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PAD4-siRNA调控T细胞亚群缓解CIA小鼠的疾病进展

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安徽医科大学学报 2025年第2期60卷 272-278页

作者：芦彦蓉赵凯庞春艳包头医学院第一附属医院中心实验室包头014010 包头医学院第一附属医院风湿免疫科包头014010

目的探讨肽基精氨酸脱亚氨酶4(PAD4)的小干扰RNA(siRNA)载体病毒和感染PAD4-siRNA病毒的小鼠脾细胞对胶原诱导关节炎(CIA)小鼠治疗效果和潜在作用机制。方法实验分对照组、模型组、治疗1组、治疗2组,每组7只小鼠。对照组小鼠不做任何处... 详细信息

目的探讨肽基精氨酸脱亚氨酶4(PAD4)的小干扰RNA(siRNA)载体病毒和感染PAD4-siRNA病毒的小鼠脾细胞对胶原诱导关节炎(CIA)小鼠治疗效果和潜在作用机制。方法实验分对照组、模型组、治疗1组、治疗2组,每组7只小鼠。对照组小鼠不做任何处理,其余3组小鼠构建CIA模型,模型组小鼠注射磷酸盐缓冲液(PBS),治疗1组的小鼠注射PAD4-siRNA病毒载体;治疗2组的小鼠注射含有PAD4-siRNA病毒载体的小鼠脾细胞,每周1次,共8周。实验结束后处死小鼠,检测小鼠脾脏中滤泡辅助T(Tfh)细胞、滤泡调节T(Tfr)细胞、1型辅助T(Th1)细胞和CD4^(+)IL-10^(+)T细胞的变化;观察CIA小鼠关节和软骨的病理变化。结果与对照组比较,模型组小鼠的脾脏Tfh和Th1细胞的比例增加(P<0.05),Tfr和CD4^(+)IL-10^(+)T细胞比例无明显变化;与模型组比较,Tfh和Th1细胞在治疗1组和治疗2组的比例下降(P<0.05),Tfr和CD4^(+)IL-10^(+)T细胞的比例无明显变化。对照组小鼠关节面光滑,模型组小鼠关节有炎性细胞浸润、关节面粗糙、软骨受损的现象;PAD4-siRNA作用后,治疗1组CIA小鼠后爪的关节炎细胞浸润减少、软骨破坏程度降低;治疗2组CIA小鼠前爪和后爪的炎细胞浸润现象有所减轻,软骨损伤程度也得到了缓解。结论抑制PAD4基因的表达后,CIA小鼠脾脏Tfh和Th1细胞的相对数量下降,小鼠后爪的关节和软骨损伤得到缓解;注射感染PAD4-siRNA病毒的小鼠脾细胞,可缓解CIA小鼠前爪的病理变化。PAD4-siRNA可以通过调控小鼠脾脏T细胞亚群对CIA小鼠发挥潜在治疗价值。

关键词：类风湿关节炎肽基精氨酸脱亚氨酶4 小干扰RNA 1型辅助T细胞滤泡辅助T细胞胶原诱导关节炎小鼠

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多肽水凝胶在药物缓释或控释中的应用研究进展

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中华口腔医学杂志 2025年第1期60卷 94-100页

作者：方雪榕邹慧儒天津市口腔医院中心实验室南开大学医学院天津市口腔功能重建重点实验室天津300041

多肽水凝胶凭借其良好的生物相容性、可降解性以及较低的细胞毒性,近年在生物医学领域备受关注;其能模拟细胞外基质微环境,有效包封药物并实现药物的缓释或控释,进而促进组织再生。本文介绍多肽水凝胶在药物缓释或控释中的应用研究进展... 详细信息

多肽水凝胶凭借其良好的生物相容性、可降解性以及较低的细胞毒性,近年在生物医学领域备受关注;其能模拟细胞外基质微环境,有效包封药物并实现药物的缓释或控释,进而促进组织再生。本文介绍多肽水凝胶在药物缓释或控释中的应用研究进展,全面梳理多肽的选择与设计原则、多肽浓度的优化策略以及水凝胶的构建技术等方面研究热点,阐述多肽水凝胶实现药物缓释或控释的原理与机制,总结适用于不同缓释或控释体系的检测手段,并对多肽水凝胶在药物递送领域的未来发展前景进行展望,以期为后续深入研究提供参考。

