检索结果-南通市图书馆

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

犬圆环病毒全基因组克隆与序列分析

病毒学报 2016年第4期32卷 429-435页

作者：孙文超曹慧慧郑敏徐素萍张红云韦显凯苏姣秀何杰勇广西大学动物科技学院南宁530001 广西动物疫病预防控制中心南宁530001 玉林市动物疫病预防控制中心玉林537000 江州区动物疫病预防控制中心崇左532200

犬圆环病毒(Dog circovirus,DogCV)是近年来新发现的一种哺乳动物圆环病毒。为研究DogCV中国流行毒株基因组特性和遗传进化,以犬血清样品提取的DNA为模板,采用重叠PCR技术首次获得DogCV中国流行毒株的全基因组序列,命名为JZ98/2014。序... 详细信息

犬圆环病毒(Dog circovirus,DogCV)是近年来新发现的一种哺乳动物圆环病毒。为研究DogCV中国流行毒株基因组特性和遗传进化,以犬血清样品提取的DNA为模板,采用重叠PCR技术首次获得DogCV中国流行毒株的全基因组序列,命名为JZ98/2014。序列分析表明JZ98/2014全基因组长度为2063nt,编码3个主要开放阅读框:ORF V1(Rep蛋白,303个氨基酸)、ORF C1(Cap蛋白,270个氨基酸)和ORF C2(106个氨基酸)。同源性比较显示JZ98/2014与美国、欧洲流行毒株的全基因组序列同源性为82.1%-89.5%,而Rep和Cap基因同源性分别为82.1%-89.5%和84.6%-89.1%。遗传进化树分析显示,目前世界流行的DogCV存在多个分支,而JZ98/2014与美国、欧洲流行毒株处于不同分支。

关键词：犬圆环病毒基因进化分析

猪促炎细胞因子多重TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国农业大学学报 2012年第2期17卷 117-123页

作者：施开创梁媛陈芳芳屈素洁莫胜兰李军广西动物疫病预防控制中心南宁530001

为建立及应用定量检测猪促炎细胞因子mRNA表达水平的方法,从分子水平研究脑心肌炎病毒(EMCV)的致病机制,分别构建含有猪促炎细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α以及管家基因β-actin基因片段的重组质粒标准品,建立了检测IL-1β/β-actin、IL... 详细信息

为建立及应用定量检测猪促炎细胞因子mRNA表达水平的方法,从分子水平研究脑心肌炎病毒(EMCV)的致病机制,分别构建含有猪促炎细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α以及管家基因β-actin基因片段的重组质粒标准品,建立了检测IL-1β/β-actin、IL-6/β-actin、TNF-α/β-actin的多重TaqMan real-time PCR检测方法。标准曲线的相关系数均达到0.998以上;初始模板的检出下限均达到10拷贝/μL;只有以目标cDNA为模板,并加入特异性引物和探针的反应才能检测到荧光信号;组内与组间的变异系数均小于2%。应用所建立的检测方法,对猪源EMCV GXLC株感染仔猪心肌中IL-1β、TNF-α、IL-6mRNA的表达水平进行检测。结果表明,所建立的多重TaqMan real-time PCR检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,可以用于猪IL-1β、IL-6、TNF-α基因的检测及定量分析。

关键词：猪促炎细胞因子脑心肌炎病毒多重荧光定量RT-PCR TaqMan探针

2006—2016年广西猪繁殖与呼吸综合征病毒流行毒株四个基因的进化动态分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医科学 2018年第5期48卷 616-624页

作者：尹彦文施开创王海清莫胜兰屈素洁广西动物疫病预防控制中心

为研究广西猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）流行毒株的遗传进化情况,对2006—2016年间,来自广西各地的部分PRRSV阳性病料进行了病毒Nsp2、ORF5、ORF6、ORF7基因的扩增、测序及进化分析。结果,获得的Nsp2-1、Nsp2-2、ORF5、ORF6、ORF7... 详细信息

