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感染性休克患者血气指标联合APACHE Ⅱ评分对预后的价值研究

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感染性休克患者血气指标联合APACHE Ⅱ评分对预后的价值研究

作者：郗宗铭延安大学

学位级别：硕士

目的通过分析感染性休克患者血气指标及APACHE Ⅱ评分的相关指标,观察血气等相关指标及APACHE Ⅱ评分对感染性休克患者预后的意义。方法本研究为回顾性临床研究,研究对象选取自2018年01月01日-2023年12月31日就诊于西安市中心医院重症... 详细信息

目的通过分析感染性休克患者血气指标及APACHE Ⅱ评分的相关指标,观察血气等相关指标及APACHE Ⅱ评分对感染性休克患者预后的意义。方法本研究为回顾性临床研究,研究对象选取自2018年01月01日-2023年12月31日就诊于西安市中心医院重症医学科（Intensive care unit,ICU）且诊断为感染性休克、脓毒性休克的患者。纳入标准:（1）符合感染性休克的诊断标准[10];（2）年龄>18周岁;（3）入院时及6小时内均监测患者生命体征及血常规、血生化、血气等相关指标。排除标准:（1）妊娠状态或哺乳期女性患者;（2）处于疾病不可逆终末状态或入院后24小时内死亡者;（3）家属放弃监测与治疗或24小时内自动出院患者;（4）24小时内行手术干预治疗患者;（5）一般资料及血气等相关指标监测资料不全致无法完成统计分析患者。此次回顾性研究的观察时间从患者入住ICU开始,持续至患者好转出院或者死亡为止。通过检索病历数据库,获取所有满足纳入和排除标准的研究对象的基本临床信息,记录入科24小时的SOFA评分、APACHE Ⅱ评分及患者的预后情况（出院或死亡）。同时将研究对象分为生存组与死亡组,进行统计学分析,以P小于0.05表示差异具有统计学意义,并将有统计学意义的某些相关因素进行二元的Logistic分析,找出危险因素,应用ROC曲线,评价相关指标判断预后的效能。结果:1.研究对象的一般资料本研究共纳入96个研究对象,其中男性59例,占61.5%,女性37例,占38.5%。根据患者预后情况分为生存组及死亡组。其中生存组57例,占59.4%,死亡组39例,占40.6%。分析患者一般临床资料,其中患者年龄、性别、入院时体温、心率、呼吸、收缩压、舒张压、平均动脉压、末梢氧饱和度等指标在生存组与死亡组之间差异没有统计学意义（P>0.05）。而SOFA评分、APACHE Ⅱ评分在两组间差异具有统计学意义（P系感染,共11例,占12%,第三位是皮肤感染,共8例,占8%,而其他感染部位共18例,占18%。*** Ⅱ评分、入院时乳酸值、乳酸清除率与预后对APACHE Ⅱ评分、入院时乳酸值、乳酸清除率做单因素回归分析,APACHE Ⅱ评分、入院时乳酸值、乳酸清除率为感染性休克的危险因素。根据ROC曲线分析,APACHE Ⅱ评分的AUC面积为0.725,敏感性为79.5%,特异性为68.4%。入院时乳酸值的AUC面积为0.739,敏感性为74.4%,特异性63.2%。两者联合应用的AUC面积为0.85,敏感度为79.5%,特异度为73.7%。结论:***评分、APACHE Ⅱ评分可以在一定程度上预测感染性休克的预后情况。*** Ⅱ评分、入院时乳酸值、乳酸清除率为感染性休克的危险因素,可以提示感染性休克患者的预后情况。*** Ⅱ评分与入院时乳酸值两者联合监测的准确性高于单一监测的任意指标。

关键词：感染性休克乳酸 APACHE Ⅱ评分预后

清代新疆军事驻防的火器装备研究（1759-1884）

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清代新疆军事驻防的火器装备研究（1759-1884）

作者：李兆鑫延安大学

学位级别：硕士

火器在中国古代有久远的发展历史,至16世纪以后,其在欧亚大陆的传播随处可见。到了17世纪下半叶至18世纪,随着清朝完成大一统的进程需要,清军逐步将火器融入到自己的军事组织体系中,这对清前期的国家结构和效能产生了关键性的作用。尤... 详细信息

