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柴胡皂苷D诱导内质网应激增强胶质瘤细胞替莫唑胺敏感性的机制

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中国药理学通报 2024年第6期40卷 1105-1114页

作者：刘桂梅郑蕊刘晓斌刘永仙王亚萍张玉富张静靳小燕刘雨思延安大学基础医学院陕西延安716000 延安大学附属医院肝胆外科陕西延安716000

目的探讨柴胡皂苷D(saikosaponin D,SSD)联合替莫唑胺(temozolomide,TMZ)对神经胶质瘤细胞(glioblastoma,GBM)的协同增敏作用及分子机制。方法CCK-8法结合HE染色分析RG-2、U251、LN-4283种GBM细胞系对SSD、TMZ敏感性差异并筛选最佳配伍浓度。通过克隆形成实验、HE染色结合Hoechst荧光染色检测联合给药对GBM细胞增殖影响。单丹磺酰胺(monodansylcadaverine,MDC)染色观察GBM细胞自噬小体形成。Western blot结合ICC法检测内质网应激相关因子及凋亡、自噬蛋白表达与分布变化。结果GBM细胞对TMZ敏感性顺序为RG-2>U251>LN-428。SSD联合TMZ给药结果显示出对GBM细胞系增殖的协同抑制作用,并经细胞克隆形成实验证实。与TMZ组相比,Hoechst荧光染色显示联合给药组细胞核亮染数目明显增加。MDC荧光染色发现SSD/TMZ组胞质出现致密浓染绿色颗粒,且较TMZ组相比明显增多。Western blot结果显示,较TMZ组相比,SSD/TMZ组内质网应激标志蛋白GRP78、CHOP、p-PERK、ATF6表达增高(P<0.05);凋亡蛋白caspase-12、caspase-9、caspase-3、cleaved caspase-3、Bax及自噬蛋白LC3、Beclin-1表达均明显增高(P<0.05)并经ICC实验验证。结论SSD可协同TMZ抑制GBM细胞增殖且诱导其发生凋亡与自噬,通过激活内质网应激途径提高GBM细胞对TMZ化疗敏感性。

关键词：柴胡皂苷D 替莫唑胺神经胶质瘤增殖凋亡自噬内质网应激

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右侧星状神经节阻滞对腹腔镜胆囊切除术后肩痛的影响

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临床麻醉学杂志 2024年第2期40卷 150-154页

作者：李晗呼远白智远李芝燕莫一凡李若瑾张二飞延安大学附属医院麻醉科 716000 延安大学附属医院肝胆胰外科 716000 延安大学附属医院东关分院重症医学科

目的探讨右侧星状神经节阻滞(SGB)对腹腔镜胆囊切除术(LC)患者术后肩痛的影响。方法选择2022年4—8月行LC患者104例,男32例,女72例,年龄18~64岁,ASAⅠ或Ⅱ级。将患者随机分为两组:SGB组(S组,n=51)和对照组(C组,n=53)。气管插管后即刻,S... 详细信息

目的探讨右侧星状神经节阻滞(SGB)对腹腔镜胆囊切除术(LC)患者术后肩痛的影响。方法选择2022年4—8月行LC患者104例,男32例,女72例,年龄18~64岁,ASAⅠ或Ⅱ级。将患者随机分为两组:SGB组(S组,n=51)和对照组(C组,n=53)。气管插管后即刻,S组使用0.2%罗哌卡因4 ml进行超声引导下的右侧SGB;C组在相同部位注射生理盐水4 ml。记录术后48 h内腹腔镜术后肩痛(PLSP)例数和PLSP持续时间;记录术毕即刻(T_(1))、术后2 h(T_(2))、6 h(T_(3))、12 h(T_(4))、24 h(T_(5))、48 h(T_(6))PLSP的VAS疼痛评分,评估PLSP程度;记录PCIA泵有效按压次数、补救镇痛例数;记录恶心、呕吐、腹胀等不良反应的发生情况。结果S组PLSP发生率、PLSP持续时间>10 h比例明显低于C组(P<0.05)。T_(3)—T_(5)时S组PLSP程度明显轻于C组(P<0.05)。S组PCIA泵有效按压次数明显少于C组,补救镇痛率明显低于C组(P<0.05)。S组恶心发生率明显低于C组(P<0.05)。结论右侧星状神经节阻滞可以降低LC患者PLSP发生率,缓解PLSP疼痛程度,降低不良反应发生率。