为研究广西猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）流行毒株的遗传进化情况,对2006—2016年间,来自广西各地的部分PRRSV阳性病料进行了病毒Nsp2、ORF5、ORF6、ORF7基因的扩增、测序及进化分析。结果,获得的Nsp2-1、Nsp2-2、ORF5、ORF6、ORF7基因的片段长度分别是1 667、1 649、603、525、172 bp,均为美洲型毒株;Nsp2、ORF5、ORF6、ORF7基因核苷酸及其推导的氨基酸序列的同源性分别为86.8%~100%和61.7%~100%、80.8%~100%和80.5%~100%、90.6%~100%和89.9%~100%、85.6%~100%和87.1%~100%;基于Nsp2、ORF5、ORF6及ORF7基因核苷酸序列分别绘制的进化树可将所有毒株分为6个亚群,而广西流行的PRRSV毒株主要分布在以JXA1株为代表的亚群6。Nsp2、ORF5、ORF6和ORF7的平均进化速率分别为1.69×10^-1、1.58×10^-2、9.71×10^-4、1.86×10^-3 substitutions/site/year。Nsp2基因是最容易发生变异的,其次是ORF5基因与ORF7基因,而ORF6基因最稳定。本研究为掌握PRRSV的分子流行病学及遗传进化规律提供了相关的基础数据。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒基因遗传变异进化动态

TK基因重组缺陷山羊痘病毒构建及其生物学特性鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

南方农业学报 2013年第9期44卷 1552-1557页

作者：郑敏梁晟郑彦梓兰彬韦显凯苏娇秀郑列丰李常挺广西动物疫病预防控制中心南宁530001 钦州市动物疫病预防控制中心广西钦州535000 隆安县动物疫病预防控制中心广西隆安532700

【目的】利用同源重组技术构建TK基因缺陷的山羊痘病毒(GTPV)毒株,为研制出更安全、高效的GTPV弱毒疫苗和病毒载体提供备选毒株。【方法】采用PCR克隆GTPV AV41株TK基因(ORF56)及其侧翼基因组片段,在TK基因内部插入报告基因EGFP和抗性基... 详细信息

【目的】利用同源重组技术构建TK基因缺陷的山羊痘病毒(GTPV)毒株,为研制出更安全、高效的GTPV弱毒疫苗和病毒载体提供备选毒株。【方法】采用PCR克隆GTPV AV41株TK基因(ORF56)及其侧翼基因组片段,在TK基因内部插入报告基因EGFP和抗性基因gpt表达盒,构建GTPV重组转移载体pTK-Eg。将重组转移载体pTK-Eg与GTPV AV41株共转染Vero细胞,通过空斑纯化筛选阳性重组病毒,鉴定其生长特性和遗传稳定性,并接种山羊评价其安全性和免疫原性。【结果】成功构建获得一株TK基因缺陷的重组病毒vTK-Eg。与亲本毒株GTPV AV41相比,vTK-Eg的生长特性及其形成的细胞病变均未发生显著改变,只是毒价略微下降100.5个数量级;在原代牛睾丸(BT)细胞上连续传代,至少在10代内保持遗传性状和病毒滴度稳定。接种vTK-Eg的山羊精神和食欲均正常,接种后体温升高和局部反应的严重程度均较接种亲本毒株GTPV AV41的山羊有所降低;vTK-Eg与GTPV AV41株诱导山羊产生的GTPV中和抗体水平无明显差异(P>0.05)。【结论】构建的TK基因重组缺陷病毒vTK-Eg具有良好的遗传稳定性和免疫原性,较亲本毒株其安全性也有所提高,可作为研制GTPV基因工程弱毒疫苗和活载体疫苗的备选毒株。

关键词：山羊痘病毒 TK基因重组病毒基因缺陷生物学特性

O型口蹄疫病毒VP1基因及其多表位基因的原核表达与纯化鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

南方农业学报 2016年第3期47卷 472-477页

作者：何奇松陈磊颜健华许瑞胜易春华韦达有冯淑萍黄胜斌梁晟熊毅广西动物疫病预防控制中心南宁530001 崇左市动物疫病预防控制中心广西崇左532200 桂林市动物疫病预防控制中心广西桂林541002

【目的】通过原核表达并纯化获得O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1基因及其多表位基因的重组蛋白,为建立O型FMDV抗体ELISA检测试剂盒及制备动物高免血清提供技术支持。【方法】以O型FMDV VP1全基因重组质粒p MD18-T-T-VP1及串联的VP1多表位基因... 详细信息

