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凡纳滨对虾脂肪酸结合蛋白基因全长cDNA的克隆及序列分析

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水产学报 2010年第11期34卷 1681-1688页

作者：赵永贞陈秀荔谢达祥王大鹏彭敏杨春玲杨彦豪韦嫔媛陈晓汉广西水产研究所广西水产动物遗传育种与健康养殖重点实验室

克隆了凡纳滨对虾脂肪酸结合蛋白基因全长cDNA并进行了序列分析。该基因由1042bp的碱基组成,开放阅读框长411bp,编码由136个氨基酸组成的蛋白,基因两翼分别存在113bp(5’端)和518bp(3’段)的非翻译区。聚类分析表明,凡纳滨对虾脂肪酸结... 详细信息

克隆了凡纳滨对虾脂肪酸结合蛋白基因全长cDNA并进行了序列分析。该基因由1042bp的碱基组成,开放阅读框长411bp,编码由136个氨基酸组成的蛋白,基因两翼分别存在113bp(5’端)和518bp(3’段)的非翻译区。聚类分析表明,凡纳滨对虾脂肪酸结合蛋白氨基酸序列与斑节对虾脂肪酸结合蛋白紧密聚为一支,之后聚类顺序依次为刀额新对虾、意大利蜜蜂、斑马鱼、大西洋鲑、鸡、猪和人。通过半定量RT-PCR对该基因在不同组织的表达分析表明,该基因在抗IHHNV对虾肠、胃、肝胰腺和肌肉组织中表达较高,在心肌中表达较低,在眼柄中不表达。比较该基因在抗IHHNV对虾和IHHNV易感对虾心、肝胰腺、肠、胃、眼柄和肌肉组织表达发现,该基因在两种对虾心、肠、胃和肌肉组织中的表达无明显差异,但在肝胰腺中抗IHHNV对虾的表达量明显高于IHHNV易感对虾的表达量,说明该基因参与抗性对虾抑制IHHNV感染的免疫过程。

关键词：凡纳滨对虾脂肪酸结合蛋白基因克隆对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒

凡纳滨对虾HSP10基因序列与低温表达分析

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南方农业学报 2013年第5期44卷 838-843页

作者：彭金霞韦嫔媛殷勤蒋小珍黎铭陈晓汉广西水产研究所/广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室南宁530021

【目的】克隆分析凡纳滨对虾HSP10基因,为研究其在寒冷耐受过程中发挥调控功能提供参考依据。【方法】搜索EST库获得凡纳滨对虾HSP10基因序列,再通过RACE-PCR扩增获得凡纳滨对虾HSP10基因cDNA全长序列,对其进行生物信息学分析,并通过荧... 详细信息

【目的】克隆分析凡纳滨对虾HSP10基因,为研究其在寒冷耐受过程中发挥调控功能提供参考依据。【方法】搜索EST库获得凡纳滨对虾HSP10基因序列,再通过RACE-PCR扩增获得凡纳滨对虾HSP10基因cDNA全长序列,对其进行生物信息学分析,并通过荧光定量PCR分析HSP10基因的组织表达及低温胁迫下表达量的变化。【结果】凡纳滨对虾HSP10基因cDNA全长720bp,包含306bp的开放阅读框,编码102个氨基酸。以各物种的HSP10蛋白序列构建系统进化树,能较好反映各物种间的进化关系。荧光定量PCR分析结果显示,凡纳滨对虾HSP10 mRNA在各组织中呈遍在表达,其中以肌肉中的表达量最高。低温表达谱分析结果显示,凡纳滨对虾HSP10 mRNA在低温处理凡纳滨对虾的各组织中均呈下调表达,当处理温度降至13℃,其在肝胰腺中表达量降至最低。【结论】凡纳滨对虾HSP10在结构和进化上较保守,其mRNA表达量在低温胁迫下呈下降趋势,可能在寒冷耐受过程中发挥负调控作用。

