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骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠心肌梗死:急性和慢性运动的影响

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中国组织工程研究 2025年第23期29卷 4868-4877页

作者：冯强皮亦华黄华生黄德伦张艳广西中医药大学体育部广西壮族自治区南宁市530021 广西中医药大学基础医学院生理教研室广西壮族自治区南宁市530021

背景:干细胞移植对治疗心肌梗死具有可观的治疗前景,但移植细胞向心脏归巢效率及在心脏内的滞留率和存活率较低限制了干细胞疗效。运动疗法是心肌梗死患者心脏康复的重要有机组成部分,然而运动在干细胞移植治疗心肌梗死中的作用尚未明... 详细信息

背景:干细胞移植对治疗心肌梗死具有可观的治疗前景,但移植细胞向心脏归巢效率及在心脏内的滞留率和存活率较低限制了干细胞疗效。运动疗法是心肌梗死患者心脏康复的重要有机组成部分,然而运动在干细胞移植治疗心肌梗死中的作用尚未明确。目的:探讨运动(包括急性和慢性运动)对骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠心肌梗死的影响。方法:取80只雌性SD大鼠,采用随机数字表法分为假手术组、模型组、移植组或联合组,每组20只。模型组、移植组或联合组大鼠通过冠状动脉结扎术制作心肌梗死模型,造模24 h后,联合组进行8周有氧运动(慢性运动,30 min/d,每周运动5 d),于首次运动(急性运动)后5 min内,移植组和联合组尾静脉输注绿色荧光蛋白标记的SD大鼠骨髓间充质干细胞,首次运动后24 h取部分大鼠,检测大鼠心肌内移植的干细胞存活率、Y染色体性别决定区mRNA表达、归巢因子蛋白表达以及氧化应激和炎症反应参数;末次运动后72 h取剩余大鼠,检测心脏结构与功能、心肌组织学变化和Ki67^(+)细胞数量。结果与结论:(1)急性运动后:与假手术组比较,模型组心肌活性氧、丙二醛、肿瘤坏死因子α和白细胞介素1β水平升高(P 区mRNA表达、超氧化物歧化酶活性及基质细胞衍生因子1α和CXC趋化因子受体4蛋白表达升高(P <0.05)。(2)慢性运动后:与假手术组比较,模型组心肌细胞横截面积、胶原含量增加(P <0.05),左心室射血分数、左心室短轴缩短率下降(P <0.05);与模型组比较,移植组心肌细胞横截面积与胶原含量降低(P <0.05),Ki67+细胞升高(P <0.05);与移植组比较,联合组胶原含量降低(P <0.05),心肌细胞横截面积、左心室射血分数、左心室短轴缩短率、Ki67+细胞升高(P <0.05)。(3)急性运动通过促进干细胞归巢、改善心肌微环境提高外源性干细胞存活率,慢性运动可刺激干细胞移植后心肌细胞增殖、抑制心脏重塑并增强心功能,提示运动有助于优化大鼠心肌梗死后干细胞移植疗效。

关键词：急性运动慢性运动干细胞移植骨髓间充质干细胞心肌梗死归巢

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高中语文教学渗透传统文化的路径探寻

语文世界 2025年第2期 93-94页

作者：罗翠霞广西壮族自治区钦州市浦北中学

将传统文化与高中语文教学相融合，可以在传承中华文化精髓的同时，培养学生的语文学习兴趣，深化学生的文化认知。教学实践中，教师可借助问题导学来促进学生感知传统文化，找准有效落点以理解文化内涵，引导文本剖析以感受文化意蕴，... 详细信息

将传统文化与高中语文教学相融合，可以在传承中华文化精髓的同时，培养学生的语文学习兴趣，深化学生的文化认知。教学实践中，教师可借助问题导学来促进学生感知传统文化，找准有效落点以理解文化内涵，引导文本剖析以感受文化意蕴，借助现代手段以拓宽文化视野。实践表明，这样的努力可以起到彰显传统文化的效果。

关键词：高中语文传统文化教学路径

新橙皮苷治疗骨质疏松症的靶点及对骨髓间充质干细胞成骨分化的作用

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中国组织工程研究 2025年第7期29卷 1437-1447页