火器在中国古代有久远的发展历史,至16世纪以后,其在欧亚大陆的传播随处可见。到了17世纪下半叶至18世纪,随着清朝完成大一统的进程需要,清军逐步将火器融入到自己的军事组织体系中,这对清前期的国家结构和效能产生了关键性的作用。尤其是在乾隆二十(1755)至二十四年(1759)平定准噶尔、回部期间,清军的火器装备数量、种类不断增多,战斗性能持续提升,保障了清朝统一新疆的历史进程。随着清朝大一统疆域的稳固,火器在军事上的应用,也促进了清朝军队编制装备的优化,尤其是火器操作日益专门化,炮位、鸟枪成为独立的编队。在清朝治理新疆的150多年间,火器在驻防军队日常保卫、平定叛乱、抵御入侵时的实战表现,已经成为能否稳固边疆安定的关键因素之一。至19世纪中晚期,在内地各省火器发展缓慢的情况下,新疆为平定和卓叛乱所涌现出的抬枪、抬炮以及战阵,进一步推动了清代军事技术的革新与发展。因此,从清朝军事文化、驻防体系、军事技术发展层面去了解与认识新疆驻防军队的火器装备,将新疆火药、火枪、火炮的发展以及骑射与火器的战术组合置于具体的战例之中考察。与此同时,对清代新疆驻防军队中所装备的弓箭、刀斧、长矛与火枪、火炮的比例与效能展开比较,这对于认识清朝火器发展的趋势以及清王朝西北边疆安全治理提供了鲜活的参照系。

关键词：清代新疆火器边疆安全

TSPAN6在胶质瘤中作为诊断预后标志物及其实验验证的研究

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TSPAN6在胶质瘤中作为诊断预后标志物及其实验验证的研究

作者：撒陇琦延安大学

学位级别：硕士

目的:在大脑和脊髓中,胶质瘤是比较常见的原发恶性肿瘤。在我国,胶质瘤的每年发病率约为每10万人中有3-6人患病,5年致死率在所有恶性肿瘤中仅次胰腺肿瘤和肝癌。目前,临床中的治疗方法主要以手术加放化疗为主,但是胶质瘤恶性程度较高以... 详细信息

目的:在大脑和脊髓中,胶质瘤是比较常见的原发恶性肿瘤。在我国,胶质瘤的每年发病率约为每10万人中有3-6人患病,5年致死率在所有恶性肿瘤中仅次胰腺肿瘤和肝癌。目前,临床中的治疗方法主要以手术加放化疗为主,但是胶质瘤恶性程度较高以及位置特殊,导致患者的预后较差。四跨膜蛋白6(Tetraspanin 6,TSPAN6)是四跨膜蛋白家族成员之一,参与调节细胞发育、激活、生长和运动等。近几年的研究指出,TSPAN蛋白家族部分成员在多数肿瘤瘤体中表达出现异常,并且参与了肿瘤的发生与进展,同时也对患者的预后产生了影响。然而,在胶质瘤中TSPAN6是否存在表达异常且与临床特征和患者预后相关,及其是否影响肿瘤微环境,仍需要进一步研究。本研究的目的是观察TSPAN6在胶质瘤肿瘤组织中和正常组织中的表达差异,探究在胶质瘤临床病理特征中TSPAN6的表达分布情况,分析TSPAN6对胶质瘤患者预后的影响;并利用生物信息学方法研究TSPAN6在胶质瘤中发挥的功能和作用以及与免疫微环境之间的关系;进一步通过体外实验敲低胶质瘤细胞系中的TSPAN6,观察TSPAN6对胶质瘤细胞系增值、迁移和凋亡的影响以及与巨噬细胞之间的关系。方法:1.基于TCGA、GETx、GEO和CPTAC数据,比较胶质瘤和正常组织之间TSPAN6在m RNA和蛋白质水平的表达差异;并观察TSPAN6与胶质瘤临床病理特征和预后的关系。2.基于TCGA数据,根据TSPAN6表达高低的中位数,将胶质瘤列队分为高、低表达两组,筛选出差异表达基因,利用差异表达基因进行GO、KEGG和GSEA分析,探索TSPAN6在胶质瘤中的分子功能以及可能参与的信号通路。3.利用sh RNA原理构建TSPAN6敲低的胶质瘤细胞系,通过CCK-8实验、平板克隆实验、流式实验、transwell实验和划痕实验,观察TSPAN6对胶质瘤细胞系增殖、凋亡、细胞周期和迁移的影响。4.利用Estimate算计评估胶质瘤肿瘤纯度,ss GSEA算法和spearman相关性分析研究胶质瘤中TSPAN6与免疫细胞的浸润情况和相关性。构建胶质瘤细胞系和THP-1共培养系统,通过transwell试验和流式实验观察TSPAN6对THP-1细胞的募集能力以及极性的影响。最后利用TIDE算法预测TSPAN6在免疫检查点阻断中的反应。结果:1.相比正常脑组织,TSPAN6在胶质瘤中高表达,TSPAN6高表达与临床病理特性呈正相关,且TSPAN6高表达组患者预后较差,诊断性ROC显示AUC值为0.987。GO、KEGG和GSEA分析显示TSPAN6可能参与调控细胞周期。2.构建TSPAN6敲低细胞系,相比对照组,TSPAN6敲低后胶质瘤细胞系增殖能力降低,细胞周期阻滞在G2/M期,并且的迁移能力降低,然而凋亡并没有明显变化。***分析显示TSPAN6高表达组有较高的免疫评分。ss GSEA分析显示TSPAN6高表达组的巨噬细胞和中性粒细胞富集得分较高,而CD8 T细胞富集得分较低。spearman相关性分析显示TSPAN6的表达与巨噬细胞和中性粒细胞的浸润呈正相关,与CD8 T细胞的浸润呈负相关。在胶质瘤细胞与THP-1细胞共培养实验中,相比对照组,TSPAN6敲低组中穿过transwell小室的THP-1细胞数量减少,并且CD163阳性的THP-1细胞百分比降低。4.基于TCGA数据,发现TSPAN6高表达组中免疫检查点基因CD274、HAVCR2、CTLA4、LAG3、PDCD1、PDCD1LG2、TIGIT和SIGLEC15相对过表达,spearman相关性分析显示TSPAN6的表达与CD274、HAVCR2、PDCD1和PDCD1LG2呈正相关。TIDE评分显示TSPAN6高表达组的TIDE评分较高。结论:***6在胶质瘤中高表达,并与临床病理特征和预后相关,有可能作为评估胶质瘤患者预后和诊断的生物标志物。***6可能通过调控细胞周期促进胶质瘤的进展。***6的表达增高可促进胶质瘤细胞系的增殖和迁移能力。***6的表达水平与免疫细胞的浸润相关,TSPAN6可促进胶质瘤细胞系募集巨噬细胞并分化为免疫抑制性的M2型巨噬细胞。

