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基于HPLC-Q-TOF-MS/MS加味清络颗粒生物碱类化学成分分析及多指标含量测定

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中草药 2024年第10期55卷 3255-3266页

作者：张日美廖嘉穗胡军华王振中王欣王佳肖伟南京中医药大学江苏南京210000 中药制药过程控制与智能制造技术全国重点实验室江苏连云港222001 江苏康缘药业股份有限公司江苏连云港222001

目的对加味清络颗粒中生物碱类成分进行定性鉴别分析,建立加味清络颗粒生物碱类多成分含量测定方法。方法采用HPLC-Q-TOF-MS/MS技术对加味清络颗粒进行正、负离子模式扫描,利用MassHunter软件计算化合物准确相对分子质量,结合质谱二级... 详细信息

目的对加味清络颗粒中生物碱类成分进行定性鉴别分析,建立加味清络颗粒生物碱类多成分含量测定方法。方法采用HPLC-Q-TOF-MS/MS技术对加味清络颗粒进行正、负离子模式扫描,利用MassHunter软件计算化合物准确相对分子质量,结合质谱二级碎片信息及对照品比对,对加味清络颗粒中生物碱类成分进行定性鉴别,并总结化合物裂解规律;利用HPLC测定加味清络颗粒中6个生物碱成分的含量,检测条件:采用Phenomenex Gemini C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈为流动相A,磷酸盐缓冲溶液(pH 5.8)为流动相B,梯度洗脱,柱温30℃,体积流量0.9 mL/min,进样量10μL,检测波长210 nm。结果加味清络颗粒中共鉴定出50个生物碱成分,分别来源于青风藤、苦参、延胡索、知母,其中喹诺里西啶类生物碱16个、苄基四氢异喹啉类生物碱31个、其他类型生物碱3个;建立了HPLC同时测定加味清络颗粒中苦参碱、槐果碱、青藤碱、原阿片碱、延胡索乙素、延胡索甲素的多指标含量测定方法,该方法中6个待测成分在检测质量浓度范围内线性关系良好(r≥0.9999),精密度、重复性、稳定性RSD均小于4%,样品中苦参碱、槐果碱、青藤碱、原阿片碱、延胡索乙素、延胡索甲素的平均加样回收率分别为94.32%、96.89%、97.83%、109.53%、99.32%、87.13%,RSD值分别为3.24%、4.99%、4.95%、4.85%、2.52%、5.95%。结论建立的方法可准确、灵敏地对加味清络颗粒中的生物碱类化学成分进行定性及定量分析,为加味清络颗粒后续物质基础研究、质量控制、制剂开发建立了基础。

关键词：加味清络颗粒定性鉴别定量测定质量控制 HPLC-Q-TOF-MS/MS 苦参碱槐果碱青藤碱原阿片碱延胡索乙素延胡索甲素

基于RBL-2H3细胞和ICR小鼠过敏与类过敏叠加模型评价注射用血塞通(冻干)过敏与类过敏反应

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药物评价研究 2024年第5期47卷 982-993页

作者：刘方美张羽汤书婉符胜男冷雪娇李存玉郑云枫彭国平南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省中药资源产业化过程协同创新中心江苏南京210023 中药制药过程控制与智能制造技术全国重点实验室江苏连云港222047

目的建立过敏和类过敏叠加的RBL-2H3细胞和ICR小鼠动物模型,对注射用血塞通(冻干)(XST)的过敏与类过敏反应进行评价研究。方法体外以RBL-2H3细胞的β-氨基己糖苷酶(β-Hex)和组胺释放率为评价指标,确定抗二硝基苯单克隆抗体(DNP-IgE)、D... 详细信息

