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滇西树鼩源沙门氏菌的分离鉴定及生物学特性研究

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中国畜牧兽医 2023年第4期50卷 1718-1728页

作者：曹颖颖梁亮曾怡蓉钟清华袁小芳唐海波冷静广西中医药大学南宁530200 广西高发传染病中西医结合转化医学重点实验室南宁530200 广西特色实验动物病证模型重点实验室南宁530200

【目的】确定试验滇西树鼩患病致死的原因,分析分离菌株的致病性与耐药情况。【方法】本研究按常规平板划线法对发病死亡的滇西树鼩心脏血、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏进行病原菌分离,进一步对分离菌进行形态学观察、生化试验及16S rRNA基... 详细信息

【目的】确定试验滇西树鼩患病致死的原因,分析分离菌株的致病性与耐药情况。【方法】本研究按常规平板划线法对发病死亡的滇西树鼩心脏血、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏进行病原菌分离,进一步对分离菌进行形态学观察、生化试验及16S rRNA基因鉴定,并进行药敏试验和致病性试验。【结果】从发病死亡的滇西树鼩肝脏和肺脏组织分离得到1株细菌。分离菌在麦康凯培养基上呈浅橘黄色单菌落,镜检为革兰氏阴性短杆菌。生化试验结果显示,分离菌能分解葡萄糖,不发酵乳糖,产气,产硫化氢等,符合沙门氏菌生化特性。遗传进化分析显示,分离株与肉用仔鸡源沙门氏菌CP082916菌株亲缘关系最近,16S rRNA基因核苷酸相似性为99%。药敏试验结果显示,分离菌对氯霉素、庆大霉素、新霉素、诺氟沙星等药物敏感;对克林霉素、万古霉素不敏感。致病性试验结果显示,该菌对树鼩及成年小鼠具有较强致病性,对小鼠的半数致死量(LD 50)为1.6×106 CFU。病理组织学观察显示,感染组树鼩和小鼠肺脏肺泡间隔增宽、间隔内可见炎性细胞浸润;肝脏细胞排列紊乱,见大量坏死细胞崩解,窦状隙变形或减小,中央静脉淤血,周围有炎性细胞浸润;脾脏部分细胞结构紊乱。【结论】沙门氏菌是引起这次试验滇西树鼩发病的致死原因,分离菌对氯霉素、庆大霉素、新霉素敏感,具有较强的致病性。

关键词：滇西树鼩沙门氏菌分离鉴定 16S rRNA 耐药性

蛇床子素通过阻断钙通道降低蛙坐骨神经复合动作电位幅度

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辽宁中医杂志 2024年

作者：李如廷韦慧芳覃翊杰熊柳淇沈宝如王运踊黄东湄黄婕何爽伍冠一广西高发传染病中西医结合转化医学重点实验室广西特色实验动物病证模型重点实验室广西中医药大学基础医学院

目的：探讨蛇床子素对蛙坐骨神经复合动作电位的作用以及离子机制。方法：通过细胞外空气间隔法诱导蛙坐骨神经复合动作电位，观察蛇床子素作用及其机制。结果：蛇床子素剂量依赖降低蛙坐骨神经复合动作电位幅度。胞外0钙能够减小蛇床... 详细信息

目的：探讨蛇床子素对蛙坐骨神经复合动作电位的作用以及离子机制。方法：通过细胞外空气间隔法诱导蛙坐骨神经复合动作电位，观察蛇床子素作用及其机制。结果：蛇床子素剂量依赖降低蛙坐骨神经复合动作电位幅度。胞外0钙能够减小蛇床子素的抑制效应。广谱钙通道阻断剂氯化镉，氯化镧阻断蛇床子素的抑制效应。L型钙通道阻断剂地尔硫卓、维拉帕米，P/T型钙通道阻断剂氯化镍都能阻断蛇床子素的抑制效应。结论：蛇床子素通过抑制钙通道降低蛙的坐骨神经复合动作电位幅度。

关键词：蛙坐骨神经复合动作电位蛇床子素钙通道

α7烟碱型乙酰胆碱受体分子伴侣Tmem35a的克隆及其功能研究

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药学学报 2024年

作者：王紫涵于津鹏长孙东亭朱晓鹏罗素兰广西大学医学院广西特色生物医药重点实验室

烟碱型乙酰胆碱受体 (nicotinic acetylcholine receptors， nAChRs) 属于配体门控离子通道受体，其中α7 nAChR亚型广泛分布于大脑皮层、丘脑和海马体等区域。此外，在小胶质细胞、巨噬细胞、骨髓细胞等也有分布，研究发现其与胆碱... 详细信息

