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基于微流控技术的外泌体分离分析及临床应用

色谱 2025年

作者：邢宇航任香善李东浩刘璐延边大学理学院化学系长白山天然药物研究教育部重点实验室延边大学医学院

外泌体是由细胞分泌的纳米级囊泡,其中富含脂质、蛋白质、核酸等多种生物功能分子。外泌体在生物体内的信息传递、疾病机理研究及诊断等方面扮演着类似“物联网、互联网”的关键角色。然而,受限于外泌体来源、尺寸、内含物以及功能的异... 详细信息

外泌体是由细胞分泌的纳米级囊泡,其中富含脂质、蛋白质、核酸等多种生物功能分子。外泌体在生物体内的信息传递、疾病机理研究及诊断等方面扮演着类似“物联网、互联网”的关键角色。然而,受限于外泌体来源、尺寸、内含物以及功能的异质性,外泌体分离分析仍然面临诸多挑战。传统外泌体分离分析方法包括超速离心、尺寸排阻和免疫共沉淀等,但这些方法普遍存在产量低、纯度低等问题限制了其进一步的临床应用。微流控技术因其微型化、高通量、自动化和集成化等特点为复杂生物样本的高效分离分析提供了强有力的工具。基于此,本文系统总结了基于微流控技术的外泌体分离和分析方法。首先,讨论了基于外泌体的尺寸、电荷、表面官能团等物化性质结合微流控技术分离外泌体及外泌体亚群的分离方法;其次,分析了基于微流控平台的外泌体检测手段,包括外泌体群体分析方法和单个外泌体分析方法;最后,探讨了微流控技术在外泌体临床应用中的前景,并在疾病诊断和治疗方面进行了展望。微流控技术有望突破传统研究中的分离分析瓶颈,为癌症等重大疾病的精准诊断及治疗提供新技术、新平台。

关键词：微流控外泌体分离分析疾病诊断及治疗

图们江流域部分市县蜱传病原体分子流行病学及蜱体内菌群调查

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畜牧兽医学报 2025年

作者：殷国璐于天王金琦徐颖刘喆高旭于龙政汲生威薛书江金东春延边大学农学院

为系统了解图们江流域蜱携带病原情况及蜱体内菌群，本试验对图们江流域血蜱属与革蜱属的蜱传病原体分子流行病学、蜱体内菌群进行调查。在图们江流域3个市县的5个采样点采集到森林革蜱，日本血蜱，嗜群血蜱。采用高通量测序技术对蜱携... 详细信息

为系统了解图们江流域蜱携带病原情况及蜱体内菌群，本试验对图们江流域血蜱属与革蜱属的蜱传病原体分子流行病学、蜱体内菌群进行调查。在图们江流域3个市县的5个采样点采集到森林革蜱，日本血蜱，嗜群血蜱。采用高通量测序技术对蜱携带细菌进行调查，对147只蜱携带细菌16S基因的V3-V4可变区进行二代测序分析。对442只蜱虫携带斑点热群立克次体、无形体和巴贝斯虫进行PCR检测。研究结果显示，高通量测序结果分析发现存在至少2种蜱传病原体，6种属内存在部分致病性菌种的潜在致病菌属。3个市县不同种属、不同性别之间的蜱携带的微生物菌群存在差异。在该地区蜱中检测出1种斑点热群立克次体：饶氏立克次氏体；无形体1种：山羊无形体；巴贝斯虫1种：驽巴贝斯虫。所获结果为该地区的蜱携带病原体、微生物菌群提供了基础数据，为蜱类和蜱传疾病的防控提供数据支持。

关键词：图们江流域蜱蜱传病原体蜱体内菌群调查

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遗传性局灶节段性肾小球硬化的治疗新进展

中国实用内科杂志 2025年第03期 204-209页

作者：叶心莹陈嘉欣谢静远上海交通大学医学院附属瑞金医院肾脏科上海交通大学医学院附属肾脏病研究所

局灶节段性肾小球硬化（FSGS）是一种特定的肾脏组织学损伤模式，其病理学特征为部分肾小球及其部分毛细血管袢发生病变。足细胞的损伤和丢失是FSGS进展的关键机制。遗传性FSGS通常由影响足细胞正常生理功能或肾小球基底膜结构的基因突... 详细信息

