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产蛋间隔前期鸽卵泡转录组比较分析揭示卵泡发育相关基因

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畜牧兽医学报 2024年第8期55卷 3503-3515页

作者：陈静吴薛蓓苗冬枝张弛郭振玉王莹扬州大学动物科学与技术学院扬州225009

旨在对产蛋间隔前期母鸽卵泡颗粒细胞(GC)层进行高通量测序,筛选出与鸽卵泡发育和选择相关的关键基因。本研究选择了80对12月龄产蛋规律、体重相近的白羽王鸽为研究对象,在产蛋间隔第1天(LI1)和第3天(LI3)分别选择3只母鸽,采集F1和SF1卵... 详细信息

旨在对产蛋间隔前期母鸽卵泡颗粒细胞(GC)层进行高通量测序,筛选出与鸽卵泡发育和选择相关的关键基因。本研究选择了80对12月龄产蛋规律、体重相近的白羽王鸽为研究对象,在产蛋间隔第1天(LI1)和第3天(LI3)分别选择3只母鸽,采集F1和SF1卵泡GC层,并利用RNA-seq进行转录组分析,筛选L1F1/L1SF1、L3F1/L3SF1、L1F1/L3F1和L1SF1/L3SF1组,4组间差异表达基因(DEGs),对DEGs进行GO功能注释和KEGG通路富集分析,通过STRING数据库进行蛋白质互作(PPI)网络分析并使用Cytoscape软件进行可视化处理筛选关键基因,各组随机选择5个DEGs进行RT-qPCR验证转录组的可靠性。在4组比对中分别获得77、2736、5698和3864个DEGs。GO分析显示,4组DEGs都主要富集的GO条目为细胞过程、细胞解剖实体和连接。KEGG通路富集分析显示,L1F1/L1SF1组和L3F1/L3SF1组DEGs均显著富集在类固醇激素生物合成和卵巢类固醇合成等信号通路,L1F1/L3F1组和L1SF1/L3SF1组DEGs均显著富集在糖胺聚糖降解、突触囊泡周期和氧化磷酸化等信号通路。进一步地,进行PPI网络分析并筛选与卵泡发育和选择密切相关的DEGs。各组随机选择5个DEGs进行RT-qPCR验证,表达趋势与测序结果一致。本研究利用RNA-seq技术筛选到与鸽卵泡发育和选择相关的关键基因——EEF2、DDX5、PLK2、IGF 2R、LHCGR、HSD 3B1、CYP 19A1和StAR,为进一步探究鸽卵泡发育和选择的分子调控机制提供了理论依据。

关键词：鸽产蛋间隔卵泡发育转录组

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ATG14调控家兔毛囊毛乳头细胞自噬进程的功能探究

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畜牧兽医学报 2024年第8期55卷 3472-3481页

作者：曹馨予蔡佳炜鲍志远姚漱玉李云鹏陈阳吴信生赵博昊扬州大学动物科学与技术学院扬州225009

旨在探究自噬相关蛋白14(autophagy-related protein 14,ATG14)调控家兔毛囊毛乳头细胞(dermal papilla cells, DPCs)自噬进程对毛囊发育生长的影响。本试验选取健康6月龄长毛兔,采集背部皮肤分离培养DPCs,通过克隆ATG14基因的编码序列(... 详细信息

