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颈椎定点旋转手法在体生物力学量化及影响因素分析

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中国组织工程研究 2025年第3期29卷 486-492页

作者：梁基耀周红海韦贵康苏少亭陈龙豪何心愉刘粮酺广西中医药大学研究生院广西壮族自治区南宁市530001 广西中医药大学骨伤学院广西壮族自治区南宁市530001 广西中医骨伤科生物力学与损伤修复重点实验室广西壮族自治区南宁市530001 国医大师韦贵康学术思想与临床诊疗传承发展研究中心广西壮族自治区南宁市530001 浙江中医药大学附属第三临床医学院浙江省杭州市310000

背景:颈椎定点旋转手法属于技术要求较高的力学操作,但目前其生物力学还缺少相关量化数据;且颈椎定点旋转手法的影响因素研究包括了众多参数并且存在差异性,需要进一步对其影响因素进行分析,以完善其相关数据。目的:量化颈椎定点旋转手... 详细信息

背景:颈椎定点旋转手法属于技术要求较高的力学操作,但目前其生物力学还缺少相关量化数据;且颈椎定点旋转手法的影响因素研究包括了众多参数并且存在差异性,需要进一步对其影响因素进行分析,以完善其相关数据。目的:量化颈椎定点旋转手法在体生物力学参数,探讨各生物力学参数之间的相关性,及研究对象个体特征差异对手法力学参数的影响。方法:选取35例颈椎病患者为测试对象,均为广西中医药大学第一附属医院仁爱分院骨伤科门诊就诊者。术者佩戴穿戴式力学测量手套采集手法力学参数,包括拇指预加载力、拇指最大推力、掌心预加载力、掌心旋扳力和掌心旋扳最大作用力。并采集患者个人特征参数,包括年龄、身高、体质量和颈围。对手法操作过程中的关键力学参数进行特征分析及不同个体特征进行量化,对力学指标参数进行Spearman相关性分析;分析不同个体特征参数对生物力学可能存在的影响。结果与结论:(1)双侧力学参数相比,左侧操作与右侧操作无显著差异性(P>0.05)。(2)拇指预加载力均值为(7.21±1.19)N、拇指最大推力均值为(28.40±4.48)N、掌心预加载力均值为(5.67±2.49)N、掌心旋扳力均值为(10.90±5.11)N、掌心旋扳最大作用力均值为(16.00±7.27)N。(3)掌心预加载力和掌心旋扳力存在显著正相关(Rs=0.812,P生物力学有一定的标准量值。该手法左右侧操作无显著差异性,具有较好的一致性和可重复性。掌心预加载力、掌心旋扳力及掌心旋扳最大作用力3种力之间存在一致性和协调性,对于治疗效果的贡献是相近的。患者的体质量是影响颈椎定点旋转手法重要的因素。

关键词：颈椎定点旋转手法生物力学影响因素分析量化研究颈椎病正骨手法保守治疗个体特征

谱系1和8重组猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离鉴定与遗传进化分析

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动物医学进展 2025年第1期46卷 29-37页

作者：邹舟黎颖韦莹莹刘惠僮韦祖樟广西大学动物科学技术学院动物传染病与分子免疫学实验室广西南宁530005 广西壮族自治区兽用生物制品工程研究中心广西南宁530005 广西畜禽繁育与疾病防控重点实验室广西南宁530004

2023年从广西疑似发生猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染猪场的病猪肺脏组织中分离到1株PRRSV,将其命名为GXWZ20230831。采用RT-PCR扩增其全基因组序列并测序,分析遗传进化特点。结果显示,GXWZ20230831能够在Marc-145细胞上增殖,且产... 详细信息

