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细胞膜修饰纳米粒子治疗脑部恶性肿瘤的研究进展

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中华神经医学杂志 2024年第2期23卷 186-191页

作者：杨晶孙逸初梁飞沈自强夏铀铀徐州医科大学附属连云港医院(连云港市第一人民医院)肿瘤放疗科连云港222000 南京医科大学连云港临床医学院(连云港市第一人民医院) 连云港222000

细胞膜修饰纳米粒子(NPs)作为一种新型的治疗脑部恶性肿瘤的手段,近年来受到广泛关注。该方法通过保留源细胞膜的特性,提高了NPs的靶向性、生物相容性和体内循环时间,可确保药物高效作用于颅内病灶。本文围绕近年该领域研究进展,尤其是... 详细信息

细胞膜修饰纳米粒子(NPs)作为一种新型的治疗脑部恶性肿瘤的手段,近年来受到广泛关注。该方法通过保留源细胞膜的特性,提高了NPs的靶向性、生物相容性和体内循环时间,可确保药物高效作用于颅内病灶。本文围绕近年该领域研究进展,尤其是细胞膜修饰NPs穿透血脑屏障、免疫逃逸、药物输送的优势,以及不同细胞膜修饰NPs的效果进行综述,以期为脑部恶性肿瘤的治疗提供新的视角。

关键词：细胞膜修饰纳米载药系统脑部恶性肿瘤血脑屏障靶向治疗

FRAX对绝经后骨质疏松症患者颈动脉粥样硬化的诊断价值

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中国骨质疏松杂志 2024年第3期30卷 369-373页

作者：金雨林红晓王东岩连云港市第一人民医院(徐州医科大学附属连云港医院、南京医科大学康达学院附属医院、南京医科大学连云港临床医学院)骨质疏松科江苏连云港222000

目的探讨FRAX对绝经后骨质疏松症患者颈动脉粥样硬化的诊断价值。方法选取201例在2019年2月至2023年7月于连云港市第一人民医院住院治疗的绝经后骨质疏松症患者,对受试者进行信息采集、血液检验、颈动脉超声和双能X线骨密度检查,将患者... 详细信息

目的探讨FRAX对绝经后骨质疏松症患者颈动脉粥样硬化的诊断价值。方法选取201例在2019年2月至2023年7月于连云港市第一人民医院住院治疗的绝经后骨质疏松症患者,对受试者进行信息采集、血液检验、颈动脉超声和双能X线骨密度检查,将患者分为颈动脉粥样硬化组(n=125)和非颈动脉粥样硬化组(n=76),采用FRAX计算未来十年内主要部位骨折风险(PMOF)和髋部骨折风险(PHF)。结果颈动脉粥样硬化组的年龄和收缩压较非颈动脉粥样硬化组更高(P0.05)。颈动脉粥样硬化组髋部和股骨颈骨密度较非颈动脉粥样硬化组显著降低(P<0.05),PMOF和PHF显著升高(P<0.05)。回归分析显示髋部和股骨颈骨密度与颈动脉粥样硬化呈负相关(P<0.05),PMOF和PHF与颈动脉粥样硬化呈正相关(P<0.05)。调整混杂因素后,上述差异仍有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析发现PHF对颈动脉粥样硬化的诊断价值最高,曲线下面积为0.775,PMOF诊断颈动脉粥样硬化的曲线下面积为0.773。结论在绝经后骨质疏松症患者中,髋部和股骨颈骨密度与颈动脉粥样硬化呈负相关,PMOF和PHF与颈动脉粥样硬化呈正相关,FRAX对颈动脉粥样硬化具有良好的诊断价值。

关键词： FRAX 颈动脉粥样硬化骨质疏松症

C57BL/6J小鼠背景的CD19嵌合抗原受体T细胞的制备及优化

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中国实验血液学杂志 2024年第2期32卷 595-602页

作者：任春晓赵莉陈娴娴田宇赵恺徐州医科大学血液病研究所江苏省骨髓干细胞重点实验室徐州医科大学附属医院血液科江苏徐州221000

目的:探索C57BL/6J小鼠CD3^(+)T细胞体外刺激条件、最佳培养和感染时间,以期提高CD19嵌合抗原受体T细胞(m CD19 CAR-T)的感染效率。方法:将纯化的C57BL/6J小鼠CD3^(+)T细胞在包被CD3/CD28抗体(anti-CD3/CD28 coated)、包被CD3抗体+可溶... 详细信息