旨在探究自噬相关蛋白14(autophagy-related protein 14,ATG14)调控家兔毛囊毛乳头细胞(dermal papilla cells, DPCs)自噬进程对毛囊发育生长的影响。本试验选取健康6月龄长毛兔,采集背部皮肤分离培养DPCs,通过克隆ATG14基因的编码序列(coding sequence, CDS),利用生物信息学对ATG14的生物学特性进行初步分析,在家兔DPCs中过表达或敲减ATG14对自噬相关蛋白和毛囊生长发育相关基因的表达及DPCs增殖水平的影响进行探究。结果表明,ATG14基因CDS长度为1 479 bp,共编码492个氨基酸,不存在潜在信号肽及跨膜区,属于定位于细胞核的不稳定蛋白,在不同哺乳动物中存在同源性。家兔DPCs中过表达或敲减ATG14后,WB结果显示ATG14能够上调自噬标志蛋白LC3和Beclin1的蛋白表达,抑制自噬抑制蛋白P62表达水平。ATG14能够增加细胞中pEGFP-LC3B荧光表达,表明ATG14能够激活细胞中LC3B的表达。同时,在DPCs中过表达ATG14能够显著上调CCND1、FGF2、LEF1、BCL2和WNT2的mRNA表达水平,显著下调SFRP2和TGFβ-1的基因表达水平(P<0.05),敲减ATG14能够显著下调CCND1、FGF2、LEF1、BCL2和WNT2的基因表达水平,显著上调SFRP2和TGFβ-1的mRNA水平(P<0.05)。ATG14能够上调LEF1和CCND1的蛋白表达水平。此外,DPC中过表达ATG14能够显著促进DPCs细胞增殖(P<0.01)。本研究通过对家兔ATG14基因调控DPCs自噬进程的功能进行分析,为阐明家兔毛囊生长发育的调控机制提供理论依据。

关键词： ATG14 自噬毛囊家兔毛乳头细胞

HDLBP通过调控氧化应激水平和炎性因子表达参与鹅肥肝的形成

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畜牧兽医学报 2024年第9期55卷 3897-3913页

作者：袁紫金王婉昕邢娅李家惠薛颖葛晶赵敏孟刘龙龚道清耿拓宇扬州大学动物科学与技术学院扬州225009

旨在利用活体与细胞模型探究高密度脂蛋白结合蛋白(HDLBP)的亚细胞分布、基因功能及其与鹅肥肝形成的关系。本研究选取70日龄健康朗德鹅公鹅14只,单笼饲养,随机均分为对照组(平均体重为3.71 kg,自由采食)和试验组(平均体重为3.72 kg,填... 详细信息

旨在利用活体与细胞模型探究高密度脂蛋白结合蛋白(HDLBP)的亚细胞分布、基因功能及其与鹅肥肝形成的关系。本研究选取70日龄健康朗德鹅公鹅14只,单笼饲养,随机均分为对照组(平均体重为3.71 kg,自由采食)和试验组(平均体重为3.72 kg,填饲20 d)进行活体模型试验。从23日龄朗德鹅胚胎中分离肝细胞并过表达HDLBP基因进行细胞模型试验。首先采用免疫印迹法、免疫荧光技术对鹅原代肝细胞中HDLBP蛋白质进行亚细胞定位分析,其次采用免疫印迹法检测填饲鹅和对照鹅肝脏全细胞HDLBP(wHDLBP)及线粒体中HDLBP(mHDLBP)的蛋白质丰度,然后在鹅原代肝细胞中过表达HDLBP,检测其对细胞中mHDLBP蛋白质丰度、丙二醛(MDA)含量、总超氧化物歧化酶(T-SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性、活性氧类物质(ROS)和线粒体膜电位水平的影响,最后通过转录组测序分析筛选HDLBP过表达影响的差异表达基因与相关信号通路,并在活体模型中对部分差异表达基因进行定量PCR验证。结果表明:HDLBP可结合到线粒体中;填饲组wHDLBP和mHDLBP蛋白质丰度均显著低于对照组(P<0.01);在鹅原代肝细胞中过表达HDLBP显著增加mHDLBP的蛋白质丰度(P<0.05),增加MDA(P<0.01)和ROS(P<0.05)含量,降低线粒体膜电位(P<0.05)及T-SOD(P<0.05)和GSH-PX(P<0.05)活性;HDLBP过表达所影响的上调差异表达基因主要富集于免疫/炎症相关通路。此外,相对于对照组,填饲组中炎症相关基因IL 1R1、TNFSF10、LTC 4S、NCF1、SFTPA 1及KDR的表达可能受到HDLBP的调控而显著减少(P<0.05,0.01或0.001)。HDLBP能够与线粒体结合,填饲显著降低鹅肝全细胞和线粒体样中HDLBP的蛋白水平,过表达HDLBP导致线粒体功能损伤、氧化应激和炎性因子的表达增强,因此HDLBP可能通过影响线粒体功能、调控氧化应激和炎症反应为鹅肥肝提供保护。