2023年从广西疑似发生猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染猪场的病猪肺脏组织中分离到1株PRRSV,将其命名为GXWZ20230831。采用RT-PCR扩增其全基因组序列并测序,分析遗传进化特点。结果显示,GXWZ20230831能够在Marc-145细胞上增殖,且产生明显的细胞病变;该毒株全基因组长度为15019个核苷酸(nt),与基因2型PRRSV谱系1 NADC30-like毒株的同源性最高,为94.0%,与基因1型PRRSV代表毒株Lelystad virus同源性最低,仅为60.0%;通过Nsp2氨基酸序列比对,结果发现GXWZ20230831存在NADC30-like典型的131(111+1+19)个氨基酸的不连续缺失模式;与美洲型代表株VR2332相比,GXWZ20230831的GP5蛋白在非中和抗原表位发生了V27A、V185A以及R191K 3处突变,同时在GP5蛋白中存在4个潜在的N-糖基化位点;构建的全基因组序列、nsp2基因、ORF5基因遗传进化树均显示该毒株处于谱系1的分支;重组分析表明,GXWZ20230831是1株以谱系1经典毒株NADC30为骨架,谱系8毒株提供重组片段的重组毒株,重组断点位于基因组的nsp1(458-1821 nt)和Nsp4(5405-8179 nt)中。研究结果可为掌握广西地区的PRRSV遗传变异规律提供参考,为制定防控措施提供科学依据。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒分离鉴定重组遗传进化分析

H9N2亚型禽流感病毒M2e和HA2串联蛋白在原核系统中的表达

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基因组学与应用生物学 2018年第3期37卷 1203-1209页

作者：张民秀谢芝勋黄莉谢志勤刘加波谢丽基邓显文罗思思黄娇玲广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室

构建H9N2亚型禽流感病毒M2蛋白胞外区（M2e）和HA蛋白颈部区（HA2）串联体，并在原核系统中进行该重组蛋白的表达，以便研究重组蛋白的反应原性。以含有全长H9N2亚型AIVHA基因的质粒为模板，经过PCR扩增得到HA2基因；利用BglⅡ和BamHⅠ... 详细信息

构建H9N2亚型禽流感病毒M2蛋白胞外区（M2e）和HA蛋白颈部区（HA2）串联体，并在原核系统中进行该重组蛋白的表达，以便研究重组蛋白的反应原性。以含有全长H9N2亚型AIVHA基因的质粒为模板，经过PCR扩增得到HA2基因；利用BglⅡ和BamHⅠ互为同尾酶的链接方法，构建3个拷贝M2e和HA2基因的串联体，并将串联体连接入原核表达载体pGEX-4T-1构成3M2e＋HA2-pGEX重组质粒；同时构建单独表达HA2蛋白的原核表达重组质粒HA2-pGEX；DNA测序鉴定这两种重组质粒正确后，转化至表达宿主菌中；重组蛋白经不同IPTG浓度进行诱导；SDS—PAGE电泳鉴定重组蛋白大小，并进行可溶性分析和纯化；采用Western blotting法对两种重组蛋白的反应原性进行分析。结果显示，3M2e＋HA2-pGEX和HA2-pGEX重组蛋白分别经终浓度为0．5mmol／L和0．25mmol／L的IPTG诱导，37℃培养4h时，表达量最高；3M2e＋HA2-pGEX和HA2-pGEX重组蛋白大小分别为59．4ku和49．8ku；对重组蛋白进行可溶性分析显示，两种重组蛋白均以包涵体形式存在；Western blotting分析显示，3M2e＋HA2-pGEX和HA2-pGEX重组蛋白与免疫H9N2禽流感病毒后获得的阳性血清具有良好的特异性反应，这些结果为进一步研究HA2、3M2e＋HA2蛋白的免疫原性和开发广谱H9N2亚型禽流感疫苗提供了理论依据。

关键词： H9N2亚型禽流感病毒 HA蛋白颈部区蛋白(HA2) 3M2e+HA2串联蛋白

竹鼠源弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定及致病性分析

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畜牧兽医学报 2017年第5期48卷 922-929页

作者：唐海波陈凤莲饶桂波姜佳佳孟菲白安斌吴健敏广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室南宁530001

