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基于PI3K/Akt/mTOR信号通路的miR-24调控ox-LDL诱导的HUVECs自噬机制研究

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右江医学 2024年第9期52卷 775-783页

作者：杨鹏杨增艳翟阳周炜潜罗雪兰欧和生广西国际壮医医院科技部广西南宁530201

目的探讨miR-24对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导下的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)自噬的影响及其相关机制,为进一步阐明miR-24在动脉粥样硬化(AS)中的作用提供理论依据。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-24的表达;应用蛋白免疫印... 详细信息

目的探讨miR-24对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导下的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)自噬的影响及其相关机制,为进一步阐明miR-24在动脉粥样硬化(AS)中的作用提供理论依据。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-24的表达;应用蛋白免疫印迹法(western blot)和qRT-PCR法检测Beclin-1、LC3Ⅰ/LC3Ⅱ、p-mTOR、p-PI3K、p-Akt的蛋白和mRNA表达水平;应用透射电子显微镜技术检测细胞的自噬小体生成情况;应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法、细胞划痕法、Caspase-3比色法和Hoechst 33258染色法分别检测细胞活性、迁移和凋亡情况。结果应用ox-LDL诱导HUVECs后,发现HUVECs中miR-24的表达显著降低(P<0.05)。miR-24过表达可明显抑制ox-LDL诱导的HUVECs自噬(P<0.05),而miR-24低表达则会增加ox-LDL诱导的HUVECs自噬(P<0.05)。miR-24过表达可显著降低Beclin-1的表达水平,上调LC3Ⅰ/LC3Ⅱ的水平(P<0.05),同时,miR-24过表达可显著促进p-PI3K、p-Akt和p-mTOR的表达(P<0.05)。此外,miR-24过表达显著抑制HUVECs的活力和迁移,增加Caspase-3活性并促进其凋亡(P<0.05)。结论miR-24的过表达可激活PI3K/Akt/mTOR信号通路而降低ox-LDL诱导的HUVECs的自噬水平并促进其凋亡,miR-24可能成为AS的潜在治疗新靶点。

关键词：氧化低密度脂蛋白人脐静脉内皮细胞 PI3K/Akt/mTOR信号通路 miR-24 自噬凋亡

基于TLR3/TAK/NF-κB信号通路探究壮宣饮对H1N1流感病毒性肺炎大鼠肺损伤的保护作用

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中成药 2023年第10期45卷 3420-3424页

作者：邹敏翟阳肖持坚梁敏徐怡辉兰小婉梅小平广西国际壮医医院儿科广西南宁530001 广西国际壮医医院脑病科广西南宁530001 广西国际壮医医院内分泌代谢病科广西南宁530001

目的探讨壮宣饮对H1N1流感病毒性肺炎大鼠肺损伤及TLR3/TAK1/NF-κB信号通路的影响。方法将大鼠随机分为对照组、模型组、奥司他韦组(135 mg/kg)和壮宣饮高、中、低剂量组(140、70、35 g/kg),每组12只。采用甲型流感病毒H1N1滴鼻法建立... 详细信息

目的探讨壮宣饮对H1N1流感病毒性肺炎大鼠肺损伤及TLR3/TAK1/NF-κB信号通路的影响。方法将大鼠随机分为对照组、模型组、奥司他韦组(135 mg/kg)和壮宣饮高、中、低剂量组(140、70、35 g/kg),每组12只。采用甲型流感病毒H1N1滴鼻法建立流感病毒性肺炎大鼠模型,造模24 h后灌胃给予相应剂量药物。给药5 d后观察大鼠一般状态变化,检测大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中TNF-α、IFN-γ、IL-6水平,计算肺湿/干重比,HE染色观察大鼠肺组织病理学变化,RT-qPCR法检测肺组织H1N1病毒载量,Western blot法检测肺组织TLR3/TAK1/NF-κB信号通路相关蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠精神萎靡、毛色无光泽、呼吸加快、行动迟缓、体质量下降,肺湿/干重比值和BALF中TNF-α、IFN-γ、IL-6水平升高(P壮宣饮各剂量组大鼠精神状态良好,皮毛有光泽,呼吸较平稳,体质量增加,肺湿/干重比值和BALF中TNF-α、IFN-γ、IL-6水平降低(P壮宣饮可有效降低促炎细胞因子的释放,减轻H1N1流感病毒性肺炎大鼠的肺损伤,其作用机制可能与抑制TLR3/TAK1/NF-κB信号通路有关。

