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基于干细胞的胶质细胞源性神经营养因子和睫状神经营养因子对CLN7型神经元蜡样脂褐质沉积症小鼠模型视网膜退行性病变的治疗研究

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中华眼底病杂志 2024年第7期40卷 526-537页

作者：魏莹莹 Udo Bartsch 汉堡-埃彭多夫大学医学中心眼科德国汉堡100731 长沙湘江爱尔眼科医院长沙410011

目的观察CLN7型神经元蜡样脂褐质沉积症小鼠模型视网膜变性的形态学和功能学改变,以及基于神经干细胞(NSC)的胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)和(或)睫状神经营养因子(CNTF)对小鼠光感受器细胞的治疗效果。方法鼠龄14 d的CLN7型小鼠100... 详细信息

目的观察CLN7型神经元蜡样脂褐质沉积症小鼠模型视网膜变性的形态学和功能学改变,以及基于神经干细胞(NSC)的胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)和(或)睫状神经营养因子(CNTF)对小鼠光感受器细胞的治疗效果。方法鼠龄14 d的CLN7型小鼠100只随机分为实验组、对照组,分别为80、20只。鼠龄14 d的C57BL/6J小鼠20只设定为野生型组(WT组)。对照组、WT组小鼠不作任何处理,于2、4、6月龄时,采用免疫组织化学染色观察视网膜视锥细胞、视杆-双极细胞、视锥-双极细胞分布和数量变化;采用视网膜电图(ERG)检查记录暗视a、b波及明视b波振幅。实验组小鼠随机选取单侧眼为实验眼,玻璃体腔分别注射2μl CNTF-NSC、GDNF-NSC、CNTF-NSC和GDNF-NSC 1:1细胞混合物(GDNF/CNTFNSC),并据此再分为CNTF-NSC组、GDNF-NSC组、GDNF/CNTF-NSC组;对侧眼玻璃体腔注射不含神经营养因子(NTF)的NSC 2μl作为自身对照组。实验组不同治疗亚组于小鼠2、4月龄时,采用免疫组织化学染色观察光感受器细胞的数量;采用ERG检查记录暗视a、b波及明视b波振幅;小鼠4月龄时,观察移植的NSC分化情况和NTF表达。两组间比较采用双因素方差分析。结果与WT组比较,小鼠2、4、6月龄时,对照组小鼠周边区视网膜视锥细胞密度(F=285.10),中央区、周边区视网膜视杆-双极细胞密度(F=823.20、346.20)、视锥-双极细胞密度(F=356.30、210.60)以及暗视a、b波振幅(F=1911.00、387.10)均显著降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论随年龄增长,CLN7型小鼠表现出渐进性加重的退行性变化,这种变化在光感受器细胞和双极细胞的形态结构及功能上是一致的。基于NSC玻璃体内递送的CNTF和GDNF/CNTF均对光感受器细胞有保护作用,但联合使用GDNF/CNTF并未展现出比各自单独使用时更显著的协同保护效果。GDNF对CLN7型小鼠视网膜的形态和功能均没有治疗效果。

关键词：神经元蜡样质脂褐质沉积症7型胶质细胞源性神经营养因子睫状神经营养因子慢病毒神经干细胞眼内干细胞移植神经保护

中国第2例冻存卵巢组织自体移植5年后活产报道

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中国临床医生杂志 2024年第11期52卷 1384-1385页

作者：阮祥燕杜娟金凤羽谷牧青程姣姣李扬璐代荫梅 Matthias Korell Markus Montag Jana Liebenthron Alfred OMueck 首都医科大学附属北京妇产医院/北京妇幼保健院内分泌科北京100026 德国诺伊斯约翰娜艾蒂安医院妇产科德国诺伊斯41462 德国Ilabcomm GmbH 德国圣奥古斯丁53757 德国杜塞尔多夫大学妇产医院生育力保护中心德国杜塞尔多夫40225 德国图宾根大学妇产医院内分泌与绝经中心德国图宾根72076

卵巢组织冻存与移植(ovarian tissue cryopreservation and transplantation,OTCT)指在患者卵巢功能严重受损前,将部分卵巢组织经手术取出,采用低温生物学方法将其冷冻保存,待原发病治疗结束后再将冻存的卵巢组织复苏、自体移植,恢复卵... 详细信息

