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线粒体移植治疗肌少症的潜力

中国组织工程研究 2025年第13期29卷 2842-2848页

作者：李伟尹洪涛孙永晨徐卫娟孙金玲金晓东淄博市中心医院老年医学科山东省淄博市255036 淄博市中心医院神经内科山东省淄博市255036

背景:肌少症是衰老引起的骨骼肌质量和力量下降的一种综合性疾病,是老年人面临的主要健康挑战。越来越多的证据表明,线粒体功能障碍在肌少症的发病机制中起着关键作用。目的:总结线粒体质量控制失调导致肌少症的机制,探讨线粒体移植可... 详细信息

背景:肌少症是衰老引起的骨骼肌质量和力量下降的一种综合性疾病,是老年人面临的主要健康挑战。越来越多的证据表明,线粒体功能障碍在肌少症的发病机制中起着关键作用。目的:总结线粒体质量控制失调导致肌少症的机制,探讨线粒体移植可能是治疗肌少症的潜在靶点。方法:以“sarcopenia,mitochondrial dysfunction,mitochondrial quality control,mitochondrial transplantation,limitations”和“肌少症,线粒体功能障碍,线粒体质量控制,线粒体移植,局限性”为关键词,检索PubMed和CNKI数据库2009-2023年间相关文献。结果与结论:线粒体功能障碍在肌少症发病机制中发挥关键作用,线粒体移植可能通过改善线粒体生物能量学和调节线粒体相关信号通路成为治疗肌少症的可能策略。虽然部分临床前和临床研究证实线粒体移植治疗各种疾病的潜力,但关于线粒体转移的具体细节方面仍有一些亟待解决的问题。

关键词：肌少症线粒体功能障碍线粒体质量控制线粒体移植局限性

卡瑞利珠单抗和化疗联合阿帕替尼救治性治疗复发或晚期头颈鳞癌的疗效分析

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安徽医药 2025年第1期29卷 174-177,I0006页

作者：魏景健牛倩倩张爱侠韩琨李晓东郑浩孟箭徐州市中心医院口腔科江苏徐州221009 平邑县中医医院口腔科山东临沂273300

目的观察卡瑞利珠单抗和化疗联合阿帕替尼救治性治疗复发或晚期头颈鳞癌(HNSCC)的疗效及安全性。方法回顾性分析2020年3月至2021年11月徐州市中心医院口腔科收治的8例复发或晚期HNSCC病人,予卡瑞利珠单抗和化疗行2周期治疗后,待瘤体缩小... 详细信息

目的观察卡瑞利珠单抗和化疗联合阿帕替尼救治性治疗复发或晚期头颈鳞癌(HNSCC)的疗效及安全性。方法回顾性分析2020年3月至2021年11月徐州市中心医院口腔科收治的8例复发或晚期HNSCC病人,予卡瑞利珠单抗和化疗行2周期治疗后,待瘤体缩小,卡瑞利珠单抗和阿帕替尼维持性治疗;主要观察指标为疾病控制率(DCR)和客观缓解率(ORR),次要观察指标为总生存期(OS)、无进展生存时间(PFS)和不良反应发生率。结果纳入8例复发/晚期HNSCC病人中,ORR为62.5%(5/8),DCR为87.5%(7/8)。随访时间为1~32个月,中位OS为18个月,中位PFS未达到,不良反应发生率为100%,但程度较轻。结论卡瑞利珠单抗和化疗联合阿帕替尼治疗复发或晚期HNSCC病人具有较好的疗效,能够有效控制疾病进展,提高病人生存质量。

关键词：头颈部肿瘤癌,鳞状细胞卡瑞利珠单抗阿帕替尼免疫治疗化疗

重组慢病毒转染兔骨髓间充质干细胞与脱钙骨基质构建转基因组织工程材料

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中国组织工程研究 2025年第23期29卷 4851-4858页

作者：宁寅宽刘林志周次腊隆宇斌邵阳市中心医院血管外科湖南省邵阳市422000 邵阳市中心医院内分泌科湖南省邵阳市422000 邵阳市中心医院脊柱外科湖南省邵阳市422000

