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地菍总黄酮抗2型糖尿病作用机制的网络药理学研究及实验验证

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现代药物与临床 2024年第1期39卷 23-33页

作者：莫烨云朱盼唐雨菲李笑笑杨秋莉李金燕韦丽秋李丽广西中医药大学药学院广西高校中药神经–代谢及免疫药理重点实验室广西南宁530200

目的利用网络药理学方法研究地菍总黄酮抗2型糖尿病的作用机制,通过动物实验对靶点进行验证。方法通过文献检索收集地菍总黄酮的化学成分,并在Swiss Target Prediction平台进行筛选;依据Swiss Target Prediction、GeneCards、TTD、Dru... 详细信息

目的利用网络药理学方法研究地菍总黄酮抗2型糖尿病的作用机制,通过动物实验对靶点进行验证。方法通过文献检索收集地菍总黄酮的化学成分,并在Swiss Target Prediction平台进行筛选;依据Swiss Target Prediction、GeneCards、TTD、DrugBank数据库预测和筛选地菍总黄酮成分治疗2型糖尿病的作用靶点;由Cytoscape3.7.1构建“成分–疾病–靶点”网络;String数据库构建靶点蛋白相互作用(PPI)网络;R语言对靶点基因进行基因本体(GO)富集分析及京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。以高脂饮食诱导和ip链脲佐菌素(STZ)方法构建2型糖尿病模型大鼠,将2型糖尿病模型造模成功的40只大鼠随机分成模型组,二甲双胍组(0.2 g/kg)组,地菍总黄酮(0.34、0.45、0.60 g/kg)组,每组8只,继续提供高脂饲料喂养,另设对照组。各组每天ig相应药物,1次/d,对照组和模型组ig 0.5%CMC-Na溶液,连续给药5周。记录大鼠体质量、饮水量和摄食量,检测大鼠血糖及血脂的相关指标,运用q PCR法检测地菍总黄酮对2型糖尿病大鼠肝组织中磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)作用靶点的调控作用。Western blotting法检测各组大鼠肝脏中Akt、AMPK、固醇调节元件结合蛋白-1C(SREBP-1C)的蛋白相对表达量。结果从地菍总黄酮成分中筛选得到槲皮素、芹菜素、柚皮素等8种活性成分,作用于98个2型糖尿病靶点,GO功能与KEGG富集分析表明,地菍总黄酮抗糖尿病主要通过调节PI3K/Akt信号通路、AMPK相关信号通路等来发挥抗2型糖尿病的作用。动物实验证实,地菍总黄酮可降低2型糖尿病大鼠的空腹血糖(FBG),抑制血脂升高,上调2型糖尿病大鼠肝脏PI3K、Akt、AMPK m RNA表达,显著增加Akt、AMPK蛋白表达含量,降低SREBP-1C蛋白表达含量(P<0.01、0.05),对糖、脂代谢紊乱均具有改善作用,具有良好的抗2型糖尿病作用。结论验证了地菍总黄酮多成分、多靶点、多途径治疗2型糖尿病的特点,其抗糖尿病的作用机制可能与调节PI3K、Akt、AMPK、SREBP-1C靶点的表达水平,从而改善糖脂代谢紊乱有关,为后续更进一步研究作用机制提供参考。

关键词：地菍总黄酮 2型糖尿病网络药理学验证槲皮素芹菜素柚皮素磷脂酰肌醇-3-激酶蛋白激酶B 固醇调节元件结合蛋白-1C

响应面法优化提取壮药三七姜总酚酸及其镇痛抗炎作用机制研究

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饲料研究 2024年第9期47卷 106-112页

作者：刘星晨梁洁马丽娟曹玉嫔陈嘉怡陈晓思魏江存赵立春广西中医药大学药学院广西南宁530200 广西壮瑶药重点实验室广西南宁530200 广西高校中药提取纯化与质量分析重点实验室广西南宁530200 壮瑶药协同创新中心广西南宁530200 广西壮族自治区民族药资源与应用工程研究中心广西南宁530200 广西国际壮医医院广西南宁530201