卵巢组织冻存与移植(ovarian tissue cryopreservation and transplantation,OTCT)指在患者卵巢功能严重受损前,将部分卵巢组织经手术取出,采用低温生物学方法将其冷冻保存,待原发病治疗结束后再将冻存的卵巢组织复苏、自体移植,恢复卵巢的生殖与内分泌功能,有效防治医源性POI[1]。OTCT可一次性保存成千上万枚卵母细胞;无需促排卵,不会延误原发病的治疗;不仅保护生育能力,还可保存卵巢内分泌功能;是亟需原发病治疗的患者及青春期前女童唯一的生育力保护方法[2-5]。

关键词：卵巢组织冻存卵巢组织移植再生障碍性贫血活产

中国卵巢组织冻存与移植后自然妊娠第2例报道

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中国医刊 2024年第5期59卷 567-570页

作者：阮祥燕杜娟金凤羽谷牧青程姣姣李扬璐代荫梅 Matthias Korell Markus Montag JanaLiebenthron Alfred O Mueck 首都医科大学附属北京妇产医院/北京妇幼保健院内分泌科北京100026 德国诺伊斯约翰娜艾蒂安医院妇产科诺伊斯41462德国德国Ilabcomm GmbH 圣奥古斯丁53757德国德国杜塞尔多夫大学妇产医院生育力保护中心杜塞尔多夫40225德国德国图宾根大学妇产医院内分泌与绝经中心图宾根72076德国

我国首个卵巢组织冻存库由首都医科大学附属北京妇产医院阮祥燕教授团队创建,该团队先后于2016年完成中国首例卵巢组织冻存与移植,2020年完成中国首例卵巢组织冻存与移植后妊娠,2021年报道中国首例卵巢组织冻存与移植后活产,至2024年已... 详细信息

我国首个卵巢组织冻存库由首都医科大学附属北京妇产医院阮祥燕教授团队创建,该团队先后于2016年完成中国首例卵巢组织冻存与移植,2020年完成中国首例卵巢组织冻存与移植后妊娠,2021年报道中国首例卵巢组织冻存与移植后活产,至2024年已成功开展26例卵巢组织冻存与移植,移植患者全部恢复了卵巢功能并长期维持。本文报道再生障碍性贫血获得临床妊娠的患者,为中国第2例卵巢组织冻存与移植后妊娠病例。患者于外院经骨髓穿刺诊断为再生障碍性贫血(重型),2017年因药物、输血治疗效果欠佳,拟行异基因造血干细胞移植,因未婚未育,强烈要求生育力与卵巢功能保护,首都医科大学附属北京妇产医院对其进行综合评估后决定实施卵巢组织冻存,在全身麻醉下行腹腔镜下右侧卵巢切除术,手术顺利,取下的卵巢组织转运至首都医科大学附属北京妇产医院卵巢组织冻存库保存。造血干细胞移植后,患者于2018年行卵巢组织复苏与移植手术,手术顺利,无并发症发生。患者卵巢组织冻存与移植5年后结婚,卵巢功能维持良好,并于备孕4个月后自然妊娠,末次月经时间为2023年12月18日。

关键词：卵巢组织冻存卵巢组织移植再生障碍性贫血妊娠

中国自体卵巢组织冻存移植后成功妊娠首例报道

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中国临床医生杂志 2021年第3期49卷 375-378页

作者：阮祥燕杜娟卢丹段微金凤羽孔为民吴玉梅代荫梅严松彪阴赪宏李扬璐程姣姣贾婵维刘晓巍吴青青谷牧青鞠蕊许新杨瑜金婧 Matthias Korell Markus Montag JanaLiebenthron Alfred OMueck 首都医科大学附属北京妇产医院内分泌科北京100026 首都医科大学附属北京妇产医院妇科北京100026 首都医科大学附属北京妇产医院妇瘤科北京100026 首都医科大学附属北京妇产医院生殖医学科北京100026 首都医科大学附属北京妇产医院产科北京100026 首都医科大学附属北京妇产医院超声科北京100026 德国诺伊斯约翰娜艾蒂安医院妇产科诺伊斯41462德国德国Ilabcomm GmbH 圣奥古斯丁53757德国德国杜塞尔多夫大学妇产医院生育力保护中心杜塞尔多夫40225德国德国图宾根大学妇产医院内分泌与绝经中心图宾根72076德国

