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壳聚糖超声可控降解及降解动力学研究

高分子学报 2007年第5期17卷 401-406页

作者：李瑾杜予民姚评佳魏远安武汉大学资源与环境科学学院武汉430079 广西亚热带生物资源保护利用重点实验室南宁530005

通过正交实验法考察了壳聚糖溶液浓度、反应温度、超声强度以及醋酸溶液浓度对超声降解反应的影响,确定了最佳反应条件,制备了一系列不同分子量的壳聚糖.研究了壳聚糖溶液浓度、反应温度以及壳聚糖原料分子参数与降解速率常数的关系.通... 详细信息

通过正交实验法考察了壳聚糖溶液浓度、反应温度、超声强度以及醋酸溶液浓度对超声降解反应的影响,确定了最佳反应条件,制备了一系列不同分子量的壳聚糖.研究了壳聚糖溶液浓度、反应温度以及壳聚糖原料分子参数与降解速率常数的关系.通过红外光谱、X-射线衍射和凝胶渗透色谱对降解产物进行了表征.结果表明,超声降解壳聚糖的最佳条件为10℃,壳聚糖溶液浓度2.5g/L.降解速率常数随壳聚糖溶液浓度和反应温度的降低而增大.高分子量和低脱乙酰度的壳聚糖原料有较高的降解速率和降解速率常数,壳聚糖原料的分子量对降解速率和降解速率常数的影响大于脱乙酰度对其的影响.超声波导致了壳聚糖分子量的降低和产物晶体结构的破坏,但没有改变产物的脱乙酰度和糖残基结构.

关键词：壳聚糖超声波降解分子量

Lactobacillus diolivorans二醇脱水酶激活因子基因的克隆、测序与功能鉴定

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生物化学与生物物理进展 2007年第1期34卷 87-92页

作者：孟晓蕾唐悦齐向辉韦宇拓黄日波广西大学广西亚热带生物资源保护利用重点实验室南宁530004 广西大学生命科学与技术学院南宁530004

根据二醇脱水酶与甘油脱水酶的激活因子基因序列同源性分析,设计简并引物从***基因组DNA中扩增出了假定的二醇脱水酶激活因子基因(gldG、gldH)全序列,补全了GenBank中该基因序列的未知部分,构建了表达质粒pSE-gldGH,以***21为宿主,进行... 详细信息

根据二醇脱水酶与甘油脱水酶的激活因子基因序列同源性分析,设计简并引物从***基因组DNA中扩增出了假定的二醇脱水酶激活因子基因(gldG、gldH)全序列,补全了GenBank中该基因序列的未知部分,构建了表达质粒pSE-gldGH,以***21为宿主,进行诱导表达.表达产物的变性与非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表明:gldGH表达产生68ku、13ku两个蛋白质,它们经金属螯合亲和层析与凝胶过滤得到共纯化,纯化产物即假定的激活因子为分子质量约325ku的蛋白质聚合体,由这两个蛋白质以等摩尔量组成,因此假定的激活因子可能为α4β4亚基结构.以***二醇脱水酶为对象,进行激活实验,结果证实gldGH表达产物具备二醇脱水酶激活因子的功能.

关键词：二醇脱水酶激活因子功能鉴定 1,3-丙二醇 Lactobacillus diolivorans

耐放射异常球菌海藻糖合成酶基因的克隆及功能鉴定

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生物化学与生物物理进展 2004年第11期31卷 1018-1023页

作者：韦宇拓朱绮霞罗兆飞陈发忠李桂媛黄鲲黄日波广西大学广西亚热带生物资源保护利用重点实验室南宁中诺生物工程公司南宁530003 南宁中诺生物工程公司

利用生物信息学手段 ,在GenBank中进行氨基酸序列的同源性比较分析 ,检索到来自于耐放射异常球菌(Deinococcusradiodurans)基因组序列中一功能未确定的开放阅读框 (ORF) ,其氨基酸序列和已报道的海藻糖合成酶的氨基酸序列有约 6 0 %的... 详细信息

利用生物信息学手段 ,在GenBank中进行氨基酸序列的同源性比较分析 ,检索到来自于耐放射异常球菌(Deinococcusradiodurans)基因组序列中一功能未确定的开放阅读框 (ORF) ,其氨基酸序列和已报道的海藻糖合成酶的氨基酸序列有约 6 0 %的同源性 .将这段ORF克隆到大肠杆菌进行表达 ,并进行功能鉴定 .实验表明这段ORF序列所编码的是一种海藻糖合成酶 ,它能将麦芽糖分子转化成海藻糖分子 ,以 30 %的麦芽糖为底物时能将约 6 5 %的麦芽糖转化成海藻糖 .重组酶性质初步研究表明 ,在 pH 7 0 ,最佳温度 30℃转化麦芽糖效率最高 .