关键词：胶质瘤四跨膜蛋白6 预后免疫浸润免疫检查点

急性单核细胞白血病的临床特征分析及PBK和DOK4的表达

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急性单核细胞白血病的临床特征分析及PBK和DOK4的表达

作者：周心怡延安大学

学位级别：硕士

研究背景:急性髓系白血病(AML,Acute Myeloblastic Leukemia)是来自骨髓的恶性血液肿瘤。根据FAB分型标准,可以将该疾病分为八种亚型,即M0-M7。AML-M5(acute monocytic leukemia,急性单核细胞白血病)是一类特殊的AML分型,以外周血、骨... 详细信息

研究背景:急性髓系白血病(AML,Acute Myeloblastic Leukemia)是来自骨髓的恶性血液肿瘤。根据FAB分型标准,可以将该疾病分为八种亚型,即M0-M7。AML-M5(acute monocytic leukemia,急性单核细胞白血病)是一类特殊的AML分型,以外周血、骨髓等器官及其他组织未成熟的单核细胞不受控的增殖为特征。此类疾病的临床症状通常较为严重,病情发展迅速,预后不佳,因此,寻找潜在的治疗靶点,提高患者的生存质量,对改善其预后都有着重要的意义。TOPK/PBK,为T-LAK细胞来源的蛋白激酶,在T-LAK以及T细胞的细胞毒功能方面有着重要作用。近年来,随着许多的研究表明,在一些恶性肿瘤进展过程中可以发现TOPK的存在,它也在许多恶性的肿瘤中呈高表达,且可能与患者的不良预后相关。DOK是一类参与调控肿瘤细胞生长的新型调控蛋白家族,DOK4是一种位于反义序列上的,由15406个氨基酸残基共同组成的酪氨酸激酶下游分子。研究证明,增加的DOK4和DOK5表达与AML预后不良有关。目前,已经有大量的研究报道表明:PBK和DOK4作为信号传导途径的关键基因,在白血病的病程进展中起着关键作用,这两种基因与与病人不良预后密切相关。本实验将验证在急性单核白血病患者及细胞系中PBK和DOK4的表达,为日后探索急性单核细胞白血病的治疗方法打下坚实的基础。目的:1.用统计学方法分析PBK和DOK4的表达与在急性单核细胞白血病的临床特征相关性。2.采用PCR和Western Blot技术探讨PBK与DOK4基因在急性单核细胞白血病患者骨髓标本及细胞系中的表达。方法:1.收集AML患者的临床骨髓标本,AML-M5、非AML-M5(M1、M2、M3、M4)、贫血的患者分别为15例、21例和14例;2.收集患者的实验室数据,主要内容有:年龄(age)、性别(gender)、白细胞计数(WBC)、血红蛋白浓度(HB)、血小板计数(PLT)、骨髓白血病细胞比例(bone marrow leukemia cell ratio)、融合基因(fusion gene)、突变基因(mutated gene)等内容。3.对患者的骨髓标本进行RNA的检测;利用SPSS26.0和Graph Pad Prism9.5统计软件,对结果进行分析。数据符合计量资料则采用均值±标准差表示,偏态分布资料采用中位数和四分位间距表示。若数据符合正态性分布及方差齐性分析,两组比较用独立样本T检验进行,多组比较用单因素方差分析。如果两个或多个组的数据不符合正态分布或方差不齐,则采用非参数检验。两分类变量采用Fisher确切概率法比较。以P系及临床患者骨髓血中的表达。5.用Western Blot实验进行THP-1、U937细胞系PBK、Dok4相关蛋白水平的检测。6.在肿瘤大数据库中对收集的相关数据进行临床相关性分析。结果:***-M5、非AML-M5(M1、M2、M3、M4)、贫血三组中WBC计数、PLT计数有统计学意义P系中的表达,通过Graphpad prism软件绘图,结果显示:DOK4、PBK在THP-1、NB4、HL-60、U937细胞系中均表达且在THP-1、U937中表达较高,以THP-1为对照组,通过组内对比P均小于0.05都有统计学意义。5.在Western Blot实验中PBK、DOK4在THP-1、U937细胞系中的蛋白均有表达。结论:1.在急性单核细胞白血病中PBK和DOK4的表达在临床实验室资料无显著统计学意义。2.经实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证发现PBK和DOK4在临床标本中急性单核细胞白血病表达相对较高,在急性髓系白血病细胞系中急性单核细胞白血病细胞系表达相对较高。*** Blot实验验证发现PBK、DOK4在急性单核细胞白血病细胞系中均有表达。