目的建立过敏和类过敏叠加的RBL-2H3细胞和ICR小鼠动物模型,对注射用血塞通(冻干)(XST)的过敏与类过敏反应进行评价研究。方法体外以RBL-2H3细胞的β-氨基己糖苷酶(β-Hex)和组胺释放率为评价指标,确定抗二硝基苯单克隆抗体(DNP-IgE)、DNP-牛血清白蛋白(BSA)的剂量及与C48/80(30μg·mL^(−1))作用的最佳时间,筛选过敏和类过敏叠加模型的阳性条件,随后考察XST(4、8、16 mg·mL^(−1))对细胞活力及与DNP-IgE/BSA叠加后对细胞脱颗粒的影响。体内以ICR小鼠为实验对象,以(类)过敏反应症状分值及血浆中免疫球蛋白E(IgE)、组胺、5-羟色胺、血管内皮生长因子A(VEGF-A)、末端补体复合物(SC5b-9)含量为评价指标,筛选卵蛋白(OVA,2.5、5.0、10.0 mg·kg^(−1))、C48/80(1、2、4 mg·kg^(−1))过敏-类过敏模型阳性条件,最后对XST(60、120、240 mg·kg^(−1))的致敏性及是否会产生过敏、类过敏反应进行评价。结果体外细胞实验最终确定400 ng·mL^(−1)的DNP-IgE致敏后用50 ng·mL^(−1)的DNP-BSA激发的同时与C48/80共同作用30 min作为过敏与类过敏叠加阳性组;16 mg·mL^(−1)的XST与DNP-IgE/BSA联合叠加时,与单给DNP-IgE/BSA或XST组比较均促进组胺和β-Hex的释放(P中药注射剂的临床前安全性评价及合理用药提供参考。

关键词：过敏反应类过敏反应叠加 RBL-2H3 ICR小鼠注射用血塞通(冻干)

基于炎症大鼠代谢组学的马钱子炮制减毒存效机制研究

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天然产物研究与开发 2024年第5期36卷 825-837页

作者：秦伟瀚魏江平张小梅阳勇重庆市中药研究院重庆400065

运用动物模型、血浆药物化学及代谢组学方法,探讨马钱子炮制前后干预炎症大鼠作用机制。按不同剂量灌胃小鼠,以死亡率初步考察炮制前后毒性;建立大鼠蛋清性足跖肿胀模型,通过肿胀率和炎性因子水平评价炮制前后抗炎效果;采用高分辨质谱... 详细信息

运用动物模型、血浆药物化学及代谢组学方法,探讨马钱子炮制前后干预炎症大鼠作用机制。按不同剂量灌胃小鼠,以死亡率初步考察炮制前后毒性;建立大鼠蛋清性足跖肿胀模型,通过肿胀率和炎性因子水平评价炮制前后抗炎效果;采用高分辨质谱结合多元统计学,鉴定入血后的移行成分及相应的代谢产物;比较分析各实验组代谢轮廓及差异生物标志物,并构建其代谢通路。结果显示,高剂量下马钱子砂烫品的毒性要明显低于生品。生品和砂烫品均能显著降低大鼠足肿胀率和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)的水平,炮制前后在抗炎效果上差异无统计学意义(P>0.05)。通过血浆药物分析,鉴定出了12个移行成分,以及相应60个代谢产物,S-plot鉴定出10个差异性化合物。代谢组学实验共发现10个内源性代谢物含量发生显著变化(P<0.05),生物标志物主要涉及苯丙氨酸代谢、甘油磷脂代谢、谷氨酸及谷氨酰胺循环、精氨酸和脯氨酸代谢等途径。通过本研究确证马钱子生品和砂烫品均有较好抗炎治疗作用,高温炮制可以降低马钱子毒性;入血后有效成分应多为生物碱,经过I相反应就容易被体内清除;马钱子炮制抗炎、镇痛、减毒机制主要与氨基酸和脂质代谢相关。该实验结果进一步阐明了起效物质基础及体内作用机制,为后续炮制工艺改进和新药研发等提供科学支撑。

关键词：马钱子炮制抗炎作用代谢组学减毒存效

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不同产地初加工方式对延胡索药材品质的影响

中药材 2024年第2期47卷 336-341页

作者：樊修和杨美琳李铂唐志书宋忠兴黄峰陕西中医药大学/陕西中药资源产业化省部共建协同创新中心陕西咸阳712046 中国中医科学院北京100091 陕西中医药大学制药厂陕西咸阳712099

目的:考察不同加工方式对延胡索外观性状和内部成分的影响,筛选其合理的产地初加工方法。方法:采用晒干、阴干、冷冻干燥、热风干燥、远红外干燥及微波干燥法处理新鲜延胡索,HPLC法测定原阿片碱、海罂粟碱、延胡索乙素、延胡索甲素、盐... 详细信息