女性生育力保护技术的需求急剧增长。全球每年新增恶性肿瘤患者超过1400万例[1],抗癌治疗在显著降低患者死亡率的同时,其性腺毒性却对患者的卵巢功能造成严重损伤,尤其在造血干细胞移植后,卵巢早衰的发生率可达100%[2]。随着发病年龄的... 详细信息

女性生育力保护技术的需求急剧增长。全球每年新增恶性肿瘤患者超过1400万例[1],抗癌治疗在显著降低患者死亡率的同时,其性腺毒性却对患者的卵巢功能造成严重损伤,尤其在造血干细胞移植后,卵巢早衰的发生率可达100%[2]。随着发病年龄的年轻化与生育年龄的推迟,78.3%的年轻恶性肿瘤患者有强烈的生育需求[3]。因此,生育力保护成为全球关注的热点。卵巢组织冻存是抗癌治疗无法延迟的女性及青春期前女童唯一的生育力保护选择[4],且有卵泡储备量大、无需促排卵、不受月经周期影响、不仅保护生育力还可保存卵巢内分泌功能等诸多优势[5]。

关键词：卵巢组织冻存卵巢组织移植妊娠

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中国首例冻存卵巢组织移植报告

首都医科大学学报 2016年第6期37卷 840-842页

作者：阮祥燕杜娟卢丹孔为民代荫梅阴赪宏严松彪金凤羽金婧崔亚美费秀珍 Matthias Korell Jana Liebenthron Markus Montag Alfred O.Mueck 首都医科大学附属北京妇产医院北京100026 德国诺伊斯约翰娜艾蒂安医院德国诺伊斯41462 德国波恩大学妇产医院德国波恩53127 德国海德堡大学妇科内分泌与生殖中心德国海德堡69120 德国图宾根大学妇产医院内分泌与绝经中心德国图宾根72076

随着癌症医学的发展,细胞毒性抗癌药物与放射治疗在临床上的普遍应用使癌症患者的生存率大幅提高,如49岁以下乳腺癌患者5年生存率约90%。超过70%的年轻癌症患者有生育要求,但性腺毒性治疗会对卵巢功能造成严重的不可逆性损伤。例如,乳... 详细信息

随着癌症医学的发展,细胞毒性抗癌药物与放射治疗在临床上的普遍应用使癌症患者的生存率大幅提高,如49岁以下乳腺癌患者5年生存率约90%。超过70%的年轻癌症患者有生育要求,但性腺毒性治疗会对卵巢功能造成严重的不可逆性损伤。例如,乳腺癌患者经FEC或FAC方案化学药物治疗（以下简称化疗）后,闭经的发生率高达50%-65%。

关键词：卵巢组织移植卵巢窝不可逆性损伤造血干细胞移植放射治疗细胞毒性化学药物治疗妇科内分泌异位移植原位移植

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子宫内膜癌卵巢组织冻存自体移植1例报道

中华生殖与避孕杂志 2021年第7期41卷 644-649页

作者：阮祥燕程姣姣杜娟李扬璐金凤羽卢丹周蓉代荫梅周琦 Matthias Korell 王虎生谷牧青 Alfred O.Mueck 首都医科大学附属北京妇产医院 100026 北京大学人民医院 100044 德国诺伊斯约翰娜艾蒂安医院 41462 德国图宾根大学妇产医院内分泌与绝经中心 72076

目的通过卵巢组织冻存及自体移植手术保护子宫内膜癌患者生育力与卵巢内分泌功能。方法对1例33岁子宫内膜癌I期患者在癌症手术过程中进行卵巢组织取材、冻存,待其癌症完全缓解后进行冻存卵巢组织自体移植手术,随访监测患者的激素水平、... 详细信息