关键词：急性髓系白血病急性单核细胞白血病 PBK DOK4

转录辅助因子PC4在肝细胞癌中的表达及预后研究

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转录辅助因子PC4在肝细胞癌中的表达及预后研究

作者：白亮亮延安大学

学位级别：硕士

背景:肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)具有肿瘤恶性程度高、临床症状不典型和早期易转移等特点,大部分患者在就诊时已处于中晚期,因此迫切需要寻找有效的生物标志物及潜在治疗靶点,以协助诊断并改善预后。转录辅助因子4(Positiv... 详细信息

背景:肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)具有肿瘤恶性程度高、临床症状不典型和早期易转移等特点,大部分患者在就诊时已处于中晚期,因此迫切需要寻找有效的生物标志物及潜在治疗靶点,以协助诊断并改善预后。转录辅助因子4(Positive cofactor 4,PC4)是一种进化过程中高度保守的核蛋白,目前研究表明其与非小细胞肺癌、食管鳞癌、乳腺癌、胰腺导管腺癌和前列腺癌等恶性肿瘤的增殖、转移和治疗抵抗显著相关,但PC4在HCC中的作用尚不清楚。本研究旨在通过生物信息学分析和基础实验探索PC4在HCC中的表达情况,并构建PC4相关的HCC预后模型。方法:1.从癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库和基因表达综合(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库获取HCC组织样本和正常组织样本的基因表达数据,分析PC4在HCC中的表达情况。通过进行基因本体论(Gene Ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析,以及基因集富集分析(Gene Set Enrichment Analysis,GSEA),可以深入了解PC4基因在肝细胞癌中的生物学功能和潜在机制。2.通过q PCR实验和Western blot实验验证PC4在肝癌细胞系中的表达情况,并构建PC4干扰稳转株。通过CCK8实验、平板克隆实验和Transwell实验等多种实验手段,我们确认了PC4对于HCC细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。3.基于TCGA数据库绘制Kaplan-Meier生存曲线探索PC4与HCC患者的预后关系。随后,通过相关性分析筛选PC4共表达基因,通过单因素COX分析、LASSO-COX回归构建基因集预后模型,并使用国际肿瘤基因组协作组(International Cancer Genome Consortium,ICGC)数据库对模型进行验证。最后,基于ENCORI数据库探索PC4在HCC中的调控机制。相关性分析获得PC4潜在上游调控mi RNA和lnc RNA,并构建内源竞争RNA(Competing endogenous RNA,ce RNA)网络。结果:***4在HCC组织中的表达显著高于正常组织。PC4高表达组和低表达组的差异表达分析共筛选出2708个上调基因和148个下调基因,并且这些基因主要参与细胞周期调控、DNA损伤修复和染色质形成等生物学过程。2.细胞实验显示,PC4在肝癌细胞系中的表达高于正常肝细胞。基于Huh-7肝癌细胞系构建PC4干扰稳转株。CCK8实验和平板克隆实验显示,PC4干扰稳转株增殖能力显著抑制。细胞划痕实验和Transwell实验显示,PC4干扰稳转株迁移和侵袭能力显著抑制。3.预后分析显示PC4高表达的HCC患者生存时间较短。构建了8基因(CEP55、TRIP13、BRIX1、STIP1、PIGU、CFL1、RBM17和OLA1)HCC预后模型。TCGA训练集1、2、3年生存率的ROC曲线下面积分别为0.797、0.708和0.685,ICGC验证集1、2、3年生存率的ROC曲线下面积分别为0.757、0.740和0.734。PCA和t-SNE分析显示高风险组和低风险组之间区分明显。基于ENCORI数据库和相关性分析确定潜在上游调控mi RNA为mi R-101-3p,潜在上游调控lnc RNA为AC120036.4、AC124798.1、GSEC、SNHG1和SNHG6。其ce RNA调控网络为lnc RNAs/mi RNA-101-3p/PC4。结论:***4在HCC组织中的表达显著高于正常组织;***4能够促进HCC的增殖、迁移和侵袭;3.高表达PC4的HCC患者预后较差;***4相关预后模型的预测效能良好,可以作为HCC患者的预后因素;*** RNAs/mi RNA-101-3p/PC4网络有助于了解PC4在HCC中的调控机制。