作者：章镇宇梁秋健杨军韦相宇蒋捷黄林科谭桢广西医科大学第二附属医院广西壮族自治区南宁市530005 广西医科大学广西再生医学重点实验室广西壮族自治区南宁市530021

背景:前期研究发现新橙皮苷可以延缓去卵巢小鼠的骨丢失,具有治疗骨质疏松症的潜力,但其具体作用机制仍有待探究。目的:基于生物信息学和体外细胞实验探索新橙皮苷治疗骨质疏松症的关键靶点与可能机制。方法:从GEO数据库获得骨质疏松症... 详细信息

背景:前期研究发现新橙皮苷可以延缓去卵巢小鼠的骨丢失,具有治疗骨质疏松症的潜力,但其具体作用机制仍有待探究。目的:基于生物信息学和体外细胞实验探索新橙皮苷治疗骨质疏松症的关键靶点与可能机制。方法:从GEO数据库获得骨质疏松症相关的基因表达数据集,通过R语言筛选和分析差异表达基因,从GeneCards和DisGeNET数据库筛选骨质疏松症的相关靶点,从ChEMBL和PubChem数据库筛选新橙皮苷的相关靶点,三者取交集获得共同靶点,使用String数据库构建交集基因的PPI网络,筛选关键目标靶点,使用DAVID数据库进行GO、KEGG富集分析,运用AutoDock软件对新橙皮苷与目标靶点蛋白进行分子对接验证。检测新橙皮苷对C57小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响,以完全培养基为空白对照组、成骨诱导液为对照组,含不同浓度(25,50μmol/L)新橙皮苷的成骨诱导液为实验组,在相应时间检测细胞成骨分化过程中碱性磷酸酶的表达、矿化程度、成骨相关基因及目标靶点基因的表达。结果与结论:(1)筛选出差异表达基因9253个,骨质疏松症相关靶点2161个,新橙皮苷相关靶点326个,三者共同靶点53个,53个基因在骨质疏松症样本中皆上调。PPI网络筛选出具有研究意义的目标靶点基因PRKACA。GO功能与KEGG通路富集分析表明,新橙皮苷通过PRKACA靶点治疗骨质疏松症主要依靠蛋白质磷酸化和蛋白质自身磷酸化等生物过程,作用于内分泌抵抗、癌症中的蛋白聚糖、雌激素信号通路等发挥治疗作用。分子对接结果表明,新橙皮苷与目标靶点PRKACA对应的蛋白有一定的结合能力。(2)碱性磷酸酶染色显示新橙皮苷可以促进间充质干细胞成骨分化早期碱性磷酸酶的表达,茜素红染色显示新橙皮苷可以促进间充质干细胞成骨分化的矿化。RT-qPCR检测结果显示,新橙皮苷可以促进碱性磷酸酶、PRKACA、骨钙素mRNA的表达。(3)结果表明,新橙皮苷可能通过雌激素信号通路上的PRKACA靶点促进成骨分化,从而防治骨质疏松症。

关键词：生物信息学骨质疏松症新橙皮苷骨髓间充质干细胞 PRKACA基因

机器学习识别激素性股骨头坏死中线粒体自噬诊断标志物及免疫浸润分析

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中国组织工程研究 2025年第11期29卷 2402-2410页

作者：黄柯琪陈跃平陈尚桐李加根广西中医药大学附属瑞康医院广西壮族自治区南宁市530000

背景:线粒体自噬和激素性股骨头坏死的发生、发展关系密切,但具体生物标志物及调控机制尚未明确。目的:通过机器学习算法识别激素性股骨头坏死中线粒体自噬的关键标志物及免疫浸润分析。方法:从GEO数据库下载股骨头坏死数据集GSE123568... 详细信息