关键词：壮宣饮流感病毒性肺炎 H1N1 TLR3 TAK1 NF-κB

消积化肝方调节Wnt/β-catenin对肝癌细胞恶性生物学行为的影响

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中药材 2023年第4期46卷 980-985页

作者：罗艺徽蒋俊娥吴姗姗王振常广西国际壮医医院广西南宁530001

目的:探讨消积化肝方调节Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)对肝癌细胞恶性生物学行为的影响。方法:将对数生长期的HepG_(2)细胞分为对照组(20%空白血清)、消积化肝方含药血清低浓度(10%)组、消积化肝方含药血清中浓度(20%)组、消积化肝方含... 详细信息

目的:探讨消积化肝方调节Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)对肝癌细胞恶性生物学行为的影响。方法:将对数生长期的HepG_(2)细胞分为对照组(20%空白血清)、消积化肝方含药血清低浓度(10%)组、消积化肝方含药血清中浓度(20%)组、消积化肝方含药血清高浓度(30%)组、LiCl(10 mmol/L)组、消积化肝方含药血清高浓度+LiCl组(30%消积化肝方含药血清+10 mmol/L LiCl),CCK-8法、EdU染色检测HepG_(2)细胞增殖;流式细胞术检测HepG_(2)细胞凋亡;划痕实验检测HepG_(2)细胞迁移;Transwell检测HepG_(2)细胞侵袭;Western Blot检测HepG_(2)细胞中PCNA、Bax、MMP-2、MMP-9、Wnt3a、β-catenin蛋白表达。结果:与对照组比较,消积化肝方含药血清各浓度组HepG_(2)细胞D(λ)_(450)值、EdU阳性率、划痕愈合率、细胞侵袭数目及PCNA、MMP-2、MMP-9、Wnt3a、β-catenin蛋白表达显著降低,细胞凋亡率、Bax蛋白表达显著升高,LiCl组HepG_(2)细胞D(λ)_(450)值、EdU阳性率、划痕愈合率、细胞侵袭数目及PCNA、MMP-2、MMP-9、Wnt3a、β-catenin蛋白表达显著升高,细胞凋亡率、Bax蛋白表达显著降低(P<0.05);与消积化肝方含药血清高浓度组比较,消积化肝方含药血清高浓度+LiCl组HepG_(2)细胞D(λ)_(450)值、EdU阳性率、划痕愈合率、细胞侵袭数目及PCNA、MMP-2、MMP-9、Wnt3a、β-catenin蛋白表达显著升高,细胞凋亡率、Bax蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论:消积化肝方可通过抑制Wnt/β-catenin通路抑制肝癌HepG_(2)细胞增殖、迁移、侵袭,促进细胞凋亡。

关键词：消积化肝方 Wnt/β-连环蛋白通路肝癌增殖迁移

盆底三维超声评估壮药产康洗剂对初产妇盆膈裂孔的影响

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壮瑶药研究 2023年第1期 214-216,315页

作者：岑纯静兰菲菲李运容陈敏华广西国际壮医医院超声科南宁530201 广西国际壮医医院科技部南宁530201

目的:应用盆底三维超声评估壮药产康洗剂对初产妇盆底功能影响作用。方法:选择80例产科分娩初产妇,分为对照组与治疗组各40例,分别采用盆底肌康复训练及在此基础上联合壮药产康洗剂治疗,运用三维超声观察静息、张力状态下产妇的盆膈裂... 详细信息

