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橙皮素通过激活SIRT1/NRF2信号改善阿霉素诱导的H9c2细胞毒性

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四川大学学报:医学版 2023年第5期54卷 947-953页

作者：李新华闫爱丽常晋瑞李汾朱娟霞西安医学院药理学与毒理学教研室西安710021 西安医学院病理学教研室西安710021 西安医学院生理学教研室西安710021

目的本研究旨在探讨橙皮素(hesperetin,Hes)能否通过调控沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)/核转录因子E2相关因子2(nuclear transcription factor E2-related factor 2,NRF2)信号减轻氧化应激改善阿霉素(doxorubicin,DOX)诱导的H9c2心肌细胞毒性。方法采用DOX诱导的H9c2心肌细胞毒性模型,随机分为4组:对照组(Control)、DOX处理组(DOX)、Hes加DOX处理组(DOX+Hes)以及Hes加SIRT1抑制剂EX527联合DOX处理组(DOX+Hes+EX527)。光镜下观察细胞形态,CCK-8检测各组细胞活力,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,DCFH-DA染色观察各组ROS水平,ELISA试剂盒检测乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)和SIRT1活性以及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,Western blot检测裂解的caspase-3(cleaved caspase-3)、细胞色素c(cytochrome c)、SIRT1、Ac-FOXO1、NRF2和血红素加氧酶1(heme oxygenase1,HO-1)的表达。结果和Control组相比,DOX组细胞形态肿胀,密度减小,细胞活力降低,培养基中LDH活性增加(P<0.01);细胞凋亡增多,cleaved caspase-3和cytochrome c表达增加(P<0.01);CAT和SOD活性降低,MDA含量和ROS水平增加(P<0.01);SIRT1、NRF2和HO-1表达以及SIRT1活性降低,Ac-FOXO1表达增加(P<0.01);与DOX组相比,DOX+Hes组细胞形态改善,密度和细胞活力增加,培养基中LDH活性降低(P<0.01);细胞凋亡减少,cleaved caspase-3和cytochrome c表达降低(P<0.01);CAT和SOD活性升高,MDA含量和ROS水平降低(P<0.01);SIRT1、NRF2和HO-1表达以及SIRT1活性增加,Ac-FOXO1表达降低(P<0.01);而与DOX+Hes组相比,EX527阻断Hes对DOX诱导的H9c2细胞损伤、氧化应激和SIRT1/NRF2信号的作用。结论Hes可以通过调控SIRT1/NRF2信号抑制氧化应激和细胞凋亡减轻DOX诱导的H9c2心肌细胞毒性。

关键词：橙皮素氧化应激 SIRT1/NRF2 H9c2细胞阿霉素

多胺通过调节线粒体通透性转换孔在心肌缺血再灌注损伤中发挥双重作用（英文）

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生理学报 2019年第5期71卷 681-688页

作者：陈慧颖贾晓丽赵淑琴郑卫红梅志刚杨红卫张世忠三峡大学医学院生理学教研室

多胺(腐胺、亚精胺和精胺)是一类重要的聚阳离子化合物,在哺乳动物各种生理和病理过程中起重要作用。本研究旨在探索多胺(腐胺、亚精胺和精胺)在心肌缺血再灌注(ischemia/reperfusion,i/R)损伤中的作用及其机制。采用langendorff离体心... 详细信息

多胺(腐胺、亚精胺和精胺)是一类重要的聚阳离子化合物,在哺乳动物各种生理和病理过程中起重要作用。本研究旨在探索多胺(腐胺、亚精胺和精胺)在心肌缺血再灌注(ischemia/reperfusion,i/R)损伤中的作用及其机制。采用langendorff离体心脏灌流装置对大鼠离体心脏进行灌流,全心缺血30 min,再灌注120 min。在复灌前10 min给予不同浓度的多胺(0.1、1、10、15μmol/L腐胺、亚精胺和精胺)、环孢菌素a(0.2μmol/L)或苍术苷(20μmol/L)。记录血流动力学变化;分光光度法检测灌流液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,lDh)含量;TTC染色法测定心肌梗死面积;分离心肌线粒体,Ca2+诱导肿胀,分光光度计测定线粒体通透性转换孔(mitochondrial permeability transition pore,MPTP)的开放程度。结果显示,与单独的i/R相比,0.1和1μmol/L多胺处理改善大鼠心脏功能,降低lDh释放,减少心肌梗死面积,但这些作用被MPTP开放剂苍术苷抑制。在分离自正常大鼠的线粒体,0.1和1μmol/L多胺处理抑制了MPTP的开放。10和15μmol/L多胺处理却出现相反的作用,这些作用被MPTP抑制剂环孢菌素a抑制。以上结果表明,多胺既可通过抑制MPTP减轻心肌i/R损伤,又可通过促进MPTP开放加重心肌i/R损伤。