背景:线粒体自噬和激素性股骨头坏死的发生、发展关系密切,但具体生物标志物及调控机制尚未明确。目的:通过机器学习算法识别激素性股骨头坏死中线粒体自噬的关键标志物及免疫浸润分析。方法:从GEO数据库下载股骨头坏死数据集GSE123568和GSE74089,分别作为训练集和验证集,在激素性股骨头坏死组和对照组之间选择差异表达基因,进行加权共表达分析。从MitoCarta 3.0数据库下载线粒体自噬相关基因,然后与差异基因和模块基因取交集。利用两种机器学习算法鉴定激素性股骨头坏死线粒体自噬关键基因,利用外部验证集进行验证。采用CIBERSORT和免疫浸润分析免疫细胞占比,单样本基因集富集分析线粒体自噬基因与免疫细胞的相关性分析。结果与结论:①差异分析共获得1163个差异基因,其中有663个上调基因和500个下调基因;加权共表达分析鉴定出4个相关模块,共1412个模块基因;②最终与线粒体自噬基因取交集初步筛选出39个交叉基因可能是疾病相关线粒体自噬基因;GO富集分析结果显示,生物过程主要涉及血红素代谢、线粒体运输、核苷酸双磷酸代谢和硫酯代谢过程,细胞组分主要涉及线粒体基质、线粒体外膜、细胞器外膜和线粒体内膜,分子功能主要涉及脂肪酸连接酶活性、铁-硫簇结合和辅酶A连接酶活性;KEGG富集分析结果共映射出6条通路,主要涉及脂肪酸降解、线粒体自噬、丁酸代谢、脂肪酸生物合成和辅因子生物合成;③经LASSO回归和随机森林算法分析最终得到4个核心基因(ALDH5A1、FBXL4、MCL1和STOM),4个核心基因和诊断列线图外部验证集的受试者工作特征曲线均大于0.9;④激素性股骨头坏死发生发展与活化的树突状细胞、骨髓来源的抑制性细胞、调节性T细胞和中心记忆CD8T细胞等免疫细胞有关;⑤结果显示,4个关键的线粒体自噬基因ALDH5A1、FBXL4、MCL1和STOM通过破骨细胞分化和免疫机制在激素性股骨头坏死进展中发挥关键作用,均具有较好的疾病预测效果,可能作为激素性股骨头坏死诊断和治疗的生物标志物。

关键词：激素性股骨头坏死线粒体自噬机器学习免疫细胞浸润关键标志物

缺血性脑卒中痰热腑实证大鼠模型的建立与评价

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中国组织工程研究 2025年第11期29卷 2301-2309页

作者：平兴枫吕军影李凯黄宗轩尹建新广西医科大学第一附属医院广西壮族自治区南宁市530021

背景:中医药在治疗缺血性脑卒中痰热腑实证中具有丰富的经验和独特的优势,为深入挖掘中医药对该病的治疗靶点和治疗机制,建立稳定、可靠的缺血性脑卒中痰热腑实证病证结合动物模型是关键。目的:探讨缺血性脑卒中痰热腑实证大鼠模型的建... 详细信息

背景:中医药在治疗缺血性脑卒中痰热腑实证中具有丰富的经验和独特的优势,为深入挖掘中医药对该病的治疗靶点和治疗机制,建立稳定、可靠的缺血性脑卒中痰热腑实证病证结合动物模型是关键。目的:探讨缺血性脑卒中痰热腑实证大鼠模型的建立方法及评价体系。方法:采用随机数字表法将60只SD大鼠随机分为4组:空白对照组(n=12)、缺血性脑卒中组(n=18)给予普通饲料喂养25 d,病证结合组(n=18)、痰热腑实证组(n=12)给予高脂饲料喂养25 d;第26天,空白对照组、缺血性脑卒中组灌胃给予生理盐水,病证结合组、痰热腑实证组灌胃给予自体粪便混悬液,连续灌胃3 d(灌胃期间继续给予高脂饲料);灌胃结束后,缺血性脑卒中组、病证结合组采用线栓法建立缺血性脑卒中模型,记录各组大鼠饮食量、饮水量、体质量、体温、粪便性状、鼻分泌物、喉中痰鸣、舌象等表征变化。造模结束后24 h,进行神经功能缺损评分、舌象表征、血脂水平检测、脑组织及颈动脉形态学观察以及血清胃动素和生长抑素水平检测。结果与结论:(1)与空白对照组比较,病证结合组大鼠呼吸急促、精神萎靡、烦躁、行动迟缓,鼻周可见大量分泌物、可闻及厚重的喉中痰鸣,饮食量、饮水量下降,体质量、体温及舌下脉络评分升高,粪便粒数、Bristol评分及粪便含水率降低;血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇及生长抑素水平升高,胃动素水平降低,神经功能缺损评分升高,颈动脉发生显著病理改变,脑组织显示明显缺血形态学改变。缺血性脑卒中组仅能造成缺血性脑组织病理改变,不能复制出痰热腑实证的证候特征。痰热腑实证组能复制出典型的中医证候特征,但不能构建出缺血性脑卒中的脑组织病理改变。(2)结果表明,高脂诱导结合线栓法及自体粪便灌胃的多因素复合造模方法,可建立缺血性脑卒中痰热腑实证病证结合动物模型。

