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RT-PCR方法检测非神经元、类神经元、神经元细胞系中淀粉样前体蛋白基因表达

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北京医科大学学报 1999年第1期31卷 17-19页

作者：乌永忠马康涛张迺蘅北京医科大学生物化学与分子生物学系德国海德堡大学分子生物学中心

目的与方法：根据人淀粉样前体蛋白（ａｍｙｌｏｉｄｐｒｅｃｕｒｓｏｒｐｒｏｔｅｉｎ，ＡＰＰ）基因ｃＤＮＡ序列设计的引物，提取总ＲＮＡ，利用ＲＴＰＣＲ方法检测非神经、类神经及神经细胞系ＡＰＰ基因的表达。结果：利用专门设... 详细信息

目的与方法：根据人淀粉样前体蛋白（ａｍｙｌｏｉｄｐｒｅｃｕｒｓｏｒｐｒｏｔｅｉｎ，ＡＰＰ）基因ｃＤＮＡ序列设计的引物，提取总ＲＮＡ，利用ＲＴＰＣＲ方法检测非神经、类神经及神经细胞系ＡＰＰ基因的表达。结果：利用专门设计的引物不能检测野生型ＣＯＳ７细胞中ＡＰＰ基因的表达，但可以检测转染人ＡＰＰ基因的非神经元类ＣＯＳ７细胞，类神经元的野生型ＰＣ１２及人神经母细胞瘤细胞ＳＨＳＹ５Ｙ细胞中ＡＰＰ基因的表达。

关键词：早老性痴呆病因学基因表达 RT-PCR APP基因

美学区盾构术中根片长度与跳跃间隙相关性的数字化测量分析

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美学区盾构术中根片长度与跳跃间隙相关性的数字化测量分析

作者：秦娆山西医科大学

学位级别：硕士

目的:本研究通过应用数字化方法虚拟盾构技术,于前牙区各牙位正中矢状面测量不同根片长度下根片根端至种植体之间的距离,探讨美学区不同牙位、不同根片长度对跳跃间隙的影响,旨在为美学区盾构技术方案制订、预后评估及并发症防治提供参... 详细信息

目的:本研究通过应用数字化方法虚拟盾构技术,于前牙区各牙位正中矢状面测量不同根片长度下根片根端至种植体之间的距离,探讨美学区不同牙位、不同根片长度对跳跃间隙的影响,旨在为美学区盾构技术方案制订、预后评估及并发症防治提供参考。方法:依据纳入排除标准,于山西医科大学口腔医院回顾性收集200例2020年1月至2021年9月成人锥形术CT(CBCT)影像,其中男性70例,女性130例,年龄(39.9±11.1)岁。获取符合以下纳入标准的CBCT:年龄18岁以上的亚洲人CBCT影像;美学区牙列完整、牙齿形态位置正常;CBCT图像包含上下颌骨;美学区CBCT影像无扭曲变形;前牙区咬合正常、牙体及牙周健康;牙根关系为Kan分类I类;使用相同设备及参数获得的CBCT影像。本研究收集的所有数据均使用同一台锥形束CT机(Ka Vo 3D e Xam,德国)并由同一位拍摄者拍摄获得,将获取的CBCT数据以DICOM文件格式导入SIMPLANT Pro Lab 17.01软件(Materialise Clinical Service Inc.,Leuven,Belgium)中,以修复及生物学为导向虚拟放置种植体于理想三维位置,在全景视图中选择待测牙的中心,在矢状窗口中调整至正中矢状位,放大400倍进行测量并记录中切牙、侧切牙和尖牙唇侧牙槽嵴顶下4mm、6mm、8mm处根片根端至种植体的距离即跳跃间隙,所有测量记录均由1名于山西医科大学口腔医学院经过严格培训的研究生完成,间隔2周后由同一研究生复测,将两次测量数据的平均值作为最终研究数据并进行整理分析。结果:本研究依据纳入标准以及排除标准共收集200例CBCT影像学资料,其中男性70例,女性130例,年龄(39.9±11.1)岁。通过SIMPLANT Pro Lab 17.01软件(Materialise Clinical Service Inc.,Leuven,Belgium)进行图像重建分析测量中切牙、侧切牙和尖牙行盾构术后唇侧牙槽嵴顶下4mm、6mm、8mm处根片根端至种植体的距离即跳跃间隙。结果显示:1.上颌中切牙、尖牙行盾构术后跳跃间隙的不同测量位点差异均无统计学意义,上颌侧切牙行盾构术后跳跃间隙的不同测量位点差异具有统计学意义(P统计学意义(P统计学意义(P>0.05)。3.上颌前牙行盾构术保留不同根片长度的跳跃间隙性别差异无统计学意义(P>0.05)。4.下颌中切牙行盾构术后跳跃间隙的不同测量位点差异无统计学意义,下颌侧切牙、尖牙行盾构术后跳跃间隙的不同测量位点差异均有统计学意义(P统计学意义(P统计学意义(P>0.05)。6.下颌前牙行盾构术保留不同根片长度的跳跃间隙性别差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1.上颌前牙行盾构术时,中切牙与尖牙保留4mm、6mm、8mm长度根片,根片与种植体间可留有跳跃间隙,而侧切牙保留8mm长度根片时,根片与种植体接触的可能性较大。上颌尖牙行盾构术跳跃间隙均大于中切牙与侧切牙。2.下颌前牙行盾构术时,中切牙保留6mm与8mm根片时存在种植体植入空间不足的风险。侧切牙保留6mm根片时种植体与根片接触的可能性较大,保留8mm会影响种植体的植入,尖牙保留8mm长度根片时跳跃间隙显著减小,但仍存在1-1.5mm的跳跃间隙。下颌尖牙行盾构术跳跃间隙均大于中切牙与侧切牙。3.上下颌前牙行盾构术时性别对跳跃间隙无影响。

