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角果木树皮来源放线菌多样性及生物活性初探

中国抗生素杂志 2021年第9期46卷 845-853页

作者：李菲李喆黄媛林潘信利黄庶识广西科学院广西近海海洋环境科学重点实验室南宁530007 广西科学院广西海洋天然产物与组合生物合成化学重点实验室南宁530007

勘探红树植物角果木树皮来源放线菌多样性,挖掘具有高效广谱抗农用真菌、高产多种功能酶和一定耐药性的放线菌,为开发农用生防菌肥提供参考依据。应用可培养技术和16S rRNA基因序列的系统发育分析研究红树植物角果木中可培养放线菌的多... 详细信息

勘探红树植物角果木树皮来源放线菌多样性,挖掘具有高效广谱抗农用真菌、高产多种功能酶和一定耐药性的放线菌,为开发农用生防菌肥提供参考依据。应用可培养技术和16S rRNA基因序列的系统发育分析研究红树植物角果木中可培养放线菌的多样性,并对其进行抑制植物病原菌、功能酶活性及其基因组DNA的聚酮合酶(PKS)基因与非核糖体肽合成酶(NRPS)基因筛选;同时对抑菌活性菌株开展有机磷农药耐受试验。结果表明,从角果木树皮中共分离到30种放线菌,隶属于10科12属;从中筛选出10株放线菌在至少1个抗菌活性检测中显示阳性,且对多种有机磷农药均表现出一定的耐受性;此外,其中24株放线菌具有至少一种功能酶活性,及18株放线菌的基因组DNA扩增出抗生素生物合成基因。综上所述,海南东寨港红树林保护区内红树植物角果木树皮来源放线菌具有丰富的物种多样性和多种显著的生物活性。

关键词：角果木放线菌多样性生物活性抗生素生物合成基因

高产壳聚糖酶菌株筛选鉴定、条件优化及酶学性质分析

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食品工业科技 2024年

作者：梁颖刘睿宋超东谢俊杰殷豆豆许霞杨登峰张红岩申乃坤广西民族大学海洋与生物技术学院广西多糖材料与改性重点实验室广西科学院广西北部湾海洋研究中心广西海洋天然产物与组合生物合成化学重点实验室

为了筛选出高产壳聚糖酶的菌株，并对其最优产酶条件及酶学性质进行研究。本研究从广西北海养殖虾塘底泥采样，经初筛、复筛选出高产壳聚糖酶菌株，并进行鉴定，再通过单因素、Plackett-Burman 及正交试验优化产酶工艺，最后对其酶学性... 详细信息

为了筛选出高产壳聚糖酶的菌株，并对其最优产酶条件及酶学性质进行研究。本研究从广西北海养殖虾塘底泥采样，经初筛、复筛选出高产壳聚糖酶菌株，并进行鉴定，再通过单因素、Plackett-Burman 及正交试验优化产酶工艺，最后对其酶学性质及产物进行研究。结果表明，筛选到1株高产壳聚糖酶的菌株Gxun-5.3.3，鉴定为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)；菌株Gxun-5.3.3产酶的最优工艺为：麦芽糖5 g/L、酵母粉3 g/L、壳聚糖 15 g/L、初始pH 6.0、发酵时间84 h，优化后酶活可达62.03±1.18 U/mL，较优化前(39.87±1.24 U/mL)提高了55.58%；酶学性质研究表明，该酶最适反应温度为60 ℃，最适反应pH为5.0，金属离子中Fe2+、Mn2+对壳聚糖酶有显著的激活作用，而Al3+、Cu2+则有较强的抑制作用；酶解壳聚糖产物经薄层层析(thin layer chromatography， TLC)测定为聚合度2～4的壳寡糖，表明菌株所产壳寡糖酶为内切型。本研究为B. cereus Gxun-5.3.3壳聚糖酶的生产和壳寡糖的酶法制备提供了理论依据。

关键词：壳聚糖酶蜡样芽孢杆菌条件优化酶学性质壳寡糖

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红树林土壤中假单胞菌群的重金属耐受活性

广西科学 2021年第6期28卷 607-615页

作者：李菲李喆黄庶识苏芯莹覃仙玲广西科学院广西近海海洋环境科学重点实验室广西南宁530007 广西科学院广西海洋天然产物与组合生物合成化学重点实验室广西南宁530007

本研究从广西钦州茅尾海红树林保护区土壤中分离出的假单胞菌群着手,对其进行重金属耐受性能筛选,旨在获得可对重金属污染环境进行高效修复的菌株。选用传统稀释涂布法和16S rRNA基因序列的系统发育分析红树林土壤中的可培养假单胞菌;... 详细信息

