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应用RT-PCR技术快速诊断疑似猪瘟病例

黑龙江畜牧兽医（下半月） 2015年第6期 93-94,186页

作者：梅小伟余瑞瑶王芹宜昌市动物疫病预防控制中心湖北宜昌443000 枝江市动物疫病预防控制中心湖北枝江443000 当阳市动物疫病预防控制中心湖北当阳443000

猪瘟是由黄病毒科瘟病毒属的猪瘟病毒引起的一种急性、热性、高度接触性传染病。近年来,原已宣布消灭了猪瘟的一些欧洲国家又报道有猪瘟发生,我国猪瘟的发病率亦呈上升趋势,严重威胁着我国养猪业的发展[1]。猪瘟病毒感染的症状和病变逐... 详细信息

猪瘟是由黄病毒科瘟病毒属的猪瘟病毒引起的一种急性、热性、高度接触性传染病。近年来,原已宣布消灭了猪瘟的一些欧洲国家又报道有猪瘟发生,我国猪瘟的发病率亦呈上升趋势,严重威胁着我国养猪业的发展[1]。猪瘟病毒感染的症状和病变逐渐呈现非典型的趋势,给临床鉴别诊断带来了极大的麻烦,

关键词：疑似猪瘟 RT-PCR技术瘟病毒属临床鉴别诊断突发高热黄病毒科养猪业四肢内侧临床症状接触性传染病

2015—2017年广西鸡源沙门氏菌耐药性与致病性的相关性分析

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南方农业学报 2019年第10期50卷 2350-2358页

作者：张珍施开创王孝德黎宗强尹彦文屈素洁陆文俊广西大学动物科学技术学院南宁530004 广西动物疫病预防控制中心南宁530001 贺州市动物疫病预防控制中心广西贺州542800

【目的】明确鸡源致病性沙门氏菌耐药表型与致病性的相关性,为有效防控鸡沙门氏菌病提供科学依据。【方法】采用玻片凝集试验对55株鸡源沙门氏菌广西分离株进行血清型鉴定,以纸片扩散(K-B)法和PCR分别测定其耐药表型及耐药基因,通过小... 详细信息

【目的】明确鸡源致病性沙门氏菌耐药表型与致病性的相关性,为有效防控鸡沙门氏菌病提供科学依据。【方法】采用玻片凝集试验对55株鸡源沙门氏菌广西分离株进行血清型鉴定,以纸片扩散(K-B)法和PCR分别测定其耐药表型及耐药基因,通过小鼠攻毒试验检测其致病性,并分析鸡源沙门氏菌广西分离株耐药表型与致病性的相关性。【结果】55株沙门氏菌广西分离株以鼠伤寒沙门氏菌和鸡白痢沙门氏菌为主,对青霉素G、阿莫西林、苯唑西林、头孢噻吩、红霉素和利福平的耐药率均达100.00%,而对庆大霉素和大观霉素较敏感(耐药率在10.00%以下)。55株沙门氏菌广西分离株中有1株(占1.82%)携带7种耐药基因、6株(占10.91%)携带6种耐药基因、20株(占36.36%)携带5种耐药基因、12株(占21.82%)携带4种耐药基因、13株(占23.64%)携带3种耐药基因、3株(占5.45%)携带2种耐药基因;16种耐药基因中,blaTEM、tetX、sul3和aadA1基因检出率较高,qepA、blaCMY和tetB基因检出率较低,而qnrA、qnrB、Aph(3)-IIa、blaPSE和aadA2基因等未被检出。55株沙门氏菌广西分离株对昆明小白鼠均具有致病性,致死率为20%~100%;随机选取10株分离株对昆明小白鼠的半数致死量(LD50)为4.00×107~3.18×108 CFU/mL。沙门氏菌分离株耐药种类数量与LD50对数值的线性回归方程为y=-0.086x+8.971(R2=0.9329),耐药基因数量与LD50对数值的线性回归方程为y=-0.148x+8.673(R2=0.5748),即沙门氏菌的耐药性与其致病性呈正相关。【结论】2015—2017年从广西发病鸡分离获得的致病性沙门氏菌以鼠伤寒沙门氏菌和鸡白痢沙门氏菌为主,普遍存在耐药性,且多重耐药现象严重。鸡源致病性沙门氏菌的耐药表型与其致病性间呈正相关,因此,生产上要加强临床用药管理,加大细菌耐药监测与防范。