目的:考察不同加工方式对延胡索外观性状和内部成分的影响,筛选其合理的产地初加工方法。方法:采用晒干、阴干、冷冻干燥、热风干燥、远红外干燥及微波干燥法处理新鲜延胡索,HPLC法测定原阿片碱、海罂粟碱、延胡索乙素、延胡索甲素、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、去氢紫堇碱含量,色差仪测定粉末颜色,分析复水比、折干率、浸出物及外观性状。化学计量法综合评价各方法对药材品质的影响。结果:晒干延胡索外观性状最佳,生物碱含量较高,但耗时长;热风和远红外干燥耗时缩短,60℃干燥外观性状与晒干法接近,生物碱含量较高;微波干燥法耗时最短,生物碱含量最高;阴干法耗时最长,生物碱含量较低,性状差;冷冻干燥药材质轻、内部多孔松泡,生物碱总含量最低。结论:热风60℃干燥法可大幅度提高干燥效率,确保药材性状及成分含量,可用于延胡索规模化产地加工;微波干燥设备改进后应用前景广阔。

关键词：延胡索产地初加工外观性状生物碱

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中药制剂量值传递研究进展

中草药 2024年第18期55卷 6448-6454页

作者：庄重侯文成刘伟锐李文兰刘洋洋哈尔滨商业大学药学院中国医学科学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发利用重点实验室中药质量国际联合研究中心海口市制药厂有限公司

中药制剂中量值传递的研究，是从“饮片-中间品-制剂”的制备工艺全程出发，基于对指纹图谱相似度、质量标志物转移率、出膏率等多方面指标进行控制，以确保中药制剂质量和药效的稳定。通过对近年来关于中药制剂量值传递相关报道的总结... 详细信息

中药制剂中量值传递的研究，是从“饮片-中间品-制剂”的制备工艺全程出发，基于对指纹图谱相似度、质量标志物转移率、出膏率等多方面指标进行控制，以确保中药制剂质量和药效的稳定。通过对近年来关于中药制剂量值传递相关报道的总结和分析，从量值传递研究内容、研究方法及应用实践对中药制剂工艺中量值传递的研究现状进行归纳和总结分析，同时对量值传递在中药制剂质量控制中的现有问题进行了讨论，为更好地开展中药制剂量值传递研究提供借鉴和参考，推动中药现代化发展。

关键词：中药制剂量值传递物质基准质量控制指纹图谱质量标志物

中药沐足联合穴位贴敷对消渴病伴不寐患者睡眠质量的影响分析

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哈尔滨医药 2024年第3期44卷 119-122页

作者：刘静王志强开封市中医院内分泌科河南开封475000

目的评价中药沐足联合穴位贴敷对消渴病伴不寐患者睡眠质量的影响。方法选取消渴病伴不寐患者120例。患者随机分为中药沐足联合穴位贴敷治疗组联合组(n=60)与对照组(n=60)。对照组采用常规西医治疗,联合组同时给予中药沐足联合穴位贴敷... 详细信息

目的评价中药沐足联合穴位贴敷对消渴病伴不寐患者睡眠质量的影响。方法选取消渴病伴不寐患者120例。患者随机分为中药沐足联合穴位贴敷治疗组联合组(n=60)与对照组(n=60)。对照组采用常规西医治疗,联合组同时给予中药沐足联合穴位贴敷治疗。比较治疗前后两组血糖指标、匹兹堡睡眠质量指数、中医证候积分。比较两组临床疗效和不良反应发病率。结果联合组治疗后空腹血糖(t=4.743,P中药沐足联合穴位贴敷治疗后,血糖、睡眠质量、中医证候积分显著改善,临床疗效显著提高,不良反应发病率显著降低。

关键词：消渴病不寐睡眠质量

基于Box-Behnken响应面法优化醒9令压片糖果复方总黄酮提取工艺研究

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陕西中医药大学学报 2024年

作者：唐莹莹赵小梅张颖屈琼张新博魏玄雷璇宋逍陕西中医药大学中药制药与新药开发教育部工程研究中心

目的优化醒9令压片糖果复方总黄酮的提取工艺。方法在单因素实验的基础上,以提取溶剂乙醇体积分数、溶剂用量和提取时间为考察因素,总黄酮提取率为考察指标,利用Box-Behnken响应面法设计实验,通过分析回归方程模型,考察各因素对提取率... 详细信息

目的优化醒9令压片糖果复方总黄酮的提取工艺。方法在单因素实验的基础上,以提取溶剂乙醇体积分数、溶剂用量和提取时间为考察因素,总黄酮提取率为考察指标,利用Box-Behnken响应面法设计实验,通过分析回归方程模型,考察各因素对提取率的影响,优选出最佳提取工艺。结果醒9令压片糖果复方总黄酮的最优提取工艺为加入22倍体积分数为68%的无水乙醇,提取119 min,在此条件下,总黄酮的提取率最高为0.812%。结论通过响应面法优化得到的提取工艺稳定可靠,可为该复方后期的开发和应用提供依据。

