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海水致小鼠溺水性肺损伤形态学及其应激反应的长时程动态研究

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中国急救医学 2017年第10期37卷 946-951,I0003页

作者：苑佳佳张晓彤鲍云婷许郑青舒远招王紫薇杜斌庞庆丰江南大学医学院病理生理学教研室江苏无锡214122

目的观察小鼠溺水性肺损伤15min～3d之间八个时间点肺组织病理形态和生化指标的动态变化规律。方法将84只小鼠随机分成正常组（10只）和模型组（74只），根据复苏情况，将模型组分为死亡组（22只）和存活组（52只）。存活组小鼠随机分... 详细信息

目的观察小鼠溺水性肺损伤15min～3d之间八个时间点肺组织病理形态和生化指标的动态变化规律。方法将84只小鼠随机分成正常组（10只）和模型组（74只），根据复苏情况，将模型组分为死亡组（22只）和存活组（52只）。存活组小鼠随机分为溺水后15min组、溺水后30min组、溺水后1h组、溺水后3h组、溺水后6h组、溺水后12h组、溺水后24h组和溺水后72h组，溺水后15min组10只，其余每组6只。正常组、死亡组和溺水后15min组各取4只小鼠检测肺湿／干比、血气分析。观察存活组不同时间点肺病理形态、CT影像等指标；检测血红素加氧酶-1蛋白含量及活性、水通道蛋白-1水平及超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量等变化情况。结果与正常组比较，肺病理形态及CT影像学显示溺水后15min、30min、1h、3h、6h肺损伤较为严重，其中溺水后1h组肺损伤最为严重，72h后逐渐恢复。溺水后超氧化物歧化酶活性降低和丙二醛含量升高；而1h后超氧化物歧化酶活性水平升高而丙二醛含量降低；溺水后肺组织血红素加氧酶-1含量及活性明显增高并且可持续3d；溺水6h后水通道蛋白-1含量增加。结论本研究首次发现溺水性肺损伤具有自愈的特点；其自愈可能与血红素加氧酶-1及水通道蛋白-1变化有关。

关键词：海水急性肺损伤血红素加氧酶-1 水通道蛋白-1 自我修复

miR-101-3p靶向E2F2调控黑色素瘤细胞增殖的分子机制探讨

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天津医药 2022年第11期50卷 1121-1127页

作者：李吻吻朱智鑫韩利民焦艳林翁宗琴赵海龙遵义医科大学基础医学院病理生理学教研室 563000

目的探讨miR-101-3p靶向E2F转录因子2(E2F2)调控黑色素瘤细胞增殖的作用机制。方法使用GEPIA、OSskcm等数据库联合分析E2F2在黑色素瘤中的表达,并评估转录因子E2F2在黑色素瘤预后中的价值;利用短发夹RNA(shRNA)抑制黑色素瘤细胞MV3中E2F... 详细信息

目的探讨miR-101-3p靶向E2F转录因子2(E2F2)调控黑色素瘤细胞增殖的作用机制。方法使用GEPIA、OSskcm等数据库联合分析E2F2在黑色素瘤中的表达,并评估转录因子E2F2在黑色素瘤预后中的价值;利用短发夹RNA(shRNA)抑制黑色素瘤细胞MV3中E2F2表达后,分别采用PI染色和流式细胞术检测细胞周期的改变;Western blot实验检测细胞周期蛋白E(CyclinE)和细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)的表达水平;免疫荧光实验检测细胞中自噬相关蛋白LC3B的表达水平;裸鼠荷瘤实验观察黑色素瘤在体内生长的变化。经miR-101-3p mimics处理后,采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测MV3细胞中miR-101-3p的表达水平,同时利用qPCR和Western blot实验检测E2F2的表达水平;通过MTT、BrdU法检测MV3细胞增殖水平。结果E2F2表达升高的患者预后更差(P<0.05);与shGFP组相比,shE2F2组中处于G0/G1期的细胞比例显著增多(P<0.05),CyclinE和CDK2的表达水平显著降低,自噬相关蛋白LC3B荧光信号明显减少(P<0.05),体内黑色素瘤形成质量显著降低(P<0.05);采用miR-101-3p mimics处理后,MV3细胞中miR-101-3p的表达水平明显升高(P<0.05),E2F2的mRNA和蛋白表达均显著低于NC mimics处理组(P<0.05),同时MTT结果表明miR-101-3p mimics组MV3细胞的活力显著降低(P<0.05),BrdU标记试验结果显示miR-101-3p mimics组细胞中BrdU阳性信号明显减少(P<0.05)。结论miR-101-3p可靶向E2F2并抑制其表达,进而降低黑色素瘤细胞增殖水平。