关键词：鸡沙门氏菌耐药表型耐药基因致病性相关性

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鸡胚源H5亚型禽流感疫苗的免疫效果及应用

中国家禽 2014年第6期36卷 59-60页

作者：谢丽华梁真韦邦伟梧州市动物疫病预防控制中心广西梧州543002

将试验动物分为鸡（A1／A2组）、鸭（B1／B2组）4个组，利用新型高效的鸡胚源H5亚型高致病性禽流感疫苗进行两次免疫，免疫前、首免及二免21d后采血检验H5亚型禽流感病毒抗体。结果显示，首免后各组免疫抗体合格率达到90％以上，二免后... 详细信息

将试验动物分为鸡（A1／A2组）、鸭（B1／B2组）4个组，利用新型高效的鸡胚源H5亚型高致病性禽流感疫苗进行两次免疫，免疫前、首免及二免21d后采血检验H5亚型禽流感病毒抗体。结果显示，首免后各组免疫抗体合格率达到90％以上，二免后各组免疫合格率为100％。首免鸡H5亚型禽流感病毒抗体滴度较高且均匀，鸭的抗体滴度相对偏低且离散分布较广。二免后鸡、鸭抗体滴度非常高，在8～10log2之间。推广应用于种禽场、商品代规模场、农村散养户等，禽类免疫合格率达到89．32％。

关键词：禽流感免疫试验推广应用

广西地区家畜牛、羊体表硬蜱情况调查及种类鉴定

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中国人兽共患病学报 2022年第11期38卷 1039-1044页

作者：周庆安黄胜斌莫胜兰胡丽萍韩银华甘雨蓝惠华林立亮韦海娜何奇松韦显凯施开创李军郭建刚广西壮族自治区动物疫病预防控制中心南宁530001

目的掌握广西地区牛羊场硬蜱种类及其分子特征,了解该地区蜱类的分类地位,为养殖户防控硬蜱及蜱媒传染病提供参考依据。方法本实验于2019年1月至2021年11月,采用动物体表法采集寄生的蜱类;提取蜱基因组,PCR扩增3种硬蜱的线粒体16S rDNA... 详细信息

目的掌握广西地区牛羊场硬蜱种类及其分子特征,了解该地区蜱类的分类地位,为养殖户防控硬蜱及蜱媒传染病提供参考依据。方法本实验于2019年1月至2021年11月,采用动物体表法采集寄生的蜱类;提取蜱基因组,PCR扩增3种硬蜱的线粒体16S rDNA和COI基因片段,并进行同源性分析。基于邻接法,用MEGA6.0软件分别构建系统发生树,进行遗传进化分析。结果牛羊体表上共采集蜱2030只,隶属1科2属3种,其中微小扇头蜱1968只,长角血蜱49只,具角血蜱13只。PCR扩增微小扇头蜱、长角血蜱和具角血蜱16S rDNA和COI基因片段长度分别是460 bp和710 bp左右,分别与GenBank中已登录的相应种类相似较高且在一个进化分支上。结论广西地区牛羊场优势蜱种是微小扇头蜱且存在长角血蜱和具角血蜱。三蜱种16S rDNA和COI序列存在多样性和地域差异性。

关键词：牛羊场硬蜱 16S rDNA COI

1株黑天鹅源H5N8亚型禽流感病毒遗传演化分析

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动物医学进展 2023年第12期44卷 17-23页

作者：栗云鹏刘海莹张启龙刘晓冬周德刚张跃傅彩霞北京市动物疫病预防控制中心北京102629

为分析1株黑天鹅源H5N8亚型禽流感病毒(AIV)的遗传演化特征,对2021年从北京圆明园遗址公园送检的黑天鹅样品中鉴定出的1株H5N8亚型禽流感病毒(A/Wild swan/China/Beijing0201/2021)的全基因组进行扩增、克隆与序列测序,并应用分子生物... 详细信息