关键词：耐放射异常球菌海藻糖合成酶基因克隆功能鉴定

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蔗糖基聚合物的研究进展

高分子材料科学与工程 2005年第2期21卷 61-64,68页

作者：何英姿姚评佳魏远安广西大学生命科学与技术学院亚热带生物资源保护利用广西重点实验室广西南宁530005

以蔗糖为原料可以制备安全无毒、可生物降解、高吸收性凝胶聚合物,聚合的途径目前有化学法和酶法,这些材料可用于普通的水吸收剂、水净化辅助剂和生物医学材料,还可作为植物生长调节剂、果蔬常温保鲜剂应用于农业生产。本文综述了近十... 详细信息

以蔗糖为原料可以制备安全无毒、可生物降解、高吸收性凝胶聚合物,聚合的途径目前有化学法和酶法,这些材料可用于普通的水吸收剂、水净化辅助剂和生物医学材料,还可作为植物生长调节剂、果蔬常温保鲜剂应用于农业生产。本文综述了近十年国内外蔗糖基聚合物的研究进展及其应用前景,并对蔗糖基聚合物的结构特点、制备方法作了较为详细的论述。

关键词：蔗糖基聚合物制备化学法酶法应用

Lactobacillus diolivorans二醇脱水酶的分离纯化与酶学性质

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化工学报 2006年第12期57卷 2938-2942页

作者：孟晓蕾齐向辉韦宇拓黄日波广西大学广西亚热带生物资源保护利用重点实验室广西南宁530004 南宁中诺生物工程公司广西南宁530003

1，3-丙二醇（1，3-propanediol，1，3-PD）是一种重要的化工和医药中间体原料，是良好的溶剂、抗冻剂或保护剂，是聚酯——聚对苯二甲酸丙二醇酯（PTT）和聚氨酯的单体，可在地毯、纺织、工程塑料等领域中广泛应用，也可用于食品、化... 详细信息

1，3-丙二醇（1，3-propanediol，1，3-PD）是一种重要的化工和医药中间体原料，是良好的溶剂、抗冻剂或保护剂，是聚酯——聚对苯二甲酸丙二醇酯（PTT）和聚氨酯的单体，可在地毯、纺织、工程塑料等领域中广泛应用，也可用于食品、化妆品和制药等行业食品．当前化工合成是生产1，3-丙二醇的主要方法，

关键词： Lactobacillus diolivorans 二醇脱水酶辅酶B12 甘油脱水酶

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猪单个卵母细胞体外转录体系的建立

动物学杂志 2008年第1期43卷 31-37页

作者：杨小淦江明生卢晟盛刘红波任子利吕培茹张明陆阳清卢克焕广西亚热带生物资源保护利用重点实验室广西大学南宁530004

利用switching mechanism at 5′end of RNA transcript(SMART)技术对猪单个体外成熟培养的MⅡ期卵母细胞进行了扩增,在此基础上,利用T7体外转录技术进行体外转录,aRNA浓度达到1.962μg。通过联合SMART技术和T7体外转录技术,mRNA浓度扩... 详细信息

利用switching mechanism at 5′end of RNA transcript(SMART)技术对猪单个体外成熟培养的MⅡ期卵母细胞进行了扩增,在此基础上,利用T7体外转录技术进行体外转录,aRNA浓度达到1.962μg。通过联合SMART技术和T7体外转录技术,mRNA浓度扩增了2.3×104倍左右,这个数量级已基本能满足cDNA array等通量筛选研究的需求。本研究为珍贵和微量的生物材料进行高通量筛选研究提供了一个有效的体系。

关键词：猪卵母细胞 SMART技术 T7体外转录技术

十字花科黑腐病菌中影响致病相关基因XC3814表达的基因鉴定

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遗传 2010年第1期32卷 81-86页

作者：苏辉昭向志娇彭方印李瑞芳安世琦陆光涛唐纪良广西大学生命科学与技术学院南宁530005 广西亚热带生物资源保护利用重点实验室南宁530005

十字花科黑腐病菌8004菌株的XC3814基因与致病性和胞外多糖合成有关。文章将XC3814的启动子与报告基因sacB融合,构建了XC3814的表达报告质粒pL3814sac。将该质粒导入野生型菌株8004,获得了报告菌株8004/pL3814sac。利用转座子EZ::Tn5对... 详细信息