关键词：黑色素瘤 E2F2转录因子细胞增殖 miR-101-3p

激活突变引发SHP2蛋白相分离对小鼠间充质干细胞增殖能力的影响及其机制

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安徽医科大学学报 2023年第11期58卷 1921-1927页

作者：刘嘉戴媛娟汪思应安徽医科大学基础医学院病理生理学教研室合肥230032

目的构建SHP2 E76K突变的小鼠模型,利用其间充质干细胞(MSC)研究激活突变引发的SHP2蛋白相分离对其细胞增殖能力的影响及其机制。方法将Ptpn11 E76K-neo/+的C57BL/6J小鼠与Mx1-cre工具鼠杂交,得到所需要的Mx1-cre;Ptpn11^(+/+)和Mx1-cre... 详细信息

目的构建SHP2 E76K突变的小鼠模型,利用其间充质干细胞(MSC)研究激活突变引发的SHP2蛋白相分离对其细胞增殖能力的影响及其机制。方法将Ptpn11 E76K-neo/+的C57BL/6J小鼠与Mx1-cre工具鼠杂交,得到所需要的Mx1-cre;Ptpn11^(+/+)和Mx1-cre;Ptpn11^(E76K/+)小鼠,并对后者注射pI-pC以诱导Cre酶的表达,使Ptpn11在骨髓MSC中突变。从Mx1-cre;Ptpn11^(+/+)和Mx1-cre;Ptpn11^(E76K/+)小鼠体内分离培养MSC,通过细胞免疫荧光染色确定所分离的细胞为MSC。以Ptpn11^(+/+)的MSC为对照组,Ptpn11^(E76K/+)的MSC为实验组,通过加药将两种细胞分成6组:Ptpn11^(+/+)组;Ptpn11^(+/+)+SHP099组;Ptpn11^(+/+)+ET070组;Ptpn11^(E76K/+)组;Ptpn11^(E76K/+)+SHP099组;Ptpn11^(E76K/+)+ET070组。免疫荧光染色法观察6组细胞内SHP2蛋白相分离的差异,Western blot法检测6组MSC中SHP2蛋白表达水平的差异。CCK-8检测相分离被影响之后细胞增殖能力的改变。提取实验组与对照组细胞总蛋白通过Western blot法检测ERK/p-ERK、AMPK/p-AMPK、mTOR/p-mTOR等蛋白的表达水平。结果小鼠基因型鉴定证实得到Mx1-cre;Ptpn11^(E76K/+)和Mx1-cre;Ptpn11^(+/+)小鼠并分离出原代Ptpn11^(+/+)和Ptpn11^(E76K/+)骨髓MSC。与Ptpn11^(+/+)组相比,Ptpn11^(E76K/+)组的SHP2蛋白产生更多的相分离冷凝物;与Ptpn11^(E76K/+)组相比,Ptpn11^(E76K/+)+SHP099组和Ptpn11^(E76K/+)+ET070组SHP2蛋白凝聚成的冷凝物在均明显减少;Western blot检测各组SHP2蛋白表达水平差异无统计学意义;与Ptpn11^(+/+)组相比,Ptpn11^(+/+)+SHP099组和Ptpn11^(+/+)+ET070组MSC的增殖能力下降,细胞内p-ERK和p-mTOR蛋白表达减少,p-AMPK蛋白表达增加;与Ptpn11^(E76K/+)组相比,Ptpn11^(E76K/+)+SHP099组和Ptpn11^(E76K/+)+ET070组MSC的增殖能力下降,细胞内p-ERK和p-mTOR蛋白表达减少,p-AMPK蛋白表达增加。结论SHP2的相分离通过刺激AMPK-mTOR信号通路的表达参与了SHP2 E76K激活突变的MSC的增殖能力改变。