关键词：缺血性脑卒中痰热腑实证病证结合动物模型症候因素

仑伐替尼治疗不可手术肝细胞癌的预后分析及列线图构建

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现代肿瘤医学 2025年第1期 73-80页

作者：陆辉荣邓恋卢美君刘少兵陈熙广西壮族自治区南溪山医院

目的:旨在建立并验证一种新的列线图模型，以预测接受仑伐替尼治疗的不可手术切除肝细胞癌(unresectable hepatocellular carcinoma, uHCC)患者的生存结果。方法:回顾性纳入接受仑伐替尼治疗的170例uHCC患者的临床资料并随机分为两个队... 详细信息

目的:旨在建立并验证一种新的列线图模型，以预测接受仑伐替尼治疗的不可手术切除肝细胞癌(unresectable hepatocellular carcinoma, uHCC)患者的生存结果。方法:回顾性纳入接受仑伐替尼治疗的170例uHCC患者的临床资料并随机分为两个队列(训练队列：n=118;验证队列：n=52)。采用单因素分析筛选可能影响总生存期(OS)的潜在因素，使用多变量Cox回归评估影响预后的独立因子并构建列线图模型，通过一致性指数(C-index)、校准曲线和决策曲线分析(DCA)以评估模型性能和预测准确性。结果:最终选择6个影响预后的因素来构建列线图模型。列线图在训练队列和验证队列的C指数分别为0.763、0.784,校准曲线显示预测概率与实际结果之间具有良好的一致性。根据列线图得分将整个队列分为低、高危组，两组的中位总生存期(mOS)分别为15.5个月和12.1个月(P=0.000)。结论:本研究中的列线图模型展现出了良好的预测性能，能较准确地预测接受仑伐替尼治疗的uHCC患者的生存结局。

关键词：肝细胞癌仑伐替尼预后模型列线图

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三七治疗骨关节炎机制:基于UHPLC-QE-MS、网络药理学及分子动力学模拟

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中国组织工程研究 2025年第8期29卷 1751-1760页

作者：陈跃平陈锋彭清林陈荟伊董盼锋广西中医药大学附属瑞康医院广西壮族自治区南宁市530011 广西中医药大学广西壮族自治区南宁市530200 哈尔滨医科大学黑龙江省哈尔滨市150086

背景:课题组前期研究发现三七能够修复骨细胞的形态结构,对于治疗骨关节炎具有良好的应用前景,但目前对于三七的具体作用机制尚不清楚。目的:采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱串联质谱(ultra-high performance liquid chromatogr... 详细信息