【目的】通过原核表达并纯化获得O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1基因及其多表位基因的重组蛋白,为建立O型FMDV抗体ELISA检测试剂盒及制备动物高免血清提供技术支持。【方法】以O型FMDV VP1全基因重组质粒p MD18-T-T-VP1及串联的VP1多表位基因重组质粒p MD18-T-O-VP1为模板,通过特异性引物扩增并回收目的基因,构建重组质粒p ET-32a-VP1和p GEX-6p-1-VP1,然后转入大肠杆菌BL211(DE3)中诱导表达,并以SDS-PAGE和Western blotting对融合蛋白进行分析鉴定。【结果】O型FMDV的VP1基因及其多表位基因在大肠杆菌BL21(DE3)中得到正确表达,表达的两种融合蛋白主要以包涵体形式存在,纯度较高,且均能与猪抗O型FMDV阳性血清发生特异性结合,具有良好的反应原性。【结论】表达获得的融合蛋白具有良好的反应原性,可作为包被抗原应用于O型FMDV抗体检测试剂盒研发。

关键词： O型FMDV VP1基因多表位基因原核表达纯化鉴定

广西新型鸭呼肠孤病毒流行毒株GX01-2020全基因组分子特征分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医学报 2022年第4期42卷 643-650,661页

作者：谢守玉刘惠心周媛熊陈勇施开创屈素洁苏文广温新瑞李媛李春英邓桂潮尹彦文广西壮族自治区动物疫病预防控制中心广西南宁530001 广西大学动物科学技术学院广西南宁530005 北海市动物疫病预防控制中心广西北海536000 钦州市动物疫病预防控制中心广西钦州535099 浦北县动物疫病预防控制中心广西钦州535300

为了解广西新型鸭呼肠孤病毒(novel duck reovirus,NDRV)流行毒株的分子遗传特征,采用RT-PCR分段进行全基因组序列扩增,经克隆、测序、拼接后,获得1株NDRV全基因组序列(命名为GX01-2020株)。结果显示,GX01-2020株基因组全长23353 bp,分... 详细信息

为了解广西新型鸭呼肠孤病毒(novel duck reovirus,NDRV)流行毒株的分子遗传特征,采用RT-PCR分段进行全基因组序列扩增,经克隆、测序、拼接后,获得1株NDRV全基因组序列(命名为GX01-2020株)。结果显示,GX01-2020株基因组全长23353 bp,分为10个片段,大小从1194 bp(S4)至3958 bp(L1)不等。同源性分析显示,GX01-2020株10个片段核苷酸同源性与NDRV代表毒株最高,为86.2%~99.4%,其中μB片段核苷酸同源性最低的毒株为番鸭呼肠孤病毒(Muscovy duck reovirus,MDRV),其他片段则为鸡源禽呼肠孤病毒(chicken-origin reovirus,CRV),说明不同片段来源祖先不完全相同。遗传进化分析显示,10个片段遗传进化树中,L2、L3片段中MDRV参考毒株及σA片段中NDRV参考毒株均形成两个进化分支,与其他片段不同,说明不同片段与参考毒株的遗传关系不尽相同。重组分析显示,GX01-2020株的L1片段存在重组信号,重组亲本毒株分别为北京MDRV_J18株和福建DRV_NP03株。本研究丰富了NDRV基因库相关信息,同时为广西地区NDRV的分子流行病学研究和有效防制措施制订提供了一定的参考。

关键词：新型鸭呼肠孤病毒(NDRV) 全基因组测序遗传进化

广西部分地区猪群PEDV N基因克隆及序列分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

西南农业学报 2018年第2期31卷 409-414页

作者：许瑞胜何奇松李春英冯淑萍易春华韦达有胡丽萍黄胜斌胡巧云熊毅马琳广西动物疫病预防控制中心广西南宁530001 钦州市动物疫病预防控制中心广西钦州535000 桂林市动物疫病预防控制中心广西桂林541002

【目的】了解广西区猪流行性腹泻病毒(PEDV)的感染及病毒的遗传变异特点,为更好防控猪流行性腹泻提供科学依据。【方法】应用RT-PCR方法从2012-2016年广西地区25个猪场收集的PEDV病料中扩增出86株PEDV的N基因,并进行序列比对及遗传进化... 详细信息