为确定桂林某竹鼠养殖场患病竹鼠的病原,从发病竹鼠肝组织分离到一株细菌。根据形态学特征及16S rRNA基因序列分析,确定分离菌株为弗氏柠檬酸杆菌。进化分析显示,该菌与来自棉花红蜘蛛的弗氏柠檬酸杆菌遗传关系最近,但处于独立的分支上... 详细信息

为确定桂林某竹鼠养殖场患病竹鼠的病原,从发病竹鼠肝组织分离到一株细菌。根据形态学特征及16S rRNA基因序列分析,确定分离菌株为弗氏柠檬酸杆菌。进化分析显示,该菌与来自棉花红蜘蛛的弗氏柠檬酸杆菌遗传关系最近,但处于独立的分支上。毒力试验结果表明,该菌对成年小白鼠的LD_(50)为2.8×10~8 CFU,对10~20日龄的竹鼠LD_(50)为6.3×10~8 CFU。药敏试验结果显示,分离菌株对头孢曲松、庆大霉素、阿米卡星、氧氟沙星、左氧氟沙星药物高度敏感,对青霉素、头孢唑啉、氟苯尼考、林可霉素、强力霉素等有耐药性。病理组织学观察显示,发病竹鼠肺泡间隔增宽伴随炎性细胞浸润;肝组织血管扩张、淤血;脾被膜外大量坏死细胞;肾组织肾小管上皮细胞肿胀、颗粒变性。综上研究结果表明,弗氏柠檬酸杆菌是引起桂林竹鼠发病和致死的病原菌,分离菌株对竹鼠有较强的致病性。

关键词：竹鼠弗氏柠檬酸杆菌分离鉴定组织病理学观察

鸡传染性喉气管炎病毒微滴式数字PCR定量检测方法的建立

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H9N2亚型禽流感病毒HA基因在昆虫细胞中的表达

西北农业学报 2024年第3期33卷 381-388页

作者：谢志勤谢芝勋张艳芳范晴谢丽基万丽军罗思思李孟张民秀曾婷婷黄娇玲王盛李丹韦悠李小凤任红玉阮志华广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室南宁 530001

旨在建立检测鸡传染性喉气管炎病毒(infectious laryngotracheitis virus,ILTV)绝对定量方法.根据已发表的鸡ILTV的TK基因序列,针对其保守区域分别设计1对特异引物和1条探针,建立检测鸡ILTV的微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)... 详细信息

旨在建立检测鸡传染性喉气管炎病毒(infectious laryngotracheitis virus,ILTV)绝对定量方法.根据已发表的鸡ILTV的TK基因序列,针对其保守区域分别设计1对特异引物和1条探针,建立检测鸡ILTV的微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)方法,并评价其特异性、敏感性和重复性.结果显示,建立方法的最佳引物浓度为20 μmol/μL,最佳探针浓度为10 μmol/μL,最佳退火温度为56 ℃.特异性检测结果显示,建立的方法只检出ILTV,没有检出其他病原株.敏感性检测结果显示,采用建立的方法定量检出ILTV重组质粒标准品的最低限为4.6拷贝/μL.对3个连续稀释的pMD18-ILTV重组质粒DNA进行检测,3次重复检测结果的变异系数均小于5％.对83份病鸡喉拭子、肺及脾组织样品进行检测,采用建立的ddPCR检出ILTV阳性样品10份,荧光定量PCR检出ILTV阳性样品9份,ddPCR的阳性检出率(12.05％)高于荧光定量PCR的阳性检出率(10.84％).结果表明,建立的ddPCR方法定量检测ILTV特异性强、敏感性高、重复性好,为绝对定量检测ILTV提供更好的技术支撑.