关键词：鹅肥肝 HDLBP 线粒体氧化应激炎症

羊肉中呈膻物质的形成机制及降膻方式的研究进展

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食品科学 2024年第8期45卷 331-341页

作者：杨东松高爽袁红赵文秀罗玉龙罗瑞明侯艳茹宁夏大学食品科学与工程学院宁夏银川750021 宁夏大学动物科技学院宁夏银川750021

羊肉是一种优质的肉类食品,具有很高的营养价值,但其典型的物种风味即膻味,影响羊肉的品质,限制消费者的接受程度。研究表明,引发羊肉膻味的主要物质有4-烷基支链脂肪酸、3-甲基吲哚、4-甲基苯酚、硬脂酸和氨基酸等。羊肉膻味物质的组... 详细信息

羊肉是一种优质的肉类食品,具有很高的营养价值,但其典型的物种风味即膻味,影响羊肉的品质,限制消费者的接受程度。研究表明,引发羊肉膻味的主要物质有4-烷基支链脂肪酸、3-甲基吲哚、4-甲基苯酚、硬脂酸和氨基酸等。羊肉膻味物质的组成及形成途径较为复杂,受营养及饲养体系、品种、性别、年龄和组织部位等多种因素的影响,且膻味消减难度大。因此,本文就羊肉中呈膻物质的来源及其形成机制、影响羊肉呈膻物质形成的因素以及降膻方式进行综述,以期为科学调控羊肉及其制品的风味提供参考依据。

关键词：羊肉膻味物质沉积机制影响因素降膻方式

甜菜碱和包被甜菜碱对荷斯坦公牛生长性能、养分消化和瘤胃发酵的影响

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动物营养学报 2024年

作者：雷文华田宇轩徐垲琳刘强郭刚张亚伟王聪山西农业大学动物科学学院

本试验旨在研究饲粮中添加甜菜碱(BT)和包被甜菜碱(CBT)对荷斯坦公牛生长性能、养分消化和瘤胃发酵的影响。选取(238.45±0.89)日龄、平均体重为(304.0±7.4) kg的荷斯坦公牛36头,随机分成3组,每组12头。对照组饲喂基础饲粮,BT组和CBT... 详细信息

本试验旨在研究饲粮中添加甜菜碱(BT)和包被甜菜碱(CBT)对荷斯坦公牛生长性能、养分消化和瘤胃发酵的影响。选取(238.45±0.89)日龄、平均体重为(304.0±7.4) kg的荷斯坦公牛36头,随机分成3组,每组12头。对照组饲喂基础饲粮,BT组和CBT组分别在基础饲粮中添加6 g/d BT和24 g/d CBT。预试期20 d,正试期60 d。结果表明:1)与对照组相比,BT组和CBT组公牛平均日增重(ADG)显著提高(P<0.05),饲料转化率(FCR)显著降低(P<0.05)。CBT组公牛ADG显著高于BT组(P<0.05)。2)与对照组相比,BT组和CBT组公牛干物质(DM)、有机物(OM)和中性洗涤纤维(NDF)表观消化率显著提高(P<0.05)。CBT组公牛DM和OM表观消化率显著高于BT组(P<0.05)。3)与对照组相比,BT组和CBT组公牛瘤胃乙酸摩尔百分比和乙酸/丙酸值显著提高(P<0.05),瘤胃丙酸摩尔百分比显著降低(P<0.05);BT组和CBT组瘤胃总细菌、总厌氧真菌、总原虫、白色瘤胃球菌(Ruminococcus albus)、黄色瘤胃球菌(Ruminococcus flavefaciens)、溶纤维丁酸弧菌(Butyrivibrio fibrisolvens)、产琥珀酸丝状杆菌(Fibrobacter succinogenes)和嗜淀粉瘤胃杆菌(Ruminobacter amylophilus)数量显著增加(P<0.05)。BT组公牛瘤胃总厌氧真菌、总原虫、黄色瘤胃球菌、溶纤维丁酸弧菌和嗜淀粉瘤胃杆菌数量显著高于CBT组(P<0.05)。4)与对照组相比,BT组和CBT组公牛血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、生长激素(GH)和胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)含量显著提高(P<0.05)。CBT组公牛血清ALB含量显著高于BT组(P<0.05)。综上所述,饲粮中添加BT和CBT均能改善荷斯坦公牛生长性能、养分消化和瘤胃发酵,其中CBT对公牛ADG以及DM和OM表观消化率改善效果要优于BT。