背景:课题组前期研究发现三七能够修复骨细胞的形态结构,对于治疗骨关节炎具有良好的应用前景,但目前对于三七的具体作用机制尚不清楚。目的:采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱串联质谱(ultra-high performance liquid chromatography-Q exactive-mass spectrometry,UHPLC-QE-MS)技术鉴定三七的主要成分,并结合网络药理学、分子对接和分子动力学模拟探究三七治疗骨关节炎的作用机制。方法:利用UHPLC-QE-MS技术鉴定三七的主要成分后,运用TCMSP数据库筛选活性成分,通过TCMSP和Uniprot数据库查找活性成分靶点,通过疾病数据库筛选骨关节炎靶点。在药物靶点与疾病靶点取交集后,导入STRING数据库和Cytoscape软件构建蛋白互作网络筛选关键靶点,通过“活性成分-作用靶点”网络筛选关键活性成分。再对关键靶点进行富集分析,并对关键活性成分和关键靶点进行分子对接验证,最后选取结合能最低的结果进行分子动力学模拟。结果与结论:①在三七溶液中共鉴定出57种活性成分,成分靶点与疾病靶点交集50个,关键活性成分5个(槲皮素、熊脱氧胆酸、山奈酚、柚皮素和红藻氨酸),关键靶点5个(白细胞介素6、基质金属蛋白酶9、白细胞介素1β、白蛋白和趋化因子配体2);②基因本体功能富集642个条目,其中620个条目代表生物过程,21个条目代表分子功能,1个条目代表细胞成分;京都基因与基因组百科全书通路分析63条通路,主要涉及雌激素信号通路、白细胞介素17信号通路和高糖基化终末产物-高糖基化终末产物受体信号通路;③分子对接显示关键活性成分和关键靶点结合活性良好,分子动力学模拟提示槲皮素和基质金属蛋白酶9间的相互作用稳定;④对三七成分进行了较全面研究,初步阐明了其药效物质基础,预测三七可通过多组分、多靶点、多途径和多通路发挥抗炎、软骨保护和免疫调节作用来治疗骨关节炎。

关键词：三七骨关节炎分子动力学模拟质谱分子对接网络药理学

乳酸干预破骨细胞条件培养基促进内皮细胞血管的生成

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中国组织工程研究 2025年第11期29卷 2210-2217页

作者：黄宏莉聂闻麦昱颖覃媛廖红兵广西医科大学口腔医学院/附属口腔医院口腔修复科广西壮族自治区南宁市530021 广西口腔颌面修复与重建研究重点实验室广西壮族自治区南宁市530021

背景:聚乳酸作为可降解的骨组织工程支架材料被广泛用于组织再生与修复研究,在促进组织愈合与新骨形成、血管生成中具有重要作用。目的:观察聚乳酸降解终产物乳酸对破骨细胞的作用,以及乳酸干预后破骨细胞条件培养基对血管内皮细胞增殖... 详细信息

背景:聚乳酸作为可降解的骨组织工程支架材料被广泛用于组织再生与修复研究,在促进组织愈合与新骨形成、血管生成中具有重要作用。目的:观察聚乳酸降解终产物乳酸对破骨细胞的作用,以及乳酸干预后破骨细胞条件培养基对血管内皮细胞增殖、迁移和小管形成功能的影响。方法:(1)取对数生长期的小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7,贴壁后分别加入含0,5,10,20 mmol/L乳酸的破骨诱导培养基(含核因子κB受体活化因子配体、体积分数10%胎牛血清的DMEM培养基),培养5 d后分别进行抗酒石酸酸性磷酸酶与细胞骨架纤维状肌动蛋白染色,培养24h后采用RT-PCR检测抗酒石酸酸性磷酸酶5 m RNA表达。(2)取对数生长期的RAW264.7细胞,贴壁后分2组培养:对照组加入破骨诱导培养基,实验组加入含10 mmol/L乳酸的破骨诱导培养基,培养5 d后更换为无血清DMEM培养基继续培养24 h,离心取上清液,分别与等体积含体积分数10%胎牛血清DMEM培养基混合后作用条件培养基备用。取对数生长期的人脐静脉内皮细胞,分别与对照组、实验组条件培养基共培养,通过CCK-8、Transwell、划痕、成管实验观察细胞的增殖、迁移和成管能力,通过RT-PCR和Western Blot检测血管生成相关基因和蛋白的表达。结果与结论:(1)抗酒石酸酸性磷酸酶与肌动蛋白染色结果显示,5,10 mmol/L乳酸可促进RAW264.7细胞破骨向分化,其中以10 mmol/L乳酸的促进作用更显著;RT-PCR检测结果显示,5,10,20 mmol/L乳酸均可提高酒石酸酸性磷酸酶5 m RNA的表达,其中以10 mmol/L乳酸的提高作用最显著;(2)与对照组条件培养基相比,实验组条件培养基可促进人脐静脉内皮细胞的增殖、迁移与成管能力(P<0.05),提高血管内皮生长因子、血管生成素1的m RNA和蛋白表达(P<0.05);(3)结果表明,乳酸诱导分化的破骨细胞条件培养基可促进内皮细胞的血管生成,机制可能与提高血管内皮生长因子、血管生成素1表达相关。