目的通过卵巢组织冻存及自体移植手术保护子宫内膜癌患者生育力与卵巢内分泌功能。方法对1例33岁子宫内膜癌I期患者在癌症手术过程中进行卵巢组织取材、冻存,待其癌症完全缓解后进行冻存卵巢组织自体移植手术,随访监测患者的激素水平、卵泡发育情况以及绝经相关症状。结果卵巢组织移植1个月后,改良Kupperman评分由12分降低至2分,绝经相关症状基本消失,移植第2个月卵泡刺激素降低至21.78 IU/L,雌二醇由<13.76 ng/L升高至65.55 ng/L,B超监测到有卵泡发育。移植第4个月,卵泡刺激素降至6.26 IU/L,雌二醇水平升至112.22 ng/L,移植后第9个月,雌二醇水平为118.14 ng/L,孕酮水平升高至8.96μg/L,且B超下监测到2个排卵后黄体。结论卵巢组织冻存移植2个月后卵巢功能恢复,证明卵巢组织在临床上移植成功。

关键词：卵巢组织冻存卵巢组织移植子宫内膜癌卵巢排卵卵巢功能

英国生育协会“医源性原因女性生育力保存策略与实践指南(2018版)”解读

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中华生殖与避孕杂志 2020年第4期40卷 344-351页

作者：张巧利吴瑞芳首都医科大学附属北京妇产医院生殖医学中心 100026 北京大学深圳医院妇产中心 518036

近年来,医学研究取得了长足发展,肿瘤治疗技术的发展使年轻肿瘤患者的生存率提高。但是肿瘤的化疗、放疗、内分泌或手术治疗,可导致卵巢功能低下甚至卵巢衰竭,如何有效保护和保存这些患者的生育力显得尤为重要。本文对英国生育力协会(Br... 详细信息

近年来,医学研究取得了长足发展,肿瘤治疗技术的发展使年轻肿瘤患者的生存率提高。但是肿瘤的化疗、放疗、内分泌或手术治疗,可导致卵巢功能低下甚至卵巢衰竭,如何有效保护和保存这些患者的生育力显得尤为重要。本文对英国生育力协会(British Fertility Society,BFS)最新发布的《医源性原因女性生育力保存的策略与实践指南》循证医学证据进行解读。

关键词：生育力保存胚胎冻存卵母细胞冻存卵巢组织冻存肿瘤

人脐带间充质干细胞联合褪黑素治疗化疗致早发性卵巢功能不全的作用及机制

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中国组织工程研究 2025年第25期29卷 5281-5288页

作者：魏璐晓黄冰雪杜静石拴霞王纪田王玲中国人民解放军联勤保障部队第九四〇医院生殖医学中心甘肃省兰州市730000 甘肃中医药大学第一临床医学院甘肃省兰州市730000 中国人民解放军联勤保障部队第九四〇医院甘肃省干细胞与基因药物重点实验室甘肃省兰州市730000

背景:目前研究证明,人脐带间充质干细胞和褪黑素均可改善卵巢功能,但人脐带间充质干细胞联合褪黑素对化疗所致早发性卵巢功能不全的保护作用及机制尚未有研究报道。目的:探讨人脐带间充质干细胞联合褪黑素对化疗所致早发性卵巢功能不全... 详细信息

背景:目前研究证明,人脐带间充质干细胞和褪黑素均可改善卵巢功能,但人脐带间充质干细胞联合褪黑素对化疗所致早发性卵巢功能不全的保护作用及机制尚未有研究报道。目的:探讨人脐带间充质干细胞联合褪黑素对化疗所致早发性卵巢功能不全的保护作用及机制。方法:将动情周期正常的40只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、人脐带间充质干细胞组、褪黑素组和人脐带间充质干细胞+褪黑素组,每组8只。除对照组外,其他组腹腔注射顺铂溶液构建早发性卵巢功能不全大鼠模型,人脐带间充质干细胞组和人脐带间充质干细胞+褪黑素组于造模后第1,6,11天分别尾静脉注射1×10^(6)个人脐带间充质干细胞,褪黑素组和人脐带间充质干细胞+褪黑素组每日腹腔注射10 mg/kg褪黑素,治疗期间监测大鼠体质量和动情周期变化。治疗14 d后,ELISA法检测血清雌二醇、卵泡刺激素、促黄体生成素、抗缪勒管激素水平,计算卵巢指数,苏木精-伊红染色观察卵巢组织学形态,透射电镜观察卵巢颗粒细胞超微结构,Western blot检测PI3K/AKT/mTOR信号通路蛋白和LC3、P62等自噬蛋白在卵巢组织中的表达。结果与结论:(1)与对照组相比,模型组大鼠体质量逐渐减轻、动情周期紊乱,卵巢指数显著下降(P<0.01);雌二醇、抗缪勒管激素水平降低(P<0.01),卵泡刺激素、促黄体生成素水平升高(P<0.01);卵巢组织学形态和卵巢颗粒细胞超微结构严重破坏;p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR和P62蛋白表达显著降低(P<0.01),LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达显著升高(P<0.001)。(2)与模型组相比,各治疗组大鼠体质量逐渐恢复,部分大鼠动情周期恢复正常,卵巢指数显著升高(P<0.01);雌二醇、抗缪勒管激素水平升高(P<0.05),卵泡刺激素、促黄体生成素水平降低(P<0.05);卵巢组织学形态和卵巢颗粒细胞超微结构显著改善;p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR和P62蛋白表达显著升高(P<0.001),LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达显著降低(P<0.01)。其中人脐带间充质干细胞+褪黑素组上述指标改善更为显著。结果表明,人脐带间充质干细胞联合褪黑素可能通过上调PI3K/AKT/mTOR信号通路,抑制卵巢颗粒细胞自噬来治疗早发性卵巢功能不全。