关键词：间充质干细胞相分离 SHP2蛋白激活突变增殖

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儿童颈部皮肤软骨瘤1例

中华病理学杂志 2022年第6期51卷 570-572页

作者：王静静冯颖曹石石玉香杨小菁李长天甘肃中医药大学基础医学院病理学与病理生理学教研室兰州730000 兰州大学第一医院病理科兰州730000

皮肤软骨瘤是一种软骨来源的良性肿瘤,发生于真皮或皮下组织。本文报道1例4岁儿童,右颈部有一蚕豆大小的肿物,质地硬。镜下观察组织表面被覆鳞状上皮,皮下纤维组织内可见两处边界清楚、呈分叶状的成熟透明软骨构成的细胞岛,软骨细胞未... 详细信息

皮肤软骨瘤是一种软骨来源的良性肿瘤,发生于真皮或皮下组织。本文报道1例4岁儿童,右颈部有一蚕豆大小的肿物,质地硬。镜下观察组织表面被覆鳞状上皮,皮下纤维组织内可见两处边界清楚、呈分叶状的成熟透明软骨构成的细胞岛,软骨细胞未见明显异型性。免疫组织化学结果:p63阳性,Ki-67阳性指数1%,S-100蛋白阳性,p53阴性。病理诊断为皮肤软骨瘤。该疾病主要与软骨性错构瘤、骨膜软骨瘤、滑膜软骨瘤及皮肤混合瘤相鉴别。手术全切除是首选治疗方法,切除不完整可能导致复发。

关键词：软骨瘤透明软骨阳性指数错构瘤右颈部分叶状 p63 纤维组织

基于网络药理学探讨复方鳖甲软肝片治疗华支睾吸虫感染所致肝纤维化的机制

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2023年第4期41卷 510-515页

作者：李天星张家明徐晨曦王子戈郭晶洁李姗河南中医药大学第五临床医学院郑州450002 河南中医药大学医学院病理学与病理生理学教研室郑州450046

为探究复方鳖甲软肝片治疗华支睾吸虫感染所致肝纤维化的药理作用和分子机制,采用TCMSP、BATMAN-TCM、Swiss、GeneCards等数据库获得复方鳖甲软肝片中11味中药的有效成分和潜在靶点以及华支睾吸虫病和肝纤维化相关靶点,筛选交集靶点构... 详细信息

为探究复方鳖甲软肝片治疗华支睾吸虫感染所致肝纤维化的药理作用和分子机制,采用TCMSP、BATMAN-TCM、Swiss、GeneCards等数据库获得复方鳖甲软肝片中11味中药的有效成分和潜在靶点以及华支睾吸虫病和肝纤维化相关靶点,筛选交集靶点构建蛋白质-蛋白质互作网络、中药-成分-靶点-疾病网络,并进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,取核心靶点与其对应化合物分子对接。结果显示,复方鳖甲软肝片有效成分、华支睾吸虫病和肝纤维化交集靶点17个,度值前5的靶点分别为半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3(CASP3)、CXC趋化因子配体8(CXCL8)、肿瘤坏死因子(TNF)、原癌基因酪氨酸蛋白激酶(SRC)、白细胞介素10(IL-10),与其分子对接结合能最小的化合物分别是黄芩素、汉黄芩素、24-乙基胆甾-4-烯-3-酮、24-乙基胆甾-4-烯-3-酮、24-乙基胆甾-4-烯-3-酮。KEGG和GO功能富集分析显示,复方鳖甲软肝片可调控细胞凋亡和增殖,减轻炎症反应和氧化应激损伤,抑制促纤维化因子的表达等,可通过磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K-Akt)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和Janus激酶/信号转导子和转录激活因子(JAK-STAT)等通路发挥治疗华支睾吸虫感染所致肝纤维化的作用。