试验采用响应面法优化壮药三七姜总酚酸提取工艺并探究其镇痛抗炎作用机制。以三七姜为原料,采用回流提取法提取总酚酸,通过单因素试验和Box-Behnken试验对提取工艺进行优化,探究乙醇浓度、液料比、提取时间对总酚酸得率的影响;建立醋... 详细信息

试验采用响应面法优化壮药三七姜总酚酸提取工艺并探究其镇痛抗炎作用机制。以三七姜为原料,采用回流提取法提取总酚酸,通过单因素试验和Box-Behnken试验对提取工艺进行优化,探究乙醇浓度、液料比、提取时间对总酚酸得率的影响;建立醋酸致小鼠扭体模型和小鼠棉球肉芽肿模型,探究三七姜总酚酸的镇痛抗炎作用机制。结果表明,三七姜总酚酸的最优提取工艺为乙醇浓度42%、液料比60 mL/g、回流时间60 min。在此条件下,三七姜总酚酸得率可达6.09 mg/g。与模型组相比,三七姜醇提物各剂量对肉芽肿炎症具有抑制作用,可以降低小鼠扭体次数,降低白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、前列腺素E2(PGE2)、白细胞介素-1β(IL-1β)、5-羟色胺(5-HT)含量,增加环磷酸腺苷(cAMP)含量。研究表明,响应面法优化壮药三七姜总酚酸的提取工艺稳定可靠;三七姜总酚酸具有一定的镇痛抗炎活性,其机制可能与减少体内IL-6、TNF-α、IL-1β和PGE2等促炎性细胞因子分泌有关。

关键词：三七姜响应面法总酚酸镇痛抗炎

不同产地荔枝叶抗炎、镇痛作用谱-效关系研究

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中国医院药学杂志 2024年第4期44卷 365-371页

作者：祁金丽宋燕劲陆春莲郑飘雪梁炎丽曹玉嫔梁洁广西中医药大学药学院广西南宁530200 广西壮瑶药重点实验室广西南宁530200 广西高校中药提取纯化与质量分析重点实验室广西南宁530200 中药固体制剂制造技术国家工程研究中心华南分中心广西南宁530200

目的:采用高效液相色谱法(HPLC)建立荔枝叶药材的指纹图谱,并探究指纹图谱与抗炎、镇痛作用的谱效关系。方法:建立不同产地荔枝叶药材的HPLC指纹图谱;构建二甲苯致小鼠耳廓肿胀急性炎症模型及醋酸致小鼠扭体镇痛模型,考察荔枝叶抗炎、... 详细信息

目的:采用高效液相色谱法(HPLC)建立荔枝叶药材的指纹图谱,并探究指纹图谱与抗炎、镇痛作用的谱效关系。方法:建立不同产地荔枝叶药材的HPLC指纹图谱;构建二甲苯致小鼠耳廓肿胀急性炎症模型及醋酸致小鼠扭体镇痛模型,考察荔枝叶抗炎、镇痛活性;采用双变量相关分析、灰色关联度分析与偏最小二乘回归分析的方法探究指纹图谱共有峰与抗炎、镇痛药效指标的谱效关系。结果:建立了荔枝叶药材的指纹图谱,确定了18个共有峰,并指认出7个成分,分别为没食子酸(2号峰)、原儿茶酸(3号峰)、儿茶素(4号峰)、表儿茶素(8号峰)、芦丁(12号峰)、槲皮素(16号峰)、山柰酚(18号峰)。经双变量相关分析发现,17号峰与抗炎作用呈显著相关,1,4,6,8,14,15,16号峰与抗炎作用呈现低度相关;1,17号峰与镇痛作用呈显著相关,4,7,8,9,13,14,15,16,18号峰与镇痛作用呈低度相关。经灰色关联度分析发现,除2,3号峰关联度大于0.6,其余共有峰与抗炎、镇痛作用的关联度均大于0.8。经PLS分析发现,1,4,6,8,16,17号峰对抗炎、镇痛作用的贡献较大。结论:建立了荔枝叶HPLC指纹图谱,结合3种谱效分析方法表明1,4(儿茶素)、6,8(表儿茶素)、16(槲皮素)、17号峰所代表的化学成分可能是荔枝叶发挥抗炎或镇痛作用的药效物质,可为荔枝叶药效物质基础筛选和质量控制研究提供依据。