本研究从广西钦州茅尾海红树林保护区土壤中分离出的假单胞菌群着手,对其进行重金属耐受性能筛选,旨在获得可对重金属污染环境进行高效修复的菌株。选用传统稀释涂布法和16S rRNA基因序列的系统发育分析红树林土壤中的可培养假单胞菌;通过肉汤稀释法对菌株展开6种重金属耐受特性研究,对其进行耐受基因检测,并进一步测试重金属耐受活性显著菌株的重金属吸附性能。结果表明,从红树林土壤中共获得23株假单胞菌,18株菌对至少一种重金属表现出耐受活性,总阳性率为78.26%;10株菌的基因组DNA中检测出重金属耐受基因。其中,对铅和/或锌耐受活性显著的11株菌中,Y234、Y123、Y264、Y225和Y346具有显著的吸附性能,铅和/或锌的吸附率均大于50%。广西钦州茅尾海红树林保护区土壤中可培养假单胞菌群丰富,其重金属耐受活性显著,具有较大的挖掘潜力。

关键词：广西红树林土壤假单胞菌群重金属耐受菌耐受基因

山口红树林土壤芽孢杆菌多样性及纤维素酶活性筛选研究

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广西科学 2021年第5期28卷 473-481页

作者：李菲李喆覃仙玲黄庶识苏芯莹潘信利广西科学院广西近海海洋环境科学重点实验室广西南宁530007 广西科学院广西海洋天然产物与组合生物合成化学重点实验室广西南宁530007

为探究广西山口红树林保护区内土壤中芽孢杆菌的多样性,挖掘具有稳定性好、耐高温的纤维素酶活性菌株,本研究利用可培养技术和基于16S rRNA基因序列的系统发育树分析研究红树林土壤中可培养芽孢杆菌的多样性,并以羧甲基纤维素钠为唯一碳... 详细信息

为探究广西山口红树林保护区内土壤中芽孢杆菌的多样性,挖掘具有稳定性好、耐高温的纤维素酶活性菌株,本研究利用可培养技术和基于16S rRNA基因序列的系统发育树分析研究红树林土壤中可培养芽孢杆菌的多样性,并以羧甲基纤维素钠为唯一碳源,结合刚果红纤维素培养法、滤纸条崩解试验、纤维素酶活力测定法,对分离出的芽孢杆菌开展纤维素降解活性研究。结果表明,从红树林土壤中共分离出171株芽孢杆菌,隶属于4科12属40种,其中芽孢杆菌属为优势菌属;从中筛选出9株具有显著纤维素酶活性的芽孢杆菌,其中4株具有显著的热稳定性。广西山口红树林自然保护区内土壤中蕴含着十分丰富的可培养芽孢杆菌种类,且部分菌株呈现出显著的纤维素酶活性,具有较大的挖掘潜力。

关键词：广西红树林土壤芽孢杆菌物种多样性纤维素酶活性

广西茅尾海红树林植物根际土壤放线菌多样性及抗菌活性研究

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中国病原生物学杂志 2018年第11期13卷 1221-1226,1231页

作者：叶景静郑红芸吴越蒋莲秀陈建宏黄庶识黄大林桂林医学院广西桂林541000 渭南职业技术学院广西海洋天然产物与组合生物合成化学重点实验室培育基地

目的研究广西茅尾海红树林植物根际土壤放线菌资源多样性及抗菌活性,为寻找新型抗菌药物奠定基础。方法采集自茅尾海的红树林土壤样品8份,采用8种分离培养基,以稀释涂布法分离纯化放线菌;通过PCR扩增和测序获得菌株16SrRNA基因序列并在... 详细信息

目的研究广西茅尾海红树林植物根际土壤放线菌资源多样性及抗菌活性,为寻找新型抗菌药物奠定基础。方法采集自茅尾海的红树林土壤样品8份,采用8种分离培养基,以稀释涂布法分离纯化放线菌;通过PCR扩增和测序获得菌株16SrRNA基因序列并在数据库中搜索比对,分析放线菌抗菌活性的多样性;放线菌液发酵后离心,留取上清液,部分用乙酸乙酯萃取,菌丝经丙酮浸泡萃取。分别取发酵液水相、酯相、菌丝浸提液3类样品;采用纸片扩散法(KB法)测定其抗菌活性;对4株活性菌进行形态学和生理生化检测。结果从8份红树林根际土壤标本中共分离到88株放线菌,分属于6个目8个科9个属,优势菌属为小单孢菌属和链霉菌属;桐花树根际土壤样品和高氏一号培养基分离的菌株较多;16SrRNA基因序列相似率低于98.65%的放线菌共6株;抗菌活性检测结果表明,14株放线菌中,有7株具良好抗菌活性,阳性率为50.00%,其中4株分别对粪肠球菌或表皮球菌有一定抑制效果。初步鉴定B44为链霉菌属Streptomyces aurantiogriseua NBRC12842,相似率为99.43%;B534为小双孢菌属Micromonospora bryophytorumNEAU-TX2-2,相似率为99.86%;B593和B276为壤霉菌属Agromyces aurantiacusYIM21741,相似率分别为98.29%和98.32%,其相似率低于98.65%可能为潜在新物种。结论广西茅尾海红树林植物根际土壤中含有丰富的放线菌资源,具有从中发现放线菌新型物种和新抗生素的潜力。

