检索结果-南通市图书馆

电子转移途径中芳香族氨基酸的引入提高了细胞色素P450s的催化性能

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

Chinese Journal of Catalysis 2023年第6期49卷 81-90页

作者：孟帅奇李忠玉季宇 Anna Joelle Ruff 刘珞 Mehdi D.Davari Ulrich Schwaneberg 亚琛工业大学生物技术研究所德国北京化工大学北京生物过程重点实验室北京100029 莱布尼茨植物生物化学研究所生物有机化学系德国莱布尼茨互动材料研究所德国

细胞色素P450s是用于生物合成的多功能催化剂.在P450催化循环中,需要两个电子来还原血红素铁,并通过电子转移途径(eTPs)激活随后的还原,该步骤是反应的限速步骤.本文重新设计了巨大芽孢杆菌P450 BM3的e TPs,大幅提高了其催化性能.通过在... 详细信息

细胞色素P450s是用于生物合成的多功能催化剂.在P450催化循环中,需要两个电子来还原血红素铁,并通过电子转移途径(eTPs)激活随后的还原,该步骤是反应的限速步骤.本文重新设计了巨大芽孢杆菌P450 BM3的e TPs,大幅提高了其催化性能.通过在P450 BM3的e TP中引入芳香族氨基酸,“最佳”变体P2H02(A399Y/Q403F)的催化效率比P450 BM3野生型催化效率提高了12.9倍(kcat/KM从65.8 L mol^(-1)s^(-1)提高到913.5 L mol^(-1)s^(-1)).分子动力学模拟和电子传递分析表明,在辅因子FMN和血红素之间引入的芳香族氨基酸可以显著提高电子转移速率和酶催化性能.同时,在电子传递途径中引入酪氨酸可以保护P450的催化中心,使其避免被氧化性中间产物所破坏,从而提高其催化效率.此外,引入芳香族氨基酸的策略被证明对其他P450(如CYP116B3)同样有效,改造后的酶表现出显著提高的催化效率.综上,本文策略有望拓展到其他带有长程电子传递链的氧化还原酶上,成为改造的通用策略.

关键词：定向进化 P450 BM3 蛋白质工程电子传递理性设计

深度学习指导的热裂褐藻角质酶工程用于促进PET解聚

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

Chinese Journal of Catalysis 2023年第7期50卷 229-238页

作者：孟帅奇李忠玉张鹏 Francisca Contreras 季宇 Ulrich Schwaneberg 亚琛工业大学生物技术研究所德国北京化工大学北京生物过程重点实验室北京100029 莱布尼茨互动材料研究所德国

有效和可持续的聚合物循环经济需要低二氧化碳排放和高效的回收工艺.聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)的酶解聚是使PET聚合物成为聚合物循环经济一部分的第一步.本文利用基于结构的深度学习模型来识别TfCut2中负责提高水解活性和增强稳定性的... 详细信息

有效和可持续的聚合物循环经济需要低二氧化碳排放和高效的回收工艺.聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)的酶解聚是使PET聚合物成为聚合物循环经济一部分的第一步.本文利用基于结构的深度学习模型来识别TfCut2中负责提高水解活性和增强稳定性的残基.机器学习引导设计确定了新的有益位置(L32E,S35E,H77Y,R110L,S113E,T237Q,R245Q和E253H),对其进行评估并逐步重组,最终获得有益变体L32E/S113E/T237Q.与TfCut2WT相比,后一种TfCut2变体表现出更好的PET解聚性能:无定形PET膜,2.9倍的改进;结晶PET粉末(结晶度>40%),5.3倍的改进.就耐热性而言,变体L32E/S113E/T237Q的半灭活温度(T_(50)^(60))增加5.7℃.利用带耗散监测的石英晶体微量天平(QCM-D)实时监测PET水解过程,以研究涂覆在金传感器上的PET解聚动力学.构象动力学分析结果表明,取代诱导了变体L32E/S113E/T237Q的构象变化,其中主要构象使催化位点和PET之间的接触更紧密,促进了PET水解.总之,本文展示了蛋白质工程中深度学习模型在识别和设计高效PET解聚酶方面的潜力.