关键词：肝细胞癌转录辅助因子PC4 生物信息学预后模型

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山丹丹亚轨道诱变育种研究

山丹丹亚轨道诱变育种研究

作者：毛超延安大学

学位级别：硕士

山丹丹形态优美,颜色鲜红,在我国北方地区分布广泛,但山丹丹一般在阴生环境下生长,抗倒伏能力较差,花色单一。针对山丹丹的这些问题,在试验筛选出山丹丹最适灭菌时间及各个生长阶段所需的培养基后,以延安地区分布的山丹丹6月红品系的鳞... 详细信息

山丹丹形态优美,颜色鲜红,在我国北方地区分布广泛,但山丹丹一般在阴生环境下生长,抗倒伏能力较差,花色单一。针对山丹丹的这些问题,在试验筛选出山丹丹最适灭菌时间及各个生长阶段所需的培养基后,以延安地区分布的山丹丹6月红品系的鳞茎鳞片为试验材料,建立无菌系;利用诱导获得的山丹丹愈伤组织及幼嫩鳞茎试管苗为材料搭载DEAR-7号飞行器进行亚轨道诱变试验;对诱变试管苗进行扩大化培养,诱导其形成鳞茎并生根,进行地面栽植;通过形态学指标分析、流式细胞分析、叶绿体基因组分析、生理生化指标分析等,考察了亚轨道诱变对山丹丹的影响,获得了花色变深、植株矮化的山丹丹新种质。具体研究工作如下:1、山丹丹快速繁殖体系的建立以山丹丹鳞片为材料,建立无菌系,以无菌系为材料开展种球生产研究,经过室内研究,筛选出山丹丹最适灭菌时间、诱导不定芽产生的培养基、诱导愈伤组织产生的培养基、诱导小鳞茎膨大的培养基和诱导小鳞茎生根的培养基。山丹丹鳞片作为外植体利用0.1%Hg Cl灭菌8 min最佳,其污染率为16.67%,出芽率为74.02%,接种后第16 d开始出芽;诱导山丹丹鳞片产生不定芽的最适培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L,其不定芽诱导率为90.05%;诱导山丹丹鳞片产生愈伤组织的最适培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+KT 0.2 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L,其愈伤组织诱导率为70.06%,诱导愈伤组织再分化的最适培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.15 mg/L+蔗糖30 g/L,其不定芽分化率为96.67%,分化系数为8.67;诱导小鳞茎形成的最适培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L+蔗糖90g/L,其鳞茎形成率为86.67%,60 d鳞茎质量为1.36 g,直径为1.78 cm;诱导小鳞茎生根的最适培养基为MS+NAA 0.4 mg/L+蔗糖60g/L,其生根率为98.89%,平均生根数为13.195条,平均根长2.593 cm。2、山丹丹试管苗染色体稳定性分析山丹丹鳞片经过不同水平生长调节剂组合和连续10世代继代培养获得稳定遗传的组培系。通过对根尖染色体压片发现,山丹丹6月红亲本试管苗、10世代培养的试管苗染色体数目未发生变异,为2n=2x=24条。通过流式细胞分析,以山丹丹6月红亲本株系植株为对照,将DNA荧光强度最高峰调节至80附近,继代10世代培养后栽植的对照组植株、6月红试管苗、10世代培养的试管苗鉴定结果最高峰均分布在80附近,说明染色体倍性未发生改变。3、诱变山丹丹分析诱变山丹丹材料经扩大化培养诱导生根并栽培后,再次利用流式细胞鉴定试管苗及栽培植株,发现其与对照组相比吸收峰范围变大,但染色体倍性仍未改变;对诱变山丹丹叶绿体基因组分析发现,诱变山丹丹组培试管苗叶片和亲本山丹丹保持了高度的一致性,诱变山丹丹叶绿体基因组全长152587 bp,而亲本山丹丹叶绿体基因组全长为152591 bp,均呈四段式结构,分为大单拷贝区（LSC 82013 bp）、小单拷贝区（SSC 17590 bp）及一对反向重复区（IRs 26492 bp）,亲本山丹丹叶绿体基因组中,小单拷贝区为17594 bp,其余均高度一致。以生根山丹丹亲本试管鳞茎为材料进行大田栽培,获得了和山丹丹6月红品系相同花色的植株,其作为山丹丹对照组植株,对诱变获得的实验组山丹丹植株进行对比显示:诱变植株株高、茎粗、株幅、叶片数、叶宽、花梗长、花梗粗、内花被长、外花被长宽均显著低于对照组山丹丹植株,花色与对照组植株相比有显著变化,其RHS值深度高于对照组植株。对诱变获得的实验组山丹丹植株和对照组山丹丹植株进行生理生化指标分析发现,诱变植株渗透性调节物质升高,抗氧化物酶活性升高,叶绿素、丙二醛含量降低,表明诱变植株抗逆性强于亲本植株。

