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上海5家宠物医院环境不动杆菌的耐药性检测及一株皮特不动杆菌的测序分析

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微生物学通报 2025年第2期52卷 725-735页

作者：张玉杰王晓旭徐锋沈莉萍鞠龚讷唐聪圣齐新永徐平王建上海市动物疫病预防控制中心

【背景】不动杆菌属(Acinetobacter)细菌是医院感染常见的条件致病菌，其耐药菌株的出现对公众的健康构成了严重的威胁。【目的】了解上海市宠物医院环境中不动杆菌属的流行现状及耐药性。【方法】从上海市5个区的5家宠物医院采集环境... 详细信息

【背景】不动杆菌属(Acinetobacter)细菌是医院感染常见的条件致病菌，其耐药菌株的出现对公众的健康构成了严重的威胁。【目的】了解上海市宠物医院环境中不动杆菌属的流行现状及耐药性。【方法】从上海市5个区的5家宠物医院采集环境样品，经细菌分离、纯化后利用细菌鉴定质谱仪鉴定分离株种属，并通过微量肉汤稀释法检测不动杆菌属分离株的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC)，并对其中1株耐碳青霉烯类分离菌进行基因组测序及遗传特征分析。【结果】730份环境样品共分离获得124株革兰氏阴性菌，经鉴定14株属于不动杆菌属，其中9株为鲁氏不动杆菌(A. lwoffii)。14株不动杆菌均对米诺环素敏感，但其中2株皮特不动杆菌(A. pittii)和2株鲁氏不动杆菌为碳青霉烯类多重耐药不动杆菌，5株鲁氏不动杆菌对复方新诺明耐药，1株约氏不动杆菌(A. johnsonii)对环丙沙星耐药。基因组测序结果表明，碳青霉烯类多重耐药皮特不动杆菌携带NDM-1、OXA-500和OXA-727等相关耐药基因，多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)结果表明分离株为ST1037型，单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP)分析该菌株与来源于浙江省的临床尿液分离株A. pittii AP43的进化距离最近。【结论】上海市5家宠物医院环境中的不动杆菌分离株耐药率较低(<40%)，存在多重耐药现象(5株不动杆菌分别耐≥3种药物)且皮特不动杆菌携带多种耐药基因。

关键词：宠物医院不动杆菌属碳青霉烯耐药性测序

基于山羊痘病毒融合蛋白的间接ELISA检测方法的建立及初步应用

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中国动物传染病学报 2025年

作者：肖琨王永璇田芬彭郁霖胡鹏飞程振涛六盘水市动物疫病预防控制中心贵州大学动物科学学院贵州省动物疫病与兽医公共卫生重点实验室盘州市动物疫病预防控制中心

为建立山羊痘病毒（GTPV）间接ELISA检测方法，本研究表达出了GTPV 059-P32-L1R融合蛋白作为检测抗原，优化各试验条件并进行评价。结果显示，重组059-P32-L1R蛋白以包涵体形式表达，经Western blot鉴定可知其具有良好的抗原性。经优化... 详细信息

为建立山羊痘病毒（GTPV）间接ELISA检测方法，本研究表达出了GTPV 059-P32-L1R融合蛋白作为检测抗原，优化各试验条件并进行评价。结果显示，重组059-P32-L1R蛋白以包涵体形式表达，经Western blot鉴定可知其具有良好的抗原性。经优化后的间接ELISA方法中，059-P32-L1R蛋白的包被浓度为0.5 μg/mL；阳性血清1:800稀释后，OD450仍大于0.344，敏感性好；对GTPV具有特异性；批内及批间的重复变异系数均小于10.9%；与商用试剂盒检测符合率达95.8%。本研究成功表达出GTPV重组059-P32-L1R融合蛋白，并建立了间接ELISA检测方法，为GTPV的防控技术研究提供了工具与参考。