关键词：心脏缺血再灌注线粒体通透性转换孔多胺

二甲双胍可能通过Hippo-YAP通路抑制HER 2阳性乳腺癌细胞的增殖和促进凋亡

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南方医科大学学报 2022年第5期42卷 740-746页

作者：徐钰徐婷熊远锋黄佳祎重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆400016

目的观察二甲双胍对HER-2阳性乳腺癌细胞株SKBR3增殖、凋亡的影响,并探讨其可能的机制。方法分别用0、20、40、60、80、100、120μmol/L二甲双胍处理乳腺癌细胞株SKBR3,CCK-8法检测其对细胞增殖的影响;结晶紫染色观察其对细胞集落形成... 详细信息

目的观察二甲双胍对HER-2阳性乳腺癌细胞株SKBR3增殖、凋亡的影响,并探讨其可能的机制。方法分别用0、20、40、60、80、100、120μmol/L二甲双胍处理乳腺癌细胞株SKBR3,CCK-8法检测其对细胞增殖的影响;结晶紫染色观察其对细胞集落形成的影响;计算IC50值。以该浓度二甲双胍处理细胞,与空白对照相比,流式细胞术检测细胞凋亡和周期的改变;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测YAP、TAZ、EGFR、CTGF、CYR61、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin及Fibronectin等关键基因的mRNA水平表达;Westernblotting实验检测YAP、TAZ蛋白水平的表达;免疫荧光观察二甲双胍对SKBR3细胞中YAP/TAZ核易位的改变。结果CCK-8和细胞克隆实验显示二甲双胍对SKBR3细胞增殖活力具有明显的抑制作用(P<0.05),呈浓度和时间依赖性。与对照组相比,二甲双胍处理后的SKBR3细胞凋亡明显增加;G1期细胞比例增多,而G2/M期细胞比例减少。Ncadherin、Vimentin和Fibronectin的表达降低,而E-cadherin的表达上调(P<0.05)。qRT-PCR和Westernblotting检测结果显示,二甲双胍处理后YAP、TAZ、EGFR、CTGF和CYR61的表达明显下调(P<0.05)。免疫荧光实验显示:实验组较对照组的YAP或TAZ,其荧光的定位更多地聚集于胞浆,而细胞核中荧光的量明显的减少。结论二甲双胍能抑制HER-2阳性乳腺癌细胞SKBR3的增殖,促进其凋亡和上皮-间质转化,其机制可能与抑制YAP/TAZ的表达和核定位有关。

关键词：二甲双胍 HER-2阳性型乳腺癌 SKBR3细胞 Hippo-YAP通路

热休克蛋白在动脉粥样硬化发生发展中作用的研究进展

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生理科学进展 2014年第1期45卷 1-6页

作者：白赟叶丽平高远生北京大学医学部生理学与病理生理学系北京100191 辽宁医学院病理生理学教研室辽宁121001

近年来研究表明热休克蛋白与动脉粥样硬化有密切联系,以HSP60为代表的热休克蛋白通过诱导自身免疫,增强炎症反应,促进血管平滑肌细胞增殖、迁移,促进动脉粥样硬化的发生发展;以HSP27为代表的热休克蛋白可以抑制氧化应激,降低炎症免疫反... 详细信息

近年来研究表明热休克蛋白与动脉粥样硬化有密切联系,以HSP60为代表的热休克蛋白通过诱导自身免疫,增强炎症反应,促进血管平滑肌细胞增殖、迁移,促进动脉粥样硬化的发生发展;以HSP27为代表的热休克蛋白可以抑制氧化应激,降低炎症免疫反应,抑制血管平滑肌的增殖、迁移、凋亡,增加动脉粥样斑块的稳定性,抑制动脉粥样硬化的进展。这些热休克蛋白作用的新认识对动脉粥样硬化诊断和治疗提供了有益的线索。

关键词：热休克蛋白自身免疫应答 Toll样受体动脉粥样硬化斑块稳定性

Gq-PLC-IP3信号通路在钙敏感受体介导的A549细胞增殖中的作用

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解剖学报 2019年第6期50卷 776-779页

作者：曹玓程凤辉杨百路李光伟齐齐哈尔医学院病理生理学教研室

目的探讨缺氧活化钙敏感受体(CaSR)在人非小细胞肺癌细胞A549细胞增殖中的信号转导途径。方法将A549细胞随机分为对照组、缺氧组(H)、缺氧+CaSR激动剂组(H+Gd)、缺氧+CaSR抑制剂组(H+NPS)与磷脂酶C(PLC)通路抑制剂组(H+Gd+U73122)。应... 详细信息