关键词：鸡传染性喉气管炎病毒微滴式数字PCR 定量检测

来源：博看期刊评论

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基因组学与应用生物学 2017年第3期36卷 859-864页

作者：张民秀谢芝勋黄莉谢志勤刘加波谢丽基邓显文罗思思黄娇玲广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室南宁530001

为了获得具有良好免疫活性的H9N2亚型禽流感病毒HA蛋白,本研究利用Bac-to-Bac昆虫-杆状病毒表达系统对H9N2亚型禽流感病毒HA蛋白进行表达。运用PCR对H9N2亚型禽流感病毒HA基因进行扩增,将HA基因连接于转移载体pFastBacDual的BamHⅠ和Hin... 详细信息

为了获得具有良好免疫活性的H9N2亚型禽流感病毒HA蛋白,本研究利用Bac-to-Bac昆虫-杆状病毒表达系统对H9N2亚型禽流感病毒HA蛋白进行表达。运用PCR对H9N2亚型禽流感病毒HA基因进行扩增,将HA基因连接于转移载体pFastBacDual的BamHⅠ和HindⅢ两个酶切位点之间,构成pFastBacDual-HA重组载体;将pFastBacDual-HA转化至大肠杆菌DH10Bac感受态细胞,利用蓝白斑筛选法和PCR方法对阳性菌落筛选重组杆粒Bacmid-HA;重组杆粒Bacmid-HA对Sf9昆虫细胞进行了转染,获得重组杆状病毒rBV-HA;运用SDS-PAGE电泳和Western blotting分析rBV-HA感染的细胞和细胞上清。结果表明,重组HA蛋白大小约为65 kD;Western blotting分析显示,HA蛋白与免疫H9N2禽流感病毒后获得的阳性血清具有良好的特异性反应,为进一步研制针对HA蛋白的H9N2亚型AIV亚单位疫苗和研发H9亚型ELISA抗体检测试剂盒奠定了基础。

关键词： H9N2亚型禽流感病毒 HA蛋白 Bac—to—Bac昆虫-杆状病毒表达系统

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发酵酸鱼中乳酸菌的鉴定及特性分析

中国酿造 2023年第3期42卷 95-100页

作者：韦珏刘金凤覃绍敏秦树英许力士林俊陈凤莲韦珊珊马玲陈童锦悦吴健敏广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室广西南宁530001

该研究以分离自酸鱼发酵后期的乳酸菌菌株LP224为研究对象,采用形态学观察、生理生化试验和分子生物学技术对其进行菌种鉴定,采用K-B药敏纸片扩散法和聚合酶链式反应(PCR)法对其耐药性和抗性基因进行检测,并研究其生长特性及耐受性。结... 详细信息

该研究以分离自酸鱼发酵后期的乳酸菌菌株LP224为研究对象,采用形态学观察、生理生化试验和分子生物学技术对其进行菌种鉴定,采用K-B药敏纸片扩散法和聚合酶链式反应(PCR)法对其耐药性和抗性基因进行检测,并研究其生长特性及耐受性。结果表明,菌株LP224被鉴定为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),其对头孢曲松、链霉素、环丙沙星、磺胺异噁唑、万古霉素、林可霉素等6类15种抗生素耐药,基因组DNA检测出ermC和tetG2种抗性基因,而细菌质粒未检测到抗性基因,说明该菌株相对安全。菌株LP224经55℃水浴处理30 min后存活率为35.06%;p H2.5环境下存活率为52.60%;0.3%胆盐浓度下存活率为31.67%,说明该菌株具有较强的耐热、耐酸、耐胆盐能力。

关键词：植物乳杆菌分离鉴定耐药性耐酸耐胆盐酸鱼

血清4型禽腺病毒广西分离株GX2019-010全基因组测序与分析

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2016—2018年广西猪繁殖与呼吸综合征流行病学调查和PRRSV ORF5基因的遗传变异分析

中国畜牧兽医 2020年第12期47卷 3793-3804页

作者：栾勇娇谢芝勋王盛罗思思张蕾谢丽基谢志勤邓显文张民秀张艳芳曾婷婷范晴广西大学动物科学技术学院南宁530004 广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室南宁530001 广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室南宁530001 广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室南宁530001 广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室南宁530001 广西大学动物科学技术学院南宁530004 广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室南宁530001 广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室南宁530001 广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室南宁530001 广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室南宁530001 广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室南宁530001 广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室南宁530001 广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室南宁530001 广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室南宁530001