背景:缺损组织的修复重建受限于自体或异体可替代移植材料的来源问题而导致临床应用受限,转基因干细胞和组织工程材料研究开辟了新的治疗思路。目的:探究增强型绿色荧光蛋白重组慢病毒转染兔骨髓间充质干细胞在体外的生物学特性以及与... 详细信息

背景:缺损组织的修复重建受限于自体或异体可替代移植材料的来源问题而导致临床应用受限,转基因干细胞和组织工程材料研究开辟了新的治疗思路。目的:探究增强型绿色荧光蛋白重组慢病毒转染兔骨髓间充质干细胞在体外的生物学特性以及与脱钙骨基质体外构建转基因组织工程材料的生物矿化特性。方法:细胞贴壁及密度离心法获得兔骨髓间充质干细胞,增强型绿色荧光蛋白重组慢病毒以感染复数为100转染第5代兔骨髓间充质干细胞,体外观察转染细胞与未转染细胞的增殖能力、细胞表型、细胞周期以及成骨诱导后碱性磷酸酶、Runx2、骨钙素表达的差异;增强型绿色荧光蛋白重组慢病毒转染骨髓间充质干细胞与脱钙骨基质在体外构建转基因组织工程材料,对其进行扫描电镜观察及元素能谱分析。结果与结论:增强型绿色荧光蛋白重组慢病毒成功转染骨髓间充质干细胞后,在转染24,48 h细胞增殖较未转染细胞缓慢(P 0.05);增强型绿色荧光蛋白标记的骨髓间充质干细胞在脱钙骨基质支架上有较好的生物相容性,根据荧光表达强度推测目的基因在2周左右发挥最大生物学功能,且出现了钙磷矿化物沉积,体现出优越的生物矿化特性。

关键词：重组慢病毒载体增强绿色荧光蛋白骨髓间充质干细胞基因治疗生物学特性

piR-7472影响电压调控钾离子通道促进小鼠成骨细胞分化的机制

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中国组织工程研究 2025年第14期29卷 2868-2874页

作者：隆宇斌王湘斌樊基耿杨厚志杨洋李勇邵阳市中心医院脊柱外科湖南省邵阳市422000 天津医科大学研究生院天津市300070 邵阳市中心医院肿瘤内科湖南省邵阳市422000

背景:现有研究在PIWI相互作用RNA(piRNA)抗骨质疏松方面取得了重大进展,但piRNA发挥功能的具体靶点和相关机制仍有待探索。目的:探讨piR-7472对小鼠成骨细胞(MC3T3-E1细胞)分化的影响及下游机制。方法:①12只C57/BL6J小鼠随机分为假手... 详细信息

背景:现有研究在PIWI相互作用RNA(piRNA)抗骨质疏松方面取得了重大进展,但piRNA发挥功能的具体靶点和相关机制仍有待探索。目的:探讨piR-7472对小鼠成骨细胞(MC3T3-E1细胞)分化的影响及下游机制。方法:①12只C57/BL6J小鼠随机分为假手术组和卵巢切除组,每组6只,术后8周通过Micro-CT检测小鼠的骨量,RT-qPCR检测piR-7472的表达;②将MC3T3-E1细胞分为NC mimics组、piR-7472 mimics组、NC inhibitor组与piR-7472 inhibitor组,转染后成骨诱导7 d采用RT-qPCR检测piR-7472、骨桥蛋白、胶原蛋白Ⅰ、Runt相关转录因子2、钾电压门控通道调节因子亚家族F成员1 mRNA的表达;成骨诱导7 d采用Western blot检测骨桥蛋白、Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2、钾电压门控通道调节因子亚家族F成员1(KCNF1)蛋白表达;成骨诱导14 d通过碱性磷酸酶染色检测碱性磷酸酶的表达;成骨诱导21 d通过茜素红染色检测矿化结节数量;③双荧光素酶报告基因实验观察piR-7472是否能与钾电压门控通道调节因子亚家族F成员1相结合。结果与结论:①与假手术组相比,卵巢切除组小鼠骨密度、骨体积分数、骨小梁厚度、骨小梁数量明显下降,骨小梁分离度明显升高,并且骨组织中piR-7472 mRNA表达明显下调;②与NC组相比,piR-7472 mimics组骨桥蛋白、胶原蛋白Ⅰ、Runt相关转录因子2的mRNA表达明显升高,骨桥蛋白、Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2的蛋白表达明显升高,矿化沉积与碱性磷酸酶表达增多;与NC inhibitor组相比,piR-7472 inhibitor组骨桥蛋白、胶原蛋白Ⅰ、Runt相关转录因子2的mRNA表达明显降低,骨桥蛋白、Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2的蛋白表达明显降低,矿化沉积与碱性磷酸酶表达降低;③通过miRanda数据库预测发现piR-7472能与KCNF1相互作用;双荧光素酶报告基因实验发现piR-7472 mimcis能与钾电压门控通道调节因子亚家族F成员1结合并促进其表达。结果表明:piR-7472能够促进成骨前体细胞MC3T3-E1成骨分化,其发挥作用的机制可能是通过促进KCNF1表达实现的。