关键词：荔枝叶谱-效关系镇痛抗炎

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鸡血藤的质量控制现状及质量标志物预测分析

中华中医药学刊 2024年第5期42卷 125-130页

作者：梁炎丽梁洁孙正伊陆春莲郑飘雪谢晶晶柳贤福广西中医药大学广西南宁530200 广西壮瑶药重点实验室广西南宁530200 广西高校中药提取纯化与质量分析重点实验室广西南宁530200 中药固体制剂制造技术国家工程研究中心华南分中心广西南宁530200 广西中医药大学附属瑞康医院广西南宁530011 广西中医药大学赛恩斯新医药学院广西南宁530222

鸡血藤中含有黄酮类、酚酸类、苯丙素类、蒽醌类、甾醇类及萜类、生物碱类、香豆素类等多种活性成分。现代药理研究表明,鸡血藤具有抗血小板聚集、保护心肌缺血、调节血脂、抗氧化、抗炎、抗病毒、镇静催眠、保肝的药理作用,具有良好的... 详细信息

鸡血藤中含有黄酮类、酚酸类、苯丙素类、蒽醌类、甾醇类及萜类、生物碱类、香豆素类等多种活性成分。现代药理研究表明,鸡血藤具有抗血小板聚集、保护心肌缺血、调节血脂、抗氧化、抗炎、抗病毒、镇静催眠、保肝的药理作用,具有良好的发展前景。概括鸡血藤的质量控制现状,从植物亲缘学、传统药性、传统药效、不同配伍、新的药效用途、化学成分可测性、网络药理学等7个方面对鸡血藤的质量标志物进行预测分析,儿茶素、表儿茶素、甘草素、大豆苷、芒柄花苷、大豆苷元、槲皮素、木犀草素、柚皮素、芦荟大黄素等成分可作为鸡血藤质量标志物的筛选对象,为提升鸡血藤质量标准提供了参考。

关键词：鸡血藤质量控制质量标志物预测

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山豆根的质量控制现状及质量标志物预测分析

中华中医药学刊 2024年第5期42卷 103-107页

作者：陆春莲梁洁孙正伊郑飘雪梁炎丽曹玉嫔广西中医药大学广西南宁530200 中药固体制剂制造技术国家工程研究中心华南分中心广西南宁530200 广西高校中药提取纯化与质量分析重点实验室广西南宁530200 广西壮瑶药工程技术研究中心广西南宁530200 广西中医药大学附属瑞康医院广西南宁530011

山豆根含有生物碱、黄酮类、多糖、三萜及三萜皂苷、挥发油、有机酸等活性成分,主要有清热解毒、消肿利咽的功效。阐述山豆根的质量控制现状,预测山豆根的质量标志物。从传统药性、传统药效、不同复方配伍、可测性化学成分、新的药效用... 详细信息

山豆根含有生物碱、黄酮类、多糖、三萜及三萜皂苷、挥发油、有机酸等活性成分,主要有清热解毒、消肿利咽的功效。阐述山豆根的质量控制现状,预测山豆根的质量标志物。从传统药性、传统药效、不同复方配伍、可测性化学成分、新的药效用途、植物亲缘关系等7个方面对山豆根质量标志物作预测分析。山豆根的质量标志物可能含有苦参碱、氧化苦参碱、槐根碱、槐定碱、槐醇、芒柄花素、高丽槐素、金雀花碱、β-甾醇、红车轴草苷等化合物。这些化合物可首选作为山豆根的质量标志物,为建立山豆根的质量控制标准研究提供参考。