关键词：锥束计算机体层摄影术(CBCT) 美学盾构术跳跃间隙

从MT2、HeLa细胞DNA及人和黑猩猩PBMC DNA中扩增GBV-C核苷酸同源序列的研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2001年第2期21卷 221-224页

作者：严杰 R.H.Dennin 浙江大学医学院微生物学教研室杭州310006 德国吕贝克医科大学微生物学研究所

目的　检测MT2和HeLa细胞DNA、6例人和 1例黑猩猩PBMCDNA中是否存在与GBV C同源的核苷酸序列。方法　直接以上述DNA为模板、采用GBV C 5′ NCR和NS3区引物的直接套式PCR(dPCR)、核苷酸序列分析、引物介导原位扩增 (PRINS)NDA序列特异荧... 详细信息

目的　检测MT2和HeLa细胞DNA、6例人和 1例黑猩猩PBMCDNA中是否存在与GBV C同源的核苷酸序列。方法　直接以上述DNA为模板、采用GBV C 5′ NCR和NS3区引物的直接套式PCR(dPCR)、核苷酸序列分析、引物介导原位扩增 (PRINS)NDA序列特异荧光标记技术。结果　从MT2和HeLa细胞DNA、4例人PBMCDNA标本中获得 5′ NCR引物扩增片段 ,从MT2和HeLa细胞DNA、5例人和黑猩猩PBMCDNA标本中获得NS3区引物扩增片段。这些扩增产物的核苷酸序列与GBV C同源性分别为 74 2 9%～ 77 14%和 73 80 %～ 79 15 %。PRINS检测结果显示 ,dPCR阳性的PBMC及其染色体上有荧光着色。结论　MT2和HeLa细胞DNA、人和黑猩猩PBMCDNA中存在与GBV C 5′ NCR和或NS3区同源性较高的核苷酸序列 ,这些序列可能位于dPCR阳性的PBMC染色体上。

关键词： GB病毒C型基因组外周血单个核细胞DNA 聚合酶链反应核苷酸序列

玻璃体内注射康柏西普对糖尿病黄斑水肿患者和继发于视网膜静脉阻塞的黄斑水肿患者的疗效差异

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眼科新进展 2023年第1期43卷 53-56页

作者：朱婷婷黄丹张春元孙瑞竹刘振兴顾喆瑶马戈奚婷南京医科大学姑苏学院苏州市立医院南京医科大学附属苏州医院眼科江苏省苏州市215008

目的探讨玻璃体内注射康柏西普对糖尿病黄斑水肿(DME)患者和继发于视网膜静脉阻塞(RVO)的黄斑水肿患者的疗效差异。方法回顾性研究。选取2019年8月至2021年12月在苏州市立医院北区眼科行玻璃体内注射康柏西普治疗的DME患者44例63眼记为... 详细信息