关键词：右侧星状神经节阻滞腹腔镜胆囊切除术术后肩痛不良反应

糖尿病肾脏疾病患者可溶性α-Klotho水平与持续血糖监测中血糖控制相关性的研究

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中国糖尿病杂志 2024年第5期32卷 343-346页

作者：李林娟郑俊晨张梅王瑞杨宁延安大学附属医院全科医学科 716000 延安大学附属医院心血管病中心 716000 延安大学附属医院呼吸内科 716000

目的探讨DKD患者可溶性α-Klotho(SKL)水平与持续血糖监测(CGMS)中血糖控制的相关性。方法选取2020年5月至2022年5月于延安大学附属医院全科医学科治疗的T2DM患者140例,根据UACR水平分为单纯T2DM组(UACR<30 mg/g,n=60)和合并DKD组(DKD... 详细信息

目的探讨DKD患者可溶性α-Klotho(SKL)水平与持续血糖监测(CGMS)中血糖控制的相关性。方法选取2020年5月至2022年5月于延安大学附属医院全科医学科治疗的T2DM患者140例,根据UACR水平分为单纯T2DM组(UACR<30 mg/g,n=60)和合并DKD组(DKD,UACR≥30 mg/g,n=80),同期选取45名体检健康者为正常对照(NC)组。结果 DKD组SKL低于T2DM、NC组(P<0.05)。Spearman相关分析显示,SKL与eGRF及TIR呈正相关(P<0.01),与FPG、HbA_(1)c、血肌酐、UACR、胱抑素C、β2微球蛋白、平均血糖、血糖高于目标范围时间及血糖管理指标(GMI)呈负相关(P<0.01)。多元线性回归分析显示,HbA_(1)c、GMI是SKL的影响因素。结论 DKD患者SKL水平与HbA_(1)c及GMI相关。

关键词：糖尿病肾脏疾病可溶性α-Klotho 持续血糖监测糖尿病,2型

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HIF-1α在妇产领域研究进展

临床医学进展 2024年第4期14卷 1602-1607页

作者：师烁徐萌李红梅延安大学附属医院产科陕西延安

氧气参与机体各种代谢活动。缺氧可影响机体各种生理、病理活动发生。HIF-1α是缺氧条件下的关键调节因子,通过调节相关基因、蛋白的表达,参与多种机体活动。本文就HIF-1α在妇产科相关疾病中的研究进展进行综述,旨在为基于HIF-1α的妇... 详细信息

氧气参与机体各种代谢活动。缺氧可影响机体各种生理、病理活动发生。HIF-1α是缺氧条件下的关键调节因子,通过调节相关基因、蛋白的表达,参与多种机体活动。本文就HIF-1α在妇产科相关疾病中的研究进展进行综述,旨在为基于HIF-1α的妇产科疾病提供研究思路。

关键词： HIF-1α 缺氧妇产科学

人脐带间充质干细胞运载呼肠孤病毒对人慢性髓系白血病K562细胞溶瘤作用的研究

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中国病理生理杂志 2024年第6期40卷 1043-1051页

作者：刘雨思贺晶杜娟靳小燕张静张玉富延安大学基础医学院陕西延安716000 延安大学附属医院陕西延安716000 西安医学院第二附属医院陕西西安710038 陕西干细胞工程有限公司陕西西安710075

目的:探讨人脐带间充质干细胞(hUMSCs)运载3型呼肠孤病毒(Reo3)对人慢性髓系白血病K562细胞的溶瘤效应。方法:流式细胞术检测hUMSCs和K562细胞表面Reo3易感受体——连接黏附分子A(JAM-A)表达情况,电镜观察Reo3感染hUMSCs 72 h后胞内病... 详细信息