目的:应用盆底三维超声评估壮药产康洗剂对初产妇盆底功能影响作用。方法:选择80例产科分娩初产妇,分为对照组与治疗组各40例,分别采用盆底肌康复训练及在此基础上联合壮药产康洗剂治疗,运用三维超声观察静息、张力状态下产妇的盆膈裂孔结构(面积、长径、横径)情况。结果:观察组产妇静息下盆膈裂孔各结构指标在静息、张力状态均显著小于同期对照组(P壮药产康洗剂对初产妇盆底结构改善更加显著,有益于初产妇产后康复。

关键词：盆底三维超声盆膈裂孔壮医

中医药治疗高血压病胰岛素抵抗(IR)临床疗效的Meta分析

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中华中医药学刊 2019年第2期37卷 460-465页

作者：陆新蒋嘉诚广西国际壮医医院广西南宁530000

目的:用Meta分析(Meta-analysis)的方法对国内已公开发表的有关中医药对高血压的临床疗效的研究进行综合定量分析,以期为临床治疗高血压的选择方案提供参考依据。方法:收集1989年1月—2017年12月中国知网CNKI、中国生物学文献数据库CBM... 详细信息

目的:用Meta分析(Meta-analysis)的方法对国内已公开发表的有关中医药对高血压的临床疗效的研究进行综合定量分析,以期为临床治疗高血压的选择方案提供参考依据。方法:收集1989年1月—2017年12月中国知网CNKI、中国生物学文献数据库CBM、维普数据库VIP、万方数据库WanFang公开发表的有关中医药对高血压病胰岛素抵抗临床疗效的临床随机对照试验,按Meta分析的要求对检索到的原始研究进行质量评估,采用Rev Man 5.3对符合条件的研究进行Meta分析,评价中医药对高血压IR的临床疗效。结果:符合纳入标准文献共22篇,总样本量1614例。中西医结合与西药降压疗效对比[OR=0.30,95%CI(0.20,0.44),Z检验Z=5.90,P=0.000 01医结合与西药对收缩压(SBP)的疗效对比[SMD=-0.29,95%C(-0.52,-0.06),Z检验Z=2.45,P=0.01];中西医结合与西药对DBP疗效对比[SMD=-0.28,95%CI(-0.38,-0.17),Z检验Z=5.08,P医结合与西药对FINS疗效对比[MD=-0.75,95%CI(-0.86,-0.64),Z检验Z=13.29,P医结合与西药对ISI的疗效对比[SMD=0.90,95%CI(0.54,1.26),Z检验Z=4.85,P医结合与西药对HOMA-IR的疗效对比[SMD=-0.21,95%CI(-0.45,0.03),Z检验Z=1.70,P=0.09]。结论:中医药具有一定的调节血压的作用,并明显改善高血压病患者的IR及临床症状。

关键词：高血压病胰岛素抵抗中医药 Meta分析

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民族药六棱菊抗炎作用及其机制研究

中国新药杂志 2021年第9期30卷 818-823页

作者：魏江存秦祖杰钟文李耀华谢沛桃杨鹏覃丽萍赵凤仙韩倩广西国际壮医医院南宁530201 广西中医药大学南宁530200

目的:研究六棱菊提取物的抗炎作用及其机制,为该药用植物开发应用提供实验依据。方法:建立二甲苯致小鼠耳肿胀、醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加、角叉菜胶致小鼠足肿胀等炎症模型,评价六棱菊提取物对急、慢性炎症的药理活性。建立二... 详细信息