目的:探索C57BL/6J小鼠CD3^(+)T细胞体外刺激条件、最佳培养和感染时间,以期提高CD19嵌合抗原受体T细胞(m CD19 CAR-T)的感染效率。方法:将纯化的C57BL/6J小鼠CD3^(+)T细胞在包被CD3/CD28抗体(anti-CD3/CD28 coated)、包被CD3抗体+可溶性CD28抗体(anti-CD3 coated+soluble anti-CD28)和包被CD3抗体(anti-CD3 coated)3种不同条件下分别刺激12 h和24 h,后续培养24 h、48 h和72 h并记录细胞克隆数。在上述3种条件下分别刺激C57BL/6J小鼠CD3^(+)T细胞12、24和36 h,然后加入白介素(IL)-2(100 U/ml),镜下记录培养24 h、48 h和72 h的细胞克隆数;此条件下取刺激24 h的CD3^(+)T细胞,感染m CD19 CAR-T逆转录病毒,制备m CD19 CAR-T细胞,流式检测48 h时3组中GFP+CAR-T细胞的百分率。结果:利用获得BALB/c小鼠m CD19 CAR-T细胞的最优化条件,制备C57BL/6J小鼠的m CD19 CAR-T细胞感染效率仅5.23%;anti-CD3^(+)soluble anti-CD28 coated刺激C57BL/6J小鼠CD3^(+)T细胞24 h,终止刺激继续培养至48 h时细胞克隆数最高;在上述条件刺激24 h后加入IL-2培养48 h,anti-CD3^(+)soluble anti-CD28 coated组T细胞增殖克隆数量显著增加,且CAR-T细胞感染效率为17.63%±4.17%。结论:C57BL/6J小鼠来源T细胞制备CAR-T细胞的最佳条件与BABL/c小鼠不同;anti-CD3^(+)soluble anti-CD28 coated+IL-2刺激条件下诱导的T细胞感染逆转录病毒后可获得最高效率的m CD19 CAR-T细胞。

关键词： C57BL/6J小鼠 CD19 嵌合抗原受体T细胞

基于BCMA突变体构建BCMA CAR-T细胞体外杀伤功能评价模型

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中国肿瘤生物治疗杂志 2024年第5期31卷 493-500页

作者：张小雪华静涵侯睿刘丹施明曹江徐州医科大学第一临床医学院江苏徐州221000 徐州医科大学药学院江苏徐州221000 徐州医科大学江苏省肿瘤生物治疗研究所江苏徐州221000 徐州医科大学附属医院血液科江苏徐州221000

目的:为解决野生型B细胞成熟抗原(BCMA)被γ分泌酶切割导致表达不稳定的问题,构建抵抗γ分泌酶切割的BCMA突变体并构建靶细胞,用于评价BCMA CAR-T细胞的杀伤功能。方法:将野生型BCMA的穿膜域替换为人CD8α穿膜域,构建抵抗γ分泌酶切割的... 详细信息

目的:为解决野生型B细胞成熟抗原(BCMA)被γ分泌酶切割导致表达不稳定的问题,构建抵抗γ分泌酶切割的BCMA突变体并构建靶细胞,用于评价BCMA CAR-T细胞的杀伤功能。方法:将野生型BCMA的穿膜域替换为人CD8α穿膜域,构建抵抗γ分泌酶切割的BCMA突变体(BCMA-CD8αTM),构建过表达该突变体的U266(U266^(BCMA Mut))、K562(K562^(BCMA Mut))、SKOV3(SKOV3^(BCMA Mut))和CHO(CHO^(BCMA Mut))细胞;构建装载NFAT-EGFP报告基因的BCMA CAR Jurkat细胞(BCMA-CAR-Jurkat-Reporter)与U266^(BCMA Mut)细胞共培养,采用FCM检测该细胞中EGFP表达水平以指示NFAT激活水平,荧光素酶法检测BCMA CAR-T细胞对Luciferase标记的K562^(BCMA Mut)细胞的杀伤作用,实时无标记动态细胞分析技术(RTCA)检测BCMA CAR-T细胞对SKOV3^(BCMA Mut)和CHO^(BCMA Mut)细胞的杀伤作用。结果:应用γ分泌酶抑制剂LY411575抑制γ分泌酶活性,显著增强野生型U266细胞表面BCMA表达水平,平均荧光强度上调10倍以上;但撤除抑制剂后BCMA表达水平逐渐降低(P0.05);U266细胞及过表达BCMA-CD8αTM的U266细胞与BCMA-CAR-Jurkat-Reporter细胞共培养后都可激活Reporter系统、增强EGFP表达,但该效应在BCMA-CD8αTM过表达的U266细胞中更显著(P<0.01);BCMA-CD8αTM在BCMA表达阴性的K562、SKOV3和CHO 3种靶细胞中成功过表达,且在LY411575处理下该突变体的表达水平仅有小幅度升高;荧光素酶法检测结果显示,不同效靶比下,BCMA CAR-T细胞均可特异、高效杀伤过表达BCMA-CD8αTM的K562细胞;RTCA结果显示,不同效靶比下,BCMA CAR-T细胞均可有效识别、杀伤过表达BCMACD8αTM的SKOV3和CHO细胞,但同等效靶比下的Mock-T细胞无此效应。结论:本实验构建的BCMA-CD8αTM突变体能够抵抗γ分泌酶的切割,在多种靶细胞表面稳定表达,为评价BCMA CAR-T细胞体外杀伤的有效性和特异性提供多种检测手段。