关键词：早发性卵巢功能不全人脐带间充质干细胞褪黑素雌激素自噬 PI3K AKT mTOR

门诊微型宫腔镜检查在不孕症患者中的临床应用

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首都医科大学学报 2019年第4期40卷 549-553页

作者：阮祥燕张露平代荫梅王虎生金凤羽谷牧青程姣姣鞠蕊闵敏 Thomas Roemer 首都医科大学附属北京妇产医院内分泌科北京100026 德国图宾根大学妇产医院妇女健康部与妇女健康研究中心图宾根D-72076德国德国科隆大学妇产医院科隆D-50931德国

目的观察门诊微型宫腔镜检查在不孕症患者中的临床应用。方法分析2017年9月至2019年1月期间在首都医科大学附属北京妇产医院内分泌科接受门诊微型宫腔镜检查并有生育要求的患者159例,排除由早发性卵巢功能不全(premature ovarian insuff... 详细信息

目的观察门诊微型宫腔镜检查在不孕症患者中的临床应用。方法分析2017年9月至2019年1月期间在首都医科大学附属北京妇产医院内分泌科接受门诊微型宫腔镜检查并有生育要求的患者159例,排除由早发性卵巢功能不全(premature ovarian insufficiency,POI)、输卵管因素导致的不孕症,排除急性或亚急性阴道生殖道炎性反应,子宫内膜病变或子宫内膜恶性肿瘤,合并严重的心血管,肝、肾系统原发疾病不宜行宫腔镜检查的患者,失访12例,最终纳入分析110例,记录患者的年龄、体质量指数(body mass index,BMI)、不孕病因、宫腔镜术前及术后促排卵周期、妊娠状态及妊娠时间,分析门诊微型宫腔镜检查对患者妊娠的影响。结果 110例患者平均年龄(31.95±4.86)岁,发现宫腔异常者77例,占70%,宫腔正常共33例,占30%。37例妊娠,占33.63%;37例妊娠患者宫腔镜检查后妊娠促排卵周期的中位数1(0~3),较宫腔镜检查前促排卵周期的中位数3(0~15)明显减少(P多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)患者宫腔镜检查后妊娠促排卵周期中位数1(0~3)较宫腔镜检查前促排卵周期的中位数3(0~15)明显减少(P<0.05),PCOS患者宫腔镜检查术后的妊娠率为40.58%(28/69)。在37例患者中,宫腔镜检查无结构性病变的患者21例,宫腔镜检查术后妊娠促排卵周期中位数为1(0~3)较宫腔镜前促排卵周期的中位数明显减少5(0~9)(P<0.05)。另外未妊娠的73例患者年龄及不孕年限较妊娠组患者明显增大,非妊娠组患者的子宫内膜炎及薄型子宫内膜的比率明显升高。结论门诊微型宫腔镜检查可以及时发现宫腔内病变,对不孕症患者宫腔因素的诊断具有很重要的应用价值,PCOS患者,微型宫腔镜检查后短期内妊娠率明显增高,其机制有待探讨。

关键词：门诊微型宫腔镜不孕多囊卵巢综合征微刺激