关键词：山丹丹组织培养育种亚轨道诱变

课程思政背景下高中文言文教学研究 ——以渭南市华州区咸林中学为例

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课程思政背景下高中文言文教学研究 ——以渭南市华州区咸林中学...

作者：刘婷延安大学

学位级别：硕士

在强调“立德树人”的时代背景下,国家高度重视对学生的德育培养,而课程思政要求将思政教育和各学科教学结合起来,实现核心素养与德育双线并行,能够有效落实“立德树人”根本任务。高中阶段是提升学生政治素养的关键时期,必须要重视对... 详细信息

在强调“立德树人”的时代背景下,国家高度重视对学生的德育培养,而课程思政要求将思政教育和各学科教学结合起来,实现核心素养与德育双线并行,能够有效落实“立德树人”根本任务。高中阶段是提升学生政治素养的关键时期,必须要重视对学生的思政教育,而语文学科作为人文社科类基础学科之一,既能为学生传授知识,又可能发挥德育作用。高中语文教材选文都是古今中外优秀作品,课程中蕴含着丰富的育人元素,先天具备隐形的思想政治教育功能,特别是在文言文教学上,把课程思政融入到文言文教学中,对学生道德意识的唤醒、三观的培养以及为人处世能力的提升具有积极意义。所以,基于当前教学要求,探究如何将课程思政与高中语文必修教材文言文教学融合起来这一问题是很有必要的。本论文除绪论与结语之外,正文包含五部分内容。第一部分主要明确课程思政与文言文教学的概念及理论基础。第二部分是从选文数量、体裁、题材以及选文实施思政教学的可行性四方面分析高中语文必修教材文言文选文概况。第三部分是对当前高中语文文言文课程思政教学现状进行调查,以渭南市华州区咸林中学为调查基地,分别对该校高一师生展开问卷调查,通过调查数据分析发现当前文言文教学存在学生学习兴趣不高,课程思政教学方式不当,课程思政教学成效不佳三方面问题,并结合教学实际进行归因分析。第四部分针对高中语文必修教材文言文课程思政教学现状,从教学内容、教师成长、教学方法三个方面提出实施策略,包括深挖思政元素,丰富教学内容;提升教师素养,课程思政教学专业化;创新教学方法,课程思政形式多样化。第五部分是对以上所提出教学策略的实践应用,以必修下册第八单元的《谏太宗十思疏》为教学示例,验证教学策略的可行性,并进行教学评价和反思,以期对高中文言文课程思政教学发展有所帮助。

关键词：课程思政文言文教学教学策略

微小RNA miR-424-5p对胃癌细胞迁移、侵袭的影响及其机制探讨

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微小RNA miR-424-5p对胃癌细胞迁移、侵袭的影响及其机制探讨

作者：郝静延安大学

学位级别：硕士

研究背景:胃癌(Gastric Cancer,GC)是世界上高发病率、高死亡率的恶性肿瘤之一,早发现、早诊断、早治疗一直是其防控关键,早期准确诊断对患者预后有直接影响。非编码RNA(nc RNA)在疾病发病机制中通常失调,已被充分证实可调节癌症中的各... 详细信息