关键词：山羊痘病毒原核表达酶联免疫吸附试验融合蛋白

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技能竞赛中的鸡翅静脉采血技术与技巧

浙江畜牧兽医 2025年第1期50卷 41-42页

作者：陈栋永王杭花王宾磊永康市动物疫病防控中心 321300 永康市畜牧农机发展中心

动物血样采集是畜牧兽医工作的一项重要内容,是疫病监测、疫病诊断、抗体监测等动物疫病防控工作的基础,其中鸡翅静脉采血是省动物防检疫职业技能竞赛的必考项目。鸡是易受惊吓、抗敌能力差、易产生应激的动物,采血不适不仅易引起鸡的... 详细信息

动物血样采集是畜牧兽医工作的一项重要内容,是疫病监测、疫病诊断、抗体监测等动物疫病防控工作的基础,其中鸡翅静脉采血是省动物防检疫职业技能竞赛的必考项目。鸡是易受惊吓、抗敌能力差、易产生应激的动物,采血不适不仅易引起鸡的生产性能下降,还直接关系到家禽免疫状况、疫病的准确诊断。本文作者根据多年来的实际工作经验,结合浙江省动物防检疫职业技能竞赛中的鸡翅静脉采血要求,总结出鸡翅静脉采血技巧及注意事项,供大家参考。

关键词：抗体监测职业技能竞赛疫病诊断疫病监测畜牧兽医工作血样采集静脉采血动物疫病防控工作

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2023年华南地区猪繁殖与呼吸综合征病毒的遗传变异分析

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中国畜牧兽医 2025年第1期52卷 331-340页

作者：李松倍谢永生龙晓琴张晓晓陈永杰张春红焦茂兴郭春和华南农业大学兽医学院动物疫病防控全国重点实验室广州510642 宜春学院生命科学与资源环境学院宜春336000 肇庆市动物疫病预防控制中心肇庆526000

[目的]了解2023年华南地区猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)的遗传变异情况,为华南地区PRRSV的防控提供理论依据。[方法]采用实时荧光定量PCR方法对华南地区不同猪场采集的328... 详细信息

[目的]了解2023年华南地区猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)的遗传变异情况,为华南地区PRRSV的防控提供理论依据。[方法]采用实时荧光定量PCR方法对华南地区不同猪场采集的328份样品进行PRRSV检测,对来自不同猪场具有代表性的29个PRRSV阳性样品ORF5基因进行测序和遗传进化分析。[结果]所有样本中PRRSV的阳性率为54.27%(178/328),获得29株PRRSV。ORF5基因序列分析结果显示,所获得的PRRSV毒株均属于基因Ⅱ型毒株,29株PRRSV ORF5基因之间的核苷酸序列相似性为83.7%~100%,氨基酸序列相似性为83.0%~100%。其中6株属于以重组毒株NADC30-like为代表的谱系1,2株属于以经典毒株VR2332为代表的谱系5,21株属于以高致病性毒株JXA1为代表的谱系8。ORF5基因氨基酸突变主要集中在2个高变区、1个诱饵表位和3个跨膜区。谱系1的5株毒株的诱饵表位区域发生了V27A突变,谱系5的2株毒株的诱饵表位区域发生了V29A突变。在中和表位区域,谱系1的8株毒株发生了I39L突变,谱系8的5株毒株发生了I39F突变。在毒力相关位点中,部分毒株发生了R13Q、R151K、R151I、R151G突变。此外,谱系1的N-糖基化位点变异较多,主要集中在第30-32、32-34、33-35、34-36、35-37、57-59位氨基酸处,而谱系5和谱系8的N-糖基化位点相对保守。[结论]目前华南地区猪场的PRRSV阳性率仍较高,PRRSV流行以多谱基因Ⅱ型为特征,谱系8和谱系1毒株占比较高,并且变异复杂多样,需加强对PRRSV的监测,以掌握PRRSV毒株之间的遗传变异情况,及时做好防控。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 遗传变异 ORF5基因谱系

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微生态制剂的作用机制及其在家禽健康养殖中的应用

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黑龙江畜牧兽医 2025年第1期 15-19页

作者：谢作杰董鹏宇尹苗邓永涛陈希文绵阳师范学院动物疫病防控与健康养殖工程技术研究中心四川绵阳621000 四川生猪重大疫病监测与防控工程研究中心四川绵阳621000