为分析1株黑天鹅源H5N8亚型禽流感病毒(AIV)的遗传演化特征,对2021年从北京圆明园遗址公园送检的黑天鹅样品中鉴定出的1株H5N8亚型禽流感病毒(A/Wild swan/China/Beijing0201/2021)的全基因组进行扩增、克隆与序列测序,并应用分子生物学软件对其进行遗传演化及关键氨基酸位点分析。结果显示,该H5N8亚型禽流感病毒株属于clade2.***.4.4b进化分支,其PB2、PB1、PA、HA、NA、NP、MP、NS基因均与H5N8亚型AIV的相应基因片段具有较高同源性,且与2020-2021年越南、哈萨克斯坦、俄罗斯、柬埔寨、法国等地的H5N8毒株密切相关。氨基酸位点分析显示,该毒株HA蛋白裂解位点呈现高致病性禽流感病毒的分子特征,且出现S137A、T160A、T192I、S227R氨基酸突变,158位缺失糖基化位点,这些位点的突变均能够增强H5亚型禽流感病毒对人源唾液酸受体结合的能力;该毒株的PB2蛋白、NP蛋白、M1蛋白和NS1蛋白均存在多个可以增强流感病毒在哺乳动物体内的复制能力和致病性的关键氨基酸位点。研究结果可为H5N8亚型禽流感病毒的进化规律研究及综合防控提供参考。

关键词：黑天鹅禽流感病毒 H5N8亚型遗传演化

北京1株犬源狂犬病病毒全基因组序列测定及分析

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中国畜牧兽医 2015年第1期42卷 17-23页

作者：张弼陈立本张玮刘庆斌冯小宇宋彦军北京市动物疫病预防控制中心北京102609

本试验旨在对北京1株犬源狂犬病病毒株（BJ2012ZW株）在全基因组水平上进行分子进化研究,比较与全国流行株及疫苗株之间的差异。试验采集犬脑组织以直接免疫荧光技术和内基氏小体检查方法进行检测,以RT-PCR扩增病毒核酸覆盖全基因组,对... 详细信息

本试验旨在对北京1株犬源狂犬病病毒株（BJ2012ZW株）在全基因组水平上进行分子进化研究,比较与全国流行株及疫苗株之间的差异。试验采集犬脑组织以直接免疫荧光技术和内基氏小体检查方法进行检测,以RT-PCR扩增病毒核酸覆盖全基因组,对产物测序后进行遗传学分析。结果显示,BJ2012ZW株狂犬病病毒属于基因1型,与目前中国的主要流行株全序列同源性为83.9%~99.7%。与同样分离自北京的毒株BJ2011E和CNM1101C的核苷酸全序列同源性最高（99.7%）,进化关系近。G蛋白主要抗原位点分析结果表明,BJ2012ZW株与国内疫苗株相比有部分抗原位点发生了替换。BJ2012ZW株属于中国目前的流行株,与目前国内所使用的疫苗株存在一定的差异。

关键词：狂犬病病毒街毒株全基因组序列分析

黔南州首免重组禽流感病毒二价灭活苗抗体水平调查

同方期刊数据库博看期刊评论

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黑龙江畜牧兽医 2018年第18期 192-193页

作者：犹银俊董保豫蒙炳超李沛丽龚才伟罗秀丽陈启青覃倩黔南州动物疫病预防控制中心贵州都匀558000 都匀市动物疫病预防控制中心贵州都匀558000 惠水县动物疫病预防控制中心贵州惠水550600 荔波县动物疫病预防控制中心贵州荔波558499

高致病性禽流感是由正黏病毒科流感病毒属A型流感病毒引起的以禽类为主的烈性传染病。禽流感病毒可分为高致病性、低致病性和非致病性三大类,其中高致病性禽流感是由H5和H7亚毒株引起的疾病。因高致病性禽流感在禽类中传播快、危害大、... 详细信息

高致病性禽流感是由正黏病毒科流感病毒属A型流感病毒引起的以禽类为主的烈性传染病。禽流感病毒可分为高致病性、低致病性和非致病性三大类,其中高致病性禽流感是由H5和H7亚毒株引起的疾病。因高致病性禽流感在禽类中传播快、危害大、病死率高,被世界动物卫生组织（OIE）列为必须报告的动物传染病,我国将其列为一类动物疫病。