目的探讨玻璃体内注射康柏西普对糖尿病黄斑水肿(DME)患者和继发于视网膜静脉阻塞(RVO)的黄斑水肿患者的疗效差异。方法回顾性研究。选取2019年8月至2021年12月在苏州市立医院北区眼科行玻璃体内注射康柏西普治疗的DME患者44例63眼记为DME组,另选取采用同样方法进行治疗的继发于RVO的黄斑水肿患者40例40眼记为RVO组。采用国际标准视力表(小数)检查并记录患者最佳矫正视力(BCVA),采用德国海德堡公司OCT仪进行OCT检查,自动测量患者黄斑中心凹1 mm视网膜厚度并以此作为黄斑中心视网膜厚度(CMT)。所有患者玻璃体内均一次性注射0.05 mL康柏西普(成都康弘生物科技有限公司)。对比分析DME组和RVO组患眼基线特征及康柏西普治疗后7 d疗效差异。结果DME组患眼基线CMT为(484.94±152.89)μm,RVO组为(582.33±241.57)μm,RVO组基线CMT高于DME组,差异有统计学意义(P统计学意义(P>0.05)。注射后7 d,DME组患眼CMT为(333.40±88.08)μm,较基线CMT改变量为(-151.54±118.24)μm,注射前后差异有统计学意义(t=10.173,P统计学意义(t=-12.609,P统计学意义(t=8.132,P统计学意义(t=-13.258,P统计学意义(均为P<0.05)。结论玻璃体内注射康柏西普治疗DME和继发于RVO的黄斑水肿在患者水肿消退及视力提高方面疗效均显著,继发于RVO的黄斑水肿患者经康柏西普治疗后疗效较DME患者更好。

关键词：血管内皮生长因子糖尿病视网膜病变视网膜静脉阻塞康柏西普黄斑水肿

豚鼠星状神经节内P物质免疫反应纤维的超微结构和免疫反应性的定位

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同济医科大学学报 1992年第2期21卷 76-79,T140页

作者：刘能保 W.Kummer Ch.Heym 同济医科大学基础医学部组织胚胎学教研室联邦德国海德堡大学解剖学和细胞生物学研究所

采用抗生蛋白链菌素-生物素-过氧化物酶复合物免疫组化技术,观察了豚鼠星状神经节内P物质(SP)-免疫反应(IR)纤维的超微结构和免疫反应性(IRy)的定位。IR无髓纤维包括非串珠和串珠部分.IRy主要定位于非串珠部分的运输颗粒内、串珠间段的... 详细信息

采用抗生蛋白链菌素-生物素-过氧化物酶复合物免疫组化技术,观察了豚鼠星状神经节内P物质(SP)-免疫反应(IR)纤维的超微结构和免疫反应性(IRy)的定位。IR无髓纤维包括非串珠和串珠部分.IRy主要定位于非串珠部分的运输颗粒内、串珠间段的胞浆内和串珠结构大核心囊泡的致密核心内。IR串珠结构与神经元的树突和胞体构成突触,串珠间段部分地暴露于组织间隙和(或)与其它神经元结构直接接触。这些表明,IR物质除突触释放外,还存在非突触弥散性释放.讨论了豚鼠星状神经节内SP-IR神经纤维的来源。

关键词： P物质免疫组化星状神经节

tDCS对中风大鼠功能恢复和Notch信号通路的影响

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深圳大学学报（理工版） 2020年第5期37卷 521-527页

作者：段军秀郑嵋戈穆淑花田大胜许新忠贺震旦张健深圳大学基础医学院广东深圳518060 明斯特大学生物物理及生物医学研究所德国明斯特48149 安徽医科大学第二附属医院骨科安徽合肥230601 深圳大学心理学院广东深圳518060