关键词：水凝胶类肽类药物释放系统多肽水凝胶缓释控释

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TAM在胃癌发生发展及耐药中的研究进展

中国比较医学杂志 2025年

作者：蔡秋玲杨靖沈慧玲许文林江苏大学附属第四人民医院中心实验室江苏大学医学院

肿瘤相关巨噬细胞（tumor-associated macrophages，TAM）作为近几年肿瘤微环境研究中的热点之一。为实现其功能上的不同作用，巨噬细胞经历了一系列表型的极化，通常存在两个不同的亚群，M1型巨噬细胞具有促炎和杀肿瘤作用，而M2型巨... 详细信息

肿瘤相关巨噬细胞（tumor-associated macrophages，TAM）作为近几年肿瘤微环境研究中的热点之一。为实现其功能上的不同作用，巨噬细胞经历了一系列表型的极化，通常存在两个不同的亚群，M1型巨噬细胞具有促炎和杀肿瘤作用，而M2型巨噬细胞具有抗炎和促肿瘤作用。其中，TAM主要表现出的M2极化已被发现与多种癌症的不良预后相关，并表现出对多种恶性肿瘤的支持特性。胃癌患者早诊率低，疾病分期晚，预后也较差，具有易于复发转移的生物学行为特点。目前药物的耐药性和毒副作用极大限制了胃癌治疗的应用和疗效，因而寻找新的治疗靶点或药物至关重要。本文总结了肿瘤相关巨噬细胞在胃癌发生、发展及耐药过程中所取得的研究进展，为胃癌患者的临床治疗和预后分析提供新的见解。

关键词：肿瘤相关巨噬细胞 M2型巨噬细胞胃癌预后耐药

单细胞转录组测序技术在牙齿发育研究中的应用与进展

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中华口腔医学杂志 2025年第1期60卷 75-80页

作者：蒋楠朱旭彤刘燕北京大学口腔医学院·口腔医院中心实验室国家口腔医学中心国家口腔疾病临床医学研究中心口腔生物材料和数字诊疗装备国家工程研究中心口腔数字医学北京市重点实验室北京100081

牙齿发育是一个由来源于外胚层的上皮和颅神经嵴细胞衍生的间充质在时空上有序、精准互作的复杂过程。这一过程不仅依赖于细胞自身基因调控,还涉及细胞与周围环境不同类型细胞的密切相互作用。然而即使在同一类型的细胞群体中,也可能呈... 详细信息

牙齿发育是一个由来源于外胚层的上皮和颅神经嵴细胞衍生的间充质在时空上有序、精准互作的复杂过程。这一过程不仅依赖于细胞自身基因调控,还涉及细胞与周围环境不同类型细胞的密切相互作用。然而即使在同一类型的细胞群体中,也可能呈现出显著的细胞异质性。单细胞转录组测序是针对分离的单个细胞转录组进行测序的新技术。转录组是连接基因组遗传信息与生物功能蛋白质组的必然纽带,对转录组的解析扩展到单细胞水平,有利于对细胞异质性、器官发育轨迹的理解,为阐明复杂生物学过程并发现潜在治疗靶点提供有力的工具。本综述主要讨论单细胞转录组测序技术在牙齿发育过程中的最新进展,为牙齿修复与再生研究提供新的见解和帮助。

关键词：基因组学牙发育单细胞测序转录组细胞亚群标志基因

NPM3在肺腺癌中的表达及其对肺腺癌细胞生物学功能的影响

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华中科技大学学报(医学版) 2025年第1期54卷 36-44页

作者：王韵舒扬武晓白郭若楠黄汉鹏向敏江苏大学附属医院呼吸与危重症医学科镇江212001 江苏大学附属医院中心实验室镇江212001 江苏大学附属医院检验科镇江212001

目的探究Nucleophosmin3(NPM3)在肺腺癌中的表达情况及其对肺腺癌细胞系H292生物学功能的影响,为肺腺癌的诊疗提供新的思路。方法首先利用生物信息学数据库TCGA分析NPM3基因在肺腺癌和正常组织中的表达差异及其与肺腺癌患者临床病理特... 详细信息