关键词： B细胞成熟抗原 γ分泌酶 CD8α穿膜域 CAR-T细胞杀伤功能评价

外泌体递送角蛋白8小干扰RNA调控下咽癌细胞对5-FU敏感性研究

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中国耳鼻咽喉头颈外科 2024年第4期31卷 219-225页

作者：罗飘林秋红韩加辉李利王金鑫肖祥张书嘉董春光徐州医科大学附属连云港医院耳鼻咽喉头颈外科江苏连云港222000

目的探究下咽癌患者血清源性外泌体中角蛋白8(KRT8)小干扰RNA(si-KRT8)对人咽鳞状细胞癌FaDu细胞株5-氟脲嘧啶(5-FU)化疗敏感性的影响和作用机制。方法收集下咽癌患者肿瘤组织以及治疗后耐药患者的血清、肿瘤组织以及癌旁组织。构建FaDu... 详细信息

目的探究下咽癌患者血清源性外泌体中角蛋白8(KRT8)小干扰RNA(si-KRT8)对人咽鳞状细胞癌FaDu细胞株5-氟脲嘧啶(5-FU)化疗敏感性的影响和作用机制。方法收集下咽癌患者肿瘤组织以及治疗后耐药患者的血清、肿瘤组织以及癌旁组织。构建FaDu的5-FU耐药细胞株(FaDu/R)用于后续实验。超速梯度离心法分离患者血清中的外泌体并利用透射电镜及蛋白质免疫印迹(Western blot,WB)技术进行鉴定,利用电转染技术将si-KRT8封装至外泌体(Exosome@si-KRT8)中,后续用于处理细胞。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)及WB方法检测KRT8分别在不同组织、电转染后外泌体及不同处理条件下FaDu细胞中的表达水平。CCK-8、原位末端转移酶标记技术及迁移侵袭技术和WB检测Exosome@si-KRT8对FaDu/R细胞活力、凋亡及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。结果下咽癌耐药组织及FaDu/R细胞中的KRT8表达水平相较于癌旁组织和肿瘤组织以及正常FaDu细胞均升高(t=15.79,P<0.01)。分离的患者血清外泌体呈现双层膜结构,且CD63和TSG101蛋白均表达,电转染si-KRT8后,外泌体中KRT8表达量下降(t=6.70,P<0.01)。Exosome@si-KRT8能够抑制FaDu/R细胞中KRT8的蛋白表达水平(t=123.50,P<0.01)。与5-FU组及5-FU+Exosome组相比,Exosome@si-KRT8能够抑制FaDu/R细胞的活力(t=17.07,P<0.01),促进其凋亡水平,并且抑制FaDu/R细胞耐药相关蛋白的表达(t P-gp=103.20,t MDR1=238.60,P<0.01)。此外,Exosome@si-KRT8还能抑制FaDu/R细胞的迁移侵袭能力(t=42.30,t=122.00,P<0.01),并在促进E-cadherin的表达同时抑制N-cadherin的表达水平(t=130.80,t=83.90,P<0.01)。结论下咽癌患者血清来源的外泌体封装si-KRT8能够增强下咽癌细胞的化疗敏感性,且其作用机制可能与抑制细胞上皮间质转化有关。

关键词：下咽肿瘤角蛋白8 化疗敏感性外泌体上皮间质转化

冠脉周围脂肪组织与疑诊冠状动脉狭窄所致心肌缺血的相关性研究

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中国医学计算机成像杂志 2024年第2期30卷 168-173页

作者：郭艳李智勇朱远代岳王淑芹徐州医科大学附属医院影像科徐州221004 徐州医科大学附属医院核医学科徐州221004

目的:探讨冠状动脉周围脂肪衰减指数(FAI)及心包外脂肪体积(EATV)与心肌缺血的相关性。方法:回顾性收集就诊于徐州医科大学附属医院的130例15天内行冠状动脉CT血管成像(CCTA)和心肌灌注显像(MPI)检查的患者,且CCTA提示至少一根血管存在... 详细信息