关键词：塑料热解聚对苯二甲酸乙二醇酯 TfCut2 机器学习带耗散监测的石英晶体微量天平定向转化

脊髓创伤后施万细胞神经生长因子受体的表达及在轴突再生中的作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华神经科杂志 1996年第4期29卷 237-240页

作者：王子慧 Gerha.,L 北京医科大学病理学系德国埃森大学神经病理学研究所

为了探讨人脊髓损伤后再生过程，用免疫组织化学及电镜等方法研究了２１例脊髓创伤后存活２小时至５４年患者的脊髓尸检材料。结果表明：创伤后４天，损伤的脊髓组织内便可见再生的轴突支芽。创伤４．５个月以后，损伤的脊髓内出现许多... 详细信息

为了探讨人脊髓损伤后再生过程，用免疫组织化学及电镜等方法研究了２１例脊髓创伤后存活２小时至５４年患者的脊髓尸检材料。结果表明：创伤后４天，损伤的脊髓组织内便可见再生的轴突支芽。创伤４．５个月以后，损伤的脊髓内出现许多轴突再生巢。巢内含有定向排列的轴突及施万细胞，部分轴突已被施万细胞形成的髓鞘所包绕。巢内施万细胞表达了神经生长因子受体（ＮＧＦＲ）。此外，受损平面脊神经根内，施万细胞的ＮＧＦＲ表达增强。以上结果表明：人脊髓创伤后有积极的再生过程，施万细胞的ＮＧＦＲ可介导神经生长因子，支持并引导中枢性轴突的再生。

关键词：轴突再生神经生长因子许旺细胞脊髓损伤创伤

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

路用聚氨酯胶结料的抗紫外老化性能

中国公路学报 2020年第10期33卷 240-253页

作者：洪斌陆国阳高峻凌王川和王大为哈尔滨工业大学交通科学与工程学院黑龙江哈尔滨150090 德国亚琛工业大学道路工程研究所北莱茵-威斯特法伦亚琛52074

路用聚氨酯(PU)胶结料在工程应用中不可避免地会遭受紫外照射的影响。为此,采用紫外老化试验箱模拟自然老化过程,以影响路用性能的拉伸性能和黏弹性(基于温度扫描和频率扫描的动态热力学性能)为评价指标,研究老化下路用PU胶结料性能的... 详细信息

路用聚氨酯(PU)胶结料在工程应用中不可避免地会遭受紫外照射的影响。为此,采用紫外老化试验箱模拟自然老化过程,以影响路用性能的拉伸性能和黏弹性(基于温度扫描和频率扫描的动态热力学性能)为评价指标,研究老化下路用PU胶结料性能的演化规律,并通过红外光谱和电子扫描显微镜揭示其老化机理;同时,通过调整PU的组分配比(多元醇/异氰酸酯的质量比为100/80,100/65,分别记为PU-Ⅰ,PU-Ⅱ),揭示不同异氰酸酯组分含量对PU紫外老化性能的影响规律与机理。试验表明:紫外老化对PU拉伸强度和断裂伸长率的影响主要表现在老化前期,老化中后期性能保持相对稳定甚至有所回升,如PU-Ⅰ的残余强度在老化28d后恢复至98.8%;紫外老化并未明显降低PU的拉伸模量,反而提高了其拉伸模量,如老化28d后PU-Ⅰ的拉伸模量提升了近一倍;紫外老化提高了PU的储能模量和玻璃化转变温度(Tg),增大了低频区PU的复数模量和黏弹比,降低了中高频区PU的复数模量和黏弹比,特别是PU-Ⅰ。上述PU性能的演化机理主要包括塑化、分子链断裂和物化交联,其中物化交联主要包括较强氢键形成而产生的物理交联、后固化以及水分子与未反应的-N=C=O官能团反应而引起的化学交联;异氰酸酯含量的适当增加,增强了物化交联作用,可以提高PU的抗老化能力。总之,研究成果为PU胶结料在道路工程领域中的应用奠定了一定的基础。