烟碱型乙酰胆碱受体 (nicotinic acetylcholine receptors， nAChRs) 属于配体门控离子通道受体，其中α7 nAChR亚型广泛分布于大脑皮层、丘脑和海马体等区域。此外，在小胶质细胞、巨噬细胞、骨髓细胞等也有分布，研究发现其与胆碱能抗炎通路的功能密切相关，是阿尔茨海默症和精神分裂症药物开发的重要靶标。建立稳定的体外药物筛选体系，对于靶向α7 nAChR新药的高效筛选至关重要。在非洲爪蟾卵母细胞膜上，重组表达nAChRs的不同亚型，并通过电生理技术进行电流检测，是一种先进而复杂的新药筛选模型。分子伴侣可以协助部分nAChRs亚基组装形成功能性受体，为靶向该受体的化合物筛选提供稳定表达的模型。为此，本研究从大鼠体内分离克隆了α7 nAChR的一个分子伴侣基因，其名称为Tmem35a (transmembrane protein 35A)，进一步构建了该基因的重组表达载体，再利用体外转录技术获得了该基因的cRNA，将之与α7 nAChR的cRNA混合后同时注射到非洲爪蟾卵母细胞中进行表达。然后，利用双电极电压钳检测该分子伴侣对α7 nAChR电流表达和通道药理活性的影响。结果显示， TMEM35a (也被称为novel acetylcholine receptor chaperone， NACHO) 可有效提高α7 nAChR蛋白在卵母细胞膜上的表达，受体蛋白表达量提高了约1倍; 其配体乙酰胆碱 (acetylcholine， ACh) 刺激诱发的峰值电流提高了约10倍。注入Tmem35a cRNA后的卵母细胞，其表达的α7 nAChR对激动剂ACh的半数效应浓度为228.5 μmol·L-1，和本体223.3 μmol·L-1基本一致，维持了α7受体正常功能特性。研究结果表明，分子伴侣NACHO有效协助了α7 nAChR在非洲爪蟾卵母细胞的异源表达，稳定表达的α7 nAChR可以为靶向该受体的先导化合物活性筛选提供模型。本研究所有动物实验过程经广西大学伦理委员会审查批准 (批准号: GXU-2023-0249)。

关键词： α7烟碱型乙酰胆碱受体分子伴侣NACHO 基因克隆双电极电压钳药物筛选模型

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一例瑶山亚种树鼩原发多形性脂肪肉瘤的诊断

实验动物与比较医学 2023年第6期43卷 647-653页

作者：李竹欣梁亮曹颖颖翟珊珊戴颖涵何夏陶俊宇冷静唐海波广西中医药大学南宁530200 广西高发传染病中西医结合转化医学重点实验室南宁530200 广西特色实验动物模型重点实验室南宁530200

在常规饲养5年的老龄雌性瑶山亚种树鼩中发现1例背腹部近髋关节处自发一大肿块。大体观察发现,该瘤体巨大,表面皮毛完整,未发生溃烂;该患病树鼩行动不便,精神状态尚可。异氟烷(2%~4%)吸入麻醉后,采血法安乐死,解剖剥离瘤体,肿瘤边界不清... 详细信息

在常规饲养5年的老龄雌性瑶山亚种树鼩中发现1例背腹部近髋关节处自发一大肿块。大体观察发现,该瘤体巨大,表面皮毛完整,未发生溃烂;该患病树鼩行动不便,精神状态尚可。异氟烷(2%~4%)吸入麻醉后,采血法安乐死,解剖剥离瘤体,肿瘤边界不清,向周围组织浸润。HE染色结果显示,肿瘤组织可见小灶多形性及大片脂肪母细胞,多形性肉瘤区域主要由异型的上皮样细胞组成,核分裂易见;脂肪母细胞大小显著不同,可见较多多形性脂肪母细胞,细胞体积大,核深染、畸形,边缘见压迹,胞质见多泡状脂滴。免疫组织化学染色结果显示,肿瘤细胞vimentin阳性,小灶多形性脂肪母细胞S-100阳性,Ki-67较高比例阳性。结合HE染色及免疫组织化学结果,综合诊断该例树鼩的自发肿瘤为多形性脂肪肉瘤。

关键词：瑶山亚种树鼩多形性脂肪肉瘤诊断组织病理学

一例树鼩毛发上皮瘤的诊断及细胞生物学特性观察

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实验动物与比较医学 2023年第4期43卷 440-445页

作者：翟珊珊梁亮曹颖颖李竹欣王青陶俊宇运晨霞冷静唐海波广西中医药大学南宁530200 广西高发传染病中西医结合转化医学重点实验室南宁530200 广西特色实验动物模型重点实验室南宁530200