目的:研究六棱菊提取物的抗炎作用及其机制,为该药用植物开发应用提供实验依据。方法:建立二甲苯致小鼠耳肿胀、醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加、角叉菜胶致小鼠足肿胀等炎症模型,评价六棱菊提取物对急、慢性炎症的药理活性。建立二甲苯致摘除双侧肾上腺小鼠耳肿胀、角叉菜胶致摘除双侧肾上腺小鼠足肿胀模型,判断其抗炎作用是否依赖下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPAA)系统,测定足炎性组织丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)和超氧化物歧化酶(SOD)水平。结果:与模型组比较,除低剂量组无统计学意义(P>0.05)外,六棱菊提取物高、中剂量组对二甲苯致小鼠耳肿胀均有显著的抑制作用;六棱菊提取物抑制醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性的升高,对角叉菜胶致小鼠足肿胀亦有显著抑制作用;与模型组比较,在摘除双侧肾上腺小鼠模型中,六棱菊提取物高、中剂量组能显著抑制二甲苯致该模型小鼠耳肿胀;以及能显著抑制角叉菜胶致该模型小鼠足肿胀;六棱菊提取物高、中剂量组均能显著降低足组织中MDA和NO水平,均能显著提高足组织中SOD水平。结论:六棱菊提取物均具有抗炎活性,其抗炎作用的发挥不依赖HPAA系统,同时六棱菊提取物的抗炎作用机制与降低MDA和NO水平,提高SOD水平有关。

关键词：六棱菊抗炎作用机制下丘脑-垂体-肾上腺轴系统

GPCR48表达与肝癌术后转移和预后的关系研究

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中华肝胆外科杂志 2020年第12期26卷 891-896页

作者：彭契六韦尚谋张磊甘丽英谢珍覃举张智韦邦宁广西国际壮医医院检验科南宁530201 南宁市第一人民医院肝胆外科 530022 广西国际壮医医院肝胆外科南宁530201

目的探讨肝癌组织中G蛋白偶联受体48(GPCR48)的表达与肝癌转移和预后的关系。方法选择2019年1月至8月在广西国际壮医医院肝胆外科行手术切除(R0切除)的10例肝癌患者,其中男性6例,女性4例,年龄37.0~64.0岁;选择2019年1月至12月在广西国... 详细信息

目的探讨肝癌组织中G蛋白偶联受体48(GPCR48)的表达与肝癌转移和预后的关系。方法选择2019年1月至8月在广西国际壮医医院肝胆外科行手术切除(R0切除)的10例肝癌患者,其中男性6例,女性4例,年龄37.0~64.0岁;选择2019年1月至12月在广西国际壮医医院肝胆外科行肝部分切除术的6例因外伤或结石行肝部分切除的患者,其中男性3例,女性3例,年龄16.0~63.0岁。收集肝癌患者的肝癌组织、癌旁组织及肝部分切除患者的正常肝组织,利用实时荧光定量PCR、蛋白印迹技术和免疫组化技术检测肝癌组织、癌旁组织和正常肝组织中GPCR48的mRNA和蛋白表达,比较分析肝癌组织、癌旁组织和正常肝组织中GPCR48表达的差异。选择2009年6月至2019年6月在南宁市第一人民医院肝胆外科行肝癌切除术的68例肝癌患者癌组织标本以及相关临床资料,其中男性56例,女性12例,年龄范围31.0~76.0岁,采用免疫组化技术检测肝癌组织中GPCR48的表达,根据肝癌组织中GPCR48的表达水平将肝癌患者分为GPCR48高表达组和GPCR48低表达组,分析GPCR48的表达水平与肝癌转移和预后的关系。结果肝癌组织GPCR48 mRNA的表达水平高于癌旁组织[(0.894±0.086)比(0.583±0.095)]和正常肝组织[(0.894±0.086)比(0.485±0.111)],肝癌组织GPCR48蛋白的表达水平高于癌旁组织[(0.772±0.080)比(0.453±0.052)]和正常肝组织[(0.772±0.080)比(0.329±0.046)],差异均具有统计学意义(P0.05)。68例肝癌患者中,GPCR48高表达组46例,GPCR48低表达组22例,GPCR48高表达组患者肿瘤累积复发率高于GPCR48低表达组(χ^2=15.577),累积生存率低于GPCR48低表达组(56.5%比27.3%,χ^2=6.309),差异均具有统计学意义(8.7%比36.4%,P<0.05)。结论GPCR48 mRNA和蛋白在肝癌组织中表达上调,与肝癌复发转移有关,影响肝癌患者的预后。