关键词：甜菜碱公牛生长性能养分表观消化率瘤胃发酵

晋南牛SREBP1基因调控前体脂肪细胞分化的研究

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畜牧兽医学报 2024年

作者：张唯玉程景许家宝王静陶薪燕李博张亚伟张丹丹张宁郝振凯周琛帛张元庆山西农业大学动物科学学院

旨在探究SREBP1基因对晋南牛前体脂肪细胞分化的影响，并通过RNA-Seq技术探究该基因在晋南牛前体脂肪细胞分化过程中的调控机制。本研究利用SREBP1基因的过表达载体和siRNA转染晋南牛前体脂肪细胞，油酸诱导分化后采用油红O染色观察脂... 详细信息

旨在探究SREBP1基因对晋南牛前体脂肪细胞分化的影响，并通过RNA-Seq技术探究该基因在晋南牛前体脂肪细胞分化过程中的调控机制。本研究利用SREBP1基因的过表达载体和siRNA转染晋南牛前体脂肪细胞，油酸诱导分化后采用油红O染色观察脂滴累积情况，检测甘油三酯（triglyceride，TG）含量以探究SREBP1基因对其分化的影响。利用RT-qPCR和蛋白免疫印迹技术（Western Blotting，WB）检测过表达SREBP1基因的前体脂肪细胞中相关基因mRNA和蛋白水平变化。RNA-Seq检测干扰SREBP1基因的脂肪细胞，筛选差异表达基因（differentially expressed genes，DEGs）并进行KEGG通路富集分析，并对差异表达基因进行验证，以探究SREBP1基因参与调控晋南牛前体脂肪细胞分化相关的潜在靶基因。每个处理均设置3个重复。结果表明：1）过表达SREBP1基因能够促进前体脂肪细胞内脂滴的累积、极显著提高细胞内TG含量（P<0.01），干扰SREBP1基因则会抑制脂滴形成。2）过表达SREBP1基因后FABP4的mRNA表达量显著升高（P<0.05），FABP7、LPL极显著升高（P<0.01），WB结果显示FABP4蛋白表达水平明显升高；3）RNA-seq共筛选到DEGs 227个，其中包括67个上调基因和160个下调基因。京都基因和基因组百科全书（KEGG）富集分析结果表明差异基因富集到PPAR信号通路和不饱和脂肪酸生物合成等相关通路，干扰SREBP1基因后，差异表达基因FABP4、LPL和FABP7的mRNA表达量均极显著降低（P<0.01），FABP4的蛋白表达水平也明显降低。由此可知，SREBP1基因对于晋南牛前体脂肪细胞分化具有促进作用，过表达该基因可促进细胞内TG累积，并且极有可能是通过对与脂质分化相关的PPAR信号通路和不饱和脂肪酸生物合成通路的调控实现的。本研究结果为探究SREBP1基因在晋南牛前体脂肪细胞分化过程中的调控机制提供理论参考。

关键词：前体脂肪细胞 SREBP1 诱导分化 RNA-Seq PPAR

番鸭不同质地蛋壳超微结构及其与蛋壳强度的关联分析

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动物营养学报 2024年第2期36卷 1350-1360页

作者：梅慧灵郑定黔赵邦哲田若宁陈莹李昂连森阳梅景良吴旭福建农林大学动物科学学院(蜂学学院) 福州350002

本试验旨在研究番鸭正常蛋、沙壳蛋和条纹蛋等3种不同质地蛋壳在超微结构性状上的异同,并分析蛋壳超微结构性状与蛋壳强度之间的关联性。试验选用300日龄笼养白羽番鸭所产白色的正常蛋、沙壳蛋和条纹蛋厚度相近的蛋壳各12枚,分别作为3... 详细信息