目的探讨缺氧活化钙敏感受体(CaSR)在人非小细胞肺癌细胞A549细胞增殖中的信号转导途径。方法将A549细胞随机分为对照组、缺氧组(H)、缺氧+CaSR激动剂组(H+Gd)、缺氧+CaSR抑制剂组(H+NPS)与磷脂酶C(PLC)通路抑制剂组(H+Gd+U73122)。应用Western blotting分析不同处理情况下CaSR、增殖细胞核抗原(PCNA)在A549细胞中的表达;采用激光扫描共焦显微镜技术检测不同处理情况下细胞内钙离子浓度的变化;利用流式细胞术检测不同药物处理对细胞周期及增殖指数的影响;HE染色观察不同药物处理后细胞数量的变化。结果缺氧导致A549细胞的CaSR与PCNA表达增加,细胞增殖指数上调,细胞数量增加,氯化钆(GdCl3)(CaSR激动剂)能够放大缺氧的作用,NPS2390(CaSR抑制剂)可以减弱缺氧的作用,上述效应均可被U73122(PLC通路抑制剂)抑制。结论缺氧活化的CaSR通过Gq-PLC-IP3信号通路介导A549的增殖。

关键词：钙敏感受体 A549细胞增殖缺氧信号转导免疫印迹法

海马齿状回区多巴胺D1受体在大鼠主动回避学习中的作用及其机制

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吉林大学学报（医学版） 2018年第6期44卷 1138-1143页

作者：王玮瑶张岩赵可孙传博金清华延边大学医学院生理学与病理生理学教研室吉林延吉133002 吉林医药学院病理学教研室吉林吉林132021

目的:观察大鼠海马齿状回(DG)区的多巴胺(DA)水平在大鼠主动回避条件反射建立及消退过程中的变化,探讨D1受体在大鼠主动回避学习中的作用及其机制。方法:24只SD雄性成年大鼠随机分为非训练组、训练组、对照组和SCH组,每组6只。训练组大... 详细信息

目的:观察大鼠海马齿状回(DG)区的多巴胺(DA)水平在大鼠主动回避条件反射建立及消退过程中的变化,探讨D1受体在大鼠主动回避学习中的作用及其机制。方法:24只SD雄性成年大鼠随机分为非训练组、训练组、对照组和SCH组,每组6只。训练组大鼠每天进行穿梭箱训练,非训练组大鼠只放进穿梭箱而不进行训练,测定2组大鼠DG区细胞外液中DA水平。对照组和SCH组大鼠每天进行穿梭箱训练前向DG区注射生理盐水或SCH-23390,训练后测定2组大鼠DG区细胞外液中谷氨酸(Glu)水平和场兴奋性突触后电位(fEPSP)幅值。利用穿梭箱的行为学分析系统记录各组大鼠主动回避反应率,采用脑部微量透析法和高效液相色谱法测定各组大鼠DG区DA和Glu水平,采用电生理学记录法观察各组大鼠DG区fEPSP幅值。结果:训练组大鼠DG区DA水平在条件反射的建立过程中逐渐升高,且在消退过程中逐渐降低;与第1天比较,第5天大鼠DG区DA水平明显升高(P0.05)。对照组大鼠训练第5天达到主动回避条件反射建立标准(主动回避反应率>65%),第7天达到消退标准(主动回避反应率0.05);与对照组比较,训练第5天时SCH组大鼠DG区Glu水平和fEPSP幅值均明显降低(P<0.05)。结论:大鼠海马DG区DA可通过激活D1受体促进主动回避学习,其作用可能与增加DG局部Glu水平和突触传递效应有关。

关键词：海马齿状回多巴胺D1受体主动回避学习长时程增强谷氨酸

L-NMMA对阿尔茨海默病模型大鼠海马齿状回区谷氨酸含量的影响

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中国老年学杂志 2018年第9期38卷 2197-2199页

作者：王玮瑶占素扬孙传博赵可金清华吉林医药学院病理生理学教研室延边大学医学院生理学与病理生理学教研室吉林延吉133002

目的观察一氧化氮(NO)合成酶抑制剂L-单甲基-精氨酸(L-NMMA)对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠的海马齿状回(DG)区的谷氨酸(Glu)含量,以及对其空间学习记忆能力的影响。方法 18只雌性SD大鼠随机分为sham组、AD组、L-NMMA组,每组6只。AD组和L-N... 详细信息