目的:探讨人脐带间充质干细胞(hUMSCs)运载3型呼肠孤病毒(Reo3)对人慢性髓系白血病K562细胞的溶瘤效应。方法:流式细胞术检测hUMSCs和K562细胞表面Reo3易感受体——连接黏附分子A(JAM-A)表达情况,电镜观察Reo3感染hUMSCs 72 h后胞内病毒包涵体分布。将不同(0、1、2和3)感染复数(MOI)的Reo3感染hUMSCs 24、48、72、96和120 h后利用CCK-8法筛选最适MOI。选择最适滴度的Reo3感染hUMSCs 24、48、72、96和120 h后收集上清液,利用小鼠成纤维细胞系L929结合半数组织培养感染剂量(TCID50)法测定各组上清液中Reo3病毒滴度以确定最适感染时间。将K562细胞分为对照组、hUMSCs组、Reo3组和hUMSCs-Reo3组,hUMSCs组和hUMSCs-Reo3组设置hUMSCs与K562细胞作用的低、中、高比例(5∶1、10∶1和20∶1)。CCK-8法分析hUMSCs-Reo3与K562细胞共培养24、48、72 h后K562细胞活力的变化。流式细胞术评估细胞凋亡。利用L929细胞确定抗Reo3单克隆抗体的半数效应浓度(EC50);验证在体外抗体存在条件下hUMSCs-Reo3对K562细胞溶瘤作用的变化。Western blot检测运载体作用于K562细胞后胞内Bcl-2、Bax、survivin和cleaved caspase-3蛋白水平。构建K562细胞的BALB/c裸鼠皮下荷瘤模型(每组6只),分析hUMSCs-Reo3在体内对K562细胞的抑瘤效果。结果:hUMSCs和K562细胞表面JAM-A分子表达量分别为11.0%和99.0%。电镜显示Reo3感染hUMSCs 72 h后胞内出现大量病毒包涵体。在120 h范围内,与未感染组相比,MOI=1的Reo3对hUMSCs活力无显著影响,故最佳MOI为1;TCID50结果显示,MOI=1的Reo3感染hUMSCs 48 h后细胞裂解液中病毒滴度最高,故最适感染时间为48 h。hUMSCs-Reo3作用24、48和72 h后K562细胞活力呈现剂量与时间依赖性抑制。抗Reo3单克隆抗体的EC50为1∶34;在体外不同浓度(1∶34、1∶300和1∶600)抗体存在条件下,hUMSCs仍能运载Reo3抑制K562细胞活力并诱导凋亡发生。与对照组相比,hUMSCs-Reo3作用48 h后K562细胞中Bcl-2和survivin表达水平显著下调(P<0.05),Bax和cleaved caspase-3表达水平显著上调(P<0.05或P<0.01)。在BALB/c裸鼠荷瘤模型中,荷瘤体积测定、肿瘤组织和主要脏器病理学分析及小动物活体成像仪检测组织蛋白酶B/L活性结果表明,运载体在体内对K562细胞具有溶瘤效应而对正常组织无不良影响。结论:hUMSCs可有效运载Reo3,该运载体系在体内、外实验中能够释放足量Reo3抑制K562细胞恶性增殖并促进细胞凋亡,从而发挥溶瘤效应。

关键词：人脐带间充质干细胞呼肠孤病毒慢性髓系白血病溶瘤作用细胞凋亡荷瘤模型

hUMSCs外分泌上清联合替莫唑胺在不同胶质瘤细胞系中的协同增敏作用

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中国病理生理杂志 2024年第3期40卷 385-394页

作者：刘雨思王明明张玉富靳小燕贺晶史海燕陈美霓张静延安大学基础医学院陕西延安716000 延安大学附属医院陕西延安716000 西安医学院第二附属医院陕西西安710038 陕西干细胞工程有限公司陕西西安710075