关键词：华支睾吸虫病复方鳖甲软肝片肝纤维化网络药理学

甲基-β-环糊精通过限制脂质代谢抑制横纹肌肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭

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安徽医科大学学报 2023年第12期58卷 2010-2018页

作者：胡亚飞阚晨汪思应安徽医科大学基础医学院病理生理学教研室合肥230032

目的探讨抑制脂质合成对人骨骼横纹肌肉瘤细胞的影响及其分子机制。方法采用肿瘤基因表达数据库检查人骨骼肌细胞(HSMC)和人骨骼横纹肌肉瘤细胞脂质合成相关基因固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)和角鲨烯环氧化酶(SQLE)mRNA表达水平并通过... 详细信息

目的探讨抑制脂质合成对人骨骼横纹肌肉瘤细胞的影响及其分子机制。方法采用肿瘤基因表达数据库检查人骨骼肌细胞(HSMC)和人骨骼横纹肌肉瘤细胞脂质合成相关基因固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)和角鲨烯环氧化酶(SQLE)mRNA表达水平并通过qRT-PCR验证。通过细胞增殖实验选出脂质抑制剂甲基-β-环糊精(mβCD)的细胞处理浓度。分别将3株人骨骼横纹肌肉瘤细胞(RD、SJCRH30和A673)作为对照组,1 mmol/L mβCD处理的三株人骨骼横纹肌肉瘤细胞分别作为实验组。平板克隆实验、软琼脂集落形成实验、细胞迁移及侵袭实验和裸鼠成瘤实验检测对照组和mβCD处理组人骨骼横纹肌肉瘤细胞增殖、迁移、侵袭和肿瘤生长的变化。通过脂质组学及三酰甘油(TG)分析探究mβCD抑制人骨骼横纹肌肉瘤细胞恶性的分子机制。结果相对于HSMC,人骨骼横纹肌肉瘤细胞脂质合成相关基因SREBP1、SQLE表达增高(P<0.001);与对照组相比,mβCD组人骨骼横纹肌肉瘤细胞的增殖、平板克隆、迁移侵袭和集落形成能力减弱(P<0.05);裸鼠肿瘤体积和肿瘤质量增加也减少(P<0.05);脂质组学和TG试剂盒检测结果发现,与对照组相比,mβCD组TG含量降低(P<0.01)。结论mβCD可能通过降低TG等脂质代谢过程从而抑制人骨骼横纹肌肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭等恶性生物学行为。

关键词：横纹肌肉瘤脂质合成脂质代谢三酰甘油甲基-β-环糊精

基于学生视角的教学设计推进病理生理学课程教与学共鸣

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基础医学教育 2023年第12期25卷 1033-1037页

作者：陈小湧谭红梅中山大学中山医学院病理生理学教研室广州510080 中山大学医学院病理生理学教研室

病理生理学是研究疾病发生发展过程中功能和代谢改变规律及其机制的学科,作为桥梁学科连接了基础医学与临床医学,因涉及学科多、逻辑性强、抽象难懂等特点,容易造成教与学存在差距,严重影响教学质量。从学生角度出发是教育的核心理念,... 详细信息

病理生理学是研究疾病发生发展过程中功能和代谢改变规律及其机制的学科,作为桥梁学科连接了基础医学与临床医学,因涉及学科多、逻辑性强、抽象难懂等特点,容易造成教与学存在差距,严重影响教学质量。从学生角度出发是教育的核心理念,注重学情分析,立足于学生视角,反向设计教学,是实现教与学共鸣的根本路径。文章以病理生理学为例,立足学生已有知识版图,由浅入深、从已知探索未知,推进知识融会贯通并激发学习潜力;利用学生已有的生活经验,联系临床情景与生活实际,促进知识情感交融并唤起学习动力;充分考虑学生的领悟能力,适当借助信息科学技术再现疾病发生发展演变过程,实现知识可视化且提升学习效率;多管齐下、有的放矢,提供可知、可感、可视的沉浸式学习之旅,实现病理生理学课程教与学共鸣,助力新医科背景下的课程改革。