目的观察一氧化氮(NO)合成酶抑制剂L-单甲基-精氨酸(L-NMMA)对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠的海马齿状回(DG)区的谷氨酸(Glu)含量,以及对其空间学习记忆能力的影响。方法 18只雌性SD大鼠随机分为sham组、AD组、L-NMMA组,每组6只。AD组和L-NMMA组应用双侧卵巢摘除术结合腹腔注射D-半乳糖法制备AD模型,之后在每次Morris水迷宫(MWM)训练前向L-NMMA组腹腔注射L-NMMA。利用高效液相色谱分析法及脑部微量透析法,检测大鼠海马DG区Glu的含量,通过MWM检测大鼠的空间学习记忆能力。向大鼠DG区注射L-NMMA,观察其对AD大鼠的学习记忆行为及大鼠DG区Glu含量的影响。结果 3组大鼠Glu的基础含量差异无统计学意义(均P>0.05)。AD组逃避潜伏期显著延长,AD组穿越原平台区次数明显减少(均P<0.05);L-NMMA组与AD组比较穿越原站台区的次数明显增加,逃避潜伏期明显缩短,大鼠空间学习记忆能力明显改善(均P<0.05)。sham组和L-NMMA组Glu含量,在训练的第2、3天明显增加(均P<0.05),其后又回到训练前水平;AD组Glu含量在训练过程中均明显增加(均P<0.05)。结论 L-NMMA可通过恢复空间学习过程中的海马DG区Glu的反应,改善AD大鼠的空间学习记忆功能。

关键词： L-单甲基-精氨酸(L-NMMA) 齿状回区谷氨酸

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黄芪甲苷对缺血性心脏病保护作用的研究进展

中国老年学杂志 2022年第24期42卷 6168-6171页

作者：贾伟伟赵宇李清禹杨浩然任珊王淑秋林岩齐齐哈尔医学院病理生理学教研室黑龙江齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院基础医学院佳木斯大学病理生理学教研室

缺血性心脏病(IHD)又称冠状动脉粥样硬化性心脏病,简称冠心病,是一种以心脏血流量减少和心肌氧供不平衡为特征的临床表现综合征〔1〕。据统计,我国平均每年约有350万人死于心血管疾病(CVD),而IHD患者占比超过30%〔2〕。冠状动脉急性持... 详细信息

缺血性心脏病(IHD)又称冠状动脉粥样硬化性心脏病,简称冠心病,是一种以心脏血流量减少和心肌氧供不平衡为特征的临床表现综合征〔1〕。据统计,我国平均每年约有350万人死于心血管疾病(CVD),而IHD患者占比超过30%〔2〕。冠状动脉急性持续性缺血缺氧,引起心肌坏死称为急性心肌梗死(AMI),AMI常伴有心肌坏死、炎症、心肌细胞肥大、毛细血管丢失和心肌重塑,最终可导致心力衰竭〔3〕。

关键词：缺血性心脏病(IHD) 黄芪甲苷心肌细胞凋亡心肌肥厚

平滑肌钙激活钾通道表达转换参与糖尿病大鼠动脉粥样硬化发生

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南方医科大学学报 2014年第2期34卷 188-192页

作者：王燕赵丽梅苏兴利于玮邓秀玲西安交通大学医学院生理学与病理生理学系陕西西安710061 西安医学院生理学与病理生理学教研室陕西西安710021

目的观察糖尿病大鼠胸主动脉组织形态学及平滑肌钙激活钾通道(Ca2+-activated K+channels,KCa)表达的变化。方法采用高糖高脂饲料喂养SD大鼠8周和链脲佐菌素腹腔注射(30 mg/kg)建立实验性糖尿病大鼠模型,检测血液生化指标,进行胸主动脉H... 详细信息

目的观察糖尿病大鼠胸主动脉组织形态学及平滑肌钙激活钾通道(Ca2+-activated K+channels,KCa)表达的变化。方法采用高糖高脂饲料喂养SD大鼠8周和链脲佐菌素腹腔注射(30 mg/kg)建立实验性糖尿病大鼠模型,检测血液生化指标,进行胸主动脉HE、弹力纤维、Masson染色和抗平滑肌α-actin免疫组织化学染色,并采用逆转录聚合酶链反应和免疫印迹技术观察主动脉平滑肌KCa通道表达的变化。结果与年龄匹配的对照组大鼠相比,模型大鼠体质量下降,血糖、血脂、糖化血红蛋白和平均血压明显升高,并出现多食、多饮、多尿等典型糖尿病体征;主动脉组织学出现早期粥样硬化变化,表现为内皮受损不完整,表面有炎细胞粘附,内膜下平滑肌细胞排列紊乱,局部增生,弹力纤维中断、融合,胶原纤维增多等;主动脉中层平滑肌KCa1.1α亚单位和β亚单位表达降低,KCa3.1表达明显增加。结论平滑肌KCa表达转换参与糖尿病动脉粥样硬化的发生。

关键词：糖尿病血管平滑肌钙激活钾通道动脉粥样硬化