关键词：凡纳滨对虾热休克蛋白 HSP10基因低温表达量荧光定量PCR

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石斑鱼的研究进展

南方农业学报 2012年第7期43卷 1058-1065页

作者：王大鹏曹占旺谢达祥甘西广西水产研究所/广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室南宁530021

通过对石斑鱼当前的繁育、养殖模式及技术、疾病防治、分子水平等研究现状进行综述,发现石斑鱼作为我国南方沿海快速发展的新兴海洋鱼类,拥有广阔的发展前景,但苗种繁育、养殖病害、饲料、养殖方式等4个突出问题严重制约石斑鱼产业的快... 详细信息

通过对石斑鱼当前的繁育、养殖模式及技术、疾病防治、分子水平等研究现状进行综述,发现石斑鱼作为我国南方沿海快速发展的新兴海洋鱼类,拥有广阔的发展前景,但苗种繁育、养殖病害、饲料、养殖方式等4个突出问题严重制约石斑鱼产业的快速发展,因此建议在苗种繁育方面要重点研究生物饵料的稳定培养技术,解决苗种繁育早期活饵供应不足的问题;在养殖病害方面既要加强研发高效疫苗的力度,又要推广"防重于治"的观念;在饲料问题方面应着力探索鱼粉的替代植物蛋白,进行低碳养殖;在养殖方式方面则应着力推广深海网箱养殖和工厂化循环水高密度养殖模式,提升养殖效率,拓展潜在养殖空间,以期促进石斑鱼产业的快速发展。

关键词：石斑鱼繁育研究养殖模式疫病防治饲料研究进展

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卵形鲳鲹微卫星分子标记的筛选

武汉大学学报（理学版） 2010年第5期56卷 564-569页

作者：陈秀荔肖群平陈晓汉彭敏李咏梅广西水产研究所/广西水产动物遗传育种与健康养殖重点实验室广西南宁530021

本研究通过生物素与链霉素的强亲和性原理,采用生物素-磁珠吸附微卫星富集法筛选卵形鲳鲹的微卫星分子标记序列.从201个菌落中挑选出152个阳性克隆进行测序,成功测序137个,微卫星含量达到90.13%,共得到131个重复次数在6次以上的微卫星DN... 详细信息

本研究通过生物素与链霉素的强亲和性原理,采用生物素-磁珠吸附微卫星富集法筛选卵形鲳鲹的微卫星分子标记序列.从201个菌落中挑选出152个阳性克隆进行测序,成功测序137个,微卫星含量达到90.13%,共得到131个重复次数在6次以上的微卫星DNA序列,除生物素探针中使用的CA重复外,还得到TG、TC、GA、ATTT的重复序列.其中完美型85个,占64.9%;非完美型36个,占27.5%;混合型10个,占7.6%.利用PrimerPremier5.0设计引物90对,挑选其中的60对引物进行合成和PCR筛选,结果显示,35对引物可扩增出特异性条带.筛选的卵形鲳鲹微卫星分子标记具有多态性,可用于遗传多样性分析.

关键词：卵形鲳鲹磁珠富集法微卫星

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永生化尼罗罗非鱼巨噬细胞系的建立及鉴定

水产学报 2018年第3期42卷 376-387页

作者：张永德潘传燕余艳玲冯鹏霏罗洪林广西水产科学研究院广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室

为获得具有单一克隆特性的能稳定传代培养的罗非鱼巨噬细胞系,本研究从尼罗罗非鱼腹腔中分离纯化巨噬细胞,采用EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)感染,筛选单克隆细胞的方法建立了尼罗罗非鱼巨噬细胞系,并对其进行了EBV感染鉴定、电镜观... 详细信息