目的:探讨人脐带间充质干细胞外分泌上清(hUMSC-CM)联合替莫唑胺(TMZ)在不同胶质瘤细胞系中的协同增敏作用及潜在机制。方法:采用2种血清剥夺法(24和48 h分批次撤血清法)收集hUMSC-CM并制备成冻干粉,设置5种浓度(0、1、3、6和9 g/L)处... 详细信息

目的:探讨人脐带间充质干细胞外分泌上清(hUMSC-CM)联合替莫唑胺(TMZ)在不同胶质瘤细胞系中的协同增敏作用及潜在机制。方法:采用2种血清剥夺法(24和48 h分批次撤血清法)收集hUMSC-CM并制备成冻干粉,设置5种浓度(0、1、3、6和9 g/L)处理大鼠恶性胶质瘤细胞系RG-2、人星形细胞瘤细胞系U251和人胶质母细胞瘤细胞系LN-428。通过CCK-8实验检测hUMSC-CM作用于胶质瘤细胞24、48和72 h后的肿瘤抑制可行性及敏感度。HE染色结合CCK-8法确定6种浓度(0、25、50、100、200和400µmol/L)的TMZ作用于胶质瘤细胞48 h后化疗敏感性的差异。筛选出低、高2种浓度(3和9 g/L)的hUMSC-CM和低、中、高3种浓度(50、100和200µmol/L)的TMZ配伍,作用于胶质瘤细胞后检测细胞活力和病理形态学变化。TUNEL染色检测细胞凋亡;流式细胞术分析细胞周期变化;Western blot检测凋亡相关蛋白cleaved caspase-3、cleaved caspase-8和cleaved PARP1,以及自噬相关蛋白beclin-1和LC3的表达变化,探讨hUMSC-CM与TMZ体外联合给药协同增敏的作用机制。结果:3种胶质瘤细胞系对hUMSC-CM和TMZ的敏感度为RG-2>U251>LN-428。hUMSC-CM(3和9 g/L)与TMZ(50、100和200µmol/L)配伍给药对胶质瘤细胞生长的抑制作用比单独给药组显著增强(P<0.05),且随着配伍药物剂量的增加而增强。其中,9 g/L hUMSC-CM(C9)与50µmol/L TMZ(T50)配伍可有效抑制胶质瘤细胞生长。与C9或T50组相比,CCK-8实验显示C9+T50组细胞活力显著下降(P<0.05),HE染色和TUNEL检测结果显示C9+T50组细胞形态变化明显,出现典型凋亡形态学特征,流式细胞术结果显示C9+T50可诱导胶质瘤细胞周期发生阻滞,Western blot结果显示C9+T50组细胞中cleaved caspase-3、cleaved caspase-8、cleaved PARP1、beclin-1和LC3-II/LC3-I水平显著升高(P<0.01)。结论:(1)hUMSC-CM与TMZ配伍给药对胶质瘤细胞的抑制作用具有广谱性,且两者之间存在增敏作用,在不同细胞系中呈现不同的增敏效果。(2)hUMSC-CM提高胶质瘤细胞对TMZ敏感度的机制可能与调节caspase-8/caspase-3/PARP1信号通路及自噬通路、诱导胶质瘤细胞发生凋亡和自噬有关。

关键词：脐带间充质干细胞替莫唑胺胶质瘤细胞凋亡自噬 caspase-8/caspase-3/PARP1信号通路

同轴针技术在超声引导下经会阴前列腺穿刺活检中的应用价值

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中国男科学杂志 2024年第3期38卷 61-65页

作者：贾海云周晓莹王胜利赵龙王宇佳王佳强延安大学附属医院超声医学科

目的比较超声引导下经直肠穿刺与基于同轴针技术的经会阴穿刺对前列腺癌的检出率与术后并发症的发生率，探讨同轴针技术在超声引导下经会阴前列腺穿刺活检中的应用价值。方法选取在我院超声医学科接受超声引导下前列腺穿刺活检的患者... 详细信息