关键词：道路工程聚氨酯胶结料紫外老化拉伸性能黏弹性老化规律老化机理

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

大肠癌肠嗜铬细胞的免疫细胞化学研究

中华病理学杂志 1990年第2期19卷 86-89页

作者：陈培辉 Bare.,GL 310006，杭州，浙江医科大学病理学教研室联邦德国吕贝克医科大学病理学研究所

130例大肠普通型腺癌应用铬粒素单克隆抗体免疫细胞化学方法发现54例(41.5%)肿瘤含有肠嗜铬细胞(EC细胞)。其中呈激素阳性反应者,血清素30例,生长抑素14例,高血糖素11例,胰多肽5例,胃泌素1例。与EC细胞阴性者比较,EC细胞(++)或多肽类阳... 详细信息

130例大肠普通型腺癌应用铬粒素单克隆抗体免疫细胞化学方法发现54例(41.5%)肿瘤含有肠嗜铬细胞(EC细胞)。其中呈激素阳性反应者,血清素30例,生长抑素14例,高血糖素11例,胰多肽5例,胃泌素1例。与EC细胞阴性者比较,EC细胞(++)或多肽类阳性的肿瘤分化多较好、多处于较早期,其患者的五年存活率也较高。在不同分化程度的肿瘤和非肿瘤性粘膜中,EC细胞群体结构也有明显差别,呈激素阳性,特别是多肽类阳性细胞的比例在粘膜中最高,中低分化癌最低。根据上述结果,对EC细胞、的发现率、方法学及其临床病理学意义进行了讨论。

关键词：大肠肿瘤嗜铬细胞免疫细胞化学

低能脉冲超声波影响巨噬细胞功能的分子机制探讨

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国实验血液学杂志 2007年第6期15卷 1253-1256页

作者：李懿萍周韶霞 Andreas Schmelz Max G.Bachem 东南大学基础医学院病理学系南京210009 德国Ulm大学临床化学系 89081 德国Ulm大学创伤外科 89070

本研究探讨低能脉冲超声波(LIPUS)对人原代巨噬细胞调节作用的分子机制。用酶谱学检测细胞基质金属蛋白酶(MMP)的分泌,采用荧光染色法观察细胞的吞噬能力、局部复合物和基质金属蛋白酶诱导剂EMMPRIN的表达。蛋白质印迹杂交方法检测EMMP... 详细信息

本研究探讨低能脉冲超声波(LIPUS)对人原代巨噬细胞调节作用的分子机制。用酶谱学检测细胞基质金属蛋白酶(MMP)的分泌,采用荧光染色法观察细胞的吞噬能力、局部复合物和基质金属蛋白酶诱导剂EMMPRIN的表达。蛋白质印迹杂交方法检测EMMPRIN和细胞外信号调节激酶(ERK)的表达。结果表明:LIPUS加速巨噬细胞对大肠杆菌的吞噬,促进巨噬细胞表达EMMPRIN和分泌MMP,增加细胞的磷酸化程度和ERK1/2的磷酸化;上述功能只限于黏附细胞,且可被PD98059或RGD抑制。结论:LIPUS对巨噬细胞功能的调节依赖于细胞黏附,并与整合蛋白-细胞外信号调节激酶(integins-ERK1/2)信号途径相关。