局灶节段性肾小球硬化（FSGS）是一种特定的肾脏组织学损伤模式，其病理学特征为部分肾小球及其部分毛细血管袢发生病变。足细胞的损伤和丢失是FSGS进展的关键机制。遗传性FSGS通常由影响足细胞正常生理功能或肾小球基底膜结构的基因突变引起。这些致病基因主要涉及与肾小球滤过屏障功能密切相关的基因，包括足细胞细胞骨架、离子通道及蛋白质合成等过程。临床表现主要为不同程度蛋白尿、进展性肾功能衰竭，部分患者可能合并血压升高等症状。尽管病因复杂且缺乏有效的治愈方法，但随着致病基因和发病机制研究的不断深入，特别是新治疗靶点的发现为该病的有效治疗带来希望。目前，药物治疗主要集中在免疫抑制和支持治疗，以减缓病情进展，但这些方法往往不能完全阻止疾病恶化。近年来，随着基因组学和分子生物学的进步，新的治疗策略不断涌现，如抑制内质网应激、修复线粒体功能、调节离子通道等新靶点的研究。此外，基因治疗被认为是根本性的治疗途径，研究者正在积极探索通过基因编辑技术纠正致病突变，以期为患者提供更有效的治疗选择。未来，随着科学技术的进步，针对遗传性FSGS的治疗有望取得突破性进展，提供更为精准和个体化的治疗方案。

关键词：遗传性局灶节段性肾小球硬化基因突变药物治疗基因治疗

超声联合免疫炎症指标构建列线图预测早期浸润性导管癌淋巴结转移

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中国超声医学杂志 2025年第03期 265-269页

作者：史娜王爽马兆丽李丽余承芳朴艺兰延边大学附属医院(延边医院)超声医学科

目的基于超声特征、病理资料、炎症指标构建列线图模型，探讨其预测早期浸润性导管癌(IDC)患者腋窝淋巴结转移(ALNM)的价值。方法回顾性分析268例经穿刺或术后病理证实为早期IDC患者的超声特征、病理资料及炎症指标，以7∶3比例随机... 详细信息

目的基于超声特征、病理资料、炎症指标构建列线图模型，探讨其预测早期浸润性导管癌(IDC)患者腋窝淋巴结转移(ALNM)的价值。方法回顾性分析268例经穿刺或术后病理证实为早期IDC患者的超声特征、病理资料及炎症指标，以7∶3比例随机分为训练集(187例)和验证集(81例)。根据有无ALNM进一步分为转移组与无转移组，对两组进行单因素及多因素Logistic回归分析后构建列线图预测模型并验证其临床应用价值。结果肿块超声特征(边缘不光整、成角、AdlerⅢ级)、病理资料(P53阳性、淋巴管血管侵犯)、炎症指标(中性粒细胞与淋巴细胞比值>2.792)是早期IDC患者ALNM的独立危险因素(P<0.05),以此构建列线图模型。训练集和验证集曲线下面积分别为0.936、0.870,校准曲线与理想曲线较为贴合，其区分度及校准度较高。临床决策曲线显示具有较好的临床价值。结论根据早期IDC患者原发灶超声特征、病理资料、炎症指标构建的列线图模型可有效预测ALNM。

关键词：乳腺肿瘤超声检查腋窝淋巴结列线图

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CircRNA调控畜禽脂肪沉积的研究进展

中国草食动物科学 2025年

作者：冉祥淼周海洋戢爽延边大学农学院

脂肪生长是动物生产中的重要环节，探寻脂肪生理活动对提升肉产品品质具有重要意义。环状核糖核酸（circular RNA，circRNA）是一种新发现的内源性非编码核糖核酸（ncRNA）。它具有独特的共价闭合环结构，由外显子和/或内含子组成，广... 详细信息

脂肪生长是动物生产中的重要环节，探寻脂肪生理活动对提升肉产品品质具有重要意义。环状核糖核酸（circular RNA，circRNA）是一种新发现的内源性非编码核糖核酸（ncRNA）。它具有独特的共价闭合环结构，由外显子和/或内含子组成，广泛存在于真核细胞中。随着测序技术和生物信息学技术的不断进步，circRNA在脂肪沉积领域中受到广泛关注，成为当前的热点研究之一。本文系统阐述了circRNA的生物学特性、调控机制及其在畜禽脂肪沉积中的作用，以期为深入理解脂肪生理活动及调控机制提供参考。