研究背景:胃癌(Gastric Cancer,GC)是世界上高发病率、高死亡率的恶性肿瘤之一,早发现、早诊断、早治疗一直是其防控关键,早期准确诊断对患者预后有直接影响。非编码RNA(nc RNA)在疾病发病机制中通常失调,已被充分证实可调节癌症中的各种分子途径和机制,诱导或抑制致癌。微小RNA(miRNA)属于常见非编码RNA,在肿瘤中表达异常,主要通过信使RNA(m RNA)的降解或沉默来调节蛋白质编码基因的表达,可作为促癌或抑癌基因,在多种肿瘤中发挥重要调控作用,如影响增殖、迁移、侵袭、自噬、血管生成和细胞凋亡等生物学行为,可以作为肿瘤诊断预后的标志物及治疗的靶点。自噬(autophagy),亦称为程序性细胞死亡,是哺乳动物中高度保守的自我防御机制,对于维持细胞代谢、内环境稳定和正常生理功能十分重要,在癌症的发生发展过程中起着双重作用。近年来,自噬相关的非编码RNA在胃癌中的作用引起了广泛的关注,miRNA在其中重要的桥梁作用被广泛认可。目前研究已证明微小RNA miR-424-5p在多种肿瘤中表达异常。一方面,在肝细胞癌、宫颈癌等表达下调,另一方面在胰腺癌、结肠癌等上调,且在肝细胞癌和乳腺癌中对自噬有调控作用,但是其对胃癌细胞有何作用及是否能通过对自噬的调节影响胃癌的发生发展未见明确报道。因此本研究通过检测miR-424-5p在胃癌组织、细胞中的表达并进行临床相关病理学分析,同时探讨其是否通过自噬这一机制调节胃癌细胞迁移侵袭的生物学功能,以期为胃癌患者提供更多新的诊疗策略及可能的治疗靶点。研究目的:1.组织水平验证胃癌组织样本中miR-424-5p的表达,分析其表达与对应患者临床病理参数的关系,探讨miR-424-5p与胃癌预后因素的相关性。2.细胞水平检测胃癌细胞中miR-424-5p的表达,明确miR-424-5p的表达对胃癌细胞迁移、侵袭的影响,揭示miR-424-5p在胃癌细胞中的生物学作用。3.细胞水平检测miR-424-5p的表达改变对胃癌细胞自噬功能的影响,探讨miR-424-5p可能影响胃癌细胞生物学功能的机制。研究方法:1.检测胃癌组织及正常组织样本miR-424-5p的表达情况用RT-q PCR方法,将miR-424-5p与对应胃癌患者临床病理参数进行相关性分析。2.筛选对应细胞系,通过miR-424-5p的miRNA抑制物(miRNA ihibitor)及模拟物(miRNA mimic)构建沉默miR-424-5p及过表达miR-424-5p胃癌细胞组。通过细胞划痕实验、Transwell实验验证miR-424-5p被抑制或模拟后,胃癌细胞迁移、侵袭的改变。3.构建沉默miR-424-5p及过表达miR-424-5p胃癌细胞组。通过RT-q PCR实验在m RNA水平分别检测miR-424-5p被抑制或模拟后自噬相关因子Beclin-1、LC3、p62的表达情况。研究结果:1.在胃癌组织中miR-424-5p的相对表达量明显低于对应正常组织。miR-424-5p的表达与胃癌患者是否有神经、淋巴管血管侵犯情况存在显著差异性,相较无神经或淋巴管血管侵犯的患者,有侵犯的患者miR-424-5p的表达水平相对更低。但与患者的一般情况、组织学分型、分化程度、肿瘤部位、T分期、N分期等无关。2.在胃癌细胞中miR-424-5p的相对表达量明显低于对应正常胃粘膜细胞。在胃癌细胞系HGC27、MKN28中,miR-424-5p-inhibitor组胃癌细胞较对照组迁移、侵袭能力更强,miR-424-5p-mimics组较对照组迁移、侵袭能力更弱。3.在胃癌细胞系HGC27、MKN28中,miR-424-5p-inhibitor组与inhibitor-NC组相比,p62均表达上调,Beclin-1与LC3均表达下调;对应miR-424-5p-mimics组与mimics-NC组相比,p62均表达下调,而Beclin-1在HGC27中下调,在MKN28中差异无统计学意义,LC3则在MKN28中被抑制,在HGC27中差异无统计学意义。研究结论:***-424-5p在胃癌组织和细胞中的表达下调,并且与胃癌患者是否有神经及淋巴管血管侵犯状况有关。***-424-5p负调控胃癌细胞迁移侵袭能力。下调miR-424-5p的表达,胃癌细胞的迁移侵袭能力增强;反之上调,具有抑制胃癌细胞迁移侵袭的效果。***-424-5p正调控胃癌细胞自噬水平。下调miR-424-5p的表达,自噬水平被抑制;上调miR-424-5p的表达,自噬水平被促进,揭示了miR-424-5p可能通过促进自噬调控胃癌细胞迁移侵袭行为。