关键词：山豆根质量控制质量标志物

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止得咳颗粒在大鼠体内的代谢产物研究

中国药房 2024年第2期35卷 172-178页

作者：梁洁郑飘雪陈辉华黄春燕梁炎丽陆春莲谢晶晶马玉明彭嘉文赵立春陈日兰广西中医药大学药学院南宁530200 广西高校中药提取纯化与质量分析重点实验室南宁530200 中药固体制剂制造技术国家工程研究中心华南分中心南宁530200 广西壮瑶药工程技术研究中心南宁530200 钦州市检验检测中心广西钦州535000 广西中医药大学附属瑞康医院药剂科南宁530011

目的分析止得咳颗粒在大鼠体内的代谢产物并推测其代谢途径。方法将雄性SD大鼠随机分为空白组、给药组(止得咳颗粒,9.45 g/kg),每组灌胃超纯水或相应药液,每天2次,每次灌胃间隔6~8 h,连续3 d。收集各组大鼠血清、粪便、尿液样品,利用超... 详细信息

目的分析止得咳颗粒在大鼠体内的代谢产物并推测其代谢途径。方法将雄性SD大鼠随机分为空白组、给药组(止得咳颗粒,9.45 g/kg),每组灌胃超纯水或相应药液,每天2次,每次灌胃间隔6~8 h,连续3 d。收集各组大鼠血清、粪便、尿液样品,利用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Exactive-MS)技术鉴定大鼠灌胃止得咳颗粒后上述生物样品中的代谢产物,并推测其代谢途径。结果大鼠灌胃止得咳颗粒后,在其血清、尿液、粪便样品中共鉴定出16个原型成分(如野鸢尾黄素、黄芩素、绿原酸等)和11个代谢产物(如山柰酚或木犀草素水合产物、绿原酸甲基化产物、黄芩苷羟基化产物)。其中,血清样品中鉴定出8个原型成分和4个代谢产物;尿液样品中鉴定出10个原型成分和7个代谢产物;粪便样品中鉴定出8个原型成分和5个代谢产物。结论止得咳颗粒在大鼠体内的代谢成分主要包括黄芩苷、野鸢尾黄素、绿原酸,主要涉及甲基化、羟基化、葡萄糖醛酸化等代谢途径。

关键词：止得咳颗粒超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱技术代谢产物代谢途径大鼠

15种中药基原豆科植物查尔酮合酶基因的生物信息学分析

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分子植物育种 2023年

作者：陈靖余林婵明如宏黄鼎谭勇黄荣韶姚绍嫦广西中医药大学药学院广西高校中药民族药资源保护与利用重点实验室

查尔酮合酶(chalcone synthase， CHS)是植物类黄酮生物合成途径的关键限速酶之一。为了比较不同豆科植物CHS的氨基酸序列结构特征及预测其在调控类黄酮化合物的生物合成过程中发挥的作用，本研究利用生物信息学分析15种中药基原的豆科... 详细信息

查尔酮合酶(chalcone synthase， CHS)是植物类黄酮生物合成途径的关键限速酶之一。为了比较不同豆科植物CHS的氨基酸序列结构特征及预测其在调控类黄酮化合物的生物合成过程中发挥的作用，本研究利用生物信息学分析15种中药基原的豆科植物CHS基因的编码蛋白的理化性质、亚细胞定位、蛋白二级结构与系统发育树。结果表明，15种CHS蛋白均呈酸性，属于亲水性蛋白，大部分为稳定蛋白，定位于细胞质，无跨膜结构与信号肽，磷酸化位点总数51～62个；α螺旋与无规则卷曲是豆科植物CHS蛋白中主要存在的结构原件；15个豆科CHS基因均有CHS＿like的保守序列，其中5个属于PLN03172基因家族，其他的属于PLN03173基因家族；CHS的氨基酸序列高度同源，同源度为79.42%，均具有3个保守的蛋白催化位点、2个高度保守结构域、2个底物特异性残基与1个丙二酰辅酶A结合部位；系统进化树结果显示15种豆科植物CHS被分为3个分支，与植物分类学基本一致。基于上述结果，15种中药基原的豆科CHS具有较高的保守性和稳定性，推测可能执行类似的功能，研究结果为豆科植物CHS的功能及作用机制研究提供了理论依据。