关键词：环状RNA 脂肪沉积肌内脂肪

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工程菌调控肿瘤相关巨噬细胞增强免疫治疗

中国临床药理学与治疗学 2025年第03期 297-312页

作者：王龙王宇辰郭奕霖吴锦慧南京大学医学院

肿瘤免疫抑制微环境限制了免疫治疗的疗效。肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）是肿瘤微环境中含量最丰富的免疫细胞，表现出免疫抑制性的M2型并促进肿瘤免疫抑制微环境的形成。调控TAMs为抗肿瘤表型能够增强免疫治疗并抑制肿瘤生长。近年来，基... 详细信息

肿瘤免疫抑制微环境限制了免疫治疗的疗效。肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）是肿瘤微环境中含量最丰富的免疫细胞，表现出免疫抑制性的M2型并促进肿瘤免疫抑制微环境的形成。调控TAMs为抗肿瘤表型能够增强免疫治疗并抑制肿瘤生长。近年来，基于工程菌的肿瘤免疫治疗手段备受关注。细菌不仅能够靶向肿瘤并优先定植于肿瘤区域，而且含有丰富的病原体相关分子模式（DAMPs），能够在肿瘤免疫抑制环境中有效激活TAMs，增强TAMs对肿瘤的杀伤和清除。随着合成生物学的迅速发展，工程菌成为一种有效的免疫治疗模式，越来越多的研究关注到工程菌调控TAMs的作用。本文首先介绍了靶向TAMs治疗和工程菌肿瘤治疗的临床研究，随后梳理了细菌调控TAMs的最新进展，从增强TAMs招募、提高TAMs吞噬能力和重塑TAMs表型三个方面详细概括总结了工程菌对TAMs的调控作用。工程菌调控TAMs提供了一种有前途的治疗策略，是肿瘤免疫治疗的新方向。

关键词：工程菌肿瘤相关巨噬细胞免疫治疗肿瘤微环境

miR-15b-5p通过USP9X影响PIK3CA/AKT1通路缓解哮喘气道炎症

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细胞与分子免疫学杂志 2025年

作者：周宇洋王知广朴艺花韩雪宋艺兰延光海朴红梅延边大学附属医院呼吸内科延边大学附属医院重症医学科延边大学解剖学教研室

目的研究miR-15b-5p是否能通过负调控泛素特异性肽酶 9X（USP9X）下调磷脂酰肌醇 4 ，5-二磷酸 3-激酶催化亚基 α/AKT 丝氨酸/苏氨酸激酶 1（PIK3CA/AKT1）通路的表达，从而缓解哮喘气道炎症。方法我们通过在线数据库（miRWalk）预测... 详细信息

目的研究miR-15b-5p是否能通过负调控泛素特异性肽酶 9X（USP9X）下调磷脂酰肌醇 4 ，5-二磷酸 3-激酶催化亚基 α/AKT 丝氨酸/苏氨酸激酶 1（PIK3CA/AKT1）通路的表达，从而缓解哮喘气道炎症。方法我们通过在线数据库（miRWalk）预测USP9X可能是miR-15b-5p的直接靶点，并进行了荧光素酶报告基因检测验证。通过免疫共沉淀（CO-IP）验证了USP9X与PIK3CA之间能否直接结合以及USP9X及其小分子抑制剂WP1130在PIK3CA的去泛素化中作用。取C57小鼠，随机分为Control、OVA组、OVA联合NC组以及miR-15b-5p agomir治疗组，每组10只。BEAS-2B细胞用白细胞介素13（IL-13）诱导，并用miRNA-15b-5p mimic治疗。进行了HE、Masson、PAS、免疫组织化学、免疫荧光染色及流式细胞术、Western blot、实时定量PCR。结果发现给予miR-15b-5p agomir和mimic后能够减少支气管周围炎性细胞，改善气道炎症，并且miR-15b-5p能靶向负调控USP9X。USP9X能够与PIK3CA直接结合，以蛋白酶体依赖性方式调节PIK3CA水平，并且USP9X对K29连接的PIK3CA蛋白起到去泛素化作用，下调USP9X会使PIK3CA的泛素化水平增加。USP9X的小分子抑制剂WP1130与敲低USP9X作用一致，均能够增加PIK3CA的泛素化水平，使PIK3CA的蛋白水平降低。结论 miR-15b-5p/USP9X/PIK3CA/AKT1信号通路可能为哮喘提供潜在的治疗靶点。