关键词：成骨细胞MC3T3-E1 PIWI相互作用RNA 成骨分化骨质疏松症电压调控的钾离子通道 KCNF1

体外培养时间对诱导多能干细胞源性心肌细胞成熟度的影响

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中国组织工程研究 2025年第25期29卷 5304-5310页

作者：熊挺淋张丽莎王德伟曹海平杨燕南充市中心医院心内科•川北医学院第二临床医学院四川省南充市637000 四川驰鼎盛通生物科技有限公司四川省成都市610041

背景:研究已证实诱导多能干细胞能够定向分化为心肌细胞,但目前很少有分化心肌细胞成熟度的研究报道。目的:探讨延长诱导分化时间对诱导多能干细胞源性心肌细胞的形态、肌节长度、双核细胞含量、心脏基因表达、心脏蛋白表达和线粒体功... 详细信息

背景:研究已证实诱导多能干细胞能够定向分化为心肌细胞,但目前很少有分化心肌细胞成熟度的研究报道。目的:探讨延长诱导分化时间对诱导多能干细胞源性心肌细胞的形态、肌节长度、双核细胞含量、心脏基因表达、心脏蛋白表达和线粒体功能的影响。方法:使用骨形态发生蛋白4、CHIR 99021和IWR1诱导多能干细胞向心肌细胞分化,分别在第20天和第40天收集分化心肌细胞;采用RT-PCR和免疫荧光检测分化心肌细胞中心脏基因和蛋白的表达水平;LAS X图像分析软件分析分化心肌细胞形态和肌节长度;MitoTracker Green FM线粒体染色检测线粒体总量,JC-1线粒体染色检测线粒体膜电位。结果与结论:与第20天的分化心肌细胞相比,第40天的分化心肌细胞的细胞周长和肌节长度更长、细胞面积更大(P<0.05);多核细胞比例从第20天的16%左右大幅上升至第40天的29%左右(P<0.05);第40天的分化心肌细胞具有与原代心肌细胞更相近的基因表达水平,SERCA2A、Cx-43和α-MHC基因表达水平明显高于第20天的分化心肌细胞(P<0.05);与第20天的分化心肌细胞相比,第40天的分化心肌细胞中TNNT2和α-MHC蛋白表达水平较高,线粒体分布密度更大,且功能性线粒体数量增加(P<0.05)。结果表明:延长诱导分化时间,可以通过增加肌节长度和功能性线粒体数量以及升高心脏基因和蛋白表达水平而提高分化心肌细胞的成熟度。

关键词：诱导多能干细胞分化心肌细胞线粒体心脏基因心脏蛋白成熟度

血清游离脂肪酸和心型脂肪酸结合蛋白表达与2型糖尿病病人动脉粥样硬化斑块的关系研究

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安徽医药 2025年第1期29卷 151-155页

作者：张明华安亚琴孙丽静张静歌张玲玲王丽游向东保定市第四中心医院内分泌科河北保定072350 保定市第四中心医院心内科河北保定072350

目的探讨血清游离脂肪酸(FFA)和心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)表达与2型糖尿病(T2DM)病人动脉粥样硬化斑块(CAP)的关系研究。方法选取2020年6月至2022年6月保定市第四中心医院接收的T2DM病人302例为研究对象。通过颈动脉超声检查进一步将... 详细信息