目的比较超声引导下经直肠穿刺与基于同轴针技术的经会阴穿刺对前列腺癌的检出率与术后并发症的发生率，探讨同轴针技术在超声引导下经会阴前列腺穿刺活检中的应用价值。方法选取在我院超声医学科接受超声引导下前列腺穿刺活检的患者183例，根据穿刺途径将患者分为经直肠组102例和经会阴组81例。比较两组总前列腺癌检出率、术后并发症发生率，以及在不同年龄、TPSA、PV亚组之间前列腺癌检出率的差异。结果经会阴组前列腺癌及临床显著性前列腺癌检出率与经直肠组相比差异无统计学意义，且在不同年龄、TPSA及PV亚组间，经会阴组与经直肠组前列腺癌检出率差异也无统计学意义(P>0.05)。经直肠组血便、穿刺部位疼痛及术后发热的发生率分别为10.8%、12.7%、8.8%,均高于经会阴组，差异有统计学意义(P0.05)。结论同轴针技术应用于超声引导下经会阴前列腺穿刺活检不仅可以保证穿刺的有效性，而且能够减少对患者的创伤及穿刺术后血便、疼痛及感染的发生率，值得在临床推广。

关键词：同轴针技术前列腺活组织检查,针吸

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PSMD2在肿瘤中的研究进展

医学诊断 2024年第1期14卷 142-148页

作者：余远离刘伟利钱延玲延安大学附属医院妇产科陕西延安

泛素蛋白酶体途径(Alterations in the ubiquitin-proteasome system UPS),是由泛素介导的一种高度复杂的蛋白降解系统,普遍参与各种生物学功能,例如细胞生长,细胞周期进程,DNA转录、损伤、修复和信号转导及自噬,因此在体内各种调节蛋... 详细信息

泛素蛋白酶体途径(Alterations in the ubiquitin-proteasome system UPS),是由泛素介导的一种高度复杂的蛋白降解系统,普遍参与各种生物学功能,例如细胞生长,细胞周期进程,DNA转录、损伤、修复和信号转导及自噬,因此在体内各种调节蛋白的降解和整体细胞的稳态中发挥着至关重要的作用。UPS的表达功能异常或改变可能导致蛋白质的积累,与人类多种疾病相关,包括恶性肿瘤、血液系统疾病等。其中泛素化是泛素蛋白酶体系统途径的关键步骤,PSMD2 (proteasome 26S subunit, non-ATPase 14)位于蛋白酶体26S亚基,是一种非ATP酶组分,是泛素–蛋白酶体的重要组成部分之一。近年来,其在疾病发生发展中的作用越来越受到关注,本文将对PSMD2的结构、作用机制及在不同疾病中的研究进展进行综述。

关键词：泛素–蛋白酶体 PSMD2肿瘤

“互联网+”延续性护理模式在产妇产后康复中应用观察

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贵州医药 2024年第6期48卷 1003-1005页

作者：于丽丽王菊任娟西安大兴医院产科陕西西安710000 延安大学附属医院产科三病区陕西延安716000

目的探讨“互联网+”延续性护理模式在产妇产后康复中的应用。方法将116例足月生产产妇随机分为对照组(常规护理与出院指导)和观察组(“互联网+”延续性护理)各58例。应用简明心境量表(POMS-SF)评价两组产妇护理前后不良情绪变化,对比... 详细信息

目的探讨“互联网+”延续性护理模式在产妇产后康复中的应用。方法将116例足月生产产妇随机分为对照组(常规护理与出院指导)和观察组(“互联网+”延续性护理)各58例。应用简明心境量表(POMS-SF)评价两组产妇护理前后不良情绪变化,对比两组产妇护理前后的睡眠质量情况,并对比两组产妇产后恢复情况及并发症发生率。结果护理后,观察组POMS-SF的各项评分均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);护理后,两组睡眠质量和PSQI总评分均降低,且观察组更低,差异有统计学意义(P<0.05);观察组产妇产后恢复良好率明显高于对照组,并发症发生率明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论“互联网+”延续性护理模式可减轻产妇生产后的不良情绪,提升其睡眠质量,进而减轻产后并发症发生率,促进其产后恢复,值得临床应用推广。

关键词： “互联网+” 延续性护理产后康复不良情绪睡眠质量并发症