为获得具有单一克隆特性的能稳定传代培养的罗非鱼巨噬细胞系,本研究从尼罗罗非鱼腹腔中分离纯化巨噬细胞,采用EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)感染,筛选单克隆细胞的方法建立了尼罗罗非鱼巨噬细胞系,并对其进行了EBV感染鉴定、电镜观察、端粒酶活性检测、致癌性评估、核型分析以及分子生物学鉴定。研究表明,EBV已整合到尼罗罗非鱼巨噬细胞中且稳定表达,经30代稳定传代,该细胞系仍维持较好的增殖状态;该细胞系表面不平滑,有明显的钝圆形突起和细长的伪足,表现为典型的巨噬细胞形态;端粒酶活性显著高于未经感染的巨噬细胞,而与He La细胞差异不显著,且该细胞系不具有致癌性,说明永生化细胞系构建成功。核型分析结果发现,该细胞系具有44条染色体,其核型公式为2 n=2 x=44=4 sm+17 st+1 t。PCR检测发现,该细胞系存在CD33和CD205的转录本,这些都是单核巨噬细胞的标志物,经18S r RNA检测证明该细胞系来自尼罗罗非鱼巨噬细胞。永生化尼罗罗非鱼巨噬细胞系已被成功建立,该细胞系为研究罗非鱼链球菌HSP70-肽疫苗的高保护率,以及罗非鱼的免疫防御机制提供了工具。

关键词：尼罗罗非鱼巨噬细胞永生化细胞系

禾花鲤与建鲤肌间骨miRNAs测序与分析比较

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水生生物学报 2019年第4期43卷 757-762页

作者：何苹萍王卉韦嫔媛林勇黄姻王韶韶彭金霞吴铁军广西水产科学研究院广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室

为了研究禾花鲤(Rice flower carp)肌间骨柔软的分子调控机制,采集禾花鲤和建鲤(Jian carp)的肌间骨进行micro RNAs (miRNAs)的高通量测序,并进行了生物信息学分析。从禾花鲤肌间骨的小RNA文库测序获得18 32 nt的高质量miRNA序列2547489... 详细信息

为了研究禾花鲤(Rice flower carp)肌间骨柔软的分子调控机制,采集禾花鲤和建鲤(Jian carp)的肌间骨进行micro RNAs (miRNAs)的高通量测序,并进行了生物信息学分析。从禾花鲤肌间骨的小RNA文库测序获得18 32 nt的高质量miRNA序列25474895条、鉴定出成熟miRNAs 595种,而从建鲤文库获得miRNA序列24625715条、成熟miRNAs 570种。表达差异分析结果显示,与建鲤相比,禾花鲤肌间骨中84个miRNAs呈上调表达、267个呈下调表达。禾花鲤下调表达的miRNAs中有7条为已报道的促进人类成骨的miRNAs,上调表达的miRNAs中有6条为已报道的抑制人类成骨的miRNAs。因此推测禾花鲤可能是通过下调表达促进成骨的miRNAs及上调表达抑制成骨的miRNAs来抑制成骨过程,从而维持其肌间骨细小及柔软的特性。研究为国内首次开展禾花鲤肌间骨发育的分子调控机制研究,为水产动物肌间骨发育的研究奠定了基础。

关键词：禾花鲤建鲤肌间骨 miRNAs 高通量测序

碱度调节对南美白对虾室内高密度养殖水质及生长性状的影响

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南方农业学报 2013年第3期44卷 511-515页

作者：王大鹏谢达祥张彬赵永贞陈晓汉广西水产研究所/广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室南宁530021

【目的】研究碱度调节对南美白对虾养殖水质和生长性状的影响，为零换水有氧异氧养殖系统（ZEAH）适宜碱度的选择提供参考。【方法】采用ZEAH养殖理念，通过泼洒碳酸氢钠（NaHCO3）将12个南美白对虾室内高密度养殖池的碱度分别控制在：T... 详细信息