目的观察实验动物树鼩的原发性肿瘤,为研究毛发上皮瘤的发生机制及防治措施提供基础。方法将常规自然饲养过程中发现胸腹部长有肿块的1例树鼩麻醉后,手术摘除肿块,肿块组织经石蜡切片后行HE染色及免疫组织化学染色,并对肿瘤细胞进行分... 详细信息

目的观察实验动物树鼩的原发性肿瘤,为研究毛发上皮瘤的发生机制及防治措施提供基础。方法将常规自然饲养过程中发现胸腹部长有肿块的1例树鼩麻醉后,手术摘除肿块,肿块组织经石蜡切片后行HE染色及免疫组织化学染色,并对肿瘤细胞进行分离和传代培养。分离获得的肿瘤细胞接种至健康树鼩及裸小鼠皮下。每天观察1次肿瘤细胞的体内成瘤情况,裸小鼠连续观察2个月,树鼩观察6个月以上。结果HE染色显示发病树鼩腹部肿块组织中真皮内基底样细胞整体排列似串花瓣样,形成巢状及条索状且边缘界限清晰的肿瘤;进一步放大倍数后观察发现肿瘤细胞呈栅栏状、基底状排列,核染色深,细胞质少。免疫组织化学染色显示,肿瘤细胞中CK蛋白强阳性表达,ki-67蛋白呈低比例阳性表达;肿瘤细胞间质中Vimentin强阳性表达,Bcl2和CD10呈低比例阳性表达。分离获得的肿瘤细胞在含10%胎牛血清的DMEM培养液中生长良好,可传代培养。健康树鼩及裸小鼠皮下接种肿瘤细胞后,均未见肿瘤形成。结论结合肿瘤发生部位、大体形态结构、病理切片HE染色及免疫组织化学结果,综合诊断该例树鼩胸腹部肿块为毛发上皮细胞瘤。

关键词：树鼩毛发上皮瘤诊断肿瘤细胞移植裸小鼠

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啮齿类动物类风湿关节炎模型概述

医学研究杂志 2022年第12期51卷 182-185页

作者：李宝莹运晨霞广西中医药大学基础医学院、广西高发传染病中西医结合转化医学重点实验室、广西特色实验动物病证模型重点实验室南宁530000

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种病因不明的自身免疫系统疾病,其主要特征是关节滑膜组织的慢性炎症和关节软骨的损伤。RA新疗法的研究与开发需要通过临床分析和借助动物模型来展开研究与验证。目前RA模型构建中常用的实验... 详细信息

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种病因不明的自身免疫系统疾病,其主要特征是关节滑膜组织的慢性炎症和关节软骨的损伤。RA新疗法的研究与开发需要通过临床分析和借助动物模型来展开研究与验证。目前RA模型构建中常用的实验动物是啮齿类动物,主要采用佐剂、Ⅱ型胶原蛋白、链球菌细胞壁、软骨寡聚基质蛋白、降植烷等刺激剂制备不同类型的动物模型,均可从不同病理机制、临床变化等反映RA发病的疾病特点。当研究者为不同研究目的选择RA动物模型时,应根据每种模型在不同诱因下的发病机制,有针对性的选择。本文将几种常用啮齿类动物RA模型的发病特征及构建时需要注意的关键问题等进行概述,为构建啮齿类动物RA模型的研究者提供参考。

关键词：类风湿关节炎啮齿类动物发病机制病理特征

HIV-1感染过程中CD8^+T细胞PD-1水平增高与其活化状态正相关

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细胞与分子免疫学杂志 2016年第10期32卷 1372-1377页

作者：肖健刘显郁晓磊董原王绪琴冷静杨荣阁王盈广西特色实验动物病证模型重点实验室广西南宁530001 上海市疾病预防控制中心上海200336 中国科学院武汉病毒研究所湖北武汉430071

目的分析人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)感染者CD8+T细胞程序性死亡蛋白1(PD-1)、CD38、人白细胞抗原DR(HLA-DR)及KI-67抗原(ki67)的表达水平,探讨HIV-1感染过程中CD8^+T细胞PD-1表达水平与免疫活化和免疫耗竭的关系及意义。方法收集HIV-1... 详细信息