本试验旨在研究番鸭正常蛋、沙壳蛋和条纹蛋等3种不同质地蛋壳在超微结构性状上的异同,并分析蛋壳超微结构性状与蛋壳强度之间的关联性。试验选用300日龄笼养白羽番鸭所产白色的正常蛋、沙壳蛋和条纹蛋厚度相近的蛋壳各12枚,分别作为3种不同质地蛋壳的试验组,每组设12个重复,每个重复1枚蛋壳。使用S3400N型扫描电镜观察蛋壳的超微结构,测定乳突层厚度和乳突间隙,计算有效厚度和平均乳突大小。结果表明:1)蛋壳强度在3种蛋之间差异显著(P沙壳蛋>条纹蛋;3种蛋间蛋形指数和钙化壳重差异均不显著(P>0.05)。2)在超微结构上,沙壳蛋和条纹蛋蛋壳的外表面皲裂较正常蛋蛋壳多而深,气孔较多,表观不平整;与正常蛋蛋壳相比,沙壳蛋蛋壳内表面纤维疏松凌乱,纤维间空隙较多,而条纹蛋蛋壳内表面纤维分布较沙壳蛋更为稀少,纤维间有明显间隙;沙壳蛋和条纹蛋蛋壳的横断面平整性和致密度都更差,乳突层与壳膜层联系也更加不紧密。在超微结构性状中,3种蛋壳间的钙化壳厚度和平均乳突大小差异不显著(P>0.05);沙壳蛋和条纹蛋蛋壳的乳突间隙均显著大于正常蛋蛋壳(P0.05);乳突层厚度在3种蛋壳之间均存在显著差异(P沙壳蛋>条纹蛋。3)3种蛋壳的乳突层厚度与蛋壳强度呈显著负相关(P0.05)。由此可见,厚度相似的番鸭正常蛋、沙壳蛋和条纹蛋蛋壳其蛋壳强度和超微结构均存在显著差异,其中乳突层厚度和乳突间隙与蛋壳强度均呈显著负相关,有效厚度与蛋壳强度呈显著正相关;在超微结构层面上,乳突层厚度、乳突间隙及有效厚度是影响蛋壳强度的主要因素。

关键词：番鸭正常蛋沙壳蛋条纹蛋超微结构蛋壳强度

饲粮中添加花椒籽对湖羊营养物质表观消化率、肠道发育、免疫功能和消化酶活性的影响

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动物营养学报 2024年第5期36卷 3131-3142页

作者：刘子龙李乔马学义李讨讨马友记甘肃农业大学动物科学技术学院兰州730070

本试验旨在研究饲粮中添加花椒籽对湖羊营养物质表观消化率、肠道发育、免疫功能和消化酶活性的影响。选取3月龄体重[(25.66±3.03) kg]相近的健康湖羊公羔27只,随机分为3组,每组9只羊。对照组饲喂基础饲粮,试验Ⅰ和Ⅱ组分别用3%和6%的... 详细信息

本试验旨在研究饲粮中添加花椒籽对湖羊营养物质表观消化率、肠道发育、免疫功能和消化酶活性的影响。选取3月龄体重[(25.66±3.03) kg]相近的健康湖羊公羔27只,随机分为3组,每组9只羊。对照组饲喂基础饲粮,试验Ⅰ和Ⅱ组分别用3%和6%的花椒籽等量替代基础饲粮中部分粗饲料。预试期7 d,正试期90 d。结果表明:1)试验Ⅱ组的粗蛋白质(CP)表观消化率显著低于对照组(P<0.05)。试验Ⅰ和Ⅱ组的粗脂肪(EE)和钙表观消化率显著高于对照组(P<0.05),且试验Ⅱ组的EE表观消化率显著高于试验Ⅰ组(P<0.05)。2)试验Ⅰ组的十二指肠绒毛高度/隐窝深度显著高于对照组(P<0.05),试验Ⅰ和Ⅱ组的空肠绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度显著高于对照组(P<0.05)。3)试验Ⅱ组的血清免疫球蛋白G(IgG)、补体3(C3)和补体4(C4)含量显著高于对照组(P<0.05),试验Ⅰ和Ⅱ组的血清溶菌酶(LZM)活性显著高于对照组(P<0.05)。4)试验Ⅰ组的十二指肠和回肠Toll样受体2(TLR2)mRNA相对表达量显著高于对照组和试验Ⅱ组(P<0.05),试验Ⅰ组的空肠TLR2 mRNA相对表达量显著高于对照组(P<0.05)。试验Ⅰ组的十二指肠、空肠和回肠TLR2蛋白相对表达量显著高于对照组和试验Ⅱ组(P<0.05)。5)试验Ⅰ和Ⅱ组的十二指肠淀粉酶活性显著高于对照组(P<0.05),试验Ⅰ和Ⅱ组的回肠淀粉酶活性显著高于对照组(P<0.05)。由此可见,饲粮中添加花椒籽可促进湖羊肠道发育,提高肠道免疫功能,且添加水平为3%时效果最优。