目的探究Nucleophosmin3(NPM3)在肺腺癌中的表达情况及其对肺腺癌细胞系H292生物学功能的影响,为肺腺癌的诊疗提供新的思路。方法首先利用生物信息学数据库TCGA分析NPM3基因在肺腺癌和正常组织中的表达差异及其与肺腺癌患者临床病理特征和预后的相关性;通过基因干扰技术构建敲低NPM3的细胞模型(si-NPM3-H292),运用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹技术(Westernblot)检测干扰效率;通过CCK-8及平板克隆实验检测敲低NPM3对肺腺癌细胞增殖能力的改变;运用划痕实验和Transwell实验检测敲低NPM3对H292细胞迁移能力的影响;运用qRT-PCR法和Westernblot检测与上皮间质转化(EMT)相关指标的mRNA及蛋白表达情况;通过Westernblot检测PI3K/Akt信号通路相关蛋白的表达水平。结果TCGA数据库分析结果显示,NPM3在肺腺癌中高表达且与肺腺癌患者临床病理分型密切相关,高表达NPM3的肺腺癌患者的生存预后显著差于低表达NPM3的患者(P<0.05)。成功构建敲低NPM3的细胞模型;敲低NPM3的表达降低了H292细胞的增殖和迁移能力(均P<0.05);与对照组比较,si-NPM3-H292细胞中E-cadherin的mRNA及蛋白表达水平均上调,N-cadherin的mRNA及蛋白表达水平均下调(均P<0.05);与对照组比较,si-NPM3-H292细胞中Akt及PI3K的蛋白表达水平无明显变化,但其磷酸化水平降低,而PTEN的蛋白表达水平有所上升(均P<0.05)。结论NPM3在肺腺癌中高表达且与患者不良预后相关,NPM3可能通过调控PI3K/Akt信号通路发挥对肺腺癌细胞增殖与迁移的促进作用。

关键词： NPM3 肺腺癌上皮间质转化细胞增殖细胞迁移

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CCDC114双等位基因变异所致Kartagener综合征伴梗阻性无精子症1例患者的临床及遗传学分析

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中华男科学杂志 2025年第02期 108-114页

作者：蔡美娇辛美姣王宇林厦门大学附属妇女儿童医院/厦门市妇幼保健院中心实验室厦门医学院/基础医学院机能与临床转化福建省高校重点实验室厦门医学院/基础医学院/厦门医学院-模基生科类器官技术转化运用研究联合实验室

目的:探讨1例Kartagener综合征伴梗阻性无精子症患者的临床特点与遗传学病因。方法:选取1例就诊于厦门大学附属妇女儿童医院的男性不育症患者作为研究对象，收集其临床资料与检查结果。采用高通量测序以及生物信息学等方法分析其遗传学... 详细信息

目的:探讨1例Kartagener综合征伴梗阻性无精子症患者的临床特点与遗传学病因。方法:选取1例就诊于厦门大学附属妇女儿童医院的男性不育症患者作为研究对象，收集其临床资料与检查结果。采用高通量测序以及生物信息学等方法分析其遗传学病因，使用Sanger测序对其家系进行验证。同时使用免疫组化及免疫荧光等分析CCDC114蛋白在正常人中的表达情况。结果:患者存在Kartagener综合征伴梗阻性无精子症，测序发现其CCDC114双等位基因变异(c.71-2A>C,c.816＿817insGCAG),分别遗传自其父亲、母亲。根据美国医学遗传学与基因组学学会(ACMG)相关指南，患者的变异为致病性变异。最终患者配偶通过卵细胞胞质内单精子注射(ICSI)助孕获得2名后代。结论:上述发现拓宽了CCDC114基因的变异谱，为Kartagener综合征患者的遗传及辅助生殖咨询提供了新思路。CCDC114基因变异不影响ICSI助孕的结局。