目的:探讨冠状动脉周围脂肪衰减指数(FAI)及心包外脂肪体积(EATV)与心肌缺血的相关性。方法:回顾性收集就诊于徐州医科大学附属医院的130例15天内行冠状动脉CT血管成像(CCTA)和心肌灌注显像(MPI)检查的患者,且CCTA提示至少一根血管存在狭窄。根据总积分差值(SDS)是否大于2分为心肌缺血组和非心肌缺血组,结合MPI结果及CCTA图像判断可能引起心肌缺血的主要责任血管,在CCTA图像上测量和计算FAI、EATV、Gensini积分及斑块长度,同时收集入组患者的基本资料[年龄、性别、体重指数(BMI)、高血脂、高血压],并进行两组间数据比较。采用单因素logistic回归分析心肌缺血和患者基本资料、EFAI、EATV、Gensini积分及斑块长度等指标的关系,并对存在显著性差异的指标行多因素回归分析。利用受试者工作特征(ROC)曲线比较不同指标预测心肌缺血的效能。结果:两组间患者性别、年龄、高血脂、高血压、FAI、EATV、Gensini积分及斑块长度等指标存在统计学差异。心肌缺血组的FAI、EATV、Gensini积分、斑块长度高于非心肌缺血组[-(69.01±11.59)HU vs-(83.38.49±8.11)HU,127.51(109.87,145.46)cm^(3)vs 108.34(99.92,116.9)cm^(3),16(10,25)分vs 9(5,13)分,18(12,30)mm vs 10.33(8.00,14.50)mm;均P<0.001]。FAI预测心肌缺血的价值高于EATV(AUC分别为0.892和0.837),FAI和EATV两指标联合对心肌缺血的预测效能进一步提高,且具有显著性差异(AUC=0.919,P<0.001)。结论:FAI、EATV对预测心肌缺血均具有一定的价值,FAI对心肌缺血的预测效能高于EATV,且两指标联合可进一步提高心肌缺血的预测效能。

关键词：心肌缺血冠状动脉脂肪衰减指数心包外脂肪体积

颈动脉斑块MRI特征与同侧急性脑梗死患者DWIGASPECTS的相关性研究

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放射学实践 2024年第1期39卷 49-54页

作者：王贝茹余苗徐彤彤李均彪胡春峰徐州医科大学附属医院影像科江苏221000 徐州医科大学附属医院介入科江苏221000

目的:探讨颈动脉斑块MRI特征与同侧急性脑梗死患者DWI-ASPECTS的相关性。方法:回顾性搜集我院85例颈动脉斑块患者的临床及影像资料,所有患者均于出现脑血管症状2周内行颈动脉高分辨率MRI和常规颅脑MRI平扫。将患者分为DWI-ASPECTS≤7分... 详细信息

目的:探讨颈动脉斑块MRI特征与同侧急性脑梗死患者DWI-ASPECTS的相关性。方法:回顾性搜集我院85例颈动脉斑块患者的临床及影像资料,所有患者均于出现脑血管症状2周内行颈动脉高分辨率MRI和常规颅脑MRI平扫。将患者分为DWI-ASPECTS≤7分组和DWI-ASPECTS>7分组,比较两组间临床、实验室资料和颈动脉斑块定量、定性指标的差异。通过Logistic回归筛选DWI-ASPECTS评分的预测因子。结果:25例(29.4%)DWI-ASPECTS≤7分,60例(70.6%)DWI-ASPECTS>7分。DWI-ASPECTS≤7分组患者纤维帽变薄/破裂(分别为80.0%和35.0%,P7分组;此外,DWI-ASPECTS≤7分组患者显示出更高的斑块负荷,DWI-ASPECTS≤7分组与DWI-ASPECTS>7分组的最大管壁厚度[分别为(4.38±1.68)和(3.47±1.78)mm,P=0.033]、平均管腔面积[分别为(15.33±11.57)和(22.88±13.95)mm 2,P=0.019]、最小管腔面积[分别为(11.52±11.23)和(18.98±13.52)mm 2,P=0.017]、平均管壁面积[分别为(62.81±14.32)、(55.66±14.93)mm 2,P=0.045]、最大管壁面积[分别为(66.70±14.57)、(59.56±15.19)mm 2,P=0.049]、平均标准化管壁面指数[分别为(81±14)%、(71±16)%,P=0.011]、最大标准化管壁指数[分别为(86±14)%、(76±16)%,P=0.012)]差异均有统计学意义。DWI-ASPECTS≤7分组中NIHSS评分>4分的患者比例更高(分别为48%和23.3%,P=0.025),高密度脂蛋白浓度更低[分别为(1.24±0.28)、(1.10±0.28)mmol/L,P=0.043]。Logistic回归分析结果显示,纤维帽变薄/破裂(OR=4.133,95%CI:1.151~14.836,P=0.030)和斑块内出血(OR=6.409,95%CI:1.737~23.646,P=0.005)与较低的DWI-ASPECTS评分显著相关。结论:颈动脉斑块中存在纤维帽变薄/破裂和斑块内出血的急性脑卒中患者DWI-ASPECTS评分更低,有助于评估患者的病情严重程度。