目的探讨血清游离脂肪酸(FFA)和心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)表达与2型糖尿病(T2DM)病人动脉粥样硬化斑块(CAP)的关系研究。方法选取2020年6月至2022年6月保定市第四中心医院接收的T2DM病人302例为研究对象。通过颈动脉超声检查进一步将研究对象分为CAP组(165例)和无CAP组(137例)。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清FFA、H-FABP水平;采用logistic多因素回归分析CAP发生的影响因素;采用Spearman法分析血清FFA、H-FABP水平及与临床资料的相关性分析;采用受试者操作特征曲线(ROC曲线)评价血清FFA、H-FABP及其联合对CAP发生的诊断效能。结果相较于无CAP组,CAP组年龄、高血压史、C反应蛋白(CRP)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)、载脂蛋白A(ApoA)、FFA、H-FABP[(4.63±1.43)μg/L比(3.68±1.05)μg/L]水平显著上升(P<0.05),LPa水平显著下降(P<0.05)。logistic分析显示,年龄、CRP、TG、LDL、FFA、H-FABP均是T2DM病人CAP发生的独立危险因素(P<0.05)。T2DM合并CAP病人血清FFA与H-FABP、年龄、CRP、TG、LDL水平呈正相关(rs=0.61、0.59、0.52、0.57、0.55,P<0.05)。血清H-FABP与年龄、CRP、TG、LDL水平呈正相关(rs=0.58、0.53、0.57、0.54,P<0.05)。ROC曲线结果显示血清中FFA、H-FABP水平及二者联合预测T2DM病人CAP发生的AUC分别为0.71、0.74、0.84,其中联合预测AUC显著高于二者单独预测AUC(Z=3.65、2.68,P<0.05)。结论FFA、H-FABP水平在T2DM合并CAP病人血清中升高,与年龄、CRP、TG、LDL关系密切,均有望成为T2DM病人CAP发生的诊断因子。

关键词：糖尿病,2型斑块,动脉粥样硬化游离脂肪酸心型脂肪酸结合蛋白相关性诊断

延迟增强MRI对心房颤动患者左心房心肌纤维化的评估价值

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中华放射学杂志 2018年第3期52卷 172-176页

作者：窦丽娜胡春艾孙卫红李光超侯居攀吕璐璐韩冰李先进师毅冰郝敬明徐州市中心医院影像科 221009 徐州市中心医院心内科 221009

目的探讨2D延迟增强MRI（LGE-MRI）技术对心房颤动（简称房颤）患者左心房心肌纤维化评估的临床应用价值。方法回顾性分析我院自2015年3月至2016年12月拟行射频消融术的房颤患者49例，所有患者术前均行LGE-MRI检查。由2名富有经验的... 详细信息

目的探讨2D延迟增强MRI（LGE-MRI）技术对心房颤动（简称房颤）患者左心房心肌纤维化评估的临床应用价值。方法回顾性分析我院自2015年3月至2016年12月拟行射频消融术的房颤患者49例，所有患者术前均行LGE-MRI检查。由2名富有经验的影像诊断医师对MR图像分析评估，轴位像上将左心房划分为8个象限，根据延迟强化程度及范围，将左心房纤维化分为4级。全部患者三维电解剖标测（CARTO）,左心房电解剖图像均在房颤导管消融术前复律后窦性心律下左房基质标测取得，并根据其低电压分布分级。采用Kappa检验来评估MRI延迟增强左心房心肌纤维化和CARTO系统左心房心内膜电压重建图像分级的一致性。结果 49例心房颤动患者LGE-MRI及CARTO左心房电解剖图像均成功完成。LGE-MRI左心房纤维化分级0级17例，Ⅰ级10例，Ⅱ级11例，Ⅲ级11例；CARTO心房纤维化分级0级17例，Ⅰ级9例，Ⅱ级12例，Ⅲ级11例。LGE-MRI心房纤维化诊断准确率为81.6%（40/49），与CARTO分级间一致性检验好（Kappa=0.751，P〈0.01）。结论 LGE-MRI技术能够较准确评估房颤患者左心房心肌纤维化程度，有助于临床对合适的患者行导管消融术。