关键词： CCDC114 男性不育 Kartagener综合征梗阻性无精子症基因变异

紫花前胡苷通过抑制肠上皮细胞焦亡改善TNBS诱导的小鼠实验性结肠炎

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南方医科大学学报 2025年

作者：黄菊殷丽霞牛民主耿志军左芦根李静胡建国蚌埠医科大学第一附属医院中心实验室蚌埠医科大学第一附属医院炎症相关性疾病基础与转化研究安徽省重点实验室蚌埠医科大学第一附属医院检验科蚌埠医科大学检验医学院免疫学教研室蚌埠医科大学第一附属医院胃肠外科

目的探讨天然植物单体紫花前胡苷（Nod）对克罗恩病（CD）样结肠炎的影响及其作用机制。方法建立脂多糖和三磷酸腺苷（ATP）联合诱导的结肠类器官焦亡模型，通过检测焦亡关键调节因子、通透性和促炎因子，探讨Nod对细胞焦亡、肠道屏... 详细信息

目的探讨天然植物单体紫花前胡苷（Nod）对克罗恩病（CD）样结肠炎的影响及其作用机制。方法建立脂多糖和三磷酸腺苷（ATP）联合诱导的结肠类器官焦亡模型，通过检测焦亡关键调节因子、通透性和促炎因子，探讨Nod对细胞焦亡、肠道屏障功能和炎症反应的影响。以2,4,6-三硝基苯磺酸（TNBS）干预小鼠为CD动物模型，通过检测体质量、DAI评分、组织病理学分析、炎症评分、肠屏障功能和肠上皮细胞焦亡，探讨Nod对CD样结肠炎的治疗效果。通过网络药理学和体内、体外实验验证，探索Nod保护肠上皮细胞焦亡的潜在机制。结果脂多糖和ATP诱导的结肠类器官经Nod干预后显著抑制NLRP3、GSDMD-N、Cleaved-caspase-1和Caspase-11的表达，改善肠道FITC-dextran(FD4,4000)通透性，以及降低IL-1β和IL-18的水平（P实验证实，Nod抑制PI3K/Akt通路的激活，且PI3K/Akt通路的激活剂（IGF-1）逆转了Nod对肠上皮细胞焦亡和肠屏障功能的保护作用（P<0.05）。结论 Nod至少部分通过抑制PI3K/Akt信号传导拮抗肠上皮细胞的焦亡，从而保护肠屏障功能和改善CD样结肠炎，有望成为一种新的CD治疗药物。

关键词：克罗恩病紫花前胡苷细胞焦亡肠上皮细胞 PI3K/Akt

夜间光污染抑制褪黑素分泌影响发育期颌骨糖代谢的实验研究

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中华口腔医学杂志 2025年第2期60卷 140-150页

作者：唐清明尹盈陈莉莉华中科技大学同济医学院附属协和医院口腔医学中心华中科技大学同济医学院口腔医学院口腔颌面发育与再生湖北省重点实验室武汉430022 中山大学附属口腔医院正畸科·中山大学光华口腔医学院·广东省口腔医学重点实验室广州51005

目的探究夜间光污染对小鼠下颌骨生长的影响及其调控机制。方法通过控制光照时间模式差异, 构建夜间光污染(夜间光污染组)和正常光照(正常光照组)的小鼠动物模型, 每组4只。采用显微CT分析两组小鼠下颌骨骨量差异, 使用实时荧光定量PCR(... 详细信息