在家禽养殖过程中,维持家禽肠道稳态是影响经济收益的重要因素。在防治动物疾病的过程中,长期大量滥用抗生素导致了很多耐药菌株的产生,使机体免疫水平下降并产生一系列的健康问题。因此,研究抗生素替代品成为热点话题。微生态制剂具有... 详细信息

在家禽养殖过程中,维持家禽肠道稳态是影响经济收益的重要因素。在防治动物疾病的过程中,长期大量滥用抗生素导致了很多耐药菌株的产生,使机体免疫水平下降并产生一系列的健康问题。因此,研究抗生素替代品成为热点话题。微生态制剂具有绿色、安全、无药物残留的优点,是一种无公害的绿色添加剂,在促进免疫系统发育、维持肠道菌群平衡、改善生产性能和健康状况及提高机体抗氧化性能等方面具有显著作用。本文概述了微生态制剂的作用机制及其在家禽养殖中的应用情况,旨在为未来安全、高效地发展家禽产业提供理论支撑,为研发出新型高效的微生态制剂提供参考。

关键词：微生态制剂作用机制家禽抗生素肠道菌群平衡绿色添加剂

基因Ⅰ型日本脑炎病毒NS1蛋白的多克隆抗体制备及鉴定

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中国兽医科学 2025年第1期55卷 26-32页

作者：柴风雪田占成杨吉飞张鸿歌牛庆丽独军政关贵全殷宏中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室甘肃兰州730046 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

乙型脑炎(Japanese encephalitis,JE)是由三带喙库蚊媒介传播的日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)感染引起的,临床表现以神经症状为主。NS1蛋白作为JEV编码的非结构蛋白,能够诱导机体产生非中和作用的保护性抗体,是JE诊断... 详细信息

乙型脑炎(Japanese encephalitis,JE)是由三带喙库蚊媒介传播的日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)感染引起的,临床表现以神经症状为主。NS1蛋白作为JEV编码的非结构蛋白,能够诱导机体产生非中和作用的保护性抗体,是JE诊断和疫苗研发的主要靶标。本研究以基因Ⅰ型JEV的NS1蛋白为靶标,将构建的重组质粒p ET30a-His-NS1转化Rosetta(DE3)表达菌,以0.5 mmol/L IPTG诱导表达。结果显示,与预期蛋白分子量大小一致的重组NS1蛋白以包涵体形式表达。经亲和层析柱纯化获得浓度为2.568 mg/mL的重组His-NS1蛋白。免疫印迹和间接免疫荧光结果表明,制备的高效价抗NS1蛋白多克隆抗体能够特异性识别蛋白分子量分别为46和55 ku的天然NS1蛋白。此外,本研究首次发现制备的抗NS1蛋白多克隆抗体与JEV预孵育能够剂量依赖性的显著降低JEV感染BHK-21细胞的病毒产量。将抗NS1蛋白多克隆抗体作为免疫沉淀抗体,用于JEV感染PK-15细胞的免疫沉淀质谱分析。结果表明,NS1蛋白能够与囊膜E蛋白相互作用。总之,本研究为深入了解NS1蛋白的生物学功能、JE诊断方法的建立和疫苗研制提供了基础材料。

关键词：日本脑炎病毒 NS1蛋白多克隆抗体制备鉴定

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山区“稻+鱼+鸭”生态养殖技术

河南畜牧兽医 2025年第1期46卷 12-14页

作者：姚有志盘祖香陈敏黄明捷刘江静刘霜云贵州镇远县动物疫病防控中心贵州镇远557700 黔东南州畜牧技术推广站

通过稻田的选择、稻田的改造、水稻的种植、稻田养鱼、养鸭形成综合种养模式,该种养模式通过多年的实践形成山区“稻+鱼+鸭”生态养殖技术,该技术能多途径开发食物资源,从而更好地保障国家的食物安全,提供更加丰富多样、营养健康的食物... 详细信息