关键词：颈动脉斑块磁共振成像 DWI-ASPECTS评分急性脑梗死

基于可穿戴式步行引导仪的可视化步行训练对帕金森病冻结步态患者步行能力的影响

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中国康复医学杂志 2024年第1期39卷 45-52页

作者：韩允史媛媛宋文静崔桂云高修明项洁徐州医科大学第二临床医学院江苏省徐州市221004 徐州医科大学附属医院康复科

目的:探讨基于可穿戴式步行引导仪的可视化步行训练对帕金森病冻结步态患者步行能力的影响。方法:选取23例帕金森病冻结步态患者为试验组,同时选取20例性别、年龄等匹配的健康者为对照组。试验组给予利用可穿戴式步行引导仪的可视化步... 详细信息

目的:探讨基于可穿戴式步行引导仪的可视化步行训练对帕金森病冻结步态患者步行能力的影响。方法:选取23例帕金森病冻结步态患者为试验组,同时选取20例性别、年龄等匹配的健康者为对照组。试验组给予利用可穿戴式步行引导仪的可视化步行训练,20min/次,2次/日,训练1周。利用Vicon三维步态分析系统收集试验组训练前后和对照组时空参数、非优势侧及优势侧运动学参数、非优势侧及优势侧地面反作用力参数(包括前-后侧峰值、内-外侧峰值及纵向第一峰值)。结果:(1)训练后,试验组患者步速及双侧步长均明显增加,步频、双支撑期明显减小,与训练前相比,差异均有显著性意义(P0.05)。(2)训练后,试验组患者双侧髋关节着地角度、踝背屈及跖屈最大角度及下肢关节活动范围均明显增加,膝关节着地角度减小,踝关节第一峰值出现的阶段延迟,与训练前相比,差异均有显著性意义(P0.05)。(3)干预后,试验组患者双侧地面反作用力前-后侧峰值及纵向第一峰值明显提高,地面反作用力内-外侧峰值明显下降,差异均有显著性意义(P0.05)。结论:基于可穿戴式步行引导仪的可视化步行训练可有效提高帕金森病冻结步态患者步行平衡稳定性及步伐连贯性。

关键词：帕金森病冻结步态可穿戴式步行引导仪三维步态分析地面反作用力

米力农控制性低中心静脉压对腹腔镜肝切除术患者术中脑血流的影响

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中华麻醉学杂志 2024年第5期44卷 553-557页

作者：董育硕崔佳丽高巨张婷婷李琳葛亚丽扬州大学附属苏北人民医院麻醉科扬州225001 徐州医科大学扬州临床学院扬州225001

目的评价米力农控制性低中心静脉压(CLCVP)对腹腔镜肝切除术患者术中脑血流的影响。方法择期行腹腔镜肝切除术患者80例,性别不限,BMI 18~30 kg/m^(2),年龄18~64岁,ASA分级Ⅰ-Ⅲ级,采用随机数字表法分为2组(n=40):硝酸甘油组(X组)和米力... 详细信息

目的评价米力农控制性低中心静脉压(CLCVP)对腹腔镜肝切除术患者术中脑血流的影响。方法择期行腹腔镜肝切除术患者80例,性别不限,BMI 18~30 kg/m^(2),年龄18~64岁,ASA分级Ⅰ-Ⅲ级,采用随机数字表法分为2组(n=40):硝酸甘油组(X组)和米力农组(M组)。手术开始后M组持续静脉泵注米力农0.5μg·kg^(-1)·min^(-1),X组持续静脉泵注硝酸甘油0.5~1.5μg·kg^(-1)·min^(-1),维持CVP0.05)。结论相对于硝酸甘油CLCVP而言,米力农CLCVP可在一定程度上改善腹腔镜肝切除术患者术中脑血流降低。

关键词：米力农降压,控制性中心静脉压肝切除术脑血管循环