目的探究夜间光污染对小鼠下颌骨生长的影响及其调控机制。方法通过控制光照时间模式差异, 构建夜间光污染(夜间光污染组)和正常光照(正常光照组)的小鼠动物模型, 每组4只。采用显微CT分析两组小鼠下颌骨骨量差异, 使用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测小鼠下颌骨骨皮质和髁突成骨中心的成骨分化、代谢相关基因的表达水平差异。通过酶联免疫吸附测定法检测两组小鼠血清褪黑素浓度的昼夜差异。夜间光污染补充褪黑素组小鼠通过每天定时定量注射褪黑素恢复血清褪黑素浓度的昼夜差异, 正常光照组和夜间光污染组注射相同体积的生理盐水, 分别检测3组小鼠下颌骨骨量、下颌骨组织形态、髁突成骨中心和骨皮质的成骨分化、糖代谢表达的差异。结果夜间光污染组小鼠下颌骨骨皮质厚度[(0.196±0.017)mm]、下颌骨髁突成骨中心骨体积分数[(36.90±1.09)%]及下颌骨长度[(10.86±0.17)mm]均显著小于正常光照组小鼠[分别为(0.228±0.007)mm、(54.24±1.49)%、(11.41±0.32)mm](P=0.029, P中心的成骨相关基因肝/骨/肾型碱性磷酸酶(Alpl)、骨钙素(Ocn)、Runt相关转录因子2(Runx2)、成骨细胞特异性转录因子(Osx)基因的表达均显著低于正常光照组(均P中心代谢相关基因腺苷活化蛋白激酶α1亚基(Prkaa1)、ATP酶H+转运V0亚基D1(Atp6v0d1)、细胞色素C氧化酶亚基Ⅳ亚型1[Cox4il(基因)/COX Ⅳ(蛋白)]表达相比正常光照组小鼠均显著减少(均P中心骨体积分数、下颌骨长度均显著高于夜间光污染组(均P实验结果显示, 夜间光污染补充褪黑素组小鼠下颌骨骨皮质和髁突成骨中心的Prkaa1、Atp6v0d1、Cox4i1表达较夜间光污染组小鼠均显著增加(均P中心的成骨分化相关基因Alpl、Ocn、Runx2均显著高于夜间光污染组小鼠(均P<0.01)。蛋白质印迹法结果显示, 夜间光污染补充褪黑素组小鼠下颌骨糖代谢、成骨相关蛋白RUNX2、OSX、ATP6V0D1、COX Ⅳ表达和AMPKα1/α2磷酸化水平均显著高于夜间光污染组小鼠(均P<0.01)。结论夜间光污染可抑制小鼠褪黑素分泌, 降低颌骨组织糖代谢, 影响下颌骨的膜内成骨和软骨成骨活动, 最终导致下颌骨发育不足。

关键词：骨发育糖代谢下颌骨成骨活动夜间光污染褪黑素

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人乳头瘤病毒16型纳米抗体的筛选及鉴定

中国肿瘤生物治疗杂志 2025年

作者：王若瑜白崇智仲启明范瑞文牛林茹韩鹏程山西省中医药研究院中心实验室山西农业大学羊驼生物工程实验室君研生物科技(山西)有限公司东南大学附属中大医院医学院

目的：构建HPV16L1蛋白纳米抗体初级文库，通过筛选鉴定获得一株HPV16L1特异性纳米抗体。方法：以HPV16L1蛋白为抗原进行羊驼免疫，采用噬菌体展示技术构建初级文库。经3轮淘选，采用ELISA法鉴定阳性克隆，将阳性反应最强克隆的VHH序列... 详细信息

目的：构建HPV16L1蛋白纳米抗体初级文库，通过筛选鉴定获得一株HPV16L1特异性纳米抗体。方法：以HPV16L1蛋白为抗原进行羊驼免疫，采用噬菌体展示技术构建初级文库。经3轮淘选，采用ELISA法鉴定阳性克隆，将阳性反应最强克隆的VHH序列进行真核表达。经亲和纯化、凝胶过滤层析纯化、SDS-PAGE和WB法鉴定，获得目的纳米抗体；表面等离子共振技术（SPR）检测纳米抗体与HPV 16 L1蛋白之间的亲和力；CCK-8法检测纳米抗体对人永生化角质细胞HaCat的毒性；荧光素酶报告基因实验检测纳米抗体对HPV 16假病毒的中和活性。结果：初级文库库容为1.304×1010，丰度为6.5×109个/mL，ELISA法鉴定获得36个阳性克隆。表达、纯化获得蛋白单体与二聚体，经鉴定为目的纳米抗体（Nb）。Nb与HPV 16 L1蛋白结合的亲和力为35.41 nmol/L。Nb实验组HaCat细胞增殖活力与空白组没有显著性差异（p≥0.01）。与阴性组比较，0.1 μmol、1 μmol Nb均能抑制假病毒感染293T细胞。结论：本研究成功获得一株纯度较好、亲和力较高，对上皮细胞没有毒性作用、有效抑制HPV 16假病毒感染293T细胞的纳米抗体Nb，为防治HPV 16感染提供了有效的候选抗体类药物。

关键词： HPV 16 噬菌体展示技术纳米抗体亲和力