关键词： miR-424-5p 自噬相关基因胃癌迁移侵袭

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NLRX1在脊髓损伤中的作用及机制研究

NLRX1在脊髓损伤中的作用及机制研究

作者：高保青延安大学

学位级别：硕士

脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)是一种严重的中枢神经系统损伤,其治疗和康复一直是临床治疗中的巨大难题。核苷酸结合寡聚化结构域NOD样受体X1(nucleotide binding domain and leucine rich repeat containing family member,NLRX1)作为一种位于线粒体的NOD样受体,它在炎症反应中的负向调节作用以及其在线粒体自噬途径中的作用,为研究脊髓损伤提供了新的视角。在自身免疫性疾病和炎症性疾病中的研究表明,NLRX1可能对调节炎症反应和保护组织有积极影响,如脑损伤和多发性硬化症的病理过程中,NLRX1显示出潜在的保护作用。这些发现提示NLRX1可能在脊髓损伤中也扮演着重要角色。但其在中枢神经系统中的分布表达情况及其在脊髓损伤中的作用和机制,尚未明确。研究目的:本研究旨在深入理解NLRX1在中枢神经系统中的作用,特别是NLRX1在脊髓损伤中的表达分布情况、以及调控作用和机制。通过研究拟阐明以下科学问题:1.阐明NLRX1在神经细胞中的表达分布情况,包括脊髓损伤后,NLRX1在脊髓细胞中的表达分布,以及NLRX1蛋白表达水平在损伤后的变化。2.探索NLRX1在脊髓损伤中的调控作用及机制。这涉及到NLRX1如何影响脊髓损伤后的炎症反应、细胞凋亡、线粒体功能障碍等病理机制,为干预NLRX1促进脊髓损伤后神经组织保护和运动功能恢复奠定基础。3.探究NLRX1靶向小分子激动剂NX-13对神经元的保护作用及机制。通过细胞实验,探索NX-13对神经细胞在氧糖剥夺损伤中的作用,阐明其在神经细胞中的作用。研究方法:本研究主要涉及动物实验和细胞实验两个层面。动物实验部分:1.通过脊髓损伤手术构建小鼠脊髓夹伤模型。2.利用小鼠双后肢功能评分量表(basso mouse scale,BMS)评分和Catwalk步态分析仪评估小鼠运动恢复情况。3.收集不同时间点的脊髓组织样本,通过蛋白质免疫印迹技术(western blot,WB)检测NLRX1蛋白表达水平。4.利用免疫组化染色技术观察NLRX1在脊髓组织细胞中的表达和分布。通过WB和免疫组化染色检测脊髓损伤中心的炎症反应、细胞凋亡和自噬情况。5.用苏木精伊红染色(hematoxylin and eosin staining,H-E)染色观察NLRX1敲除后脊髓损伤中心的损伤面积变化。6.用透射电镜技术观察NLRX1敲除后脊髓损伤中心的线粒体损伤情况。细胞实验部分:1.培养神经元细胞系SH-SY5Y细胞,并进行氧糖剥夺处理,模拟脊髓损伤后缺血缺氧环境。2.应用不同浓度的NLRX1激动剂NX-13处理细胞,用CCK-8法评估其对氧糖剥夺条件下细胞活率的影响。3.通过WB检测细胞蛋白,评估炎症信号传导通路的激活情况。研究结果:第一部分:NLRX1在脊髓损伤后的表达(1)行为学结果显示:在脊髓损伤后小鼠的双后肢功能逐渐恢复。BMS评分显示,脊髓损伤后小鼠具有一定的自我恢复功能,随着时间的推移与疾病的进展,小鼠的双后肢功能逐渐恢复正常;在脊髓损伤后第14天(14days post injury,14dpi)小鼠可以在Catwalk步道台行走并进行步态参数分析,同样14dpi时,小鼠双后肢的承重功能与协调性逐渐恢复;(2)蛋白水平检测结果:WB检测脊髓损伤中心NLRX1的蛋白表达量发现:随着时间的推移,脊髓损伤中心NLRX1的表达量逐渐升高,在21dpi达到峰值;(3)组织形态学结果:通过将NLRX1分别与Neu N(神经元Marker)、Iba1(小胶质细胞Marker)、GFAP(星形胶质细胞Marker)和SOX10(少突胶质细胞Marker)进行共标,通过细胞计数发现:在生理状态下和脊髓损伤后,NLRX1在神经元中大量表达,神经元是NLRX1在脊髓中表达的主要细胞类型。第二部分:NLRX1敲除小鼠脊髓损伤后的表现(1)行为学结果:BMS评分发现:在脊髓损伤后,与WT小鼠相比较,NLRX1基因敲除的小鼠双后肢的运动功能恢复较缓慢;Catwalk分析小鼠双后肢的承重功能与协调性发现:从SCI后14dpi开始,相比较于WT小鼠,基因敲除小鼠双后肢的承重功能与协调性、行走的节奏性恢复较慢;(2)H-E结果:与WT小鼠相比,NLRX1敲除小鼠脊髓损伤中心的损伤面积更大。第三部分:NLRX1对脊髓损伤继发性损伤机制的影响(1)WB检测相关蛋白结果显示:在21dpi,NLRX1敲除小鼠的脊髓损伤中心的炎症反应更强烈、细胞凋亡更多,而细胞自噬水平降低;(2)组织形态学结果:将Neu N与TNFα(tumor necrosis fac

关键词：脊髓损伤 NLRX1 炎症反应细胞凋亡线粒体自噬