通过稻田的选择、稻田的改造、水稻的种植、稻田养鱼、养鸭形成综合种养模式,该种养模式通过多年的实践形成山区“稻+鱼+鸭”生态养殖技术,该技术能多途径开发食物资源,从而更好地保障国家的食物安全,提供更加丰富多样、营养健康的食物供应,有效提高山区稻田的综合效益。

关键词：稻田种养稻鱼鸭经济效益

某父母代种鸡场肠炎沙门菌的分离与感染情况调查

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黑龙江畜牧兽医 2025年第2期 74-78页

作者：吴惠明张硕张启龙刘晓冬刘海莹李志军郑博君殷雨晴梅力高晓龙罗伏兵李刚北京市动物疫病预防控制中心北京102629

为了解某父母代种鸡场肠炎沙门菌的感染情况,试验采集37,45,53周龄肉鸡的泄殖腔拭子、环境拭子等共661份临床样品进行禽沙门菌的分离培养,并对分离菌株进行了生化鉴定、PCR鉴定、血清学鉴定,另外对采集的15,28,37,53周龄鸡血清进行D群... 详细信息

为了解某父母代种鸡场肠炎沙门菌的感染情况,试验采集37,45,53周龄肉鸡的泄殖腔拭子、环境拭子等共661份临床样品进行禽沙门菌的分离培养,并对分离菌株进行了生化鉴定、PCR鉴定、血清学鉴定,另外对采集的15,28,37,53周龄鸡血清进行D群沙门菌抗体检测。结果表明:共分离得到48株疑似禽沙门菌,分别命名为3701,4501~4530,5301~5317。其中1株来源于37周龄养殖环节的泄殖腔拭子样品(分离率为0.9%),30株来源于45周龄孵化环节的死鸡胚样品(分离率为75.0%),17株来源于53周龄孵化环节的死鸡胚样品(分离率为28.3%)。48株分离菌均符合沙门菌的生化特性,经PCR鉴定均为肠炎沙门菌。48株肠炎沙门菌均与O9、O12、Hg、Hm血清凝集,均属于D群肠炎沙门菌。鸡群15周龄时血清D群沙门菌抗体均为阴性;28周龄时血清D群沙门菌抗体开始转阳,平均阳性率为11.3%;37周龄时血清D群沙门菌抗体平均阳性率为48.6%;53周龄时血清D群沙门菌抗体平均阳性率为71.0%。说明该种鸡场鸡群在28周龄前就已经感染了肠炎沙门菌,53周龄时仍有部分感染鸡在持续排菌。

关键词：肠炎沙门菌细菌分离抗体阳性率调查禽沙门菌

单链DNA退火蛋白介导细菌基因组同源重组的机制及应用研究进展

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生物技术通报 2025年第1期41卷 39-48页

作者：尹号尤留超韩瑞高鹏程付磊储岳峰中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室兰州730000 甘肃省病原生物学基础学科研究中心兰州730046

基因组编辑技术是研究细菌等微生物在基因功能、耐药机制及致病机制等方面的重要工具,而同源重组是细菌基因组编辑的重要方式之一,传统的细菌内源性重组途径存在效率低下的问题,而一种来自噬菌体的单链DNA退火蛋白(SSAP)表现出了远超内... 详细信息

基因组编辑技术是研究细菌等微生物在基因功能、耐药机制及致病机制等方面的重要工具,而同源重组是细菌基因组编辑的重要方式之一,传统的细菌内源性重组途径存在效率低下的问题,而一种来自噬菌体的单链DNA退火蛋白(SSAP)表现出了远超内源性重组途径的基因组编辑效率,该蛋白具有单链DNA结合活性、介导基因组定向重组的特点,使其成为目前极具潜力的基因组编辑工具。本文主要对同源重组基本原理、噬菌体源SSAP介导的同源重组途径的基本元件、重组机制模型以及应用策略展开概述,旨在为进一步解析单链DNA退火蛋白介导的同源重组过程提供帮助,为研究更多细菌基因功能、致病机制以及开发工程菌株提供技术支撑,也为缺乏基因编辑方法的细菌提供技术参考。

关键词：细菌单链DNA退火蛋白同源重组机制应用