十字花科黑腐病菌8004菌株的XC3814基因与致病性和胞外多糖合成有关。文章将XC3814的启动子与报告基因sacB融合,构建了XC3814的表达报告质粒pL3814sac。将该质粒导入野生型菌株8004,获得了报告菌株8004/pL3814sac。利用转座子EZ::Tn5对报告菌株的基因组进行随机诱变,分离到3株耐蔗糖的突变体。分析发现其中的1株突变体是由EZ::Tn5插入到编号为XC3882的未知功能的基因所产生的。将由XC3814启动子与报告基因gusA融合得到的报告质粒pGUS3814分别导入8004菌株和XC3882的转座子Tn5gusA5插入突变体,测定比较pGUS3814的GUS表达水平,结果显示在XC3882突变体背景下GUS的表达水平比在野生型背景下降低81.3%,表明XC3814基因的表达水平受XC3882基因的影响。

关键词：野油菜黄单胞菌致病相关基因表达调控

造纸废水纸浆沉淀物中未培养微生物纤维素酶基因的克隆和鉴定

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微生物学报 2006年第5期46卷 783-788,i0001页

作者：许跃强段承杰周权能唐纪良冯家勋庞浩封毅莫新春郭鸿张鹏广西大学广西亚热带生物资源保护利用重点实验室南宁530005 广西大学生命科学与技术学院南宁530005

提取纯化造纸废水纸浆沉淀物的宏基因组DNA并构建16S rDNA文库,系统发育分析显示该环境中存在大量的未培养细菌且具有种类的多样性。以柯斯质粒为载体构建了1个含10000个克隆的宏基因组文库,文库容量为3.53×108bp。筛选文库得到2个表... 详细信息

提取纯化造纸废水纸浆沉淀物的宏基因组DNA并构建16S rDNA文库,系统发育分析显示该环境中存在大量的未培养细菌且具有种类的多样性。以柯斯质粒为载体构建了1个含10000个克隆的宏基因组文库,文库容量为3.53×108bp。筛选文库得到2个表达内切葡聚糖酶活性的克隆、3个表达外切葡聚糖酶活性的克隆和2个表达β-葡萄糖苷酶活性的克隆。从表达不同活性的克隆中分别挑选活性最强的进行鉴定,得到3个新的纤维素酶基因umcel5L、umcel5M和umbgl3D。umcel5L、umcel5M和umbgl3D分别编码产生内切葡聚糖酶、纤维糊精酶和β-葡萄糖苷酶,其编码产物与已报道的纤维素酶一致性最高的分别为43%、48%和46%。这是第一次采用未培养方法对造纸废水纸浆沉淀物中的细菌多样性进行分析并从中克隆纤维素酶基因的报道。

关键词：纸浆沉淀物细菌多样性未培养微生物宏基因组文库纤维素酶

猪卵母细胞蛋白质组双向电泳体系的建立及初步分析

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动物学杂志 2008年第4期43卷 67-71页

作者：胡惠忠付强卢晟盛张明陆阳清蒙冰卢克焕广西亚热带生物资源保护利用重点实验室广西大学南宁530004

建立了猪(Sus scrofa)卵母细胞蛋白质双向电泳平台,并对裂解液的组成、样品处理、双向电泳程序等相关技术进行优化,得到清晰的微量卵母细胞蛋白质的电泳图谱。利用上述优化后的体系分别对未成熟和成熟的猪卵母细胞进行双向电泳分析,并用... 详细信息

建立了猪(Sus scrofa)卵母细胞蛋白质双向电泳平台,并对裂解液的组成、样品处理、双向电泳程序等相关技术进行优化,得到清晰的微量卵母细胞蛋白质的电泳图谱。利用上述优化后的体系分别对未成熟和成熟的猪卵母细胞进行双向电泳分析,并用ImageMaser软件对图谱进行比对分析。结果表明,电泳图谱上大约有800个左右的蛋白点,其中差异蛋白35个,包括上调蛋白22个及下调蛋白13个。说明基于双向电泳的蛋白质组学可以用于卵母细胞成熟的蛋白表达差异的研究。

关键词：猪卵母细胞双向电泳蛋白组学