关键词：破骨细胞条件培养基乳酸人脐静脉内皮细胞血管生成内皮细胞

罗汉果苷V调控高糖状态巨噬细胞M1极化促进骨髓间充质干细胞的成骨分化

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中国组织工程研究 2025年第19期29卷 3968-3975页

作者：叶枝茂惠久莹钟晓霞麦昱颖李昊广西医科大学口腔医学院/附属口腔医院口腔修复科广西壮族自治区南宁市530021 广西口腔颌面修复与重建研究重点实验室广西壮族自治区南宁市530021

背景:糖尿病微环境会造成巨噬细胞过度M1极化,这种高糖炎症状态会抑制骨髓间充质干细胞的成骨分化,从而影响糖尿病骨缺损的愈合。研究表明罗汉果苷Ⅴ具有抗炎、抗氧化、降血糖的作用,但其能否调节高糖炎症状态下巨噬细胞M1极化及骨髓间... 详细信息

背景:糖尿病微环境会造成巨噬细胞过度M1极化,这种高糖炎症状态会抑制骨髓间充质干细胞的成骨分化,从而影响糖尿病骨缺损的愈合。研究表明罗汉果苷Ⅴ具有抗炎、抗氧化、降血糖的作用,但其能否调节高糖炎症状态下巨噬细胞M1极化及骨髓间充质干细胞的成骨分化尚不清楚。目的:探讨罗汉果苷Ⅴ在高糖炎症状态下调节巨噬细胞M1型极化对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响。方法:构建糖尿病C57BL/6小鼠模型,从正常和糖尿病小鼠分离骨髓来源巨噬细胞,分别培养于低糖和高糖培养基。使用脂多糖和干扰素γ作为炎症刺激诱导骨髓来源巨噬细胞的M1型极化,同时以160,320,640μmol/L罗汉果苷Ⅴ干预,用流式细胞术检测F4/80^(+)CD86^(+)细胞比例,qRT-PCR检测诱导型一氧化氮合酶、白细胞介素1β、白细胞介素6的mRNA表达水平,ELISA检测骨髓来源巨噬细胞上清液中肿瘤坏死因子α水平。分离C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞,分别使用低糖或高糖成骨诱导液诱导成骨分化,添加M1型巨噬细胞条件培养基作为炎症刺激,以及320μmol/L罗汉果苷Ⅴ干预,成骨诱导14 d后采用qRT-PCR检测碱性磷酸酶、Runt相关因子2、骨钙素、骨桥蛋白的mRNA表达水平,成骨诱导21 d后进行茜素红染色及定量分析。结果与结论:①流式细胞术结果显示320,640μmol/L罗汉果苷Ⅴ组的F4/80^(+)CD86^(+)细胞比例明显低于高糖炎症对照组(P<0.05);②qRT-PCR结果显示160,320,640μmol/L罗汉果苷Ⅴ组的诱导型一氧化氮合酶、白细胞介素6的mRNA相对表达量较高糖炎症对照组显著降低(P<0.05),320,640μmol/L罗汉果苷Ⅴ组白细胞介素1β的mRNA相对表达量较高糖炎症对照组显著降低(P<0.05);③ELISA结果显示160,320,640μmol/L罗汉果苷Ⅴ组的肿瘤坏死因子α分泌水平较高糖炎症对照组显著降低(P<0.05);④320μmol/L罗汉果苷Ⅴ干预后,高糖炎症状态下骨髓间充质干细胞的钙盐沉积增加(P<0.05),且碱性磷酸酶、Runt相关因子2和骨桥蛋白的mRNA相对表达量增加(P<0.05)。结果表明,罗汉果苷Ⅴ可通过抑制高糖炎症状态下骨髓来源巨噬细胞的M1型极化及炎症因子表达,促进骨髓间充质干细胞的成骨分化。

关键词：罗汉果苷Ⅴ 巨噬细胞 M1型极化骨髓间充质干细胞炎症反应成骨分化高糖