为了解广西地区血清4型禽腺病毒(FAdV-4)的基因特征,本研究对实验室前期分离的一株FAdV-4(命名为GX2019-010)进行了全基因组测序,对所获核苷酸序列进行同源性比对和遗传进化分析,并进一步分析了主要结构蛋白Hexon、Penton和Fiber的氨基... 详细信息

为了解广西地区血清4型禽腺病毒(FAdV-4)的基因特征,本研究对实验室前期分离的一株FAdV-4(命名为GX2019-010)进行了全基因组测序,对所获核苷酸序列进行同源性比对和遗传进化分析,并进一步分析了主要结构蛋白Hexon、Penton和Fiber的氨基酸序列.结果显示,GX2019-010全长43 719 bp,GC含量为54.9％,主要包括43个潜在蛋白质编码区域.核苷酸序列同源性比对发现,GX2019-010与致病株MX-SHP95的同源性为95.8％,与非致病株ON1和KR5同源性分别为95.0％和95.2％.遗传进化分析显示,GX2019-010与中国FAdV-4近几年的流行毒株在同一分支,而与国外FAdV-4毒株不在同一分支,说明FAdV-4存在遗传差异,主要的差异存在于基因组的右端,国内分离株均出现1 966 bp的缺失,其中包括ORF19、ORF48和ORF27基因的缺失,说明中国流行的FAdV-4具有地域性.对主要结构蛋白Hexon、Penton和Fiber的氨基酸序列分析发现,3个主要结构蛋白均有氨基酸位点的突变,其中Fiber-2的突变位点最多.本研究丰富了广西地区FAdV-4的基因库,为今后心包积液-肝炎综合征(HHS)的防控及流行病学调查研究提供了参考依据.

关键词：血清4型禽腺病毒(FAdV-4) 全基因组测序进化分析

来源：评论

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黑龙江畜牧兽医 2019年第20期 90-94,97页

作者：刘磊卢冰霞段群棚何颖秦毅斌李斌陈忠伟周英宁梁家幸苏乾莲蒋冬福闭炳芬卢敬专杨思仪赵武广西壮族自治区兽医研究所/广西兽医生物技术重点实验室

为了解广西地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的流行和变异情况,试验应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)的方法对2016—2018年广西14个地区规模化猪场的1564份主要脏器进行了PRRSV检测,选取部分阳性样品进行ORF5基因的扩增并进行序列... 详细信息

为了解广西地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的流行和变异情况,试验应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)的方法对2016—2018年广西14个地区规模化猪场的1564份主要脏器进行了PRRSV检测,选取部分阳性样品进行ORF5基因的扩增并进行序列分析。结果表明:共检测出PRRSV阳性样品467份,阳性率为29.9%。在广西14个地区规模化猪场送检的样品中均能检测到PRRSV。从年份上看,2016年的PRRSV阳性率最高,为43.9%;2017年为26.9%;2018年最低,为23.7%。获得的25条PRRSV ORF5基因序列中有1株与NADC30株同源性较高,1株与GM2株同源性较高,其余23株均与高致病性PRRSV同源性较高。在25株PRRSV中有21株与TJM、JXA1、HuN等高致病毒株亲缘关系较近,并位于同1个分支;2株处于经典株和变异株之间,分别形成2个分支;1株与NADC30株亲缘关系较近,位于同1个分支;1株与GM2株亲缘关系较近,位于同1个分支。PRRSV ORF5基因编码氨基酸序列分析结果表明,25个毒株均为毒力较强的野毒株。说明广西地区仍以高致病性PRRSV为主要流行毒株,但2018年新发现类NADC30毒株和类GM2毒株的流行。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 流行病学调查 ORF5 序列分析遗传变异