关键词：放线菌红树林茅尾海抗菌活性多样性

海藻酸钠裂解酶高产菌株的筛选、鉴定及产酶条件的优化

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食品工业科技 2021年第21期42卷 125-132页

作者：王巧贞潘信利杨玲李菲李喆黄媛林李翠梅黄庶识广西科学院广西海洋天然产物与组合生物合成化学重点实验室广西南宁530007 广西师范大学物理科学与技术学院广西桂林541004

以海藻酸钠为唯一碳源培养基,对广西北海涠洲岛采集的马尾藻进行微生物的筛选和分离,采用3,5-二硝基水杨酸法(DNS)进行海藻酸钠裂解酶相对酶活力测定,获得高产酶菌株M0101;依据形态、生理生化特征及16S rDNA序列分析对其进行鉴定,该菌... 详细信息

以海藻酸钠为唯一碳源培养基,对广西北海涠洲岛采集的马尾藻进行微生物的筛选和分离,采用3,5-二硝基水杨酸法(DNS)进行海藻酸钠裂解酶相对酶活力测定,获得高产酶菌株M0101;依据形态、生理生化特征及16S rDNA序列分析对其进行鉴定,该菌属于弧菌属,命名为Vibrio gangliei M0101;通过单因素实验确定了菌株M0101的产酶优化方案:海藻酸钠50 g/L,(NH_(4))_(2)SO_(4)2 g/L,K_(2)HPO_(4)1 g/L,NaCl 100 g/L,MgSO_(4)·7H_(2)O 1 g/L,FeSO_(4)·7H_(2)O 0.01 g/L,培养温度30℃,初始pH9.0,200 r/min;优化后菌株M0101产酶最大活性可达221.90 U/mL,相较于优化前最大酶活36.32 U/mL,优化后酶活力是优化前的6.11倍。表明M0101能高效水解高浓度海藻酸钠,是强耐盐的菌株,具有大规模制备海藻酸钠裂解酶的潜力。

关键词：海藻酸钠裂解酶高效水解高耐盐酶活力产酶条件优化

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白骨壤内生细菌的多样性及其抑菌活性分析

西南农业学报 2020年第9期33卷 1991-1998页

作者：倪婕李菲李雨霖陆璐谢一嘉刘小玲余炼广西大学轻工与食品工程学院广西南宁530004 广西科学院/广西近海海洋环境科学重点实验室广西南宁530007 广西科学院广西海洋天然产物与组合生物合成化学重点实验室培育基地广西南宁530007

【目的】分析红树植物白骨壤(Avicennia marina)内生细菌的多样性并检测其抗菌活性,为红树植物微生物资源的开发利用提供理论依据。【方法】以广西北部湾北仑河口红树植物白骨壤为试验材料,通过传统稀释涂布法和16S rRNA序列鉴定分析其... 详细信息

【目的】分析红树植物白骨壤(Avicennia marina)内生细菌的多样性并检测其抗菌活性,为红树植物微生物资源的开发利用提供理论依据。【方法】以广西北部湾北仑河口红树植物白骨壤为试验材料,通过传统稀释涂布法和16S rRNA序列鉴定分析其内生细菌的多样性;通过发酵得到内生细菌中的次级代谢产物,并采用牛津杯法测试内生细菌次生代谢产物对5种病原菌的抑菌活性。【结果】从白骨壤的果实、花、根、叶和皮等部位共分离到61株内生细菌,隶属于3门4纲12目16科20属36种,其中有8株潜在新种,放线菌是白骨壤内生细菌的优势类群。各部位的内生细菌数量排序为果实>花>皮>根=叶,果实的内生细菌共10个属,占总属数的50.00%。36株细菌至少对1种指示菌株具有抑菌活性,有4株细菌具有广谱抑菌活性,其中文昌小单胞菌YA350对枯草芽孢杆菌和扩展青霉的抑菌活性最强。【结论】从白骨壤的果实、花、皮、根和叶部位分离得到的内生细菌多样性较丰富,且部分具有广谱抑菌活性,可作为开发新型生物活性化合物的重要来源。