目的分析人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)感染者CD8+T细胞程序性死亡蛋白1(PD-1)、CD38、人白细胞抗原DR(HLA-DR)及KI-67抗原(ki67)的表达水平,探讨HIV-1感染过程中CD8^+T细胞PD-1表达水平与免疫活化和免疫耗竭的关系及意义。方法收集HIV-1感染者87例,健康志愿者22例,密度梯度法分离外周血单个核细胞;采用流式细胞术分析其CD8+T细胞PD-1、CD38、HLA-DR、ki67的表达水平;观察用抗PD-L1 m Ab阻断PD-1/PD-L1通路后CD8^+T细胞分泌肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)的水平变化。结果 HIV-1感染者CD8^+T细胞PD-1表达水平显著高于健康对照组;CD8^+T细胞PD-1水平与病毒载量呈正相关,与CD4^+T细胞数呈负相关;CD8^+T细胞PD-1与CD38、HLA-DR表达呈正相关,与ki67表达无相关性;体外阻断PD-1/PD-L1通路后TNF-α、IFN-γ的表达量增加。结论 HIV-1感染者外周血CD8^+T细胞PD-1表达增加;PD-1过表达与HIV感染过程中CD8^+T细胞功能受抑、免疫耗竭及疾病进程相关;体外阻断PD-1/PD-L1通路可恢复CD8^+T细胞功能。

关键词：人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1) CD8+T细胞细胞程序性死亡蛋白1(PD-1) 免疫活化免疫耗竭

HPLC法测定加味逍遥散复方中丹参酮ⅡA的含量

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医学信息 2020年第2期33卷 165-166+171页

作者：程金来梁丹冷静曹子茵夏猛广西中医药大学基础医学院/广西特色实验动物病症模型重点实验室/广西高发传染病中西医结合转化医学重点实验室培育基地

目的建立加味逍遥散复方中丹参酮Ⅱ的测定方法。方法采用十八烷基硅烷键合硅胶柱(inertsil ODS-3柱250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-0.1%磷酸,进行梯度洗脱;检测波长:270 nm;流速:1.0 ml/min;柱温:20℃。结果丹参酮Ⅱ在0.0001～0.0005... 详细信息

目的建立加味逍遥散复方中丹参酮Ⅱ的测定方法。方法采用十八烷基硅烷键合硅胶柱(inertsil ODS-3柱250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-0.1%磷酸,进行梯度洗脱;检测波长:270 nm;流速:1.0 ml/min;柱温:20℃。结果丹参酮Ⅱ在0.0001～0.0005μg范围内呈现良好的线性关系[r=0.9991,平均回收率为97.36%(RSD=1.38%,n=6)]。结论本方法专属性强,准确度高,重现性良好,可用于加味逍遥散的质量控制。

关键词：加味逍遥散含量测定丹参酮ⅡA HPLC

HPLC法测定癌痛消方及其拆方中松脂醇二葡萄糖苷和芍药苷的含量

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医学信息 2019年第23期32卷 73-77页

作者：程金来梁丹夏猛曹子茵冷静广西中医药大学基础医学院/广西特色实验动物病症模型重点实验室/广西高发传染病中西医结合转化医学重点实验室培育基地

目的建立癌痛消方及其拆方中松脂醇二葡萄糖苷和芍药苷的测定方法。方法采用十八烷基硅烷键合硅胶柱（Inertsil ODS-3柱250×4.6 mm,5μm）;流动相:乙腈-0.1%磷酸（15∶85）为流动相,进行梯度洗脱;检测波长:230 nm（0;6 min,松脂醇二葡... 详细信息

目的建立癌痛消方及其拆方中松脂醇二葡萄糖苷和芍药苷的测定方法。方法采用十八烷基硅烷键合硅胶柱（Inertsil ODS-3柱250×4.6 mm,5μm）;流动相:乙腈-0.1%磷酸（15∶85）为流动相,进行梯度洗脱;检测波长:230 nm（0;6 min,松脂醇二葡萄糖苷）,277 nm（16;0 min,芍药苷）;流速:1.0 ml/min;柱温:30oC。结果癌痛消-补虚组中松脂醇二葡萄糖苷在1.0;.0μg范围内呈现良好的线性关系,r=0.9992,平均回收率为97.23%（RSD=1.31%,n=6）;癌痛消-抑癌组中芍药苷在1.0;.0μg范围内呈现良好的线性关系,r=0.9993,平均回收率为97.08%（RSD=1.38%,n=6）;癌痛消-全方中松脂醇二葡萄糖苷在1.0;.0μg范围内呈现良好的线性关系,r=0.9992,平均回收率为98.01%（RSD=1.30%,n=6）;癌痛消-全方中芍药苷在1.0;.0μg范围内呈现良好的线性关系,r=0.9993,平均回收率为96.97%（RSD=1.54%,n=6）;结论本方法专属性强,准确度高,重现性良好,可用于癌痛消方的质量控制。

关键词：癌痛消方含量测定松脂醇二葡萄糖苷芍药苷 HPLC