关键词：肝肿瘤转移 G蛋白偶联受体48 预后

外周时钟基因在非酒精性脂肪性肝炎发展与防治中的作用

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临床肝胆病杂志 2025年第12期40卷 2505-2512页

作者：刘思言田静怡黄雨扬谷天麒邓茗月杨攀重庆医科大学国际医学院重庆 401331 重庆医科大学附属第二医院急救部重庆 400000

非酒精性脂肪性肝炎（NASH）作为非酒精性脂肪性肝病的严重临床表现形式，以肝脂质沉积、炎症损伤为特征。目前NASH的临床治疗药物仍处于探索实验阶段，亟待取得进展。有研究指出NASH的发病机制与肝脏昼夜节律紊乱有关，具体可表现为肝... 详细信息

非酒精性脂肪性肝炎（NASH）作为非酒精性脂肪性肝病的严重临床表现形式，以肝脂质沉积、炎症损伤为特征。目前NASH的临床治疗药物仍处于探索实验阶段，亟待取得进展。有研究指出NASH的发病机制与肝脏昼夜节律紊乱有关，具体可表现为肝时钟基因如BMAL1等表达失调，导致肝内脂质生成增多、脂肪酸氧化减少以及促炎症因子激活。因此，改善肝脏昼夜节律，调节肝时钟基因表达被视为防治NASH的可行策略。目前已有通过激活时钟基因编码蛋白治疗NASH的药物应用于动物实验，如REVERB全激动剂SR9009，其能抑制肝脏的炎症发展，有效证实了靶向时钟编码蛋白在NASH治疗中的可能性。本文总结了肝时钟基因在调节肝脂质代谢与炎症发生发展中的作用，阐述了近年来以时钟基因及其相关蛋白作为靶点的药物研究进展，以期为NASH治疗提供新靶点。

关键词：非酒精性脂肪性肝病昼夜节律时钟蛋白质类

高尿酸对血管内皮细胞eNOS基因表达的调节作用及其对血管新生的影响

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中国老年学杂志 2020年第7期40卷 1498-1502页

作者：罗雪兰滕红丽覃裕旺张文宇唐华民吕冬宁杨鹏杨国勋欧和生广西国际壮医医院科技部广西南宁530201 中铁十二局集团有限公司中心医院药械科

目的探讨高尿酸对血管内皮细胞内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因表达调节作用及其对血管新生的影响.方法人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)在600μmol/L尿酸溶液中培养,应用RT-PCR和Western印迹分别检测各组细胞eNOS mRNA和蛋白表达,应用硝... 详细信息

目的探讨高尿酸对血管内皮细胞内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因表达调节作用及其对血管新生的影响.方法人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)在600μmol/L尿酸溶液中培养,应用RT-PCR和Western印迹分别检测各组细胞eNOS mRNA和蛋白表达,应用硝酸还原法检测各组细胞上清液中一氧化氮(NO)含量,应用人工基底膜检测细胞的管腔形成能力,应用鸡胚尿囊膜试验检测细胞的血管新生能力,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组HUVECs的增殖,应用划痕试验检测各组HUVECs的迁移能力.结果与对照组比较,600μmol/L的高尿酸培养HUVECs 48 h后,细胞eNOS mRNA转录水平、蛋白表达量、NO浓度显著下降(P<0.01);HUVECs有聚集倾向,但未能形成管腔样网络结构;CAM的血管新生面积比率降低49.78%(P<0.01);同时,细胞的增殖能力降低63.68%(P<0.05),细胞的迁移能力下降38.70%(P<0.01).结论高尿酸抑制血管内皮细胞eNOS基因表达和NO含量;高尿酸抑制细胞的血管新生能力,同时抑制细胞增殖与迁移,其抑制的可能机制与高尿酸下调eNOS的表达有关.

关键词：高尿酸人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC) 内皮型一氧化氮合酶(eNOS) 血管新生