【目的】了解广西区猪流行性腹泻病毒(PEDV)的感染及病毒的遗传变异特点,为更好防控猪流行性腹泻提供科学依据。【方法】应用RT-PCR方法从2012-2016年广西地区25个猪场收集的PEDV病料中扩增出86株PEDV的N基因,并进行序列比对及遗传进化分析。【结果】86株PEDV的N基因核苷酸同源性为94.2%~100.0%,与参考毒株核苷酸同源性为94.1%~100.0%。N基因遗传进化分析显示广西的PEDV可分为2个群,Cluster2由韩国株DR13、日本株83P-5、中国株CH/S以及本研究的GP35-8、LC37-22、LC107-5、LC107-19和LC107-16毒株组成,其他81株毒株属于Cluster 3,包括中国株DX、LJB-03、Hu N、JS-2004-2;Cluster 1和Cluster 4则由其它参考毒株组成。【结论】PEDV是引起广西规模化猪场新生仔猪腹泻的主要病原,广西地区的PEDV流行毒株可分为2个群且其N基因仍然保守。

关键词：猪流行性腹泻病毒 N基因序列分析遗传进化分析

猪源脑心肌炎病毒GXLC株对仔猪的致病性试验

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医科学 2012年第2期42卷 138-143页

作者：施开创胡丽萍郑敏粟艳琼陆文俊杨荣广西动物疫病预防控制中心广西南宁530001

为研究猪源脑心肌炎病毒(EMCV)GXLC株对仔猪的致病性,将其接种4周龄健康断乳仔猪,观察临床症状及病理变化,检测心、脑、脾组织及血清中的病毒含量,测定血清抗体效价,检测心、脑、脾组织中IL-1β、TNF-α、IL-6mRNA的表达水平。结果显示... 详细信息

为研究猪源脑心肌炎病毒(EMCV)GXLC株对仔猪的致病性,将其接种4周龄健康断乳仔猪,观察临床症状及病理变化,检测心、脑、脾组织及血清中的病毒含量,测定血清抗体效价,检测心、脑、脾组织中IL-1β、TNF-α、IL-6mRNA的表达水平。结果显示,仔猪感染后,出现体温升高、精神不振、腹泻等症状;剖检发现心包积液,心脏变软,脑充血;组织病理学观察发现心肌炎、脑炎,病理炎症分值显著提高;心、脑、脾、血清中均可检测到大量病毒;血清中出现高效价的中和抗体;感染仔猪心、脑、脾组织中IL-1β、TNF-α、IL-6mRNA的表达水平显著上调,而且细胞因子的表达高峰期与出现临床症状、病理损害的时间密切相关。表明,猪源EMCV GXLC株对仔猪具有致病性,IL-1β、TNF-α、IL-6等促炎细胞因子在EMCV对仔猪的致病过程中发挥重要作用。

关键词：猪源脑心肌炎病毒致病性促炎细胞因子仔猪

猪脑心肌炎病毒感染对iNOS mRNA转录水平的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国预防兽医学报 2012年第9期34卷 686-691页

作者：施开创覃芳芸陆文俊屈素洁黄胜斌李军广西动物疫病预防控制中心广西南宁530001

为研究iNOS在猪脑心肌炎病毒(EMCV)致病机制中的作用,本研究将猪源EMCV GXLC株人工感染小鼠、仔猪,观察临床症状和病理变化,检测心、脑组织中iNOS mRNA转录水平。试验结果表明,小鼠和仔猪感染EMCV后均出现明显的临床症状、剖检及组织病... 详细信息

为研究iNOS在猪脑心肌炎病毒(EMCV)致病机制中的作用,本研究将猪源EMCV GXLC株人工感染小鼠、仔猪,观察临床症状和病理变化,检测心、脑组织中iNOS mRNA转录水平。试验结果表明,小鼠和仔猪感染EMCV后均出现明显的临床症状、剖检及组织病理学变化显示心、脑组织的病理炎症分值显著增加;心、脑组织中的iNOS mRNA转录水平显著上调,并且转录水平上调的峰值与感染小鼠、仔猪出现明显临床症状、严重病理损害及小鼠死亡高峰存在明显的时间相关性,与心、脑组织的病理炎症分值成线性正相关。表明组织中iNOS的过量表达与感染动物的发病和死亡密切相关,iNOS在EMCV致病机制中发挥重要作用。

关键词：脑心肌炎病毒 iNOS mRNA转录水平致病机制