUC分别为0.740、0.684、0.651、0.630;各指标灵敏度、特异度均≥65.00%。结论:在PI-RADS 2.0评分3分的凝似前列腺癌患者中,f/t-PSA、PSAD、p2PSA及PHI检测能在一定程度上反映前列腺癌的风险,可作为前列腺癌筛查的辅助手段。

关键词：前列腺癌前列腺影像报告和数据系统前列腺特异性抗原前列腺特异性抗原密度前2肽前列腺特异性抗原前列腺健康指数