关键词：心房颤动磁共振成像对比研究

五味子乙素对急性心肌梗死小鼠心肌结构和心功能的影响

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中华心血管病杂志 2017年第11期45卷 963-970页

作者：陈彭生刘佳孟浩宇武澎杨志健徐州市中心医院心内科 221009 徐州市中心医院检验科 221009 南京医科大学第二附属医院心内科

目的探讨五味子乙素对心肌梗死小鼠心肌结构和心功能的影响及其机制。方法C57BL/6J雄性小鼠56只，由南京医科大学动物中心提供。采用随机数字表法将小鼠分为3组，即假手术组（n＝8）、五味子乙素组（n＝24）和心肌梗死组（n＝24）。采... 详细信息

目的探讨五味子乙素对心肌梗死小鼠心肌结构和心功能的影响及其机制。方法C57BL/6J雄性小鼠56只，由南京医科大学动物中心提供。采用随机数字表法将小鼠分为3组，即假手术组（n＝8）、五味子乙素组（n＝24）和心肌梗死组（n＝24）。采用冠状动脉结扎术建立小鼠心肌梗死模型，假手术组只开胸不结扎。术后五味子乙素组小鼠给予五味子乙素80 mg·kg－1·d－1灌胃治疗。术后3周观察各组小鼠存活率，通过二维超声心动图检测各组小鼠心功能指标，处死小鼠计算心脏质量/体重比，通过氯化三苯基四氮唑染剂（TTC）和伊文思蓝染色计算心肌梗死面积，制作心脏病理切片并行HE及Masson染色以观察小鼠心肌炎性浸润、结构及纤维化的情况，通过免疫荧光法检测小鼠缺血心肌组织细胞凋亡情况，通过酶联免疫吸附试验检测转化生长因子－β（TGF－β）、肿瘤坏死因子－α（TNF－α）、白细胞介素1β（IL－1β）蛋白的表达水平，Western blot法检测核因子－κB （NF－κB）、B淋巴细胞瘤－2（Bcl－2）相关蛋白X（Bax）、Bcl－2、内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、磷酸化eNOS（p－eNOS）、蛋白激酶B （Akt）、磷酸化Akt（p－Akt）蛋白的表达水平。结果术后3周，假手术组小鼠存活率为100%（8/8），五味子乙素组小鼠存活率为83.33%（20/24），心肌梗死组小鼠存活率为54.17%（13/24），五味子乙素组小鼠存活率明显高于心肌梗死组（P〈0.05）。五味子乙素组小鼠左心室舒张末期内径（LVEDD）和左心室收缩末期内径（LVESD）均明显低于心肌梗死组[分别为（4.13±0.40） mm比（4.44±0.46） mm和（3.07±0.39） mm比（3.46±0.52） mm），P均〈0.05]，左心室射血分数（LVEF）和左心室短轴缩短率（LVFS）均明显高于心肌梗死组[（51.77±8.50）%比（40.23±8.30）%和（26.44±5.15）%比（19.53±4.56）%，P均〈0.05]，心脏质量/体重比值明显低于心肌梗死组[（0.59±0.06）%比（0.68±0.10）%，P〈0.05]。五味子乙素组小鼠心肌梗死面积为（23.4±2.36）%明显小于心肌梗死组的（39.4±2.06）%（P〈0.05）。HE染色结果显示心肌梗死组小鼠梗死边缘区域心肌大量炎性浸润，排列结构非常紊乱，而五味子乙素组小鼠心肌病变情况则明显轻于心肌梗死组。Masson染色结果显示，五味子乙素组心肌纤维化范围明显小于心肌梗死组、程度明显轻于心肌梗死组。心肌梗死组小鼠心肌细胞凋亡指数[（45.33±2.02）%]明显高于假手术组[（5.00±1.83）%]（P〈0.05），而五味子乙素组小鼠心肌细胞凋亡指数[（26.00±2.73）%]则明显低于心肌梗死组（P〈0.05）。五味子乙素组小鼠心肌组织抗凋亡蛋白Bcl－2明显高于心肌梗死组（P〈0.05），凋亡蛋白Bax则明显低于心肌梗死组（P〈0.05），Bcl－2/Bax比值明显高于心肌梗死组（P〈0.05）。心肌梗死组小鼠心肌组织NF－κB、TGF－β、TNF－α和IL－1β的表达水平均明显高于假手术组（P均〈0.05），而五味子乙素组上述炎症因子的表达水平均低于心肌梗死组（P均〈0.05）。假手术组、五味子乙素组、心肌梗死组小鼠心肌组织中eNos、Akt的表达差异均无统计学意义（P均〉0.05）。而五味子乙素组小鼠心肌组织p－eNOS和p－Akt的表达水平均明显高于心肌梗死组（P均〈0.05）。结论五味子乙素具有改善梗死后心肌重构及心功能的作用，而其机制可能与其抗纤维化、抗炎、抗细胞凋亡和增强修复的作用有关。