临床研究表明,在大鼠双眼眶上孔、眶下缘和鼻交点处采用经颅直流电刺激(transcranial direct current stimulation,tDCS)有助于中风后的康复.然而,tDCS的潜在神经生物学机制仍然知之甚少.本研究主要关注卒中后tDCS疗法对功能恢复和Notc... 详细信息

临床研究表明,在大鼠双眼眶上孔、眶下缘和鼻交点处采用经颅直流电刺激(transcranial direct current stimulation,tDCS)有助于中风后的康复.然而,tDCS的潜在神经生物学机制仍然知之甚少.本研究主要关注卒中后tDCS疗法对功能恢复和Notch信号通路的影响.采用大鼠中脑动脉闭塞(middle cerebral arterial occlusion,MCAO)再灌注模型,将实验动物随机分为缺血组(MCAO)和缺血后治疗组(MCAO+tDCS),采用神经系统严重程度评分(modified neurological severity score,mNSS)结合动物的行为学表现对神经功能的恢复进行评估.通过2,3,5-三苯基氯化四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazole chloride,TTC)染色从组织学上比较治疗前后大鼠脑缺血组织损伤的恢复情况.应用实时定量聚合酶链反应(real time quantitative polymerase chain reaction,RT-PCR)测定缺血性脑中Notch信号通路中受体蛋白、配体蛋白及下游因子的基因表达变化.结果表明,大鼠脑缺血可以激活Notch信号通路,采用多导联脑反射仪的tDCS疗法可以提高Notch信号通路中Notch1、NICD、RBP-JK和Hes-1的mRNA水平,促进神经功能的恢复,并显著减少脑梗死的体积.多导联脑反射仪的tDCS疗法有望发展为一种可靠的临床治疗方式.

关键词：神经生物学中风经颅直流电刺激大脑中动脉阻塞 Notch信号通路神经功能评分量表脑缺血

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腐殖酸对NMRI鼠关节软骨粘弹性的影响

中国地方病学杂志 2004年第3期23卷 221-222页

作者：朱少华 P.P.Fietzek 华中科技大学同济医学院法医学系武汉430030 德国Luebeck医科大学医学分子生物学研究所

目的探讨腐殖酸对NMRI鼠关节软骨粘弹性的影响及影响机制。方法用含30 mg/L腐殖酸的饮水饲养第二代NMRI鼠,应用生物化学及生物力学的方法对子代鼠关节软骨的结构、胶原水平及粘弹性进行观察。结果与对照组相比,实验组关节软骨胶原水平... 详细信息

目的探讨腐殖酸对NMRI鼠关节软骨粘弹性的影响及影响机制。方法用含30 mg/L腐殖酸的饮水饲养第二代NMRI鼠,应用生物化学及生物力学的方法对子代鼠关节软骨的结构、胶原水平及粘弹性进行观察。结果与对照组相比,实验组关节软骨胶原水平明显下降(P< 0.01),软骨的粘弹性显著降低(P< 0.01)。结论NMRI鼠关节软骨粘弹性的改变与腐殖酸对软骨胶原的表达及排列结构的影响有关。

关键词：腐殖酸 NMRI 鼠关节软骨粘弹性生物力学大骨节病

LINC00341通过MAPK通路抑制肺腺癌细胞增殖

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昆明医科大学学报 2023年第4期44卷 1-8页

作者：马诗淇丁毅李敏王梦慈张思宇冯树梅新疆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室新疆地方病分子生物学重点实验室乌鲁木齐830011 南京医科大学基础医学院南京211166 新疆第二医学院基础医学院解剖教研室乌鲁木齐830011 美国密歇根大学癌症中心美国安娜堡

目的探讨LINC00341对肺腺癌细胞增殖的影响及其潜在机制。方法在公共数据集SEO和TCGA中分析肺腺癌中LINC00341 mRNA的表达,ROC曲线分析其诊断价值,对RMA和OKAYAMA数据进行生存分析,并通过美国密歇根大学医院肺癌样本进行RNA-seq验证和RO... 详细信息