关键词：超声波巨噬细胞整合蛋白细胞外信号调节激酶

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

一种可能的结直肠癌早期病变

浙江大学学报（医学版） 2004年第2期33卷 115-117页

作者：来茂德黄琼 Parwaresch Reza 浙江大学医学院病理学和病理生理学系环境基因组学研究中心浙江杭州310031 德国基尔大学血液病理研究所

目的 :研究结直肠癌的癌前病变。方法 :应用免疫组织化学方法 ,检测 10 1例结直肠癌及相应的癌旁黏膜和远端切缘黏膜 ,16例溃疡性结肠炎、16例克隆氏病和 3例健康成年人结直肠各部位黏膜的 Ki A10的表达。结果 :在结直肠癌中 Ki A10阳... 详细信息

目的 :研究结直肠癌的癌前病变。方法 :应用免疫组织化学方法 ,检测 10 1例结直肠癌及相应的癌旁黏膜和远端切缘黏膜 ,16例溃疡性结肠炎、16例克隆氏病和 3例健康成年人结直肠各部位黏膜的 Ki A10的表达。结果 :在结直肠癌中 Ki A10阳性率为 14 .85 % (15 /10 1) ,癌旁黏膜和远端切缘黏膜均有 18例 Ki A10阳性腺窝分布 ,但并非一一对应。结论 :Ki A10阳性腺窝可能是一种新的结直肠癌癌前病变。

关键词：结肠直肠肿瘤/病理学结直肠癌癌前病变癌旁黏膜 KiA10 免疫组织化学

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

神经生长因子受体在人脊髓创伤后的再表达

中华病理学杂志 1996年第1期25卷 21-23页

作者：王子慧 GerhardLissollet 北京医科大学病理系 100083 德国埃森大学神经病理研究所

为了了解神经生长因子受体（NGFR）在受损脊髓内的表达情况，用免疫细胞化学方法，在18例脊髓创伤后存活2小时至28个月患者死后脊髓石蜡切片上进行了研究。结果表明：最早于创伤后第4天起，前角运动神经元再表达NGFR。创伤30天后，NGFR... 详细信息

为了了解神经生长因子受体（NGFR）在受损脊髓内的表达情况，用免疫细胞化学方法，在18例脊髓创伤后存活2小时至28个月患者死后脊髓石蜡切片上进行了研究。结果表明：最早于创伤后第4天起，前角运动神经元再表达NGFR。创伤30天后，NGFR阳性运动神经元逐渐减少，但直至伤后28个月仍可见到。创伤后7小时至9周，后索内轴突也表达了NGFR，可能是脊神经节细胞NGFR的轴浆运输效应。此外，受损脊髓内微血管壁外层也呈NGFR阳性。创伤后运动神经元再表达NGFR，反映神经细胞对神经生长因子的需求增加，以维持创伤后神经生长因子依赖性神经元的生存。

关键词：受体神经生长因子脊髓损伤创伤

人脊髓创伤后神经元病变的神经丝免疫组织化学研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国组织化学与细胞化学杂志 1995年第2期4卷 134-138页

作者：王子慧北京医科大学病理学系德国埃森大学神经外科研究所

本文用神经丝（ＮＦ）免疫组织化学方法在１５例人体尸检材料中研究了脊髓创伤后生存２ｈ～９Ｗ的脊髓神经元胞体和轴突的病理学改变。结果表明：脊髓创伤后２ｈ，神经丝免疫组织化学反应即可显示ＮＦ阳性反应产物在轴突内聚集。创伤后... 详细信息

本文用神经丝（ＮＦ）免疫组织化学方法在１５例人体尸检材料中研究了脊髓创伤后生存２ｈ～９Ｗ的脊髓神经元胞体和轴突的病理学改变。结果表明：脊髓创伤后２ｈ，神经丝免疫组织化学反应即可显示ＮＦ阳性反应产物在轴突内聚集。创伤后第４天，病变的前角运动神经元胞体内神经丝反应异常地增强。以上结果表明：神经丝免疫组织化学方法比常规显示轴突的染色方法能更早更清晰地显示脊髓内轴突的病变，并进一步证实了创伤后细胞骨架紊乱在神经元的病理发病机理中起重要作用。

关键词：神经丝免疫组织化学人脊髓创伤