【目的】研究碱度调节对南美白对虾养殖水质和生长性状的影响，为零换水有氧异氧养殖系统（ZEAH）适宜碱度的选择提供参考。【方法】采用ZEAH养殖理念，通过泼洒碳酸氢钠（NaHCO3）将12个南美白对虾室内高密度养殖池的碱度分别控制在：T1碱度130mg／LCaCO3；T2碱度100mg／LCaCO3；T3碱度70mg／LCaCO3；T4不调节碱度，每处理设3个重复。在63d的养殖周期内，定期测量养殖水体理化参数和对虾生长性状参数。【结果】T1和T2处理的养殖水体主要理化参数显著优于T3和T4处理（P〈0．05），但T1和T2处理间差异不显著（P〉0.05）；各处理的氨氮、亚硝酸盐、硝酸盐、磷酸盐、悬浮物和溶解CO：均随养殖时间的增加不断上升，但高碱度处理上升速率较慢。除成活率和饵料转化率外，T1和T2处理的对虾生长性状参数也显著优于T3和T4处理（P〈0．05）。从维持碱度水平来看，也是以T1（碱度调节间隔时间6～9d）和T2（碱度调节间隔时间9～12d）处理的效果较优。【结论】在高密度养殖系统中，使用碱性化合物增加碱度及提高水体缓冲能力是十分有必要的。综合考虑养殖成本和生态效益，以养殖水体碱度维持在100mg／LCaCO3为宜。

关键词：南美白对虾碱度调节水质生长性状零换水有氧异氧养殖系统(ZEAH) 碳酸氢钠(NaHCO3)

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龙胆石斑刺激隐核虫病防治技术研究

水产科技情报 2013年第1期40卷 22-26页

作者：王大鹏何安尤谢达祥李长伙陈晓汉广西水产研究所广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室南宁530021

为研究龙胆石斑(Epinephelus lanceolatus)刺激隐核病的防治技术,从病鱼中分离出刺激隐核虫并进行体外培养,利用获得的各生活阶段刺激隐核虫进行了硫酸铜、铜铁合剂、甲醛和自制中草药剂的高、中、低浓度处理试验。结果表明,不同生活阶... 详细信息

为研究龙胆石斑(Epinephelus lanceolatus)刺激隐核病的防治技术,从病鱼中分离出刺激隐核虫并进行体外培养,利用获得的各生活阶段刺激隐核虫进行了硫酸铜、铜铁合剂、甲醛和自制中草药剂的高、中、低浓度处理试验。结果表明,不同生活阶段的刺激隐核虫对药物的敏感性不同,甲醛对幼虫的杀灭速度最快,而自制中草药剂对包囊的杀灭效果最佳。对龙胆石斑进行了人工感染试验,并用甲醛和中草药剂进行治疗,试验结果,中草药剂在60 mg.L-1浓度下可完全杀灭包囊,且浸泡时间在龙胆石斑的耐受范围之内。

关键词：龙胆石斑刺激隐核虫药物处理中草药剂

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养殖文蛤病害研究进展及前景展望

西南农业学报 2012年第5期25卷 1934-1939页

作者：张彬黄婷熊建华谢达祥韦嫔媛彭金霞陈晓汉广西水产研究所广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室广西南宁530021

文蛤是重要的海洋经济贝类,随着人工养殖的发展,暴发性死亡病害频繁发生,造成重大的经济损失。文章通过归纳总结分析,对养殖文蛤病毒性疾病、细菌性疾病、寄生虫性疾病等主要病害的病原体与致病症状、流行规律、组织病理学、检测与诊断... 详细信息

文蛤是重要的海洋经济贝类,随着人工养殖的发展,暴发性死亡病害频繁发生,造成重大的经济损失。文章通过归纳总结分析,对养殖文蛤病毒性疾病、细菌性疾病、寄生虫性疾病等主要病害的病原体与致病症状、流行规律、组织病理学、检测与诊断、预防和治疗方法等进行综合评述,并展望其研究应用前景。

关键词：文蛤暴发性死亡病害研究进展

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