关键词： miR-15b-5p USP9X PIK3CA AKT1 泛素化哮喘

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病毒感染诱导细胞衰老的机制及意义

浙江大学学报(医学版) 2025年第01期54卷 70-80页

作者：常允闯吴辛娜邓伶俐王三应毛根祥湖北民族大学生物与食品工程学院浙江大学医学院浙江医院浙江省老年医学研究所全省老年医学重点实验室

病毒诱导的衰老（VIS）是一种重要的生物学现象，对机体产生多方面影响，包括免疫系统功能下降、衰老相关疾病的发生发展以及机体的加速老化。多种常见RNA病毒（严重急性呼吸综合征冠状病毒2型）、DNA病毒（疱疹病毒、乙型肝炎病毒等）... 详细信息

病毒诱导的衰老（VIS）是一种重要的生物学现象，对机体产生多方面影响，包括免疫系统功能下降、衰老相关疾病的发生发展以及机体的加速老化。多种常见RNA病毒（严重急性呼吸综合征冠状病毒2型）、DNA病毒（疱疹病毒、乙型肝炎病毒等）以及蛋白质病毒（朊病毒）均能诱导宿主细胞发生VIS，主要涉及cGAS-STING信号通路的异常激活及DNA损伤应答等机制，也可能与细胞内相分离引起的整合应激反应相关。研究发现，病毒感染与细胞衰老之间的作用是相互的。细胞衰老是宿主细胞限制病毒复制和传播的一种防御机制，而一些病毒也会利用细胞衰老来增强其感染和复制。目前，基于病毒感染与细胞衰老相关性机制的治疗靶点和药物的研究仍缺乏。虽然清除衰老细胞的抗衰老药物可能有助于治疗病毒感染和衰老相关疾病，但仍需要进一步临床试验证明。理解VIS的机制对于研发针对性的病毒感染治疗策略以及促进健康老龄化具有重要意义。本文旨在揭示病毒感染与细胞衰老之间的联系，为预防和治疗相关疾病提供新视角，并为干预机体老化进程开辟新途径。

关键词：细胞衰老病毒感染环鸟苷酸-腺苷酸合成酶-干扰素基因刺激因子 DNA损伤应答综述

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低浓度鱼藤素抑制活化T细胞增殖作用研究

中国药学杂志 2025年

作者：赵克天敬林崔文杰张佳庆伍佳丽何晶晶赖翼刘阳罗兴燕成都医学院科研实验中心成都医学院药学院广西大学医学院特色生物医药重点实验室成都医学院临床医学院成都医学院检验医学院

目的探究低浓度鱼藤素抑制活化T细胞增殖的作用特点。方法 Ficoll-Hypaque密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞，免疫磁珠法纯化人T细胞，抗人CD3/CD28抗体活化T细胞。流式细胞术测定T细胞存活率、增殖指数、凋亡进展、CD25表达水平... 详细信息

目的探究低浓度鱼藤素抑制活化T细胞增殖的作用特点。方法 Ficoll-Hypaque密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞，免疫磁珠法纯化人T细胞，抗人CD3/CD28抗体活化T细胞。流式细胞术测定T细胞存活率、增殖指数、凋亡进展、CD25表达水平及分裂期比例；ELISA检测细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IL-17及IFN-γ的分泌水平。结果低浓度鱼藤素抑制抗人CD3/CD28抗体活化的T细胞增殖，IC50为（73±12） nmol·L-1，400 nmol·L-1时无细胞毒性。低浓度鱼藤素不影响活化的T细胞表达CD25和分泌IL-2，但提高G0/G1期细胞比例。低浓度鱼藤素促进活化T细胞分泌抗炎细胞因子IL-4，并抑制促炎细胞因子IL-6、IL-17及IFN-γ的产生。结论低浓度鱼藤素显著抑制T细胞增殖于G0/G1期，并有效抑制促炎细胞因子分泌，提示鱼藤素在自身免疫病的治疗中具有潜在作用。

关键词：鱼藤素 T细胞增殖抑制低浓度抗炎作用细胞因子