关键词：禽流感病毒灭抗体水平黔南州

1株信鸽源鼠伤寒沙门氏菌的分离鉴定及其耐药性和毒力分析

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中国畜牧兽医 2021年第1期48卷 338-347页

作者：张启龙栗云鹏傅彩霞刘海莹张玮王林吴迪刘晓冬周德刚北京市动物疫病预防控制中心北京102629

本试验旨在鉴定临床疑似沙门氏菌感染致死信鸽的病原菌并确定致病菌的耐药及毒力状况。通过细菌分离培养、菌落形态观察、染色镜检、生化鉴定、血清分型、16S rRNA基因测序分析和康复信鸽血清平板凝集试验进行鉴定,并通过药敏试验、耐... 详细信息

本试验旨在鉴定临床疑似沙门氏菌感染致死信鸽的病原菌并确定致病菌的耐药及毒力状况。通过细菌分离培养、菌落形态观察、染色镜检、生化鉴定、血清分型、16S rRNA基因测序分析和康复信鸽血清平板凝集试验进行鉴定,并通过药敏试验、耐药基因和毒力基因检测进行耐药性和毒力分析。结果显示,分离纯化的细菌在BS、XLD、HE培养基上为黑色菌落,镜检为无荚膜、无芽孢的革兰氏阴性短杆菌;分离菌株生化反应结果符合沙门氏菌生化特性;分离菌株血清型为1,4,12:i:1,2;分离菌株16S rRNA基因序列系统进化树分析显示,该分离菌株与鼠伤寒沙门氏菌聚为一支,同源性>99%,康复信鸽血清与分离菌株发生特异性凝集,结合生化反应和血清分型结果该菌株鉴定为鼠伤寒沙门氏菌;分离菌株对氟苯尼考耐药,经耐药基因检测携带floR、cmlA氯霉素类耐药基因,与耐药表型相符;分离菌株mogA等17种毒力基因检测均为阳性。本试验成功分离到1株信鸽源鼠伤寒沙门氏菌,分离菌株对氟苯尼考耐药且具有较强毒力,为下一步信鸽沙门氏菌的防治和研究提供了参考依据。

关键词：信鸽鼠伤寒沙门氏菌分离鉴定耐药性毒力

禽流感病毒通用型荧光定量PCR检测试剂盒比对结果分析

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科学技术与工程 2020年第12期20卷 4647-4652页

作者：吴迪王林吴惠明高晓龙张启龙张跃刘晓冬周德刚北京市动物疫病预防控制中心北京102629

对6种禽流感病毒通用型荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction),PCR检测试剂盒进行比对与科学评价,为实验室采购提供依据。利用禽流感病毒H5、H7、H9亚型标准品,鸡新城疫活疫苗与传染性支气管炎活疫苗对市售的6种品牌(分别... 详细信息

对6种禽流感病毒通用型荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction),PCR检测试剂盒进行比对与科学评价,为实验室采购提供依据。利用禽流感病毒H5、H7、H9亚型标准品,鸡新城疫活疫苗与传染性支气管炎活疫苗对市售的6种品牌(分别记为A、B、C、D、E、F)禽流感病毒通用型荧光定量PCR检测试剂盒灵敏性与特异性进行了比对,并对97份临床样品进行了检测,筛选出禽流感病毒通用型最佳检测试剂盒。结果表明:A厂家试剂盒最低可检出1:100倍稀释的H7亚型标准品浓度,B厂家试剂盒最低可检出1:1倍稀释的H7亚型标准品浓度,C厂家试剂盒最低可检出1:10倍稀释的H7亚型标准品浓度,D厂家试剂盒最低可检出1:10倍稀释的H7亚型标准品浓度,E厂家试剂盒最低可检出1:1 000倍稀释的H7亚型标准品浓度, F厂家试剂盒最低可检出1:10倍稀释的H7亚型标准品浓度,6种试剂盒特异性均良好。综上,E厂家试剂盒优于其他厂家试剂盒,可以作为动物疫病检测实验室在实施监测任务中的首要选择。

关键词：荧光定量PCR 禽流感病毒试剂盒比对