目的探讨LINC00341对肺腺癌细胞增殖的影响及其潜在机制。方法在公共数据集SEO和TCGA中分析肺腺癌中LINC00341 mRNA的表达,ROC曲线分析其诊断价值,对RMA和OKAYAMA数据进行生存分析,并通过美国密歇根大学医院肺癌样本进行RNA-seq验证和ROC曲线分析;结合基因本体(gene otology,GO)分析LINC00341基因生物学功能;通过siRNA沉默LINC00341的表达,根据不同处理分为对照组(NT)和沉默组(siLINC00341),并验证细胞转染效率;采用WST-1和平板克隆实验检测细胞增殖能力;RNA亚细胞定位检测LINC00341定位,Western blotting检测其对MAPK信号通路相关蛋白表达水平的影响。结果LINC00341在肺腺癌组织中低表达(3个数据集P<0.0001),ROC曲线分析表明其可作为肺腺癌的诊断标记物,同时低表达LINC00341与患者较好的预后相关(P=0.004)。GO富集分析结果表明LINC00341主要与RNA聚合酶II启动子转录调控、蛋白质结合等有关。沉默LINC00341可以促进肺腺癌细胞的增殖(P<0.05)和克隆形成(P<0.05),且MAPK信号通路蛋白STAT3和ERK均被激活(P<0.05),RNA定位显示LINC00341主要分布在细胞核。结论LINC00341可能在转录水平调控MAPK通路,进而抑制肺腺癌发展,并可作为肺腺癌重要的诊断和预后标志物。

关键词：肺腺癌 LINC00341 MAPK

基于TRPV1/AMPK通路探讨石榴皮总多酚对亚油酸诱导的人皮脂腺细胞脂质合成的影响

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中草药 2023年第14期54卷 4538-4547页

作者：张曦朱明芳吴淑辉张娟娟郑慧娥王云鞠强 Christos C.Zouboulis 湖南中医药大学第二附属医院湖南长沙410005 湖南工商大学体育与健康学院湖南长沙410205 上海交通大学医学院附属仁济医院上海200127 德国勃兰登堡医学院勃兰登堡健康科学学院德绍城市医院德国德绍06847

目的探讨石榴皮总多酚(pomegranate peel polyphenols,PPPs)对亚油酸(linoleic acid,LA)诱导的永生化人皮脂腺SZ95细胞脂质合成的影响及其作用机制。方法体外培养SZ95细胞,运用LA诱导构建脂质过度合成模型,采用CCK-8法检测不同质量浓... 详细信息

目的探讨石榴皮总多酚(pomegranate peel polyphenols,PPPs)对亚油酸(linoleic acid,LA)诱导的永生化人皮脂腺SZ95细胞脂质合成的影响及其作用机制。方法体外培养SZ95细胞,运用LA诱导构建脂质过度合成模型,采用CCK-8法检测不同质量浓度PPPs对SZ95细胞活力的影响;尼罗红染色检测细胞脂质合成情况;qRT-PCR检测瞬时受体电位香草酸亚型1(transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1)、腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase,AMPK)mRNA表达;Western blotting检测TRPV1、AMPK、磷酸化AMPK(phosphorylated AMPK,p-AMPK)蛋白表达。采用siRNA进行细胞转染,观察沉默TRPV1后PPPs对LA诱导的SZ95细胞脂质合成及TRPV1/AMPK通路的影响。结果 1.25、2.5、5μg/mL的PPPs对SZ95细胞活性无明显影响,且均可显著抑制LA诱导的脂质过度合成(P统计学意义。与模型组比较,PPPs明显减少LA诱导下的SZ95细胞脂质合成(P<0.01),明显提高TRPV1、AMPK mRNA表达及TRPV1、p-AMPK/AMPK蛋白表达水平(P<0.05、0.01)。沉默TRPV1显著增加了LA诱导下的SZ95细胞脂质合成(P<0.01),并显著减弱了PPPs对SZ95细胞脂质过度合成的抑制(P<0.01),显著降低其TRPV1、AMPK的mRNA及TRPV1、pAMPK/AMPK蛋白表达水平(P<0.05、0.01)。结论 PPPs可有效抑制LA诱导的SZ95细胞脂质合成,其作用机制可能与TRPV1/AMPK通路有关。

关键词：石榴皮总多酚永生化人皮脂腺SZ95细胞脂质合成痤疮瞬时受体电位香草酸亚型1 腺苷酸活化蛋白激酶