关键词：花椒籽湖羊肠道免疫消化

阿魏酸对白羽肉鸡生长性能、屠宰性能、肉品质、肌肉质构特性和血清生化指标的影响

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动物营养学报 2024年第2期36卷 921-934页

作者：李响尹月张喜闻王敏王永芳赵玉蓉湖南农业大学动物科学技术学院长沙410128

本试验旨在研究饲粮中添加不同水平阿魏酸对白羽肉鸡生长性能、屠宰性能、肉品质、肌肉质构特性和血清生化指标的影响。选用1日龄健康、体重相近的爱拔益加(AA)肉公雏240只,随机分为4组,每组6个重复,每个重复10只鸡。对照组饲喂基础饲粮... 详细信息

本试验旨在研究饲粮中添加不同水平阿魏酸对白羽肉鸡生长性能、屠宰性能、肉品质、肌肉质构特性和血清生化指标的影响。选用1日龄健康、体重相近的爱拔益加(AA)肉公雏240只,随机分为4组,每组6个重复,每个重复10只鸡。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别在基础饲粮中添加100、300和600 mg/kg阿魏酸。试验期42 d。结果表明:1)与对照组相比,100和300 mg/kg阿魏酸添加组1~21日龄料重比显著降低(P<0.05)。2)与对照组相比,各阿魏酸添加组全净膛率和胸肌率均显著提高(P<0.05),腹脂率均显著降低(P<0.05)。3)与对照组相比,各阿魏酸添加组胸肌黄度(b^(*))值均显著降低(P<0.05);300 mg/kg阿魏酸添加组胸肌屠宰后45 min pH(pH_(45 min))显著提高(P<0.05);300和600 mg/kg阿魏酸添加组胸肌屠宰后24 h pH(pH_(24 h))显著提高(P<0.05),胸肌失水率显著降低(P<0.05)。4)与对照组相比,各阿魏酸添加组腿肌红度(a^(*))值和pH_(45 min)均显著提高(P<0.05),24 h滴水损失均显著降低(P<0.05);300 mg/kg阿魏酸添加组腿肌剪切力显著降低(P<0.05)。5)与对照组相比,各阿魏酸添加组胸肌黏附性、内聚性和咀嚼性均显著提高(P<0.05);100 mg/kg阿魏酸添加组胸肌弹性显著提高(P<0.05);300和600 mg/kg阿魏酸添加组胸肌胶黏性显著提高(P<0.05)。6)与对照组相比,300 mg/kg阿魏酸添加组腿肌硬度显著降低(P<0.05);100和300 mg/kg阿魏酸添加组腿肌黏附性显著提高(P<0.05);100和600 mg/kg阿魏酸添加组腿肌内聚性显著提高(P<0.05)。7)与对照组相比,各阿魏酸添加组血清甘油三酯(TG)含量均显著降低(P<0.05);100和600 mg/kg阿魏酸添加组血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量和乳酸脱氢酶(LDH)活性显著降低(P<0.05);300和600 mg/kg阿魏酸添加组血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量显著提高(P<0.05),血清肌酸激酶(CK)活性显著降低(P<0.05)。综上所述,饲粮中添加适宜水平的阿魏酸可以降低AA肉鸡生长前期的料重比,提高全净膛率和胸肌率,降低腹脂率和血清TG含量,对肉品质和肌肉质构特性有一定的改善作用;本试验条件下,白羽肉鸡饲粮中阿魏酸的适宜添加水平为300 mg/kg。

关键词：阿魏酸白羽肉鸡生长性能屠宰性能肉品质质构特性血清生化指标