关键词：中药基原植物豆科查尔酮合酶类黄酮生物信息学

氮磷钾肥对有柄石韦生理及绿原酸合成积累的影响

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广西植物 2023年

作者：步园园潘志芳崔祥祥周笑陈建桦黄荣韶李良波广西中医药大学药学院广西中医药大学广西高校中药民族药资源保护与利用重点实验室

为探讨氮磷钾3种养分对有柄石韦生理及有效成分绿原酸合成积累的影响，该研究以有柄石韦组培苗为材料，分别用低养分(不施肥：N0,P0,K0)、正常施肥(N:0.2 g·kg-1,P:0.15 g·kg-1,K:0.15 g·kg-1)和高养分(N1:0.4 g·kg-1,P1:0.3 g·kg-... 详细信息

为探讨氮磷钾3种养分对有柄石韦生理及有效成分绿原酸合成积累的影响，该研究以有柄石韦组培苗为材料，分别用低养分(不施肥：N0,P0,K0)、正常施肥(N:0.2 g·kg-1,P:0.15 g·kg-1,K:0.15 g·kg-1)和高养分(N1:0.4 g·kg-1,P1:0.3 g·kg-1,K1:0.3 g·kg-1)3个浓度梯度，设置7个处理分别为NPK、N0PK、N1PK、NP0K、NP1K、NPK0、NPK1，测定不同处理下有柄石韦的抗性生理指标、绿原酸含量及其合成关键酶活性。结果表明：(1)氮磷钾肥对有柄石韦的抗性生理有显著的影响，超氧化物歧化酶(SOD)在高氮和低钾处理中活性显著增加，而3种养分的低浓度和高浓度处理均会导致过氧化氢酶(CAT)活性显著上升；(2)不同水平氮、磷和钾浓度对有柄石韦绿原酸含量存在显著影响，正常施肥的绿原酸含量最高，达到12.92 mg·g-1，高钾施肥的绿原酸含量最低为7.79 mg·g-1，钾肥对绿原酸含量影响最显著；(3)绿原酸合成关键酶活性在不同施肥处理中差异显著，绿原酸含量与奎宁酸羟基肉桂酰转移酶(HQT)和香豆酰辅酶连接酶(4CL)活性呈显著正相关，与莽草酸羟基肉酰转移酶(HCT)活性显著负相关，HQT、4CL和HCT是导致绿原酸含量差异的关键因素。研究结果可为有柄石韦药材的人工栽培提供理论依据。

关键词：有柄石韦氮磷钾肥生理绿原酸积累

积雪草实时荧光定量PCR内参基因筛选和验证

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分子植物育种 2023年

作者：罗家佳零唯明如宏黄鼎广西中医药大学广西壮瑶药重点实验室广西中医药大学药学院广西高校中药民族药资源保护与利用重点实验室

为筛选出可在积雪草不同组织中稳定表达的内参基因，本研究基于已有的积雪草转录组数据以积雪草不同组织(根，茎，叶，花，叶柄)为材料，利用RT-qPCR检测和分析候选内参基因的表达情况，通过geNorm， NormFinder， BestKeeper， Ref... 详细信息

为筛选出可在积雪草不同组织中稳定表达的内参基因，本研究基于已有的积雪草转录组数据以积雪草不同组织(根，茎，叶，花，叶柄)为材料，利用RT-qPCR检测和分析候选内参基因的表达情况，通过geNorm， NormFinder， BestKeeper， RefFinder对候选内参基因进行稳定性分析。结果表明，初选出10个常用的候选内参基因，包括Actin、EF1α、eIF4α、UBQ10、PP2A、18S rRNA、GAPDH、TUB6、CYP、TIP41，其中eIF4α是积雪草不同组织中表达最稳定的内参基因，其次为GAPDH和EF1α，而TUB6是表达最不稳定的内参基因。该研究将为进一步深入研究积雪草的基因表达奠定基础。

关键词：积雪草内参基因实时荧光定量PCR 基因表达