关键词：病理生理学临床融合课程改革学生视角教学共鸣知识拓展

MiR-100基因敲除小鼠的建立及造血表型初步分析

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中国比较医学杂志 2023年第8期33卷 55-67页

作者：王幸幸黄珍周浇李桂玲阚晨郑红汪思应安徽医科大学基础医学院病理生理学教研室合肥230032

目的建立miR-100基因敲除小鼠模型,初步探索miR-100基因缺失对小鼠造血系统发育的影响。方法通过将EIIa-Cre-;miR-100fl/fl小鼠和EIIa-Cre+;miR-100+/+小鼠进行配繁,培育出EIIa-Cre+;miR-100fl/fl(miR-100-/-)小鼠,也就是miR-100全身敲除小鼠。通过PCR技术以及q-PCR技术鉴定小鼠基因型并验证miR-100基因在小鼠骨髓和脾的敲除效率。分离小鼠外周血、骨髓、脾,制备单细胞悬液,利用血细胞计数、流式细胞术、甲基纤维素血细胞集落形成实验分析该基因缺失对小鼠造血系统的影响。并通过q-PCR和RNA结合蛋白免疫沉淀实验(RIP)验证miR-100与Mospd2之间的关系。结果PCR和q-PCR结果表明,成功构建miR-100基因敲除小鼠。血细胞计数、流式细胞术及甲基纤维素血细胞集落形成实验结果表明,miR-100基因缺失小鼠外周血髓系细胞比例增多,但其对小鼠骨髓和脾的髓系细胞,T/B淋巴细胞、红细胞的比例和绝对细胞计数无影响,并且miR-100基因缺失对小鼠骨髓造血干祖细胞群体比例和数量及骨髓单个核细胞集落形成能力无影响。q-PCR结果表明,miR-100缺失可以促进小鼠骨髓细胞中Mospd2的表达。RIP实验表明,miR-100以AGO2蛋白复合物的形式与Mospd2结合在一起,进而调控Mospd2的表达。结论本研究成功建立了miR-100基因敲除小鼠模型,发现该基因缺失影响小鼠外周血髓系细胞占比,验证了miR-100与Mospd2之间的关系。本研究为进一步了解该基因在小鼠造血调控中的作用提供指导。

关键词： miR-100 造血干细胞髓系细胞基因敲除

审核评估背景下生理学混合式教学学生满意度调查研究

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中华医学教育探索杂志 2019年第12期18卷 1253-1257页

作者：孙莉郎明非大连大学医学院生理学与病理生理学教研室 116622

目的通过审核评估背景下2016至2018年生理学混合式教学学生满意度调查结果分析,探讨学生的满意度和与应用型医学专门人才培养目标的达成度。方法将医学本科生2015级口腔医学专业60人,2016级医学检验技术专业59人,2016级中药学专业27人,2... 详细信息

目的通过审核评估背景下2016至2018年生理学混合式教学学生满意度调查结果分析,探讨学生的满意度和与应用型医学专门人才培养目标的达成度。方法将医学本科生2015级口腔医学专业60人,2016级医学检验技术专业59人,2016级中药学专业27人,2017级口腔医学专业58人作为研究对象,采用生理学混合式教学,根据应用型医学专门人才的培养目标设计教学过程,进行教学效果学生满意度问卷调查。在学期初与学期末让学生对教学效果满意度进行评分,评分结果录入SPSS 19.0软件进行独立样本t检验。结果2015级口腔.2016级医学检验技术,2016级中药学,2017级口腔医学专业学期末在调查问卷的评分指标中,教学方法评分、学期末知识掌握程度评分、期末分析解决问题能力评分、期末自主学习能力评分、期末表达沟通能力评分均显著高于学期初,差异均有统计学意义(P生理学混合式教学效果达到学生的满意度,与应用型医学专门人才培养目标具有达成度,符合审核评估的基本要求。

关键词：审核评估生理学混合式教学学生满意度培养目标