关键词：白骨壤内生细菌多样性抑菌活性

茅尾海桐花树根际土壤来源几丁质降解菌株多样性及抗植物真菌活性的研究

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中国抗生素杂志 2022年第5期47卷 453-462页

作者：王巧贞李锋易淑琼杨玲潘信利黄媛林李喆李菲廖思明黄庶识广西科学院广西海洋天然产物与组合生物合成化学重点实验室南宁530007 黔南民族师范学院化学化工学院都匀558000 广西科学院广西近海海洋环境科学重点实验室南宁530007 广西科学院国家非粮生物质能源工程技术研究中心南宁530007

目的以胶体几丁质为唯一碳源的培养基,从广西茅尾海红树林桐花树根际土壤中分离几丁质降解菌株,并应用复筛培养基筛选产几丁质酶菌株,结合平板对峙法挖掘能高效抑制植物病原真菌生长的活性菌株,为红树林来源微生物农用生物防治药物的研... 详细信息

目的以胶体几丁质为唯一碳源的培养基,从广西茅尾海红树林桐花树根际土壤中分离几丁质降解菌株,并应用复筛培养基筛选产几丁质酶菌株,结合平板对峙法挖掘能高效抑制植物病原真菌生长的活性菌株,为红树林来源微生物农用生物防治药物的研发奠定基础。方法采用平板稀释涂布法和划线法分离纯化菌株,并应用复筛培养基通过透明圈观察法检测菌株几丁质酶活;采用Chelex-100法提取菌株基因组DNA,通过PCR扩增菌株的16S rRNA基因序列,上传至EzBioCloud数据库进行在线比对;采用平板对峙法筛选抗植物病原真菌的活性菌株;采用PKS和NRPS基因的扩增引物分别检测基因组聚酮合酶基因与非核糖体肽合成酶基因。结果从桐花树根际土壤中分离获得28株几丁质降解菌,隶属于10目10科17属;其中5株几丁质降解菌对4种植物病原真菌均显示出抑菌活性,抑菌活性阳性率为17.86%;并在17株几丁质降解菌中检测到抗生素生物合成基因。结论广西茅尾海红树林桐花树根际土壤来源的细菌及放线菌是重要的几丁质酶菌种资源,它们在抗植物病原真菌方面表现出良好的应用潜力,在新型绿色海洋生物农药、新颖结构海洋药物及其他高赋值产品开发和利用方面具有应用前景。

关键词：桐花树根际土壤几丁质降解菌多样性抗菌活性抗生素生物合成基因

肉桂醛熏蒸对金黄色葡萄球菌胞内生物大分子的影响

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中国食品学报 2023年第10期23卷 90-100页

作者：段雪娟黄煜强张潼韩雅莉吴克刚黄庶识广东工业大学轻工化工学院广州510006 广东工业大学生物医药学院广州510006 广西科学院广西海洋天然产物与组合生物合成化学重点实验室南宁530007

为研究肉桂醛熏蒸对金黄色葡萄球菌的影响,通过平板熏蒸法和菌块转移法研究其抗菌活性,通过透射电镜观察肉桂醛对菌体形态的影响,通过激光镊子拉曼光谱分析肉桂醛熏蒸对金黄色葡萄球菌胞内生物大分子的影响。结果表明,肉桂醛熏蒸对金黄... 详细信息

为研究肉桂醛熏蒸对金黄色葡萄球菌的影响,通过平板熏蒸法和菌块转移法研究其抗菌活性,通过透射电镜观察肉桂醛对菌体形态的影响,通过激光镊子拉曼光谱分析肉桂醛熏蒸对金黄色葡萄球菌胞内生物大分子的影响。结果表明,肉桂醛熏蒸对金黄色葡萄球菌具有良好的抗菌活性,最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)分别为0.25μL/mL和0.5μL/mL。经肉桂醛气熏后的菌体表面皱缩,可能与高浓度肉桂醛导致胞内物质外泄有关。激光镊子拉曼结果表明,肉桂醛气熏处理导致菌体蛋白主链、氢键体系以及空间结构发生改变,DNA单、双链发生断裂,脂酰基链骨架断裂或交联,同时,菌体脂双层的有序度也发生改变,影响膜的流动性,从而菌体的生长受到抑制或致其死亡。激光镊子拉曼光谱可以通过分析拉曼位移和峰强变化,分析单个细胞内生物大分子的骨架和结构变化,从而推断抗菌物质的抗菌机理。

关键词：激光镊子拉曼光谱肉桂醛金黄色葡萄球菌抗菌活性机理