关键词： Box-Behnken响应面法醒9令压片糖果总黄酮提取率提取工艺

基于神经网络优化模型的中药复方安慰剂配色模拟研究

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南京中医药大学学报 2024年第1期40卷 18-25页

作者：李航黎盛强周恩丽王团结章晨峰张欣肖伟王振中南京中医药大学康缘中药学院江苏南京210023 中药制药过程控制与智能制造技术全国重点实验室江苏连云港222001 江苏康缘药业股份有限公司江苏连云港222001

目的构建粒子群反向传播(Particle swarm optimization-back propagation,PSO-BP)神经网络对中药复方颗粒剂安慰剂制备着色剂的用量进行预测,为中药复方颗粒剂安慰剂颜色的模拟提供一种新思路。方法运用BP神经网络建立样品颜色参数L、a^... 详细信息

目的构建粒子群反向传播(Particle swarm optimization-back propagation,PSO-BP)神经网络对中药复方颗粒剂安慰剂制备着色剂的用量进行预测,为中药复方颗粒剂安慰剂颜色的模拟提供一种新思路。方法运用BP神经网络建立样品颜色参数L、a^(*)、b^(*)与色素质量分数的模型,利用粒子群算法的全局搜索能力优化BP神经网络权重和偏置,防止模型出现局部最小值,再采用线性降低权系数法和引入变异算子提高粒子群算法的全局寻优能力;以颜色综合评价指标(ΔE)为客观评价标准,验证试验结果。结果训练结果表明,改进的PSO-BP神经网络拟合精度最高达到98.31%;预测结果表明,改进的PSO-BP神经网络的预测误差最小,平均绝对百分比误差(MAPE)、均方根误差(RMSE)和平均色差(ΔE)分别为0.4115、2.1646、2.56;制备3种颗粒的验证样品进行验证,验证样品与模型药物的ΔE分别为1.73、2.63、4.11,肉眼直观评价其中两组与模型药物色差较小。结论基于改进粒子群优化算法的BP神经网络可模拟中药复方颗粒剂安慰剂制备着色剂用量预测,可作为安慰剂配色研究的推荐优化模型。

关键词：中药复方颗粒安慰剂颜色模拟神经网络粒子群算法 CIELab颜色系统

基于改进AHP-熵权-关联度及化学计量学的经典名方一贯煎提取工艺研究

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中草药 2024年第4期55卷 1178-1188页

作者：牛成琳殷洪梅宋明明周茆丁涵徐殿红陈娅王振中肖伟南京中医药大学江苏南京210023 江苏康缘药业股份有限公司江苏连云港222001 中药制药过程控制与智能制造技术全国重点实验室江苏连云港222001

目的筛选经典名方一贯煎的最优提取工艺,为其制剂研究提供实验依据。方法对HPLC法测定的甜菜碱、地黄苷D、对香豆酸、阿魏酸、毛蕊花糖苷、洋川芎内酯Ⅰ进行化学计量学分析;以筛选出的关键成分含量、出膏率及指纹图谱相似度为评价指标... 详细信息

目的筛选经典名方一贯煎的最优提取工艺,为其制剂研究提供实验依据。方法对HPLC法测定的甜菜碱、地黄苷D、对香豆酸、阿魏酸、毛蕊花糖苷、洋川芎内酯Ⅰ进行化学计量学分析;以筛选出的关键成分含量、出膏率及指纹图谱相似度为评价指标,采用改进AHP-熵权法确定各个指标的组合权重系数,以基准样品关联度评价样品与基准样品的质量一致性,在单因素试验的基础上,采用响应面法优选一贯煎的提取工艺参数。结果 Box-Behnken设计建立的数学模型具有统计学意义,一贯煎最佳提取工艺参数为加12倍量水,提取时间80 min,提取2次。此条件下设计空间的综合评分为0.963。结论采用改进AHP-熵权-基准样品关联度法优选一贯煎提取工艺参数,所拟合的模型显著,与基准样品质量基本一致,为进一步研究经典名方一贯煎复方制剂究提供了参考。

关键词：一贯煎提取工艺改进AHP 熵权法基准样品关联度响应面法化学计量学甜菜碱地黄苷D 对香豆酸阿魏酸毛蕊花糖苷洋川芎内酯Ⅰ