关键词：心肌梗死细胞凋亡五味子乙素

miR-192-5p靶向CKIP-1促进骨质疏松患者骨髓间充质干细胞成骨分化

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中国组织工程研究 2025年第13期29卷 2641-2647页

作者：鄂正康辛红伟于清波张允帅开封市中心医院(河南大学附属人民医院)骨六科河南省开封市475000

背景:酪蛋白激酶2结合蛋白1(casein kinase 2-interaction protein-1,CKIP-1)是一种重要的骨形成负调控基因,其敲除鼠骨质显著增强、骨形成和骨密度也显著提高。而miRNA作为较早发现的小分子调控物,对大多数编码基因具有调控作用,在成... 详细信息

背景:酪蛋白激酶2结合蛋白1(casein kinase 2-interaction protein-1,CKIP-1)是一种重要的骨形成负调控基因,其敲除鼠骨质显著增强、骨形成和骨密度也显著提高。而miRNA作为较早发现的小分子调控物,对大多数编码基因具有调控作用,在成骨分化中发挥重要作用。目的:探讨miRNA/CKIP-1对骨质疏松患者骨髓间充质干细胞成骨分化的影响及其分子机制。方法:采用miRNA-Seq技术检测2022年3-6月在开封市中心医院骨外科就诊32例骨质疏松患者及同期体检中心健康人群骨髓间充质干细胞中miRNA的变化情况;利用Targetscan网站预测靶向调控CKIP-1的miRNA,利用荧光素酶报告基因实验检测miRNA与CKIP-1启动子区DNA的结合;在骨髓间充质干细胞中转染miR-192-5p类似物(miR-192-5p mimics)/阴性对照(NC mimics)或miR-192-5p抑制剂(miR-192-5p inhibitor)/阴性对照(NC inhibitor),成骨诱导后第7,14天,通过实时荧光定量PCR技术及茜素红染色检测成骨标志基因Runt相关转录因子2(Runx2)、骨钙素、抗骨桥蛋白、骨唾液蛋白及CKIP-1的表达水平和骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的情况;采用蛋白质免疫印迹实验及茜素红染色检测miR-192-5p/CKIP-1/轴对细胞成骨分化的的调控作用。结果与结论:与健康组相比,骨质疏松组有16个miRNA表达明显升高,53个miRNA表达明显降低(P<0.05);利用Targetscan网站预测,并通过荧光素酶报告基因实验验证,发现miR-192-5p与CKIP-1有互补的核苷酸序列(P<0.05);过表达miR-192-5p,Runx2、骨钙素、骨桥素和骨唾液蛋白的表达水平显著升高(P<0.05),抑制miR-192-5p,Runx2、骨钙素、骨桥素和骨唾液蛋白的表达水平显著降低(P<0.05),而沉默CKIP-1的表达后,Runx2、骨钙素及骨桥素的蛋白水平增加(P<0.05),逆转了敲低miR-192-5p对细胞成骨分化的抑制作用。上述结果证实,miR-192-5p在骨质疏松症中表达降低;miR-192-5p通过靶向抑制CKIP-1的表达,促进骨髓间充质干细胞成骨分化。

关键词：骨质疏松微小RNA miR-192-5p 酪蛋白激酶2结合蛋白1 骨髓间充质干细胞成骨分化 Runt相关转录因子2 骨唾液蛋白